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Guia Completo sobre Microscopia Óptica

Este documento descreve as partes principais de um microscópio óptico e os procedimentos básicos para sua operação. Ele explica que o microscópio permite a observação de objetos menores que 0,1 mm através de lentes de aumento. Também detalha cada componente do microscópio, como o tubo, objetivas, platina e parafusos, e fornece instruções passo-a-passo para focar e observar amostras.

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elainne lima
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Guia Completo sobre Microscopia Óptica

Este documento descreve as partes principais de um microscópio óptico e os procedimentos básicos para sua operação. Ele explica que o microscópio permite a observação de objetos menores que 0,1 mm através de lentes de aumento. Também detalha cada componente do microscópio, como o tubo, objetivas, platina e parafusos, e fornece instruções passo-a-passo para focar e observar amostras.

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MICROSCOPIA

Bel
Organização: Eliana Maria Beluzzo Dessen e Jorge Oyakawa
akawa
Diagramação: Regina de Siqueira Bueno

Conhecendo o microscópio

A vista humana não é capaz de perceber objetos com diâmetros inferiores a um


décimo do milímetro (0,1mm ou 100µm). O microscópio óptico é utilizado para a
observação de células vivas ou mortas (preferencialmente após fixação e coloração)
cujas medidas encontram-se abaixo de 0,1mm. Entre elas temos células dos
organismos eucariotos, as bactérias, os ovos de vermes e muitas estruturas dos
seres vivos.

Figura 1. Microscópio óptico

•Lente ocular – encaixada na


extremidade superior do tubo, sua
•Tubo ou canhão – nos microscópios que possuem uma só função é aumentar a imagem formada
ocular (monoculares), o tubo é um cilindro metálico reto ou oblíquo. pela objetiva. O aumento fornecido
Nos microscópios que possuem duas oculares (binoculares) o tubo pela ocular está, geralmente, gravado
pode ser inclinado, com ajuste para os diferentes espaços entre os nela própria. Por exemplo: 5x, 8x,
olhos de cada observador 10x, etc.

•Estativa, braço ou coluna


•Revólver ou tambor – Nele estão
– suporte pesado que sustenta os
inseridas as lentes objetivas que podem
tubos, a mesa, o porta-condensador
ser movimentadas quando o tambor é
e os parafusos micro e macrométrico
girado. Este movimento deve ocorrer
sempre no sentido da objetiva de menor
para a de maior aumento
•Charriot – peça opcional
localizada na mesa e que serve •Lente objetiva – permite a ampliação da
para movimentar a lâmina imagem de um objeto qualquer. Pode também
para localização do campo de corrigir os defeitos das cores dos raios
observação desejado luminosos. Para se utilizar a objetiva (100x)
de imersão, coloca-se entre ela e a lamínula
uma gota de óleo de cedro ou de imersão.
Este sistema permite um maior aproveitamento
•Parafuso micrométrico da quantidade de luz com maior ampliação,
a movimentação deste parafuso pois com esse processo, captam-se os feixes
permite uma focalização mais luminosos que com as objetivas secas são
limitada e mais fina, pois o tubo desviados. Os aumentos fornecidos pelas
desloca no máximo dois objetivas encontram-se gravados nas mesmas.
milésimos de milímetro
•Platina ou mesa – pode ser fixa,
•Parafuso macrométrico móvel ou giratória no plano horizontal. A
a movimentação deste parafuso lâmina com o material a ser observado é
permite uma focalização colocada sobre a platina que apresenta
grosseira do material. Possui um uma abertura no seu centro permitindo a
percurso vertical com cerca de passagem dos raios luminosos, coletados
7,5 cm pelo espelho. Estes são convergidos pelo
condensador e pelo diafragma, passando
pelo material que está na lâmina, pela
lente objetiva do tubo e da ocular até
atingir a retina do globo ocular do
•Pé ou base – é o local •Espelho ou fonte de luz – peça observador
de apoio do aparelho feito encaixada por baixo do condensado. O
de ligas de metais pesados espelho, quando presente, possui duas faces:
uma plana e outra côncava. A face plana, •Condensador ou diafragma - localizado
usada nas grandes ampliações e na observação abaixo da platina cuja função principal é o
com sistema de imersão, colhe e projeta os fornecimento de uma grande quantidade de luz. Ao
raios paralelos e divergentes. A face côncava utilizar as objetivas de pequeno aumento, o
Legenda: colhe e projeta os raios convergentes sendo diafragma deve ser fechado para eliminar os raios
Parte Mecânica usada nas pequenas ampliações. laterais. Em maiores ampliações, abre-se
Parte Óptica proporcionalmente o diafragma.
Procedimentos básicos para a correta observação microscópica de
uma preparação:

1. Ligar a fonte luminosa.


2. Colocar a lâmina com a preparação sobre a platina.
3. Com o auxílio do condensador e do diafragma obter uma boa iluminação.
4. Olhando pelo lado externo, girar o parafuso macrométrico de forma a aproximar a objetiva de 10x o mais perto
possível da preparação.
5. Olhando pela ocular, girar o mesmo parafuso no sentido inverso até obter uma imagem nítida da preparação.
6. A seguir fazer o foco com a objetiva de 40x: girar o tambor colocando a objetiva de 40x na direção da preparação e
focalizar com o auxílio do parafuso micrométrico.
7. Para uma ampliação maior, (objetiva de 100x), girar o canhão apenas o suficiente para afastar a objetiva de 40x da
preparação. Colocar uma gota de óleo de imersão sobre a preparação citológica. Em seguida, girar o tambor de forma
que a objetiva de 100x fique posicionada sobre a preparação. Girar o parafuso micrométrico até obter o melhor foco do
material.

ATENÇÃO! Evitar o contato do óleo de imersão com as objetivas de 10 e 40x, pois este pode danificá-las. Limpar o óleo da
lente assim que terminar a observação para que este não seque e danifique lente.

Discuta com seus colegas e responda:

1. Para transportar um microscópio, qual a melhor maneira de segurá-lo?


2. Que peça é movimentada quando giramos o parafuso macrométrico?
3. Para que serve o parafuso micrométrico? O que ocorre quando o giramos? O movimento é tão
nítido quanto o do parafuso macrométrico?
4. Eleve o canhão girando o macrométrico e observe as objetivas. São todas iguais e do mesmo
tamanho? Verifique os números dos aumentos gravados nas objetivas.
5. Como calcular o aumento que o microscópio fornece?
6. Qual a função do espelho?
7. Onde deve ser colocada a lâmina contendo a preparação para observação? Qual objetiva deve ser
inicialmente usada para o procedimento de focalização?
8. A que distância da lâmina deve ser colocada a objetiva antes de ser focalizado o material desejado?
9. Qual parafuso deve ser usado inicialmente para focalizar o material?
10. Quais outras partes do microscópio devem ser controladas para obtenção de maiores aumentos?
11. Para ter certeza de que a preparação está em cima do foco de luz você olha por fora do
microscópio ou diretamente através da ocular?
12. Acoplado ao condensador existe um diafragma. Mover a alavanca do diafragma e descrever o que
ocorre.
13. Girar o tambor de forma a colocar a objetiva de menor aumento em cima da lâmina com
preparação. Abaixar o canhão girando o macrométrico. Mexendo o espelho, colocá-lo na posição
capaz de iluminar o interior do tubo. Tanto melhor será a focalização quanto mais claro estiver o
círculo que você está vendo. Este círculo é o campo do microscópio. A preparação a ser observada
deve estar no centro geométrico do campo iluminado. Na objetiva ocular há uma pestana (que
funciona como uma seta). Girando-se a ocular a pestana se move e você pode usá-la para indicar
uma estrutura que esteja querendo mostrar para alguém. Como exercício, focalizar um material e
colocar a seta na região que deve ser observada.
2
PREPARANDO 1 Cortar um pedaço de jornal de aproximadamente 1 cm.
LETRAS PARA SEREM
BSERVADAS AO MICROSCÓPIO

1 cm
1 cm

2 3
Limpar bem uma lâmina e, com um conta-gotas pingar, sobre ela, Sobre a gota
uma gota de colocar
água; o pedaço de jornal
e esperar alguns segundos;

4 Sobre o jornal colocar uma lamínula limpa; 5 Se houver bolhas de ar pressionar levemente a lamínula com
uma pinça;

6 Levar a lâmina com a preparação ao microscópio


7 Observar em menor aumento (100x, sendo 10x da objetiva e 10

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