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Thermo Fisher Scientific @thermofisherscientificpor /ThermoFisherLatinAmerica

1 Esta apresentação é de propriedade da Thermo Fisher Scientific. A distribuição, cópia ou publicação não é permitida sem os devidos créditos a
Thermo Fisher Scientific, mediante solicitação de autorização prévia por escrito.
 18 de agosto às 16h 20 de agosto às 16h 25 de agosto às 16h 28 de agosto às 16h

Tema: Microscopias FTIR e Raman - Tema: Noções básicas da Tema: Como a Thermo Fisher Tema: Teste de
fundamentos e aplicações: aprenda a Cromatografia: venha aprender as pode ajudar os laboratórios sensibilidade a
realizar análises químicas de pequenas diferentes modalidades de separação com as novas análises da IN60 antibióticos
regiões de uma amostra com resolução cromatográfica e suas aplicações.
espacial da ordem de micrômetros. Speaker: Juliana
Speaker: Luciana Pataro Speaker: Mônica Piovani Speaker: Juliana Cardoso Cardoso

Thermo Fisher Scientific @thermofisherscientificpor /ThermoFisherLatinAmerica

2
 Luciana Pataro

Foto do Especialista em Aplicações de Espectroscopia Molecular

palestrante
Materials and Structural Analysis Division
Analytical Instruments Group
Thermo Fisher Scientific
[Link]@[Link]

Esta apresentação é de propriedade da Thermo Fisher Scientific. A distribuição, cópia ou publicação não é permitida sem os devidos créditos a
3
Thermo Fisher Scientific, mediante solicitação de autorização prévia por escrito.
Microscopias FTIR e Raman: Fundamentos e Aplicações
Série de Webinars:Jornada Científica
Customer Experience Center
Agosto, 2020

The world leader in serving science

 FTIR

Proprietary & Confidential The world leader in serving science

Introdução – Espectroscopia Vibracional

Radiação Eletromagnética
Infravermelho é uma forma de radiação eletromagnética
Moléculas irradiadas vibram em diversos modos, absorvendo energia e calor

6
O que ocorre na amostra?

Light Mass, Dipole, High Frequency

Mid-IR
Heavy Mass, Dipole, Low Frequency
Far-IR

Cl H
N N
Only when there is a dipole
No Dipole, Nothing Happens
change do you get IR peaks

7
Vibrações Moleculares

Estiramento Deformação
100

95

90

85

80

75

70

65

60
%T

55

50

45

40

35

30

25

20

15

4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000

cm -1

8
Técnicas de Medição de FT-IR

• Transmissão:
• Método de referência
• Preparo da amostra pode ser complicado
• Qualitativo ou quantitativo
Io=0o

• Reflexão:
• Módulos ópticos específicos
• Líquidos, sólidos, gel, revestimentos
Io=Ro • Preparo mínimo da amostra

9
Técnicas de reflexão em FT-IR

• Reflectância Total Atenuada (ATR):

• Sólidos e líquidos
• Análise superficial
• Útil em 95% dos casos

• Reflectância Difusa (DRIFTS)

• Sólidos ou pós

• Reflectância especular
• Sólidos reflexivos ou sobre um espelho

10
 Espectroscopia Raman

Proprietary & Confidential The world leader in serving science

Básico: Raman como uma Ferramente de Laboratório

• Raman é usado para resolver problemas

• Não destrutivo, não invasivo
• Identificação, mapeamento, imagem, perfil de PET

profundidade HDPE

LDPE

• Acoplamento com microscópio

• Mínimo ou nenhum preparo de amostra

• Alta Resolução Espacial

• O que você precisa?

• Medida única, múltiplas análises?
• Flexibilidade?
• Imageamento?

12
Espectroscopia Raman

Amostra n=1
First
LASER n=0
Excited
State

Virtual
State

Energy
n=1 Ground
n=0 State

Stokes Rayleigh Anti-Stokes

• Raman é uma técnica de espalhamento Scattering Scattering Scattering

• Sensível aos modos vibracionais de ligações covalentes nas moléculas

• Mais sensível a vibrações altamente simétricas (C-C, Si-Si)
• Sensível a tudo que cause mudança na energia da ligação (como ângulo de ligação)

13
Espectro Raman
Virtual
State

Rayleigh CCl4
lex=488 nm
Stokes nex=20492 cm-1
Energy -459

Intensity
-314

-218
Anti-Stokes

218
314
n=1
459

n=0
Stokes Rayleigh Anti-Stokes
Scattering Scattering Scattering -500 -400 -300 -200 -100 0 100 200 300 400 500
Raman Shift, cm-1

Espalhamento Rayleigh é
aproximadamente 1000 vezes mais
Filtro de rejeição
intensa que o espalhamento Raman

Filtro Edge
Como Funcionam Espectrômetros Raman Dispersivos

• Sistema DXR2: Filter

• Lasers Aperture Sample
Grating
• 455 nm
• 532 nm
• 633 nm
• 785 nm
• Filtro de rejeição Rayleigh Laser
• 50 cm-1 cut-off
• Abertura Multichannel detector
• Slit
• Pinhole (confocal mode)
• Grade de difração
• Standard, 5 cm-1
• High Resolution, 2 cm-1
G
• Detectores
2D
• CCD, EMCCD

50

15
Básico: O que ocorre na Amostra?

N N
Molecular vibration Polarizability Tensor

N N

• IR → Mudança em Dipolo
• Raman → Mudança em Polarizabilidade

Fundamental vibrations of
homonuclear diatomic molecules

Raman shift, cm-1

16
Polarizabilidade do CO2
Polarizabilidade: tendência da núvem eletrônica de um átomo ser distorcida da sua forma normal

Estiramento simétrico: Ativo no Raman Estiramento Assimétrico: Não ativo no Raman

17
Características da espectroscopia Raman
• Complementar à Espectroscopia no Infravermelho
• As duas técnicas fornecem espectros ricos em informações
• Weak IR absorbers often strong Raman emitters
• Ligações simétricas & homoatômicas são melhor representadas (S-S, C-C, etc.)
• Esqueleto da molécula mais enfatizado
• Grupos finais menos enfatizados

90

80
% Transmission

70

60 Overtone Bands
50

40 Bending Bands
30

20
10
Antisymmetric Ring Stretching Bands
0.9 C-H Stretching Region
0.8
Raman intensity

0.7 Symmetric Ring Breathing

0.6 Symmetric Ring stretching
0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

3000 2000 1500 1000 500

Wavenumbers (cm -1)

18
Por que diferentes comprimentos de onda?
Balancear o laser mais eficiente com evitar fluorescência

Virtual State
Laser Choices: 455 nm, 532 nm,
633 nm, 785 nm
Electronic State
Virtual State

1
I scatter 
Virtual State

l4ex
Energy

Longer Wavelength Shorter Wavelength Laser

Lasers (785 nm) (532 nm)
More Efficient Raman
n=1 Scatter
n=0
(lower laser power)
Stokes Scattering Fluorescence Typically Less
Different lasers Fluorescence
(sample dependent)
Better Spatial Resolution

19
Evitando Fluorescência

Uncorrected
age
1007.5

spectrum
m
1005.5

1003.5

er i
1001.5

old
ceh Fluorescence Too extreme
999.5

Pla
997.5

995.5

993.5
Overwhelming Raman
6

9
15 82

15 89

15 2

15 23

15 75

15 37

15 8

15 73

15 73

15 85

15 3

29

15 9

15 36

54
3.4

4.5
7

9
0.0

7.9

0.1

6.8

1.8

8.5

7.6

0.1

2.4

7.0

4.3

8.3

1.0

7.5

9.3
31

37
Spectrum after
57

63

55

39

34

37

47

47

38

29

14

32

40

45

35
15

15
15

15
automated fluorescence Sample requires a different Laser
correction applied

If the fluorescence is not too extreme it can be compensated for using a

software correction otherwise changing the excitation wavelength (laser)
might be the best solution.

20
 Microscopia FTIR e Raman

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Micro-Espectroscopia e Imagem (Mapeamento)
• Problemas de microscópios são sobre pontos, áreas e imagens
• Imagens visuais iniciam o processo
• Variações espaciais relacionadas com características espectrais
• Diferenças na estrutura molecular, propriedades físicas, ou ambiente químico.

• FTIR e Raman fornecem visões únicas da amostra

• Nem sempre aparente em outras formas de microscopia

22
Qual método de análise ideal?

• “Point and shoot” é para… 0.18

0.16
Red Fi ber emb edded i n money

• Identificação de um único elemento

0.14

+
0.12

Abs
0.10

0.08

• Fibras
0.06

0.04

+
0.02

• Partículas
0.00
Nyl on Li brary match
0.8

0.7

0.6

• Inclusões 0.5

Abs
0.4

0.3

• Observe, obtenha um espectro e Identifique 0.2

0.1

0.0
4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
Wavenumbers (cm-1)

Polyurethane adhesive

• Mapeamento é para…
• Seções e caracterização de pequenas áreas Polyamide
Polyethylene
EVA

• Laminados EVOH

• Chips de tintas e outras seção transversal Polyethylene

• Estudos de distribuição de pequenas áreas

• Observe, obtenha uma série de espectros e identifique/ meça

• Imageamento é para…
• Caracterização de uma área grande
• Observe, ajuste uma área, faça a varredura e
extraia a informação química

23
Mapeamento? Imageamento?

Mapeamento

Imageamento

24
Lado a lado: Espectroscopia FTIR e Raman

25
 Microscopia FTIR

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Microscopia?

• Como analiso amostras pequenas?

• E como sei o que pode ter nesse comprimido ou nessa embalagem feita de diversas
camadas?

27
Microscopia FT-IR

• Microscopia FT-IR é uma combinação de microscopia

visível com espectroscopia FT-IR, que permite a
visualização da amostra e sua caracterização química

28
Modos de Medição para Microscopia FTIR

Transmission
• Preferred method for quantitative analysis
• Sample mixed and pressed; good sensitivity

Reflectance
▪ Attenuated Total Reflectance (ATR)
• The sample must contact the crystal
• Simple and fast, generally non-destructive

▪ Diffuse reflectance (DRIFTS)

• Dilute sample in a matrix (like KBr)
• Simple, but requires mixing

▪ Specular reflectance
• Sample must be reflective or on a mirror
• Signals can be very weak

29
 Microscopia Raman

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Microscopia Raman
• Raman Dispersivo oferece:
• Maior resolução espacial
~1 µm
− Comprimento de onda menor significa menor limite de
difração

• Microscopia Confocal
− Permite perfil de profundidade não destrutivo sem
prepare de amostra
− Também relacionada com difração
CH4

Gas Bubble

CH4
CO2 Quartz

20 microns

3000 2500 2000 1500 1000 500 532nm 25 Micron Pinhole 100x objective
cm-1

31
Microscopia Confocal

• DXR é um microscópio totalmente confocal

• Fornece maior resolução espacial
• Atinge 1 µm de resolução x-y
• Fornece perfil de profundidade de amostras opticamente claras
• Atinge 2 µm de resolução em profundidade

Detector

Objective

Adjust z-axis
Sample
with scope focus knob

32
Qual laser utilizar?

• Shorter wavelength for higher spatial resolution

• Shorter wavelength results in greater scattering efficiency

• Raman signal is proportional to 1/λ4

• Shorter wavelengths for dark samples (less heating)

• Longer wavelengths are more universally applicable

• Less fluorescence
• For greatest versatility, choose 532 nm and 785 nm

33
 Aplicações Microscopia FTIR

Proprietary & Confidential The world leader in serving science

Product Defect Analysis - Pharmaceutical Tablet Contamination
Diamond ATR

Contaminant

Absorbance
Tablet as received
Tablet Coating

4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500

Wavenumbers (cm-1)

• Surface contaminant – Diamond ATR

~200 µm
• Tablet coating – Hydroxypropyl methylcellulose (HPMC)
View through diamond ATR • Contaminant – Ethylene-propylene copolymer (gasket)
image • Diamond ATR gave fast, accurate result

35 SurveyIR™ ©2017 Czitek

Product Defect Analysis - Pharmaceutical Injectable Drug
Diamond ATR
1.0 Suspended White Contaminant

Abs
0.50

0.00
1.0 Polytetrafluoroethylene

Abs
• Solids observed in injectable 0.50
drug vial
0.00
• Solution filtered to isolate solid 4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
Wavenumbers (cm-1)
• Filter media with isolated white
solid contaminant • Solid measured directly on filter media
• Visible with oblique illumination and view thru
• Oblique illumination with view diamond ATR
thru ATR • Identified as PTFE (Teflon®)
– Syringe core from septa material.

36 SurveyIR™ ©2017 Czitek

Product Defect Analysis - Food Additive Crystal Contamination
Citric Acid Contaminant Diamond ATR
0.12
0.10

Abs
0.08
0.06
0.04
0.02
0.25 Hydraulic Fluid
0.20
0.15

Abs
0.10
• Citric acid crystals observed to 0.05
be off color with different 0.00
texture 4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
Wavenumbers (cm-1)
• Oblique illumination shows • Sample found using oblique illumination.
discolored crystals • Measured directly with Diamond ATR – 250 µm
aperture
• Identified hydraulic fluid contamination.
• SurveyIR quickly solved long running production
problem

37 SurveyIR™ ©2017 Czitek

Point and Shoot: Particulates in Automotive Fluids

• Teflon™ coated shock absorber piston band

• Shock absorber fluid filtered
• Thermo Scientific™ Nicolet™ iN™5 FT-IR Microscope
• Ge-Micro-ATR

Teflon: piston band main material

Pliolite®: Styrene acrylate co-polymer

Silane: slip-assist coating

38
Food Safety: Residue on Snack Bag

• Specular Reflection
• Subtract Bag spectrum
• Search result
• Edible Oil

39
Embedded Fibers - ATR

• Fiber embedded in Paper Matrix

Red Fi ber emb edded i n money
0.18
Embedded Red Fiber
0.16

0.14

0.12
Abs

0.10

0.08

0.06

0.04

0.02
0.00
Nyl on Li brary match
0.8
Nylon Library Match
0.7

0.6

0.5
Abs

0.4

0.3

0.2

0.1

0.0
4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
Wavenumbers (cm-1)

40
Análise de Materiais: Análise de Filme de Polímero Laminado

• 5-layer polymer composite cross-section analysis by ATR-imaging

• Adhesive layers of interest seem to be 5 micron thick
• Sample: slices too thick for transmission
• Spectra in transmission show total saturation in CH stretching region
• Micro ATR might be the solution
• Analysis of adhesive and barrier region
PP
EVOH

PP TiO2 PP TiO2

Adhesive material ?

41
Estrutura com ATR Imaging

Polypropylene Adhesive EVOH

0.22 * Pos ition (micrometers)=2471 µm ;-30775 µm POLYPROPYLENE LAYER
* Pos ition (micrometers)=2408 µm ;-30755 µm ADHESIVE LAYER
0.20

• Measured area size: 210 x 70 micron 0.18

0.16

•
2872.6

Collection time: less than 10 minutes 0.14

2838.8

Absorbance
0.12

• Resolution 8 cm-1 0.10

0.08
2849.4

• Time per step: 0.7 sec 0.06

0.04

• ATR step – 6 microns 0.02

3100 3000 2900 2800 2700

Wavenumbers (cm-1)

42
Imaging ATR Accessory: Hemispherical ATR Accessory
• Imaging ATR Accessory for Enhanced Spatial Resolution
• Multi-layer polymer film analysis
• Classic multilayer film analysis demonstrates
spatial resolution
• 4 layers, PP/PE + print layer
• 4 x 4 micron pixel in Ge-ATR

Embedding

10 mm PP 50 mm
ATR Crystal
PE co print layer
PE
Sample

Support
PP

Embedding

43
Processing: Area Map Profiles (Multilayer Material)

• Move Cursor along

spectra
• Color ↔ Intensity
• Highlights regions

3293 cm-1 2930 cm-1 2849 cm-1 1651 cm-1

44
Processamento: Mapas de correlação

EVA

Polyethylene

Nylon

• Highlights similar spectra

45
Paint on Metal Prepared via Epoxy Puck

Resin
Clamp

Paint

Metal

46
ATR Measurements

47
Paint Spectrum

Poly(dialyl isophthalate)

48
Paint Spectrum Second Region

Poly(dialyl isophthalate)

Aluminium Hydroxide

49
Basecoat

Epoxy Resin

50
Metal Surface: Cleaning Agent?

Surfactant

51
 Aplicações Microscopia Raman

Proprietary & Confidential The world leader in serving science

Differentiating – Distinguish Between Similar Materials

Pharmaceutical Different forms HOPG (Graphite)

Polymorphs of Carbon Graphite 500

Int
3273, 3254 cm-1 40000
Diamond

Diamond

Int
20000

Single Layer Graphen on Si Substrate

2000

Graphene

Int
SWCNT (90% 1-2 nm)

100
SWCNT

Int
(monoclinic form) MWCNT (30-50 nm diameter)
100

Int
50 MWCNT
3267cm-1 -0
3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
Raman shift (cm-1)

Different Geological
Phases Anatase TiO2

Aragonite and Calcite

(CaCO3)
(triclinic form) Rutile TiO2

800 700 600 500 400 300 200

Raman shift (cm-1)

53
Evaluating Morphology and Physical State

Crystalline vs. Amorphous Stress in Silicon

Crystalline Silicon Band

Amorphous Silicon Band

• 540 • 520 • 500 • 480 • 460 • 440 • 420 • 400

Nano-structured vs. Bulk Stress in Diamond

54
Representative Applications of Raman Spectroscopy

Polymers and Packaging

Subsurface analysis to identify inclusions and
verify layers without sample preparation

Semiconductors
and Thin Films
Variation in stress
distributions and
crystallinity across an
entire wafer; Identify
contaminants and
defects

Pharmaceuticals
Full tablet imaging for content
uniformity and formulation
analysis

55
Today Raman is Being Used in Many Different Areas
Forensic Science
Art Conservation and
Archeology
Identification and discrimination of paint
pigments using DXR microscopy and fiber optic
analysis

Identification of components in explosives residue

Analysis of lipstick

Energy Storage - Lithium Ion

Batteries Analysis of cathode components

Carbon Black

Li Mn Ni Oxide #1

Li Mn Ni Oxide #2

56
Raman Solves Many Problems
Life Science
Spectroscopic evaluation of cancerous tissue
and bacterial biofilms to expand
understanding
Cell Nuclei Collagen

Glass Slide

Carbon Nanomaterials
Analysis of graphene growth
mechanisms and distribution of
defects

Geology / Mineralogy
Identification of inclusions in minerals using Rapid non-destructive identification
DXR confocal analysis of minerals

57
Tablet Imaging Example

Migraine Relief Tablet

11 mm diameter, 676 mg

APIs
Acetaminophen 250 mg
(37%)
Aspirin 250 mg
(37%)
Caffeine 65 mg (9.6
%)

Inactive
2500 mm
corn starch, microcrystalline cellulose,
Video Mosaic Image sodium lauryl sulfate, sodium starch,
glycolate, crospovidone, polyethylene glycol,
(10X objective, 100X total magnification) polyvinyl alcohol, povidone, stearic acid, talc,
titanium dioxide

58
Imaging the Whole Tablet
Raman MCR Image

Area Imaged - 11 x 11 mm2

10X objective
Image Pixel Size - 25 mm
226,000 spectra
Exposure Time 1.8 ms (550 spectra per
s)
532 nm laser,

8 minute collect time!!

Aspirin Acetaminophen Caffeine Titanium Dioxide

59
Higher Resolution Image – Whole Tablet
Area Imaged - 11 x 11 mm2
10X objective
Image Pixel Size - 5 mm
5.4 million spectra
Exposure Time 1.8 ms (550 spectra per s)
532 nm laser
36 GB file
Size only computer limited (128 GB RAM)
6 hour collection time (3 hr estimated)

Image Analysis % Area of Particles

Calculated %
Component (Surface Reported %
Area)

Aspirin 38.6 37
Acetaminophe
35.4 37
n
Caffeine 7.7 9.6
Aspirin Acetaminophen Caffeine Titanium Dioxide

60
Identify Area of Interest – Longer Exposure Time

1.6 x 1.7 mm2

50X Objective
500 mm
5 micron image pixel size
116000 spectra Blue – Caffeine,
Exposure time 5 ms (200 spectra per s) Green - Acetaminophen,
532 nm laser Yellow – Aspirin, and Red –
5 averaged scans, 55 minutes starch
61
Define Area Further, Higher Resolution, Longer Exposure Time

500 mm
225 x 250 mm2
100X Objective 100 mm
0.5 micron image pixel size Blue – Aspirin, Green – Acetaminophen,
229000 spectra Yellow – Caffiene, Red – starch,
Exposure time 10 ms (100 spectra per s) Fuchsia – microcrystalline cellulose,
532 nm laser Orange – sodium lauryl sulfate.
5 averaged scans, 3 hr collect

62
DXR Raman Microscope -Trace Residue Analysis

TNT
TNT
Specimen

PETN

C-4

63
Imagem Raman de Compósitos de Polímero Multicamada

Polypropylene
33 mm

Polyamide (nylon) 18 mm
Poly(vinyl alcohol) ? 12 mm

Polyamide (nylon) 18 mm

Polyethylene 43 mm

532 nm laser (10 mW), 132 x 150 mm area, 0.5 mm image pixel size, 79200 spectra,
0.020 s exposure time, 3 scans

64
Multi-Layer Nylon Fiber – Cross-Section Imaging
Z

All Nylon Nylon 6 Nylon 6/6

532 nm laser (10 mW), 31x 31 mm area, 1 mm image pixel size, 961 spectra, 0.100 s exposure time, 50 scans

65
Raman em Nanotecnologia de Carbono
• Materiais de Carbono são bem caracterizados por Raman
G’ Band G Band D Band
RBM
HOPG (Graphite)
500 Graphite
Int

Diamond
40000 Diamond
Int

20000

Single Layer Graphen on Si Substrate

2000 Graphene
Int

SWCNT (90% 1-2 nm)

Single-wall carbon nanotube
100
Int

MWCNT (30-50 nm diameter)

100 Multi-walled carbon nanotube
Int

50

-0
3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
Raman shift (cm-1)

66
Análise de Grafeno, laser de 532nm

Ratio of the 2D to G band of graphene: MCR of graphene:

SiO2
substrate

Single-
layer
graphene

Non-uniform growth Hexagonal growth

175 x 175 mm surface area

50 x 50 mm surface area
122,000 spectra!!!
10,000 spectra!!! 0.5 mm pixel size
Acquisition parameters: 100 Hz (10 ms/spectrum) Acquisition parameters: 100 Hz, 10 scans
~16.7 minute collect time!! ~3.4 hour collect time!!

*Note: This graphene was initially grown on copper and then transferred to a silica substrate because the copper is a significant source of interference

67
Inclusions in Synthetic Volcanic Glasses

Video Image MCR

Raman
Image
CO2
Water
Glass
Labradorit
e

532 nm laser (10 mW), 59 x 59 mm area,

1 mm image pixel size,3481 spectra,
Y exposure time 0.020 s, 100 scans

68
Análise de Microplásticos por FTIR e Raman

The world leader in serving science

Microplastics – What are they?

• A microplastic is a small piece of

plastic
Name Abbreviation

• How small? Expanded Polystyrene

Polypropylene
EPS
PP
Polyethylene PE
• 5mm to 1 micron Acrylonitrile-butadiene-styrene ABS
Polystyrene PS
• Common microplastics Polyamide (Nylon) PA
Polymethyl methacrylate PMMA
• PE, PP, PET Polycarbonate PC
Cellulose Acetate CA
• Sources Polyvinyl chloride PVC
Polyethylene terephthalate PET
• Primary Polytetrafluoroethylene PTFE

• Particles designed to be small

• Secondary
• Formed from the breakdown of larger items

70
Why the concern?

• Ubiquitous
• Found in many places
• Environmental
• Aquatic life
• Food Chain
• Water Supply
• Bottled Water
• Fish & Seafood

71
Characterization of Microplastics

• Common questions • Technique used to identify material

• How much (Load)? depends on
• What type (Identity)? • Particle Size
• Identity of plastic is related to: • Information Required
• Source • Identity
• Potential Toxicity • Particle Size
• Size Distribution
• Number of particles to be analyzed

72
FTIR and Raman Spectroscopy

• FTIR and Raman are commonly IR Spectra of polyethylene

and polypropylene
used to identify plastics
1.0
P olyethylene

• Both are non-destructive 0.8

0.6

Abs
• Both can be used to identify
0.4

0.2

microscopic particles 0.0

1.0

0.8
P olypropyle ne

• The choice depends on the particle

0.6

Abs
0.4

size and the information required 0.2

0.0
350 0 300 0 250 0 200 0 150 0 100 0
W av enumbers ( cm- 1)

• 5mm to 0.1mm
• 100um to 10um
• 10um to 1um

73
Microplásticos
Tamanho de partícula 5 mm to 0,1 mm

The world leader in serving science

Partículas maiores: FTIR com ATR de uma reflexão

• Visível a olho nu
• Manipulado com pinças
• Microscopia não requerida
• FTIR + ATR frequentemente
utilizada nesse caso

75
Microplastics and Marine Life

1. Scat samples obtained from Gray

Seals in Cape Cod
2. Microplastic particles obtained
during filtering / washing of
samples
3. Particles identified using FTIR with
ATR

Polyethylene

Christine A Hudak and Lisa Sette

Center for Coastal Studies, Provincetown, MA,
USA Kaolin

76
Partículas de 100 mícrons a 10 mícrons

The world leader in serving science

Micro espectroscopia

• Tamanhos de partículas menores que 100

microns requerem micro espectroscopia
• Para visualizar a amostra
• Para focar o feixe do espectrômetro para um
tamanho pequeno adequado (resolução especial)
• Microscopia tem dois benefícios
• A habilidade de medir partículas pequenas
• A habilidade de medir múltiplas partículas
automaticamente
• Tanto FTIR quanto Raman estão disponíveis
em configurações com microscópios

78
Data Collection Options

• Single point
• Only a single point is collected
• Multiple-point
• Many discrete particles are analyzed in
sequence
• Imaging
• Contiguous data points are acquired to
provide a chemical map of an area

79
Análise de Ponto Único: Microesferas

• Microesferas de esfoliantes obtidas

a partir de formulações de higiene
pessoal
• Esferas possuem tamanho de 100-
25 mícrons
• Usando um microscópio IR equipado
com uma objetiva com ATR, as
partículas foram identificadas como
polietileno
• Análise simples ‘point-and-shoot’

80
Workflow Genérico: Amostragem & Análise de Microplásticos

[Link]/microplastics

81
Imaging of Filter

• Workflow
• Filtration
• Visual image used to select
target
• Automated analysis

• Reference Sample: PE
Spheres
• 7 x 6 mm area
• 17,500 spectra collected
with 50 micron steps
• Single point MCT, ultra fast
mode
• 10 spectra per second, ~ 30
min acquisition

82
Microparticle Sample Preparation Kit

83
Análise por Imagem
Search to identify
Sphere

Filter material

Image Analysis
Correlation Map

84
Partículas 10 a 1 mícrons

The world leader in serving science

Microscopia Raman para Partículas Pequenas

• Ambos os microscópios IR e Raman

microscopes podem ser usados para
identificar partículas até 10 mícrons
• Para partículas na faixa de 10 a 1
mícrons, o Raman é preferível
• Melhor performance da luz branca do
microscópio
• Mais fácil visualização da amostra

• Maior resolução espacial

• Mais fácil medir/analisar a amostra

86
Análise Raman de Microplásticos em Veneza
• Amostra de Areia / Sedimento
• Pellestrina, Veneza
• Preparo de amostra remove a areia
por decantação
• Remove partículas mais pesadas
• Tratadas com peróxido de hidrogênio
para remover matéria orgânica
• Imagem: Resultado da filtração final

Image from Google™ Maps

M. Rocchia, I. Ruff and A. Vianello

87
Particles on Filter: DXR2xi Raman Imaging

• Experimental Conditions
• Laser wavelength: 532nm
• Laser power: 5mW
• Acquisition rate: 200 spectra/sec
• Selected Regions analyzed
• 22 regions chosen

88
Partículas no Filtro: DXR2xi Raman Imaging

Polypropylene

Polyethyleneterephthalate

In total, 6 different plastics identified including

PP, PET, LLDPE, PET, PVC

89
Selecting the Right Technique

90
Microplastics Website

[Link]/microplastics

91
Microscópios FTIR e Raman

92
 Sessão de perguntas
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