Papers by Alberto Manchego Alberto manchego
Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 2021
El objetivo del presente estudio fue la genotipificación de Ornithobacterium rhinotracheale. Se i... more El objetivo del presente estudio fue la genotipificación de Ornithobacterium rhinotracheale. Se identificaron 36 cepas por pruebas moleculares y se realizó la genotipificación por Multilocus Sequence Typing (MLST). Los ensayos identificaron las secuencias tipo: N.T.1, N.T2 y N.T3, diferentes a la base de datos del NCBI y 19 alelos distintos con 229 sitios polimórficos. Además, 32 cepas pertenecen al genotipo común ST1. Los hallazgos identificaron al menos cuatro genotipos en pollos de varias regiones del Perú.
Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, Feb 24, 2011
Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, Feb 24, 2011
RESUMEN El objetivo del presente estudio fue aislar e identificar el genotipo de las cepas del vi... more RESUMEN El objetivo del presente estudio fue aislar e identificar el genotipo de las cepas del virus del Síndrome Respiratorio y Reproductivo Porcino (VPRRS) de granjas porcinas de las provincias de Lima y Arequipa. Se identificaron granjas porcinas seropositivas al VPRRS mediante la prueba de ELISA. Se colectaron muestras de suero de porcinos en etapa de recría, engorde y acabado de tres granjas de Lima (A=44, B=20, C=16) y dos de Arequipa (D=32, E=92) en 2010. Las 204 muestras fueron procesadas en 51 mezclas de 4 muestras cada una, respetando el lugar de procedencia, para el aislamiento viral en el clon 3D4/31 de la línea celular de macrófago alveolar porcino (PAM). La identificación del genoma viral se realizó mediante la técnica de Transcripción Reversa Reacción en Cade-na de la Polimerasa tipo anidada (RT-nPCR). El ADN complementario (ADNc) de cepas vacunales del VPRRS del genotipo 1 y 2 fueron utilizados como controles positivos y ADNc de los virus de la arteritis viral equina...
El objetivo del presente estudio fue determinar, mediante la técnica de RT-PCR Tiempo Real y cuan... more El objetivo del presente estudio fue determinar, mediante la técnica de RT-PCR Tiempo Real y cuantificación relativa según el método 2-Ct , los niveles relativos de expresión in vitro de ARN mensajero de IL-2 e IL-10 en leucocitos circulantes de alpacas en presencia de antígenos clostridiales, empleándose como control endógeno a GAPDH. Se colectó sangre entera de 10 alpacas adultas. Las muestras fueron centrifugadas para obtener la fracción leucocitaria en gradiente de Ficoll, colectándose la capa flogística. Se hizo un pool de leucocitos que fueron purificados con cloruro de amonio. Se centrifugó y la concentración se ajustó a 500 000 células vivas/ml de medio mínimo esencial (MEM). Fueron cultivados en placas para cultivo celular de 24 pocillos y enfrentados a suspensiones de extracto clostridial a las concentraciones de 400, 16, 0.8 y 0.2 µg/ml por 1, 12 y 24 h. Posteriormente, se realizó la RT-qPCR. La cinética de la expresión de IL-2 mostró una tendencia no significativa inversamente proporcional a la dosis de antígeno clostridial en los tres tiempos de incubación, a diferencia de IL-10 cuya expresión fue variable, alcanzando el máximo a las 12 h de incubación (p<0.05) y mostrando un patrón similar al de IL-2 en la dosis de 16 µg/ml de antígeno clostridial. La expresión de IL-10 superó hasta en 40 veces lo expresado por el calibrador respecto a IL-2, evidenciándose una marcada respuesta hacia la polarización del subtipo Th2.
Cistozoitos obtenidos a partir de macroquistes de Sarcocystis aucheniae presentes en carne de alp... more Cistozoitos obtenidos a partir de macroquistes de Sarcocystis aucheniae presentes en carne de alpacas con sarcocistiosis fueron inoculados en cultivo primario de células de cornete nasal de feto de alpaca (CNA) y en líneas de células establecidas de riñón de bovino (BHK) y de mono (VERO). Los cistozoitos ingresaron a todas las células, transformándose en grandes y pequeños esquizontes multinucleares o en estadios como quistes, produciendo gran cantidad de merozoitos, todos de posición perinuclear. Cultivos continuos a partir del inóculo original de cistozoitos fueron mantenidos por más de 150 días por subcultivo de cistozoitos sobre nuevos cultivos de células CNA, BHK y VERO. Durante este tiempo, se mantuvo la capacidad de producir ambos tipos de esquizontes. Se confirmó la reproducción de los cistozoitos por tinción Giemsa y mediante inmunofluorescencia e inmunoperoxidasa, ambas pruebas utilizando antisuero anti S. aucheniae producido en conejos.
Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 2020
Ornithobacterium rhinotracheale, al igual que otras bacterias asociadas a cuadros de orden respir... more Ornithobacterium rhinotracheale, al igual que otras bacterias asociadas a cuadros de orden respiratorio, viene siendo sometida a una exigente presión de selección debido al uso de desinfectantes y antibióticos, lo cual ha venido generando cepas multidrogo resistentes, así como un incremento en la variabilidad genética. El objetivo del estudio fue caracterizar 36 aislados de O. rhinotracheale provenientes de aves de corral de cinco regiones del Perú, mediante un perfil de ocho antibióticos (fosfomicina, amoxicilina, ciprofloxacina, enrofloxacina, norfloxacina, sulfatrimetopim, doxiciclina, oxitetraciclina), y genotipificación por técnicas de ERIC-PCR. Los resultados indican la presencia de multidrogo resistencia de 2 a 6 antibióticos en 94.4% (n=34) de las cepas y 6.6% (n=2) cepas fueron resistentes a un antibiótico, siendo la resistencia más común a la fosfomicina (77.8%) seguido del sulfatrimetopim (75.0%). Se encontraron 11 perfiles genéticos diferenciados (A-K), siendo el perfil ...
sisbib.unmsm.edu.pe
INVESTIGACIONES PECUARIAS : Enero - Julio 1998, Vol. 9 Nº 1. BROTE DE LA ENFERMEDAD DE GUMBORO EN... more INVESTIGACIONES PECUARIAS : Enero - Julio 1998, Vol. 9 Nº 1. BROTE DE LA ENFERMEDAD DE GUMBORO EN AVES DE POSTURA COMERCIAL. Rafael Falcón 2 , Hermelinda Rivera 1 , Gilberto Santillfin 1 , Alberto Manchego 1 , Mónica Alba 1 y Eliana Icochea 1. ...
Animals, 2021
Enteric infections are a major cause of neonatal death in South American camelids (SACs). The aim... more Enteric infections are a major cause of neonatal death in South American camelids (SACs). The aim of this study was to determine the prevalence of enteric viral pathogens among alpacas and llamas in Canchis, Cuzco, located in the southern Peruvian highland. Fecal samples were obtained from 80 neonatal alpacas and llamas and tested for coronavirus (CoV), mammalian orthoreovirus (MRV), and rotavirus A (RVA) by RT-PCR. Of the 80 fecal samples analyzed, 76 (95%) were positive for at least one of the viruses tested. Overall, the frequencies of positive samples were 94.1% and 100% among alpacas and llamas, respectively. Of the positive samples, 33 (43.4%) were monoinfected, while 43 (56.6%) had coinfections with two (83.7%) or three (16.3%) viruses. CoV was the most commonly detected virus (87.5%) followed by MRV (50%). RVA was detected only in coinfections. To our knowledge, this is the first description of MRV circulation in SACs or camelids anywhere. These data show that multiple virus...
Revista De Investigaciones Veterinarias Del Peru, Dec 1, 2013
El Perú posee el 13% de los bosques tropicales amazónicos con más de 460 especies de mamíferos, i... more El Perú posee el 13% de los bosques tropicales amazónicos con más de 460 especies de mamíferos, incluyendo el pecarí labiado o huangana (Tayassu pecari). Esta especie es de gran importancia ecológica y comercial, así como una importante fuente de proteína para la población amazónica; sin embargo, las informaciones sobre su estado sanitario son escasas. El objetivo del estudio fue determinar anticuerpos contra el virus de lengua azul (VLA) y otros Orbivirus en huanganas de vida libre de apariencia normal de tres localidades del departamento de Madre de Dios. Se evaluaron 106 muestras de suero para determinar los anticuerpos contra el VLA mediante un kit de ELISA de competición y contra otros Orbivirus mediante la prueba de inmunodifusión en gel de agar. El 7.5% (8/106) presentaron anticuerpos específicos contra el VLA y el 29.2% (31/106) contra VLA/otro Orbivirus. Anticuerpos contra el VLA y VLA/otro Orbivirus se hallaron en las tres localidades.
In the study was evaluated the persistence of maternal antibodies levels against the Classical Sw... more In the study was evaluated the persistence of maternal antibodies levels against the Classical Swine Fever virus (CSFV) in piglets born from vaccinated sows from two farms (A and B) with different vaccination strategies against CSFV. In farm A sows were vaccinated at 90 days of gestation and in farm B at 18-21 days postpartum. Serum samples were collected from piglets of both farms, at first (n=15), third (n=15), fifth (n=15)
El objetivo del presente estudio fue determinar la prevalencia del virus de la diarrea viral bovi... more El objetivo del presente estudio fue determinar la prevalencia del virus de la diarrea viral bovina (VDVB) y de animales persistentemente infectados (PI) en bovinos productores de leche en la Irrigación de Majes, Arequipa. En la primera fase del estudio, se colectaron 204 muestras de leche de tanque (una por hato) en la planta local de procesamiento de leche, para la detección de anticuerpos contra el VDVB mediante la prueba de ELISA indirecta. En la segunda fase se seleccionaron de modo arbitrario a 57 hatos con anticuerpos contra el VDVB con densidades ópticas (DO) iguales o mayores a 0.900. Se colectaron 286 muestras de suero sanguíneo de estos hatos para conocer el estado serológico de cada animal y la búsqueda de animales PI mediante ELISA indirecta y ELISA de captura, respectivamente. En la tercera fase se obtuvieron muestras de suero de la totalidad de terneras y vaquillas (n = 20) de tres hatos que tuvieron animales PI a fin de buscar más animales PI. El 98.0 ± 1.9% (200/204...
RESUMEN El presente estudio evaluó la protección conferida por un programa de vacunación a la eda... more RESUMEN El presente estudio evaluó la protección conferida por un programa de vacunación a la edad determinada por la fórmula Deventer frente a un desafío experimental con una cepa estándar del virus de la Enfermedad Infecciosa de la Bursa (EIB) en pollos de carne. Se formaron tres grupos experimentales. El grupo A vacunado a los 10 días de edad con la cepa Lukert (intermedia-suave) y a los 18 días con la cepa CE (intermedia-intermedia); el grupo B vacunado a los 21 días de edad (según la fórmula Deventer) con la cepa 228TC (intermedia-intermedia); y el grupo C no vacunado (control). A los 35 días de edad, 45 aves de cada grupo fueron desafiadas con la cepa estándar F 52/70 del virus de la EIB. La protección fue medida a través de signos clínicos, índice bursal (I.B.), lesiones macroscópicas y microscópicas, y serología. Todos los grupos presentaron signos clíni-cos y edema bursal hasta el día 10 post desafío. Los valores de I.B. en los tres grupos fueron compatibles con atrofia bur...
departamento de Huánuco, en el año 2007. Se colectaron muestras de sangre de 3221 animales para e... more departamento de Huánuco, en el año 2007. Se colectaron muestras de sangre de 3221 animales para el diagnóstico de Brucella sp. mediante la prueba de aglutinación Rosa de Bengala. No se encontraron reactores positivos, y con el programa @Risk de simulaciones estocástica de distribución beta se calculó una prevalencia media de 0.031% con rangos de 0.0008 a 0.1144%. La baja prevalencia permitiría implementar un programa de erradicación de brucelosis bovina en el distrito de Puerto Inca.
![Research paper thumbnail of Identification of two novel Rotavirus A genotypes, G35 and P[50], from Peruvian alpaca faeces](https://attachments.academia-assets.com/89161682/thumbnails/1.jpg)
Infection, Genetics and Evolution, 2017
Rotavirus A (RVA) Alp11B was detected from a neonatal Peruvian alpaca presenting with diarrhea, a... more Rotavirus A (RVA) Alp11B was detected from a neonatal Peruvian alpaca presenting with diarrhea, and the Alp11B VP7, VP4, VP6, NSP4, and NSP5 genes were sequenced. The partial genotype constellation of this strain, RVA/Alpaca-wt/PER/Alp11B/2010, was determined to be G35-P[50]-I13-E16-H6. Rotaviruses (RV) are non-enveloped double-stranded RNA viruses in the Reoviridae family and in the Rotavirus genus, and are classified into eight species (A-H) and two candidate species (I and J) (Matthijnssens et al., 2012; Mihalov-Kovács et al., 2015; Bányai et al., 2017). Species A rotavirus (RVA) is a major cause of dehydrating diarrhea in humans and animals worldwide (Estes and Greenberg, 2013). The RVA genome consists of 11 segments of double-stranded RNA (dsRNA) encoding six structural proteins (VP1-4, VP6, and VP7) and five or six nonstructural proteins (NSP1-NSP5/6) depending on the strain (Estes and Greenberg, 2013). The RVA genomic classification nomenclature is based on all 11 segments of dsRNA (
Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 2014
The objective of the present study was to determine and compare the levels of the relative expres... more The objective of the present study was to determine and compare the levels of the relative expression of messenger RNA (mRNA) of IgA in intestinal epithelium of newborn alpaca up to 45 days old, that were in good health status (n=35) and ill with enteropathy (n=35). In each group, five animals were newborns before the consumption of colostrum and five for each week of age until the sixth week. Samples consisted in 2 cm length of jejunum, which was immediately preserved at-196 °C. The extraction was done with Trizol®, then complementary DNA (cDNA) was synthesized. Subsequently, the conventional PCR and real time RT-PCR was conducted using oligonucleotides designed for detecting the exon 1 of the Fc IgA region of alpaca. The quantification of the relative expression was made through normalization with the GAPDH gene mRNA and the relative expression calculations were conducted using the 2-Ct method. It was identified and demonstrated through the real time RT-PCR technique that alpacas encoded and transcribed mRNA of exon 1 of the IgA Fc region from the first day of age, but not at birth. Also, the relative expression is detected and produced in intestinal epithelium of newborn alpaca from one day of age, both in healthy and ill animals. Healthy animals have a tendency of constant expression of mRNA of IgA until the fourth week of age, with slightly decrease in the subsequent weeks, whereas in enteric diseases IgA mRNA production is always superior than the expressed by the healthy animals, having significant differences (p<0.05) between the two groups (healthy 38.8 and sick 113 times respectively, with regard to the calibrator).
Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 2014
Evaluación in vitro de la respuesta leucocitaria de alpacas
Introduction: The enteric disorders represent a serious hazard for bovine and camelid breeding. T... more Introduction: The enteric disorders represent a serious hazard for bovine and camelid breeding. The aim of this study was to examine the frequency of detection and molecular characteristics of enteric coronavirus (CoV) infections in cattle, alpaca, and llama herds bred in family-based farms in Brazil and Peru. Methodology: Stool samples were collected from calves from Brazil and camelids from Peru for detection and characterization of CoV by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and sequence analysis. Results: 46.5% (47/101) samples from calves and 26.8% (70/261) from alpaca tested positive for CoV. All strains belong to lineage A1 of the Betacoronavirus genus. Phylogenetic analysis showed high identity between CoV strains detected in calves and alpacas. Conclusions: This study characterised CoV strains from dairy cattle herds in the state of Rio de Janeiro, Brazil, and indicated that this virus is spread among the state herds. The results also indicate widespread...
RESUMEN Se describen lesiones macroscópicas, histopatológicas y análisis microbiológicos de muest... more RESUMEN Se describen lesiones macroscópicas, histopatológicas y análisis microbiológicos de muestras de 27 alpacas recién destetadas en la sierra del sur del Perú que murieron por neumonía aguda. En 15/27 muestras patológicas se buscó la presencia in situ de antígenos virales, mediante inmunofluorescencia directa, para los virus Parainfluenza 3 (PI3), respi-ratorio sincitial bovino (RSB) y adenovirus bovino tipo 3 (BAdV-3) y en las 27 muestras se realizaron cultivos bacterianos. Las alteraciones macroscópicas correspondieron mayoritariamente a neumonía extensiva multilobar (11/27) asociadas con pleuritis fibrinosa (8/27), y cuadros de congestión y edema pulmonar (8/27). Con excepción de la presencia de agregado linfocítico peribronquial observado en un solo caso, los cambios histopatológicos fueron muy similares a los descritos en la literatura para neumonías agudas de alpacas neonatas. En 9 de las 15 muestras se detectaron 14 presencias virales (5 como infecciones únicas, 3 dobles ...
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