NOME DO ALUNO:______________________TURMA:______ DATA___/___/___
AULA PRÁTICA: EXTRAÇÃO DE DNA DE MORANGO
DISCIPLINA: LABORATÓRIO
FIQUE ATENTO: Se você estiver de jaleco de manga longa, calça comprida, sapatos
fechados, higienizou as mão, retirou anéis, prendeu os cabelos, você está pronto para
esta aula.
1. OBJETIVOS
Realizar a extração da molécula de Ácido Desoxirribonucleico (DNA) do
morango, demonstrando os procedimentos e as inúmeras possibilidades de estudo da
genética e suas aplicações.
2. INDRODUÇÃO
Os morangos que consumimos são plantas da espécie Fragaria ananassa. Estas
plantas são Rosáceas, ou seja, são da mesma família das rosas que enfeitam muitos
jardins. Elas se reproduzem principalmente por meio do estolão, que é um ramo que
cresce paralelo ao chão, gerando brotos de novas plantas. Uma das razões de se trabalhar
com morangos é que eles se prestam muito bem à extração de DNA, porque são muito
macios e fáceis de homogeneizar. Morangos maduros também produzem pectinases e
celulases, que são enzimas que degradam a pectina e a celulose (respectivamente),
presentes nas paredes celulares das células vegetais. Além disso, os morangos possuem
muito DNA: eles possuem oito cópias de cada conjunto de cromossomos (são
octoplóides!).
3. REAGENTE E MATERIAIS
3.1. Materiais utilizados para extração de DNA
- 1 saco plástico tipo "zip loc";
- 1 morango fresco;
- 10 ml de solução de extração de DNA (veja como fazer abaixo);
- Aparato filtrante: 1 filtro de papel com funil;
- Álcool etílico (90º g.l.) gelado;
- 1 tubo de ensaio;
- 1 bastão de vidro ou 1 palito de madeira (tipo pau-de-laranjeira).
3.2. Preparo da solução de lise celular (água, sal e detergente)
- 15 gramas de NaCl (sal de cozinha);
- 900 ml de água (H2O) destilada;
- 100 ml de xampu sem corantes.
4. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
4.1. Método de extração
- Coloque um morango, previamente lavado e sem as sépalas (as folhinhas
verdes) em um saco “zip loc”;
- Esmague o morango com o punho por, no mínimo, 2 minutos;
- Adicione aproximadamente 10 ml solução de lise celular ao conteúdo do saco;
- Misture tudo, apertando com as mãos, por 1 minuto;
- Derrame o extrato no aparato filtrante e deixe filtrar diretamente dentro do tubo.
Não encha totalmente o tubo (encha somente até 1/8 do seu volume total);
- Derrame devagar o álcool gelado no tubo, até que ele esteja cheio pela metade;
- Mergulhe o bastão de vidro ou o pau-de-laranjeira dentro do tubo no local onde
a camada de álcool faz contato com a camada de extrato;
- Mantenha o tubo ao nível dos olhos para ver o que está acontecendo.
5. QUESTÕES
1) Qual a função de cada um dos seguintes reagentes usados para a extração do DNA do
morango?
Detergente.
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Sal.
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Álcool etílico gelado.
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2) A estrutura tridimensional da molécula de DNA - a dupla hélice - foi descoberta em
1953, por Francis Crick, James Watson e Maurice Wilkins. Esta descoberta abriu uma
nova era para a ciência e, desde então, vem causando uma verdadeira revolução na
investigação científica ligada às ciências da vida. Sem dúvida foi um marco na história
da Medicina do século passado. Qual a importância da descoberta da estrutura da
molécula de DNA? Relacione essa descoberta com as pesquisas atuais na área de
Biotecnologia.
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