Análise de
alimentos II
Prof. Larine Kupski
Infravermelho
Willian Herschel séc. XIX
Termômetro em cada cor para descobri calor do sol
Aumento temperatura deslocado além vermelho
Radiação invisível -
IV
ESPECTROMETRIA DE ABSORÇÃO NO INFRAVERMELHO
A radiação infravermelha (IV) é uma radiação não ionizante na porção invisível do espectro
eletromagnético que está adjacente aos comprimentos de onda longos, ou final vermelho do espectro
da luz visível.
Região Faixas de λ (μm) Nº de onda (cm-1)
Não destrutiva Confirmação
Próximo 0,7-2,5 12000-4000
Quantificação identidade
Perfis espectrais Mediano 2,5-50 4000-200
(diferenciação) Distante 50-1000 200-10 Grupos funcionais
NÚMERO DE ONDA: 1/λ (em cm-1)
Conversão = 1 cm-1 = 104 𝛍m-1
ESPECTROMETRIA DE ABSORÇÃO NO INFRAVERMELHO
Poderosa ferramenta para identificação de compostos orgânicos e inorgânicos puros
exceto O2, N2, Cl2, todas especies absorvem IV
Equivalência exata entre espectro IV de composto com estrutura conhecida com o espectro do analito
identificação analito
5
6
Regiões do Espectro empregadas em análises espectrométicas
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Nas moléculas orgânicas os átomos não são estáticos
As ligações químicas das substâncias possuem frequências de vibração específicas, as quais
correspondem a níveis de energia da molécula (níveis vibracionais).
Tipos de vibrações
Deformações axiais (estiramento) aumento e diminuição distância interatômica
Simétrica Assimétrica
Deformações angular alteração ângulo de ligação
Níveis de energias vibrações
quantizados
Radiação IV
pode provocar
Simétrica Assimétrica mudanças entre
níveis
IV não causa mudanças níveis orbitais
moleculares
Simétrica fora do plano Assimétrica fora do plano
Fundamentais excitação estado fundamental para excitado, de energia
mais baixa
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O número de modos vibracionais possíveis de uma molécula pode ser estimado pela relação 3N – 6
( não linear) e 3N- 5 (linear) sendo que N representa o número de átomos da molécula
n-butanal
33 modos
vibracionais
CH3CH2CH2CHO
ABSORÇÃO NO IV REQUISITOS
O comprimento de onda da radiação deve possuir a energia necessária para causar a transição;
A molécula deve possuir um dipolo elétrico variável (Δμ ≠ 0).
ÁTOMOS COM DIFERENTES ELETRONEGATIVIDADE FORMAÇÃO DIPOLO (NUVEM ELETRÔNICA)
Durante a vibração dois átomos
aproximam-se e afastam-se modificando o
valor do dipolo
OBS.: Quanto maior a modificação no dipolo, maior é a intensidade de absorção.
ABSORÇÃO NO IV REQUISITOS
Força da ligação entre dois átomos determina a energia necessária para modificar o estado vibracional.
Dispersivo INSTRUMENTAÇÃO INFRAVERMELHO MEDIANO
( 4000 a 400 cm-1)
Feixe radiação através resistor aquecido
Espelho divisão (intensidade igual)
Feixes chegam monocromador
Dispersão feixes em espectro contínuo de
frequências de luz infravermelha
Detector razão entre intensidades dos
feixes de referência e de amostra
Quais frequências foram absorvidas pela amostra e
quais não foram afetadas pela luz passando através
da amostra
FT-IR INSTRUMENTAÇÃO INFRAVERMELHO MEDIANO
( 4000 a 400 cm-1)
Interferômetro de Milchelson e transformada
de Fourier
Interferômetro a energia da fonte atravessa
um divisor de feixes (espelho angulo 45º)
1 feixe segue outro desviado angulo 90º
Caminho optico de 1 deles é modificado
progressivamente movimentando-se espelho
Feixe combinado atravessa amostra e esta
absorve todos comprimentos de onda
Obtem-se inferograma (intensidadextempo)
Transformada Fourier
Preparo de amostra pra IV
Colocar compostos em recipiente de amostra ou cela substâncias ionicas (vidro e plastico absorvem
na região IV)
Placa brometo potássio : cara, porém faixa de 4000 a 400 cm -1 Brometo de potássio
Cloreto sódio
Placa cloreto de sódio: maior uso, baixo custo, faixa de 4000 a 650 cm -1
Amostra líquida gota do composto orgânico entre par de placas –> inserir suporte do instrumento
Amostra sólida 3 métodos
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Preparo de amostra pra IV
1 º Pastilha de KBr
- amostra moida bem fina com KBr e comprimir sobre alta pressão
- desvantagem pode absorver água e interferir espectro
2º Suspensão de Nujol
- moer composto com óleo mineral
- suspensão da amostra colocada entre placas de sal
- desvantagem óleo mascara bandas que podem estar presentas no composto analisado
( 2924, 1462, 1377 cm-1)
3º Dissolver o composto orgânico em um solvente
- mais comum tetracloreto de carbono.
- algumas bandas podem ficar encobertas pelo solvente
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O que buscar em um espectro de IV??
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Posições e intensidades de
relativas de todas absorções ou
picos
Forma e intensidade
característicos de ligação
Não somente posição!!!
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Regiões espectrais importantes no IV para análise qualitativa de
alimentos
Nº de onda ( m) Tipo de grupamento
3700 a 2700 2,7 a 3,7 Estiramento de ligações de H ou outros átomos
3700 a 3100 2,7 a 3,2 O-H e N-H estiramento de H sendo a 1ª mais alargada
2700 a 1850 3,7 e 5,4 Ligações triplas; S - H e R – H
1950 e 1550 5,1 a 6,5 Estiramentos de duplas ligações de carbonilas: cetonas,
aldeidos, ácidos, amidas, carbonatos.
1500 e 700 6,7 a 14 (denominada região do dedo) grandes mudanças com
pequenas alterações de estrutura (ligações simples)
INTERPRETAÇÃO DE ESPECTROS
Presença ou ausência dos principais grupos funcionais:
C=O; O–H; N–H; C–O; C=C; C C; C N
Utilize a sequência da lista de identificação;
Os grupos éster carbonil do lipídio absorvem
a 5,73 μm (1742 cm-1), os grupos amida da
proteína absorvem a 6,47 μm (1545 cm-1) e
os grupos hidroxila da lactose absorvem a
9,61 μm (1045 cm-1).
Esses instrumentos automatizados
homogeneizam os glóbulos de gordura do
leite para minimizar a dispersão da luz pela
amostra e, em seguida, bombeiam o leite
para uma célula de fluxo através da qual o
feixe de infravermelho é passado.
O instrumento é calibrado usando amostras
de concentração conhecida para estabelecer
a inclinação e a interceptação de um gráfico
da lei de Beer
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