MICROSCOPIA
10º Ano – Biologia e Geologia
João Santos
1. MICROSCOPIA ÓPTICA
1.1. Microscópio Ótico
Instrumento de trabalho de numerosos cientistas, desde há mais de três séculos, o microscópio tem
permitido observar diversos objetos e organismos não percetíveis à vista desarmada. Esta capacidade deve-
se a um sistema ótico, composto por lentes, que fornece uma imagem ampliada do objeto.
Foi no século XVII que a construção e o aperfeiçoamento do microscópio, em particular o sistema de lentes,
conheceu a sua maior expansão. Anton van Leeuwenhoek e Hans e Zacharias Jansen, fabricantes de óculos,
desenvolveram os primeiros microscópios simples e compostos. Leeuwenhoek foi um dos primeiros a
registar observações feitas num microscópio simples, que
constava de uma lente que se segurava com a mão e se dirigia para a fonte luminosa para que a luz
atravessasse a lente e o objeto. São ainda de destacar os trabalhos de Campani (l662), Hooke (l665) e Divini
(l668). No microscópio de Hooke o objeto era fixo por um grande alfinete e a luz fornecida por uma
lamparina de azeite. O sistema de lentes permitia uma ampliação de 270x.
Representação esquemática
de um microscópio ótico
composto (MOC).
Até ao século XIX, os fabricantes não conseguiam obter lentes que não decompusessem a luz.
Este fenómeno, conhecido como aberração cromática, levava a que se obtivesse uma imagem colorida
imprecisa. Só em 1830 se construíram as primeiras lentes acromáticas. O outro defeito muito comum nas
lentes, a aberração esférica, só viria a ser corrigido anos mais tarde com Ernst Abbe e Carl Zeiss (l886),
que produziram as primeiras lentes apocromáticas, capazes de corrigir não só as aberrações cromáticas
como as esféricas.
Nas últimas décadas do século XIX, os microscópios começaram a assumir o aspeto que têm hoje. As
grandes versões compostas passaram a exigir dos fabricantes melhorias significativas ao nível do sistema
de iluminação. Assim, em 1893, August Köhler introduziu um novo sistema de iluminação, cujo princípio
ainda hoje é utilizado.
O desenvolvimento e o aperfeiçoamento tecnológicos têm permitido a construção de instrumentos de
elevado poder de resolução e ampliação. O microscópio é hoje um instrumento de trabalho de
aplicações tão diversas como a biologia, eletrónica ou a metalurgia.
Componentes do Microscópio Ótico
Como utilizar o microscópio
A metodologia que a seguir se descreve é o método básico de manuseamento
do microscópio ótico de luz transmitida, adaptado à observação da maioria dos
espécimes, desde que tenham sido corados ou possuam contraste ou cor
suficientes.
Esta metodologia foi primeiramente descrita, no início deste século, por August Köhler, tendo como objetivo obter um
bom campo de visão com uma iluminação homogénea. Por este motivo é muitas vezes designada como iluminação de
Köhler.
Focagem
1. Coloque a preparação na platina, com a lamela virada para cima, e, com
o auxílio dos parafusos de movimento da sobreplatina, desloque o
objeto a observar para o centro da abertura da platina.
2. Comece por observar a preparação com a objetiva de menor ampliação.
Com o auxílio dos parafusos macrométricos aproxime, o mais possível, a
objetiva da lamela, tendo o cuidado de evitar o contacto entre ambas.
Para focar o objeto, proceda, de forma lenta, ao movimento inverso,
controlando a observação através da ocular. Logo que obtenha uma
imagem suficientemente nítida, retifique a focagem com os parafusos
micrométricos.
Alinhamento do Microscópio
1. Foque a preparação.
2. Feche o diafragma da fonte luminosa, de molde a observar um
pequeno círculo.
3. Centre o círculo com os parafusos do condensador.
4. Desloque o condensador na vertical de molde a obter os bordos do
diafragma, que delimitam o círculo, perfeitamente focados.
5. Não altere a posição do condensador para a objetiva alinhada. No
decurso da observação, ajuste a quantidade de luz abrindo ou fechando
o diafragma do condensador.
Nota: Depois de utilizar o microscópio não se esqueça de:
1) desligar a luz;
2) levantar o canhão do microscópio (ou baixar a platina consoante o
microscópio) e colocar a objetiva de menor ampliação alinhada com o
orifício da platina;
3) limpar a platina e as objetivas (se tiver utilizado óleo de imersão, limpe a
objetiva com a mistura éter-álcool);
4) tapar o microscópio.
