Reações de
Aglutinação Direta,
Indireta e Inibição de
Aglutinação
Prof MSc Giulyana Silva
Sumário
01 Aglutinação
02 Teste de Aglutinação Direta
03 Teste de Aglutinação Passiva ou Indireta
01 Aglutinação
Reações empregadas no diagnóstico
laboratorial de doenças causadas por
virus, bactérias, protozoários e fungos,
doenças auto-imunes, na detecção de
hormônios, na tipagem de grupos
sanguíneos.
Reação de Aglutinação
Caracteriza-se pela formação de
agregados visíveis como resultado
da interação de anticorpos
específicos e partículas insolúveis
que contêm determinantes
antigênicos em sua superfície.
Estágios da aglutinação
Ligação das Colisões entre
moléculas do Ac ao partículas
Ag de superfície Ac ligados a uma partícula se
ligam a determinantes
Mistura das partículas antigênicos de outra
recobertas pelo Ag com estabelecendo pontes entre
Ac. Ligações não- partículas que após vários
covalentes. entrelaçamentos formam
agregados visíveis a olho nu.
Partículas com determinantes
antigênicos
Determinantes Antigênicos Naturais em sua superfície: Aglutinação direta
Hemácias,
Bactérias,
Protozoários
Partículas inertes:
Látex,
Poliestireno, Aglutinação indireta
Bentonita ou passiva
Células antigênicamente não relacionadas:
Hemácias,
Bactérias
Interferentes da
reação
Tipo do anticorpo:
IgM é 750 vezes mais eficientes que IgG
Eletrólitos;
pH (ideal entre 6,0 e 8,0);
Macromoléculas hidrofílicas;
Enzimas;
Tempo;
Temperatura
Fenômeno Prozona (altos títulos de Ac)
Teste de
02 Aglutinação
Direta
Utilizam-se partículas antigênicas
insolúveis em sua forma íntegra ou
fragmentada
Os testes para detectar Ac específicos são
realizados empregando-se diluições em
série do anticorpo, frente a uma
quantidade constante de Ag.
Após um período de incubação a
aglutinação se completa e o resultado é
expresso de acordo com a máxima diluição
em que ocorre a aglutinação.
Reações de aglutinação
direta que usam hemácias
como Ag
Sistema ABO Reação de Paul-Bunnel-
e Rh Davidson
Antígenos Anticorpos heterófilos são um tipo de anticorpo que pode
específicos se ligar a antígenos de diferentes espécies. Eles são
frequentemente associados a reações imunes em resposta a
infecções, especialmente a infecção pelo vírus Epstein-Barr,
que causa a mononucleose infecciosa.
Reações que utilizam Ag íntegros ou
fragmentos de bactérias,
espiroquetas e protozoários
Teste de Teste de
Teste de Weil-Felix
Widal Wright
Diagnóstico de
Diagnóstico das Diagnóstico da Rickettsiose
Salmoneloses Brucelose
Testes de aglutinação para Leptospirose, toxoplasmose e tripanossomíase.
Teste de inibição
da
Hemaglutinação
Direta
Baseada na capacidade que certos
Ag virais têm de, espontâneamente,
aglutinarem certos tipos de
hemácias.
Os Ac, se presentes na Amostra,
revestem as partículas virais,
resultando na inibição da aglutinação,
indicando um teste positivo para a
presença de anticorpos.
Não distinguem entre IgM e IgG.
Detectam virus da Rubéola, Sarampo,
Influenza e certos enterovirus.
Teste de
02 Aglutinação
Passiva ou
Indireta
Utilizam-se partículas antigênicas
insolúveis em sua forma íntegra ou
fragmentada.
Detecta Ac IgM e IgG.
Partículas inertes
Hemácias e partículas inertes ( Látex, bentonita, colódio,
charcoal, leveduras etc) podem ser sensibilizadas por:
Adsorção passiva: contato direto com Ag solúveis;
Adsorção via agentes químicos: ácido tânico, cloreto de cromo;
Conjugação do Ag: ligações covalentes que fornecem reagentes
estáveis.
Hemácias (grupo O e de
carneiro) estão entre os
melhores suportes de Ag.
Teste de inibição
da
Hemaglutinação
Passiva
Sensível e específico na detecção
de pequenas quantidades de Ag,
haptenos ou Ac.
Princípio: competição pelos sítios
de combinação do Ac, entre o Ag
fixado à hemácia e o Ag solúvel
ou hapteno.
Teste de
Aglutinação
do Látex
Partículas utilizadas como
suporte na adsorção de
proteína solúvel e Ag
polissacarídicos,
funcionando como
Sistema indicador Ag-Ac.
Teste de Aglutinação do Látex
Aplicação mais comum é na
detecção do Fator Reumatoide.
Auto-anticorpo que ocorre em doenças
auto-imunes, processos agudos ou
crônicos, doenças reumáticas,
infecciosas e degenerativas.
As partículas de látex de poliestireno são
recobertas com IgG humano de Fator
Reumatoide e estabilizadas. Se uma
amostra possuir Fator Reumatoide ela
reagirá com a suspensão de látex.
Teste de Aglutinação do Látex
Detecção de Ag polissacarídeos bacterianos no soro, urina ou
líquor:
- Haemophilus influenzae;
- Rickettsia sp;
- Estreptococos do grupo B;
- Staphyolcoccus aureus;
- Neisseria meningitides
Detecção de drogas e hormônios.
Teste de Aglutinação
de Cristais de
Colesterol
Cristais de colesterol sensibilizados com lecitina e
cardiolipina para pesquisa de Ac da Sífilis. Detecta
Ac antilipídicos que se formam como resposta ao
material de natureza lipídica, liberado pelas células
lesadas no início da infecção e ao material lipídico
do próprio treponema.
Caso Clínico
Maria, 45 anos, apresenta dor articular em várias
articulações (mãos, joelhos e tornozelos),
acompanhada de fadiga, febre baixa e rigidez
matinal que dura mais de uma hora. A dor
começou há cerca de três meses e vem piorando
gradualmente.
História Médica: Sem doenças crônicas
anteriores. Sem histórico familiar significativo de
doenças autoimunes.
Exame Físico: O exame físico revela inflamação
nas articulações afetadas, com edema e dor à
palpação.
Caso Clínico
Diagnóstico Laboratorial:
Exame de sangue: Hemograma
completo e testes de função hepática
normais.
Teste de Aglutinação: Realizado o teste
para fator reumatoide utilizando
partículas de látex.
Caso Clínico
Resultados:
Fator Reumatoide: Resultado positivo
(títulos elevados).
Diagnóstico
Com base na apresentação clínica e
nos resultados do teste de fator
reumatoide, Maria é diagnosticada
com artrite reumatoide.
Caso Clínico
Maria foi tratada com sucesso, e suas
dores e rigidez articular melhoraram
significativamente após algumas
semanas de tratamento. O teste de
aglutinação foi crucial para o diagnóstico
e condução do manejo clínico.
Esse caso demonstra a importância de
testes imunológicos de aglutinação na
avaliação de condições autoimunes.
