Microscopia
É a ciência que estuda e realiza aplicações utilizando o microscopio para observar objetos,
células, etc., com dimensões invisiveis a olho nu (0,1mm). Gira em torno da arte, pesquisa e
trabalho em si. Sua importancia é tanta que possibilitou a cura de doenças como a
poliomielite, criaçãi de microchips, telefones, computadores e descoberta do DNA, tambem.
Principios de funcionamento
Os microscopios possuem a capacidade de aumentar a resolução da imagem atraves de
lentes especializadas; vidro (optica) e eletrons (eletronica).
Poder de resolução PR: É a capacidade de uma lente (ou o proprio microscopio) em formar
imagens com detalhes minimos.
Limite de resolução (LR): é a menor distancia entre 2 pontos distintos do objeto, que
poderão ser individualizados na imagem final
Microscopia
Tipos de microscopio
Microscopio de luz
Microscopio optico: mais comum
Microscopia
Microscopio Eletronico: 1000x mais potente
Microscopia
microscópio de fluorescência: Utiliza a excitação da radiaçao ultravioleta que aparecem em
estruturas brilhantes num fundo escuro
Microscopia
Microscopia
Microscopio confocal: Utiliza raios laser gerando imagens de planos opticos do tecido em
exame
Microscopio de contraste de fase: facilita a visualização de celulas e tecidos
Vantagens da microscopia:
Observação da cdlula viva sem destruição;
observaçaõ em trmpo real
alta resolução de organismos invisiveis a ollho nu
imagens multidimensionais
melhot=r contraste e resolução conforme o desenvolvimento;
Microscopia
observaçao de celulas vivas sem fixação ou artefatos de seccionamento fisico.
O mmicroscopio optico composto é utilizado para a visualização dos elementos teciduais e
estruturas celulares por intermedio da ampliação da luz refletida pela amostra em analise.
Como se forma a imagem no microscopio?
A fonte de luz esta na parte inferior e ela passa pela lente condensadora que passa pelas
lentes objetivas ate a lente ocular (é quando o cientista consegue ver). Esse
posicionamento estrategico das lentes proporcionam a formaçãp de uma imagem invertida.
MICROSCOPIO OPTICO CONVENCIONAL
Microscopia
Fixaçção; misturas de substancias capazes de agir sobre os tecidos de forma a buscar a
melhor preservaÁ„o dos elementos teciduais.
A inclusão é uma técnica histológica que consiste em impregnar o material
a ser observado com uma substância para que se torne mais consistente.
Isso facilita o corte do material em fatias muito finas, que podem ser
analisadas com um microscópio
A microtomia é uma técnica que consiste em obter cortes finos de tecidos
ou órgãos para serem observados em microscópio
Aplicações de microscopia de contraste de fase (nao ha necessidade de
coloração)
-culturas de celulas;
-exames parasitologicos
-esfregaços e raspagens de mucosas (em consultorios)
-sangue
-protozoarios de ambientes aquaticos
-algas
-bacterias
Microscopia de Campo Escuro
Microscopia
atua nos estudos de plancton, bacterias, cristais, estruturas subcelulares
como fimbrias e flagelos bem como grao de polen
Microscopia de fluorescencia
a fluorescencia é uma propriedade fisica que algumas substancias tem de
absorverem luz, em um determinado comprimento de onda e emitirem luz
com comprimentos de onda maiores e niveis energeticos mais baixos.
Com a aplicação dessa microscopia, é possivel identificar compostos
naturalmente fluorescentes
Microscopia
Imunofluorescencia: conjugação de anticorpos e fluorocromos que permite
a identificação de moleculas especificas.
A conjugação de anticorpos é um processo que envolve a fusão química e
biológica de moléculas diferentes, com o objetivo de criar moléculas com
ações farmacológicas distintas;
Microscopia confocal a laser (desde 1987), tem seu funcionamento
baseado nos princípios da microscopia de fluorescencia (utiliza laser como
fonte de luz) e permite a visualização de materiais espessos, corpos
inteiros sem coloração previa e reconstrução do objeto de maneira 3d,
onde ha varios planos focais ou cortes opticos. E ainda, ha o aumento de
sinais de fluorescencia de estruturas subcelulares por exemplos:
Microscopia
microtubulos, miofilamentos, filamentos intermediarios e elementos da
matriz extracelular.
Microscopia eletronica de Transmissão (MET) e de Varredura (MEV)
Formação de imagem no MET:
Como fica a imagem final?
Eletrodensa (escura): quando os eletrons encontram elementos como
ferro, osmio. chumbo e ouro etc.
Eletrolúcida (clara): quando os eletrons encontram elementos como h, c, o,
n eetc.
MEV; revela feições topograficas de surpeficie em detalhes com imagens
3d de vermes, insetos, celulas livres, embrioes, fragmentos geologicos.
Microscopia
Oocrre por meio de eletrons secundarios refletidos na superficie da
amostra.
