MICROSCOPIA
1. EVOLUO DO MICROSCPIO DE LUZ: Galileu Galilei: inventou o Telescpio no sculo XVI duas lentes num tubo. Zacarias Jansen: holands que inventou o primeiro microscpio composto, em 1660 - Sculo XVII. O primeiro microscpio era formado por trs tubos encaixados. Utilizou um microscpio simples (1 lente) e visualizou micro-organismos.
Robert Hooke: considerado o Pai da Citologia, utilizou um microscpio ptico composto e visualizou estruturas que para ele eram clulas de cortia. Em verdade, o que ele viu foi a parede celular dessas clulas.
2. O MICROSCPIO PTICO Serve para ampliar um objeto. Funciona com um conjunto de lentes (ocular e objetiva) que ampliam a imagem. A Iluminao natural ou artificial.
constitudo por uma parte mecnica que suporta e permite controlar uma parte ptica que amplia as imagens.
Oculares: Ampliam a imagem fornecida pelo sistema de objetivas. Canho ou tubo: Serve de suporte ao sistema ocular. Brao: Serve de suporte platina e ao revlver. Revlver: Serve de suporte s objetivas e permite a sua mudana. Objetivas: Amplia a imagem do objeto que est a ser observado. Pinas: seguram a lmina no lugar. Platina: Serve de suporte preparao a observar. Tem uma abertura na pane central (janela da platina). Condensador: Distribui a luz que atravessa o diafragma regularmente no campo da preparao. Diafragma: Regula a intensidade da luz captada pelo espelho e que incide na preparao. Fonte de luz: projeta luz para cima atravs do diafragma, lmina e lentes. Parafusos macromtrico e micromtrico: Permite movimentos (de maior ou menor amplitude) de aproximao ou afastamento entre a preparao e as objetivas. Base ou p: Constitui a base de suporte de todos os elementos do microscpio.
Poder de resoluo x Limite de resoluo: 1). Poder de Resoluo (PR): Capacidade de uma lente (ou do prprio microscpio) em formar imagens com detalhes mnimos . 2). Limite de Resoluo (LR): Menor distncia entre dois pontos distintos do objeto, que podero ser individualizados na imagem final . Quanto menor o limite de resoluo (quanto menor a distncia entre dois pontos em que eles podem ser distinguidos como tal), maior o poder de resoluo, ou seja, mais detalhes podem ser definidos com aquele aparelho. Unidades de medida da clula: Micrmetro (m) = milsima parte do milmetro:
1 m = 1mm/1000 ou 1mm = 103 m | 1 m = 10-6 m
Nanmetro (nm) = milionsima parte do milmetro:
1 nm = 1mm/1.000.000 ou 1mm = 106 nm | 1nm = 10-9 m ngstron () = dcima de milionsima parte do milmetro:
1 = 1mm/10.000.000 ou 1mm = 107 | 1 = 10-10 m
Tcnicas de microscopia: so procedimentos usados na preparao de material para observao microscpica.
Fixao: inibe a degenerao dos tecidos. Desidratao: Retirada da gua utilizando Etanol (70, 80, 90 e 100%). A desidratao deve ser gradativa. Diafanizao: mergulha-se o material em um solvente de parafina (xilol, clorofrmio ou tolueno), removedores de lcool e facilita a penetrao da
parafina. As peas tornam-se quase transparente.
Impregnao em parafina: remove o diafanizador, e ao endurecer prepara o material para ser cortado. Corte em micrtomo: O material cortado em pequenas fatias utilizando o micrtomo. Aps montado em lmina. Colorao: A lmina tratada com corantes e lavada com lcool e coberto com a lamnula.
Tcnicas de observao: Observao Vital: muito utilizado para observar clulas vegetais vivas. O material colocado em uma lmina e coberto com uma lamnula. Tambm conhecida por exame a fresco. Fixao e colorao das Clulas: muito utilizado para quando se quer observar estruturas minsculas das clulas. Para isso, deve-se matar rapidamente a clula, preservando ao mximo a sua estrutura interna (uma espcie de mumificao), e mergulh-la em corantes especficos(aqueles que tm afinidade por certas estruturas da clula), a fim de realar determinadas estruturas celulares.
Esfregao: tcnica utilizada para tecidos em que as clulas so fracamente unidas, espalhadas ou isoladas. Ex.: tecido conjuntivo e revestimentos mucosos. Consiste no espalhamento do material biolgico sobre a lmina de vidro. H, ento, a formao de uma camada fina, o que evita que as clulas fiquem empilhadas e permite observ-las isoladamente. Esmagamento: utilizada para o caso de clulas frouxamente associadas. Coloca-se o material, geralmente j fixado e corado, sobre uma lmina e cobre com uma lamnula pressionando com o dedo. Ex.: partes moles de animais e vegetais. Obs.: Em alguns casos, o material pode ser aquecido previamente para fazer com que suas clulas se separem com mais facilidade. Corte manual: tcnica utilizada quando tem-se um material biolgico de clulas firmemente unidas entre si, sendo necessrio cort-las em fatias finas, denominadas cortes histolgicos. Ex.: caules, razes, folhas. As estruturas vegetais, sendo geralmente mais rgidas que as dos, permitem a confeco de cortes suficientemente finos para uma observao vital satisfatria. Incluso e corte com micrtomo: consiste em mergulhar o material j fixado em parafina derretida pelo calor e esperar que ela esfrie e solidifique para enrijec-lo (incluso) e, depois cortar em fatias bem finas (com cerca de 5 micrmetros de espessura) o material com o aparelho micrtomo.
3. PRINCPIOS DA FORMAO DA IMAGEM AO MICROSCPIO:
4. TIPOS DE MICROSCPIO:
5. PRINCIPAIS DIFERENAS: Microscpio de luz (ML) Fonte Lentes Lentes de aumento (principal) Suporte para amostra Limite de resoluo Formao da imagem Luz (poro inferior) Vidro Objetivas e oculares Microscpio eletrnico de transmisso (MET) Eltrons (poro superior) Eletromagnticas Eletromagnticas
Lmina de vidro 0,2 Transparncia e colorao
Grade de metal (telinha), cobre ou nquel 0,0002 Variaes de densidade e de contraste.
6. MICROSCPIO ELETRNICO DE TRANSMISSO: Feixe de eltrons (da o nome eletrnico) que atravessa o material e reflete em uma tela fluorescente. Depois de atravessar o material biolgico, o feixe de eltrons deixa de ser homogneo e constitui uma imagem eletrnica das estruturas que atravessou. A imagem ampliada e projetada em um monitor de vdeo ou em uma chapa fotogrfica, na qual registrada. 7. MICROSCPIO ELETRNICO DE VARREDURA: Feixe de eltrons extremamente condensado que varre a superfcie do material biolgico previamente fixado e coberto com uma finssima pelcula metlica, permitindo a formao de imagens 3D que so reproduzidas em um monitor e que podem ser impressas como fotomicrografias. Utilizado para o estudo de detalhes da superfcie de objetos slidos. 8. TIPOS DE CLULAS: Procariontes(bactrias):
Eucariontes(animais):
Eucariontes(vegetais):
