CROMOMETRIA
FOTOCOLORIMETRIA
ESPECTROFOTOMETRIA
Prof. Dr. José Ledamir Sindeaux Neto
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
É a ciência, que estuda a interação da luz com os materiais
e de que forma é percebida pelo olho e interpretada pelo
cérebro.
Distribuição espectral da radiação emitida, refletida ou
transmitida.
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Luz visível: é composta por radiações de diferentes
comprimentos de onda, cada um correspondendo a uma cor
particular.
A decomposição da luz branca, surgindo o espectro visível
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Luz: energia constituída por ondas eletromagnéticas
irradiadas de sua origem a uma velocidade de
aproximadamente 300.000 km/s, no vácuo.
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Espectro
Sequência de radiações monocromáticas, com comprimento
de onda de 380 a 760 nm
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Fatores fundamentais na formação das cores:
1. Fonte de luz (radiação)
2. Objeto
3. Observador (sensação)
Distribuição espectral de
Comissão Internacional “iluminantes” = fonte de luz
de Iluminação (CIE)
Caracterizados pela distribuição
espectral e por sua temperatura de cor.
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Iluminante A:
Luz natural (400 – 700 nm)
Lâmpada de tungstênio 100 W (400 – 700 nm)
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Iluminante D65:
PADRÃO (CEI)
Avaliação
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
visual da cor
Uma mesma amostra exposta a diferentes fontes de luz (iluminantes)
numa mesma cabine de luz padrão
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Fluorescência
✓ As radiações ultravioletas (UV) (abaixo de 400 nm)
interferem diretamente no processo de formação da cor.
Quando determinados aditivos na superfície do objeto
(fluoróforo) absorvem as radiações UV que é reemitida
em comprimentos de onda visíveis.
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Fatores fundamentais na formação das cores:
1. Fonte de luz (radiação)
2. Objeto
3. Observador (sensação)
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
ABSORÇÃO: fenômeno pelo qual um feixe de radiação
transfere sua energia, parcial ou totalmente, para o meio
material que atravessa.
TRANSMITÂNCIA: fração desta energia que é
transmitida pelo sistema
REFLETÂNCIA: fração da luz incidente que não foi
absorvida ou transmitida, mas que foi refletida pelo
sistema.
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Absorção
Filtro azul
seletiva:
Filtro verde
Filtro vermelho
Filtro amarelo
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Refletância
Objeto branco real (100% Objeto preto real (0%
refletância de comprimentos de refletância de comprimentos de
cor visível) cor visível)
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Fatores fundamentais na formação das cores:
1. Fonte de luz (radiação)
2. Objeto
3. Observador (sensação)
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Metamerismo
Ocorre quando um par de objetos (par
metamérico) apresenta a mesma cor sob
uma determinada fonte de luz (ou
iluminante) e cores diferente quando
visualizado sob outra fonte de luz (ou
iluminante).
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
O Sistema visual humano e a percepção de cor
✓ A base do sistema visual humano é composta por
uma rede de sensores especializados existentes nos
olhos.
A retina é a parte
do olho sensível à luz e
sua superfície é
composta por
fotorreceptores e
terminações nervosas.
CONES E BASTONETES
Sensíveis a diferentes
comprimentos de onda
e responsáveis pela
transmissão do sinal
elétrico para o cérebro.
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico Fotorreceptores
Dividem o espectro visível dentro das regiões mais dominantes
-Vermelho (cone L)
-Verde (cone M)
-Azul (cone S)
RETINA
Sinais de cores para o cérebro
(nível psicométrico)
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico Fotorreceptores
Dividem o espectro visível dentro das regiões mais dominantes
-Vermelho (cone L)
-Verde (cone M)
-Azul (cone S)
Interpretação
(nível perceptual)
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Daltonismo = deficiência nos fotorreceptores (cones)
Tipos:
-Protanopia: cone L (long = grandes comprimentos de
onda) = produzindo deficiência vermelho/verde
-Deuteranopia: cone M (middle = médios comprimentos de
onda) = produzindo deficiência vermelho/verde
-Tritanopia: cone S (short = pequenos comprimentos de
onda)
▪ CROMOMETRIA: Princípio básico
Daltonismo = deficiência nos fotorreceptores (cones)
▪ CROMOMETRIA: Métodos de avaliação
Em todas as áreas das ciências e da engenharia
Instrumentos: colorímetro e espectrofotômetro
Separa os componentes da
luz (vermelho, azul e verde)
funcionado de forma Utiliza filtros que simulam a
análoga ao sistema visual resposta dos cones do olho
humano.
▪ CROMOMETRIA: Métodos de avaliação
Em todas as áreas das ciências e da engenharia
Instrumentos: colorímetro e espectrofotômetro
Composto por um feixe de luz
policromático que, de forma difusa,
espalhada, ilumina a amostra. Parte
deste feixe é refletido por ela,
seguindo para o prisma. Cálculo de
curva espectral.
▪ Fotocolorimetria e Espectrofotometria
Partículas dispersas ou dissolvidas em uma solução
interferem seletivamente com um raio de luz que passa
através desta solução.
Luz Luz
absorvida transmitida
Luz
incidente
Transmitância X Absorbância
▪ Fotocolorimetria e Espectrofotometria
Métodos biofísicos de análise de substâncias
largamente utilizado em laboratórios de análises
clínicas e de pesquisa, tendo como principal objetivo
determinar a concentração de soluções mediante
absorção de energia radiante (luz).
Quantificação de substâncias
▪ Fotocolorimetria – Fotocolorímetro:
- Seleção do comprimento de onda emitido = filtro
▪ Espectrofotômetro
Espectrofotômetros mais modernos utilizam dois feixes: um
que passa através da amostra e outro que não. A
comparação entre os dois feixes produz leitura final do
equipamento.
FLUORIMETRIA
FOTOMETRIA DE CHAMA
▪ FLUORIMETRIA: Princípio básico
Toda a vez que uma molécula absorve energia radiante,
esta energia tende a ser dissipada na forma de calor via
colisões.
95% das moléculas “utilizam” este
processo de dissipar a energia
5% das moléculas: quando energias radiantes mais intensas
(UV) são emitidas, parte da energia é perdida em calor e
outra parte excita os elétrons para níveis mais elevados, que
ao retornar ao estado fundamental, vão emitir luz visível.
▪ FLUORIMETRIA
▪ FLUORIMETRIA
▪ FLUORIMETRIA
Fluorescência e fosforescência são processos de emissão
de luz em baixas temperaturas. Nos dois processos, ocorre
absorção de energia e sua reemissão em forma de luz
visível.
Substâncias fluorescentes emitem
luz durante o período que
recebem luz. Quando cessa a
chegada de luz, cessa o processo
de emissão.
▪ FLUORIMETRIA
Fluorescência e fosforescência são processos de
emissão de luz em baixas temperaturas. Nos dois processos,
ocorre absorção de energia e sua reemissão em forma
de luz visível.
Substâncias fosforescentes
emitem luz durante e depois
de cessada a chegada
de luz.
▪ FLUORIMETRIA
Fatores que favorecem a fluorescência:
1. Rigidez estrutural: moléculas com estruturas rígidas
2. Temperatura: altas temperaturas aumenta a probabilidade de
desativação.
3. Viscosidade do solvente: quanto maior a viscosidade maior a
intensidade da fluorescência.
▪ FLUORIMETRIA – FLUORÍMETRO:
FOTOMETRIA DE CHAMA: Princípio básico
- Baseia-se na excitação de átomos obtidos pelo uso
de uma chama (sistema composto por gases
de alta temperatura).
- Os átomos excitados voltam ao seu estado
fundamental com emissão de um fóton de
radiação que pode ser identificado e medido
• Na (589,0 ou 589,6 nm)
• K (766,5 nm)
• Li (670,8 nm)
Chama Mostrador
Fotodetector
Amplificador
filtro
Gás butano
Nebulizador
Câmara de mistura
Ar
Descarte Amostra