Introdução à
Biologia Celular e do
Desenvolvimento
Aula Prática 01
Prof. Dra. Ana Paula Scaramal Ricietto
Conhecer e manipular o microscópio óptico.
Reconhecer e identificar as diferenças
estruturais entre células procariontes e
eucariontes.
Observar a organização hierárquica das células
eucariontes quanto a formação de tecidos e
órgãos.
Microscopia
óptica
Tubo ou canhão
Oculares
Microscópio óptico
Revólver
Braço
Objetivas
Mesa ou platina
Parafuso macrométrico
Condensador com
Parafuso
diafragma
micrométrico
Fonte de luz
Charriot
Base
Fonte: PublicDomainPictures / Pixabay. Disponível em https://pixabay.com/pt/photos/branco-qu%C3%ADmica-isolado-microscopia-219983/. Acesso em 16 jul. 2020.
Cálculo da ampliação total (Microscopia óptica)
Ocular Objetiva Aumento Total
10x 4x 40x
10x 10x 100x
10x 40x 400x
10x 100x 1000x
Fonte: Autora, 2021.
Fonte: Wikimedia Commons / CNX OpenStax. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=49923763. Acesso em 21 mai 2021.
Coloração HE
Corantes ácidos: interagem com estruturas
básicas das células, geralmente do citoplasma,
corando-as.
• Eosina (coloração rósea)
• Fucsina (coloração vermelha)
Corantes básicos: coram estruturas ácidas
(núcleo)
• Hematoxilina (coloração azul)
Microscopia
Recortar uma pequena letra de jornal;
Colocar uma gota de água sobre a lâmina, com auxílio de um conta-gotas
ou pipeta;
Colocar a letra de jornal (na posição de leitura) sobre a gota de água;
Colocar a lamínula na posição de 45º em relação à lâmina, abaixando-a
suavemente;
Caso haja excesso de líquido (fora da lamínula), retirá-lo com papel
absorvente;
Seguir as etapas de focalização indicadas pelo professor;
Desenhar nos aumentos de 40x, 100x, 400x e 1000x.
Esquematizar após a observação.
Formação de imagem
microscopia óptica
Ampliada Invertida de Invertida da
cima para esquerda
baixo para direita
Fonte: Leite, C. M. Adaptada; JUNQUEIRA, LUIZ CARLOS UCHOA; CARNEIRO, JOSÉ. Biologia celular e molecular. 9. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2012.
Eucariontes:
animal
Eucariontes
Fonte: Adaptado de Madigan et al. Brock biology of microoganisms. 13 ed. Pearson, 2012.
Eucarionte animal:
mucosa bucal
Raspar levemente, com o auxílio da espátula, a mucosa bucal.
Espalhar o material da espátula na lâmina.
Adicionar uma gota do corante sobre a lâmina e aguardar 2’.
Com o auxílio de uma almotolia/piseta, remover o excesso do corante.
Cobrir a lâmina com uma lamínula.
Retirar as bolhas de ar pressionando a pinça levemente sobre a
lamínula.
Observar no microscópio, nos aumentos de 10x e 40x focalizando a
imagem com o auxílio do micrométrico.
Esquematizar as estruturas observadas.
Observação
comentada
Eucariontes:
vegetal
Núcleo RER
REL
Ribossomos
Golgi Vacúolo central
Microfilamentos
Microtúbulos
Fonte: Raven et al. Biologia Vegetal . 8 ed. Guanabara Koogan, 2014.
Mitocôndria
Peroxissomos Cloroplastos
Membrana celular
Parede celular
Plasmodesmos
Fonte: Adaptado de Reece et al. Biologia de Campbell. 10 ed. Artmed, 2015.
Eucarionte vegetal:
cebola
Com a pinça, retire a epiderme da cebola colocando-a na lâmina sobre
uma gota d’água. Cubra-a com a lamínula.
Retirar as bolhas de ar pressionando a pinça levemente sobre a
lamínula.
Observar no microscópio, nos aumentos de 10x e 40x focalizando a
imagem com o auxílio do micrométrico.
Retire a lâmina da platina para a coloração com azul de metileno.
Colocar o papel-filtro ao lado da lamínula.
Adicionar uma gota de corante ao lado oposto do papel (o papel
absorverá o excesso de água-corante).
Observar no microscópio, nos aumentos de 10x e 40x focalizando a
imagem com o auxílio do micrométrico.
Esquematize as estruturas observadas salientando as diferenças
proporcionadas pela coloração.
Observação
comentada
Fonte: Wikimedia Commons. Disponível em https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Onion_Cells.jpg#/media/File:Onion_Cells.jpg. Acesso em 22 mai 2021.
Procariontes
Fímbrias Procariontes
Membrana Citoplasma
celular
Ribossomos
Parede
celular
Nucleoide
Cápsula
Inclusões
Pili Plasmídeo
Flagelo
Fonte: Adaptado de Lumen Microbiology. Disponível em https://courses.lumenlearning.com/microbiology/chapter/unique-characteristics-of-prokaryotic-cells/. Acesso em 21 mai 2021.
Parede celular
Fonte: Adaptado de Lumen Microbiology. Disponível em https://courses.lumenlearning.com/microbiology/chapter/unique-characteristics-of-prokaryotic-cells/. Acesso em 21 mai 2021.
Fonte: Madigan et al. Microbiologia de Brock. 14 ed. Artmed, 2016.
Procarionte
Com o auxílio de uma espátula, em uma lâmina com uma gota d’água,
adicionar uma pequena porção do iogurte natural.
Secar levemente à chama da lamparina.
Corar o esfregaço com duas gotas de azul de metileno deixando reagir
durante cerca de 3’.
Lavar a lâmina com água destilada e deixar secar naturalmente.
Observar ao microscópio utilizando a objetiva de menor aumento.
Colocar uma gota de óleo de imersão e observar na objetiva de maior
aumento (100x).
Esquematizar as células observadas.
Observação
comentada
Fonte: Josef Reischig / Wikimedia Commons. Disponível em
https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Lactobacillus_acidophilus_(259_08)_Lactobacillus_acidophilus_(D%C3%B6derlein_bacillus).jpg. Acesso em 22 mai 2021.
Verificar se todos os alunos conseguiram observar as lâminas especificas;
Verificar se os alunos esquematizaram as estruturas;
Verificar se os alunos conseguiram identificar as principais características
estruturais das células estudadas;
Esclarecer as possíveis dúvidas dos alunos quanto as características de cada
lâmina observada.
