HEMATOPOIESE

• https://youtu.be/NckF2m0SwWo
 1 - Introduction

Cellules sanguines

Durée de vie limitée

pas de capacité de division cellulaire

peu de capacité de synthèse protéique

en nombre constant

Phénomène de renouvellement des cellules sanguines

=hématopoïèse
 2- Définition

• HEMATOPOIESE: remplacement continu et

régulé des cellules sanguines.

• Continu: processus fonctionnel de la vie intra-utérine à la

mort.
• Régulé: adapter avec précision la production cellulaire aux
besoins
* dans les conditions d’homéostasie
* et en réaction aux situations pathologiques
(hémorragies, infections…)

Identification des phénomènes de régulation

 3- Siège de l’hématopoïèse

• Au cours du développement humain, l’hématopoïèse va se

mettre en place dans différents sites anatomiques.
• L’hématopoïèse fœtale lors de la vie intra-utérine:
– Période mésoblastique: L’hématopoïèse démarre dans le sac vitellin
jusqu’au 2ème mois de la vie fœtale.
– Période hépatique et splénique: entre le 3e et le 5e mois.

– Période médullaire: elle apparaît au 4e mois, elle est prépondérante à

partir du 6e mois et elle est exclusive à la naissance.
Figure N°1: Sites de l’hématopïèse pendant la gestation
 3- Siège de l’hématopoïèse

• Après la naissance, l’hématopoïèse normale est localisée

exclusivement dans la moelle osseuse:

- Jusqu’à 5 ans, tous les os, plats et longs, ont une activité
hématopoïétique.
-L’hématopoïèse des os longs disparaît au cours de la
croissance, remplacée par du tissu adipeux,
- Seuls les os plats et courts restent actifs chez l’adulte:
Sternum, côtes, vertèbres, os iliaques.
 3- Siège de l’hématopoïèse

Chez l’adulte : vertèbre,

sacrum,
os iliaque,
côtes,
sternum,
crâne,
extrémités supérieures du fémur
et de l’humérus
• La moelle osseuse fonctionnelle:
– est un tissu semi-solide

– est composé par:

• les cellules hématopoïétiques,

• le microenvironnement médullaire: trame de

soutien
• Un réseau vasculaire: les sinusoïdes médullaires
 Réseau vasculaire médullaire

 La vascularisation est l’élément central de la micro-

structure médullaire permettant :

- le passage des substances stimulantes.

- et la libération des cellules matures.

 Réseau vasculaire médullaire

L’endothélium vasculaire est traversé

 par les cellules souches hématopoïétiques passant du :

sang  les niches d’hématopoïèse extravasculaire (homing)

 et par les cellules sanguines matures passant de :

la MO  sang (diabase)
• Le microenvironnement médullaire :
STROMA
– très important au déroulement de l’hématopoïèse.

– nécessaire à la fixation, la multiplication et la différenciation des

cellules hématopoïétiques.
– constitué par :

• des cellules:
cellules les cellules adipeuses, les histiocytes, les
fibroblastes, les cellules osseuses (les ostéoblastes et les
ostéoclastes)
• et une matrice extracellulaire (des fibres intercellulaires):
fibres de collagène de type I et III, fibronectine,
thrombospondine, trame osseuse
 Le microenvironnement médullaire :
STROMA

Les fibroblastes : forment un réseau à

mailles larges de cellules connectées,
procurant :

- Les cytokines

- Et les protéines de la matrice

extracellulaires

Nécessaire à la prolifération et à la
maturation des cellules
hématopoïétiques
• Hématopoïèse :
– Myélopoïèse :

• Granulopoïèse : PN

• Erythropoïèse : GR

• Mégacaryopoïèse : Plaquettes

• Monocytopoïèse : monocytes

– Lymphopoïèse : lymphocytes
 4- Les compartiments de l’hématopoïèse:

• Toutes les cellules sanguines sont produites à partir d'une même

cellule indifférenciée dite cellule souche totipotente ou cellule
souche primitive.
primitive

• Sous l'influence de facteurs stimulants (facteurs de croissance),

une cellule souche totipotente va s'engager dans la différenciation
d'une lignée cellulaire. Elle devient alors un progéniteur (=
cellule souche différenciée ou " engagée ").
 4- Les compartiments de l’hématopoïèse:
• Après plusieurs divisions qui aboutissent à des cellules souches
engagées à la potentialisation de différenciation de plus en plus
limitée, les progéniteurs deviennent spécifiques d'une seule
lignée. On aboutit alors aux précurseurs,
précurseurs
• Ces précurseurs se divisent et maturent. La maturation terminale
aboutit aux cellules matures fonctionnelles qui passent dans le
sang.
 4- Les compartiments de l’hématopoïèse:

• L'hématopoïèse comporte donc 3compartiments:

– Les cellules souches totipotentes

– Les progéniteurs

– Les précurseurs
 4-1- Le compartiment des cellules
souches hématopoïétiques:

• Ce sont les cellules les plus primitives

• Elles sont minoritaires dans la MO: 0.01% à 0.05% des

cellules médullaires.
• Il existe également un compartiment de cellules souches
circulantes dans le sang qui peut être augmenté par des
facteurs de croissance ou par chimiothérapie.
 4-1- Le compartiment des cellules
souches hématopoïétiques:

• Elles sont définies par trois propriétés fonctionnelles:

L’autorenouvellement
La totipotence
La capacité d’engagement en différenciation cellulaire
 4-1- Le compartiment des cellules
souches hématopoïétiques:

L’autorenouvellement

• Elles sont capables de se diviser pour donner naissance à

des cellules filles qui lui sont identiques.
• C’est ce qui permet de maintenir intact le compartiment des
CSH et donc le potentiel de l’hématopoïèse.
 4-1- Le compartiment des cellules
souches hématopoïétiques:

La totipotence

• Désigne la capacité de ces cellules à donner naissance aux

différentes lignées hématopoïétiques.
 4-1- Le compartiment des cellules
souches hématopoïétiques:

Capacité d’engagement en différenciation cellulaire

• Elle va s’orienter progressivement vers une lignée

spécialisée particulière. La différenciation conduit à la
production de cellules matures et fonctionnelles à partir des
cellules souches. Elle comporte des étapes successives de
détermination et de maturation.
 4-1- Le compartiment des cellules
souches hématopoïétiques:

• Sur le plan cytologique, ces cellules ne sont pas

reconnaissables morphologiquement sur un frottis médullaire
après coloration par le May-Grünwald-Giemsa. Leur aspect
est celui de cellule lymphoïde jeune indifférenciée:
– Rapport nucléocytoplasmique élevé

– Chromatine peu condensée,

– Présence de nucléoles

– Cytoplasme fortement basophile

 4-1- Le compartiment des cellules
souches hématopoïétiques:

• Elles possèdent des marqueurs antigéniques de surface

permettant de les reconnaitre par immunophénotypage:

CD34+ ; CD33 - ; HLA-DR -

 4-2- Le compartiment des progéniteurs:

• Issus des cellules souches qui s’engagent en

différenciation.
• Ces cellules se caractérisent par leurs capacités de
prolifération importante et de différenciation progressive
obligatoire.
• Les progéniteurs perdent progressivement leur capacité
d'autorenouvellement au fur et à mesure de leur
avancement dans la différenciation.
 4-2- Le compartiment des progéniteurs:

• Peu nombreux: uniquement 0.1 % des cellules médullaires

• Non identifiables morphologiquement.

• Possèdent des marqueurs antigéniques de surface:

CD34+; CD33+; HLA-DR+

 4-3-Le compartiment des précurseurs:

• Phase de prolifération et de maturation.

• Ce ne sont plus des cellules souches car elles ont perdu

toute capacité d'autorenouvellement.
• Les précurseurs hématopoïétiques sont des cellules
identifiables morphologiquement en cytologie.
 4-3- Le compartiment des précurseurs:

• La maturation:
maturation
– les cellules acquièrent, par la synthèse de protéines
spécifiques, des fonctions spécialisées.
– Induit des modifications morphologiques :
• Communes: la diminution de la taille cellulaire,

la diminution du rapport nucléo-cytoplasmique,

la disparition des nucléoles,

la condensation de la chromatine.
• Des modifications spécifiques de chaque lignée
 4-3- Le compartiment des précurseurs:

• La prolifération:
prolifération
•Parallèlement à la maturation, les précurseurs se
multiplient de sorte qu'un précurseur peut donner
naissance à 32 cellules filles.
•Augmenter l’efficacité et le rendement de
l’hématopoïèse
 5- Régulation de l’hématopoïèse:

• L’hématopoïèse doit être parfaitement contrôlée afin que

chaque élément figuré de sang soit produit en quantité et en
temps voulu: ni excès ni insuffisance de production.
• La régulation médullaire des étapes de l’hématopoïèse
dépend:
– Des cytokines.

– Et de l’existence d’un microenvironnement

médullaire.
 5- Régulation de l’hématopoïèse:

• Cytokines:

– Deux grands groupes principaux:

• les facteurs de régulation positive: les facteurs

de croissance hématopoïétiques;
• les facteurs de régulation négative: les
inhibiteurs
 5- Régulation de l’hématopoïèse:
• Facteurs de croissance (FC) hématopoïétique:
– origines cellulaires multiples: lymphocytes, cellules
endothéliales, fibroblastes, monocytes/macrophages
– mode de sécrétion: paracrine surtout (stroma médullaire)
endocrine (érythropoïétine)
autocrine parfois (boucles de
régulation)
– Effets biologiques:
* Prolifération et différentiation des progéniteurs
hématopoïétiques
*ce sont des facteurs de survie en inhibant
l’apoptose
*des cellules matures: stimuler leurs fonctions
Régulation humorale de la sécrétion d’érythropoïétine
 5- Régulation de l’hématopoïèse:
• le micro-environnement médullaire:

- les cellules du stroma médullaires, matrice extracellulaire

- par l’intermédiaire de molécules d’adhésion spécifiques, il

permet l’adressage (ou homing) des cellules souches et des
progéniteurs dans la MO.

- il empêche la mise en circulation des cellules non pleinement

différenciées

- il permet, par des mécanismes paracrines, l’action des

facteurs de croissance sur leurs cibles.
 6- Méthodes d’exploration de la fonction
médullaire:
6- 1- Hémogramme:
6-2- Myélogramme par ponction-aspiration médullaire:

- il est réalise sous anesthésie locale.

- siège:

chez l’adulte: manubrium sternal, EIPS, EIAS

chez l’enfant: EIPS

• L’aspiration ramène quelques gouttes du suc médullaire mélangé à un
peu de sang.
• Les grains de moelle sont étalés par frottis et colorés par MGG
•La lecture: au microscope par un cytologiste expérimenté:
•À un faible grossissement:
•Appréciation de la richesse médullaire: cotée de 0 à 5.
•Comptage des mégacaryocytes
•Recherche de cellules étrangères métastatiques
•La lecture:
•Au fort grossissement:
• détermination des pourcentages respectifs des diverses lignées
cellulaires médullaires.
•Existence d’un excès ou d’un défaut quantitatif d’une ou de
plusieurs lignées myéloïdes
•Recherche des anomalies morphologiques
(exemple: mégaloblastes en cas de déficits vitaminiques)
Sur myélogramme, chez l’adulte :
- Lignée granuleuse : 60 %
- Lignée érythroblastique : 25 %
- Lymphocytes : 12 % (1er jour)
: 50 % (1mois)
: 15 % (> 2 ans)
- Plasmocytes :2%

Soit 5% du poids du corps

dont 50% moelle rouge
 6-3: la biopsie médullaire examen anatomopathologique :
- Étude histologique de la MO
- En seconde intention après le myélogramme
- Sous anesthésie locale au niveau des épines iliaques
- Utiliser un trocart et retirer un petit cylindre d’os spongieux (2 à 3 cm de
long et de 2 à 3 mm de diamètre
 6-3: la biopsie médullaire
examen anatomopathologique :

- Permet

*d’apprécier la richesse médullaire ++

* l’étude du stroma médullaire

inaccessible à la ponction, elle est la
seule à définir l’architecture médullaire

* la recherche de cellules
lymphomateuses ou métastatiques

*la réalisation d’un immunomarquage.

6-4- Cytométrie de flux:
• Permet l’analyse rapide de grandes quantités de cellules en suspension
préalablement marqués par Ac monoclonaux marqués par des
fluorochromes
• Chaque cellule de l’hématopoïèse à une signature immunophénotypique:
Classes de différenciation (CD)
• Complète utilement le myélogramme surtout quand les cellules sont
morphologiquement proches
• Utile pour le diagnostic des leucémies aiguës et des synd^romes
lymphoprolifératifs
6-5: Autres investigations médullaires:
• Les études isotopiques,

• Etudes cytogénétiques

• Biologie moléculaire

• et fonctionnelles (cultures des progéniteurs)