TD/TP 01

Protozoaires Protozoaires
intestinaux sanguicols

Faculté de médecine d’Oran​

CHU d’Oran​
L’examen parasitologique
des selles
Définition:
La coprologie parasitaire ou l’examen parasitologique des selle ou
l’examen coproparasitologique met en évidence et identifie les
parasites qui vivent dans le tube digestif ou ceux qui sont éliminés
dans les matières fécales.

INDICATIONS

1/Des parasites digestifs 2/Des parasites extra-

(formes végétatives et digestifs ( parasites
kystiques, les vers à pulmonaires dégluties ou
différents stades…), parasites vasculaires).
Préparation du malade:
Proscrire

1/Médicaments opaques non absorbables (5jours avant)

Charbon végétal
Sel de bismuth
2/Les aliments laissant beaucoup de résidus (la veille)
Sel de magnésium
Légumes secs (féculents)
Kaolin
3/Les aliments
Les fruits àet
Baryte
les
grains:médicaments
fraise, poires qui colorent les selles
4/ToutesBetteraves
Lesthérapeutiques susceptibles
fruits à cuticule résistante:
Les laxatifs gras
d’avoir une action antiparasitaire
abricots, pêches
Charbon
suppositoires
fumafer
Fiche de renseignement :

• Nom prénom et l'âge du malade

• L’adresse (zone urbaine, rurale, zone d’endémie)
• La notion de séjour en zone d’endémie
• Les habitudes culinaires
• Le tableau clinique et les signes paracliniques (anémie,
hyperéosinophilie sanguine)
• Notion de terrain d’immunodépression
• Notion de traitement en cours et notamment antiparasitaire.
Prélèvement de la selle:
-Récipient sec, propre, fermé hermétiquement et transparent si possible.
-Eviter de mélanger avec les urines.
-Etiqueter.
-Prélèvement fait soit au laboratoire soit acheminé dans un bref délai.

• Il est nécessaire de répéter les examens des selles, un seul

résultat négatif ne doit pas être définitif, il est conseillé
d’effectuer 3 analyses, à quelques jours d’intervalle
 Examen parasitologique des
selles
Examen macroscopique Examen microscopique
• Etape importante Se fait en deux temps :
• Pose le diagnostic dans
• Examen direct
certaines situations
• Renseigne sur: • Examen après concentration
Consistance • Methodes speciales
Couleur • Technique éclaircissante
Eléments surajoutés
• Scotch test anal
Présence de sang,
mucus • Méthode de Baermann et
Parasites : Lee
Enterobius vermicularis • Techniques de coloration
Les anneaux de Taenia
Ascaris lumbricoides
Examen direct

Étape importante, c’est le seul examen qui permet de visualiser les

formes végétatives vivantes des protozoaires

Quelque soit le résultat de l’examen direct, on doit faire

obligatoirement deux techniques de concentration dont le principe
diffère
Techniques de concentration
• But: réunir dans un petit volume les parasites dispersés dans une
grande masse de matières fécales.
• Nombreuses techniques, pas de technique polyvalente
• Chaque technique a ces indications
• Le choix dépend des renseignements fournis par le clinicien.

Sans intérêt pour les formes végétatives qu’elles altèrent

 Classées en deux groupes

Les méthodes Les méthodes

physiques physicochimiques

Les techniques Méthodes par

de sédimentation flottaison
Méthodes par flottaison
Diluant dont la densité est supérieure à celle des parasites(vont flotter à la surface)

Technique Réactif utilisé Indication

Méthode de Fulleborn Chlorure de sodium

Méthode de Willis Basée sur une double

NaCl à 25%
propriété des
Œufs d’ankylostomes
Hymenolepis nana
Méthode de Faust et Faust simplifiée œufs
Sulfate d’helminthes:
de zinc
au sulfate de zinc
La méthode de Janeckso et Urbanyi Celle dedeflotter
Iodomercure à la
Lessurface
œufs de: d’une
potassium Fasciola hepatica
solution saline saturée
Schistosoma mansoni
Et celle d’adhérerTaenia
au verre
Trichocephale
Ankylostomes
Oxyure
 Classées en deux groupes

Les méthodes Les méthodes

physiques physicochimiques

Les techniques Méthodes par

de sédimentation flottaison
 Ritchie modifié

Nom
Prénom
Date

Eau
formolée
10%
Faire une dilution homogène dans un verre
conique, pour cela triturer 2 à 5 g de selles
prélevés en plusieurs points de la selle dans 5 à
10 parties de la solution aqueuse de dilution
 Dans un tube à centrifuger conique, verser d’abord la dilution de
selle apres filtration (2/3 du volume total) puis ajouté l’éther (1/3
du volume), bien agiter pendant 1 minute et centrifuger
immédiatement
Ether

1/3

Centrifugeuse
1500 Tr/ mn
3 mn 2/3
Après la centrifugation le contenu de
tube s’est réparti en 4couches de haut A
en bas:
Tourner brusquement B
Une couche d’éther lechargée
tube pour
de
éliminer les couches superficielles, puis
graisses
prélever C
Une le culot àépaisse
couche l’aide d’une
de pipette
débris
pasteur.
lipophiles (bactérie, résidus
alimentaires)
Une couche aqueuse D
Le culot à examiner
MO:
X 10 / x 40
Technique de
coloration:
Intérêt:
• Identification et diagnostic différentiels des amibes(formes végétatives)
• Diagnostic de certains protozoaires.
Ex: Cryptosporidium

1/Coloration 2/Méthodes de
3/Coloration
instantanée entre coloration de
spécifiques
lame et lamelle frottis
 1/Coloration
2/Méthodes
instantanée 3/Coloration
de coloration
entre lame et spécifiques
de frottis
lamelle

Coloration du cryptosporidium

Technique de Ziehl Neelsen modifiée par Henriksen et

Polenz:
• Utilisée à partir du culot de concentration par la technique de Ritchie

• Coloration par la fuchsine phéniquée

Décoloration par l’acide sulfurique
Contre coloration par le vert malachite
PROTOZOAIRES
INTESTINAUX
Definition

• Parasite : organisme vivant qui vit aux dépens d’un autre organisme
(hôte)

• Protozoaire : organisme unicellulaire eucaryote

04 classes

Amibes
Amibes
Flagellés Sporozoaires Cilié

Digestives Digestifs Digestifs Digestif

Libres
Digestives
Uro- Sanguicol-
genitaux tissulaire

Libres
Sanguicol-
tissulaire
Amibes Flagellés Sporozoaires Cilié

Digestives Digestifs Digestifs Digestif

Uro- Sanguicol-
Libres
genitaux tissulaire

Sanguicol-
tissulaire
Protozoaires très fréquents dans la nature,
• Entamœba histolytica.
• Entamœba dispar.
• Entamœba hartmanni.
• Entamœba polecki.
• Entamœba coli.
• entamoeba moshkovskii
• entamoeba bangladeshi
• Endolimax nanus.
• Pseudolimax butschlii.
Entamoeba histolytica/dispar
• E. histolytica est la seule espèce pathogène
• 2 formes: végétative et kystique
Trophozoites d’E. histolytica/dispar

•La forme végétative /appelée

trophozoïte
•grande taille de 20 à 40 µm
•Le noyau est arrondi, dont le centre
est un petit caryosome punctiforme
•la périphérie une croutelle de
chromatine formée de grains fins et
régulièrement disposés.
•elle est mobile
•elle se nourrit par phagocytose, son
cytoplasme granuleux contient de
nombreuses vacuoles digestives remplies
d'inclusions alimentaires ou de bactéries.
Kyste d’E. histolytica/dispar

Le kyste est arrondi et mesure 8 à

15 µm de diamètre
Il est entouré d'une double
membrane épaisse et réfringente
Il contient à maturité 4 noyaux du
même type et parfois des bâtonnets à
bouts arrondis appelés corps
sidérophiles ou cristalloïdes

C’est une forme de résistance qui

peut survivre plusieurs jours
Le kyste mûr est la forme de
dissémination de la maladie.
Entamoeba coli
•Grande taille fait 20 à 40 µm de
diamètre,
•un cytoplasme grossièrement
granuleux
Le noyau a un petit caryosome
excentré entouré d'un halo clair et une
chromatine périphérique grossière et
irrégulière.

Cette amibe se déplace très

lentement, à l’aide de pseudopodes
courts émis dans tous les sens
ses mouvements sont anarchiques, il
en résulte un mouvement sur place.
Entamoeba coli
•le plus grand des kystes
d'amibes
•il mesure 15 à 20 µm de
diamètre, plus ou moins
sphérique, il est entouré d'une
membrane épaisse et réfringente.
•le kyste mûr renferme 8 noyaux
du même type, et parfois des
cristalloïdes en aiguilles à bouts
pointus.
Endolimax nanus
•La forme végétative : est petite
de 6 à 12 µm.
Le cytoplasme contient de
nombreuses petites vacuoles et un
noyau contenant un gros caryosome
de forme et de localisation très
variable : en croissant excentré ou
en amas arrondi ou sous forme de
deux croissants occupant presque la
totalité du noyau.
Elle émet de nombreux
pseudopodes à la fois, donnant à
l’amibe un aspect en grappe de
Endolimax nanus

•Le kyste de 7 à 10 µm est

ovoïde ou rond ou rectangulaire à
angles arrondis
•Il est pourvu de 4 noyaux dont
une paire à chaque pôle.
•Le contour est différent des
autres kystes d'amibes, il est
mince et peu réfringent.
Pseudolimax butschlii
•La forme végétative :
•fait 8 à 15 µm de diamètre.
Le cytoplasme contient de nombreuses
vacuoles où se trouvent des inclusions
alimentaires volumineuses.

Le noyau contient un gros caryosome central

entouré d'un halo blanc formé de granules
achromatiques.
L’amibe pousse rapidement un très long
pseudopode en doigt de gant mais très fragile
elle se lyse rapidement.
Pseudolimax butschlii

•Le kyste est très polymorphe

(ovale, sphérique ou piriforme) il
mesure 6 à 15 µm.
• Possède un seul noyau et une
grosse vacuole iodophile, d'où le
nom de Iodomoeba.
Amibes Flagellés Sporozoaires Cilié

Digestives Digestifs Digestifs Digestif

Uro- Sanguicol-
Libres
genitaux tissulaire

Sanguicol-
tissulaire
Giardia intestinalis
La forme végétative :
• En forme de poire
• 16 à 18μ sur 8 à 10 μ.
• L’extrémité antérieure est arrondie, et elle
est creusée d’une dépression en forme de
rein (réniforme) où sont logés 2 noyaux.
• 1 axostyle (élément de soutient) et 04 paires
de flagelles qui lui confèrent une grande
mobilité.
• Mouvements « en chute de feuilles»
• Très fragile et est retrouvée dans les selles
diarrhéiques.
Giardia intestinalis Kystes
La forme kystique :
• Elle est ovalaire, immobile et
mesure 10 à 12 μ sur 8 à 10 μ.
• 2 à 4 noyaux et des résidus
flagellaires.
• Le kyste est entouré d’une
membrane lisse peu épaisse et
réfringente.
• Ils sont très résistants et on les
retrouve dans les selles
consistantes.
• L’élimination des kystes est
intermittente.
Amibes Flagellés Sporozoaires Cilié

Digestives Digestifs Digestifs Digestif

Uro- Sanguicol-
Libres
genitaux tissulaire

Sanguicol-
tissulaire
 cryptosporidium isospora cyclospora sarcocystis

Retrouvé dans les selles sous forme

d’Oocystes sporulés mûrs arrondis ou
ovalaires à paroi épaisse de 4 à 6 µm de ø
Amibes Flagellés Sporozoaires Cilié

Digestives Digestifs Digestifs Digestif

Uro- Sanguicol-
Libres
genitaux tissulaire

Sanguicol-
tissulaire
Balantidium coli trophozoites

Ovoïde
Taille :50-100µm sur 40-
60µm
Péristome
02 vacuoles contractiles
02 noyaux
Macronucleus
micronucleus
Balantidium coli

 sphérique
 mesurant 50 à 60µ
 coque épaisse.
 2 noyaux
 Forme de dissémination
 Autres…: blastocystis hominis
Il peut être identifié sous au moins 04 formes :
vacuolaire( présence de vacuole),
granulaire( présence de vacuole),
Vacuole centrale, Appareil nucléaire( 1à4 noyau),
amiboïde( absence de vacuole ) Vésicules pinocytotiques, Le cytoplasme peut
kystique( absence de vacuole). contenir d‟antres inclusions dont les plus
importantes sont les ribosomes, les lysosomes et les
inclusions glycogéniques et lipidiques
 TD 02
Les
protozoaires La confection d’un
sanguicol- frotti
tissualaires

Faculté de médecine d’Oran​

CHU d’Oran​
Définition:

Les protozoaires sanguicol-tissualires regroupe des parasites

très divers dont certains, parmi les plus graves, ont un
développement dans le sang, mobile comme leishmania et
trypanosoma ou immobile comme le plasmodium, Babesia,
et toxoplasma
04 classes

Amibes
Amibes
Flagellés Sporozoaires Cilié

Digestives Digestifs Digestifs Digestif

Libres
Digestives
Uro- Sanguicol-
genitaux tissulaire

Libres
Sanguicol-
tissulaire
Fiche de renseignement :

• Nom prénom et l'âge du malade

• L’adresse (zone urbaine, rurale, zone d’endémie)
• La notion de séjour en zone d’endémie
• Les habitudes culinaires
• Le tableau clinique et les signes paracliniques (anémie,
hyperéosinophilie sanguine)
• Notion de terrain d’immunodépression
• Notion de traitement en cours et notamment antiparasitaire.
Prélèvement :

Sang Biopsie
Autres…
Diagnostic :
Examen direct
Etat frais : pour voir la mobilité
Apres coloration : MGG+++
Biologie moléculaires et autres…

Examen indirect

Sérologie et autres….
Lecture

X100
 Amibes Trypanosoma
Flagellés Sporozoaires Trypanosoma
Cilié
Leishamia sp brucei cruzi
Digestives Digestifs Digestifs Digestif

Uro- Sanguicol-
Libres
genitaux tissulaire

Sanguicol-
tissulaire
 Leishamia sp Trypanosoma brucei Trypanosoma cruzi

►Responsable d’un groupe de maladies qu’on appelle les

leishmanioses

►En 2018, plus de 85% des cas provenaient de 10 pays dont

l’Algérie

►Les leishmanies infectent les phagocytes mononucléaires

(macrophages…) de l‘hôte

► Transmises à l’homme par la piqûre de phlébotomes femelles infestées

► En Algérie, le chien est le réservoir de la leishmaniose viscérale et cutanée du nord.

Pour la leishmaniose cutanée zoonotique le réservoir est représenté essentiellement par
PHLEBOTOME

Phlébotome adulte mouche de sable

Petit moucheron jaune pale , 1-4mm,crps bossu, velu, ailes velues lancéolés,
relevés en V au repos
PROMASTIGOTES

F
N

est allongée, mesure 10 à 25 µ de

longueur avec un noyau central, un
kinétoplaste antérieur et un flagelle libre
antérieur. C’est une forme libre et
mobile, retrouvée chez le phlébotome et
dans le milieu de culture.
K
Phlébotome
AMASTIGOTE

est ovoïde, mesure 2 à 6 µ avec un noyau

arrondi en position para centrale et un
Leishmania sp : kinétoplaste punctiforme ou allongé juxta-
Amastigotes (3-5µm) nucléaire .
C’est une forme intracellulaire obligatoire,
“amastigotes” retrouvée chez l’homme et le réservoir
Leishmania sp :
Amastigotes (3-5µm)
 Leishamia sp Trypanosoma brucei Trypanosoma cruzi

► Trypanosomose
Responsable de la africaine /
maladie de sommeil
► Causée par Trypanosoma brucei

► Vecteur : Glossine (mouche tsé-tsé)

GLOSSINE
« Mouche Tsé-Tsé »

Diptère de grande taille (6 à 13mm de long)

Hématophage : mâle et femelle
Repas sanguin : le jour
EPIMASTIGOTE

Chez le vecteur et en milieu de culture

forme allongée, noyau central, kinétoplaste proche du noyau, membrane ondulante longeant le corps à
partir du noyau et flagelle libre à partir de l'extrémité antérieure corps cellulaire de 15 à 20 µm
TRYPOMASTIGOTE METACYCLIQUE INFESTANTE

Elle ressemble au trypomastigote forme longue, sans flagelle libre, de 25 à

40um de long.
Trypomastigote long

Chez l’hôte contamine :

Forme Trypomastigote : Deux aspects

Trypomastigote long : forme allongée, 15 à 20 µm, noyau central,

kinétoplaste postérieur, membrane ondulante longeant le corps sur toute sa
longueur et flagelle libre à partir de l'extrémité antérieure.
Trypomastigote court

Elle ressemble à la précédente mais plus petite et sans flagelle libre.

Extra cellulaire, multiplication lente, présente dans les phases de remissions
de la maladie
 Leishamia sp Trypanosoma brucei Trypanosoma cruzi

► agent pathogene de la Trypanosomose Américaine /

Maladie de Chagas
► Transmis par :
■ vecteur : punaises (les reduves )(Triatoma, rhodnius, panstrongylus)
■ transfusion sanguine.
■ voie congénitale.

► Quatrième maladie transmise en Amérique latine (Mort de 50.000 )

TRIATOME

Les antennes sont a mi-chemin entre les yeux et

l’extrémité antérieure de la tête
 EPIMASTIGOTE
chez HI insecte et en culture
- Formes épimastigote : forme allongée 15 à 20 µm, noyau central, kinétoplaste proche du noyau, membrane ondulante
longeant le corps à partir du noyau et flagelle libre à partir de l'extrémité antérieure
 TRYPOMASTIGOTE
chez HD vertébré

Forme Trypomastigote: forme allongée 15 à 20 µm, noyau central, kinétoplaste postérieur très volumineux,
membrane ondulante longeant le corps sur toute sa longueur et flagelle libre à partir de l'extrémité antérieure

Epimastigotes chez insecte

 AMASTIGOTE

Forme Amastigote: cellule arrondie, kinétoplaste large, flagelle vestigial, immobile , 3 à 4 µm,
endocellulaire localisées et se multipliant dans les cellules du SRE et cellules musculaires du
vertébré

Amastigotes dans macrophages Amastigotes dans muscle cardiaque

 Amibes Flagellés Sporozoaires Toxoplasma
Cilié
Plasmodium sp Babesia sp gondii
Digestives Digestifs Digestifs Digestif

Uro- Sanguicol-
Libres
genitaux tissulaire

Sanguicol-
tissulaire
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Paludisme, Malaria, mauvais air, fièvre des marrais

Endémie parasitaire majeure,

Maladie infectieuse due à un protozoaire du genre Plasmodium,

Vecteur : l’anophèle femelle

Le Dg de référence est : frotti + goutte épaisse

 ANOPHELE
•Position oblique au repos par rapport au support.
•Palpes aussi longues que la trompe.
•Peu poilue.
•Seule la ♀ transmet :hématophage
•Œufs pondus isolement à la surface des eaux.
•Présence de flotteurs latéraux.
•Les larves n’ont pas de siphon respiratoire.
EXFLAGELLATION D’UN GAMETOCYTE MÂLE
OOCYSTE
SPOROZOITE
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

• Cinq espèces plasmodiales sont responsables du paludisme chez

l’homme :
• Plasmodium falciparum
• Plasmodium vivax
• Plasmodium ovale
• Plasmodium malariae
• Plasmodium knowlesi
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium falciparum

C’est l’espèce la plus répandue

Le polyparasitisme

Il n’y a pas de reviviscence schizogoniques

Cette espèce entraine des complications chez la

femme enceinte.
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium falciparum
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium falciparum

La multiplication des noyaux dans le schizonte donne «le corps

en rosace » et en parallèle, l’hémoglobine se dégrade et donne
des taches de maürer pour le falciparum
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium falciparum
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium vivax

La parasitémie dépasse rarement 2%.

Il n'y a pas de polyparasitisme.

Les reviviscences se font jusqu’à 2 à 5ans

(le parasite subsiste dans le foie sous forme
d’hypnozoite).

Cette espèce entraîne des complications

chez la femme enceinte.
Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium vivax
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium vivax

La multiplication des noyaux dans le schizonte donne «le corps

en rosace » et en parallèle, l’hémoglobine se dégrade et donne
les granulations de schüffner pour Plasmodium vivax et ovale
Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium vivax
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium ovale

La parasitémie est de 1 à 2%

Le polyparasitisme est rare

Les accès de reviviscence schizogonique

surviennent 5 ans après l'infestation car le
parasite subsiste dans le foie sous forme
d'hypnozoïtes.

Très proche de vivax

Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium ovale
Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium ovale
Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium ovale
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium malariae

Parasitémie 1 à 2%

Il n’y a pas de ployparasitisme.

.
L’existence d’hypnozoites n’a pas été
démontrée.

Les rechutes seraient dues à la

persistance du parasite dans le sang ou
la moelle osseuse (mécanisme
inconnu).
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium malariae
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium malariae
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium malariae
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium knowlesi

Parasite des primates.

Cette espèce s’est révélée pathogène pour l’homme et elle a été longtemps considérée comme étant un
malariae.

Elle était connue chez le singe et a été découverte récemment chez l'homme en Asie du Sud-Est.
Elle est proche microscopiquement de malariae et génétiquement de vivax.
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

Plasmodium knowlesi
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

► Les Babésioses = parasitose émergente cosmopolites dues à des parasites intra

érythrocytaires du genre Babésia, transmises par des tiques (Ixodidae) :

► Elles atteignent avec prédilection les

animaux domestiques et sauvages

(Réservoir)

► l'Homme est un hôte souvent accidentel.

TROPHOZOITE

forme annulaire
aspect en croix de Malte
aspect germiné

(1-2,5µ) (B.microti).
(2,5-5µ)(B.divergens)
 Plasmodium sp Babesia sp Toxoplasma gondii

 Anthropozoonose cosmopolite .

 Protozoaire , intracellulaire obligatoire.

 Hôte définitive = chat (félidés).

 Diversité d’ hôte intermédiaire = homme et animaux

homéotherme (mammifères et oiseaux)
 OOCYSTE

 Forme infestante
Issu de la reproduction sexuée du
parasite dans les cellule de l ’épithélium
intestinal du chat
 Elimine dans le milieu extérieur sous
forme d’oocyste
TACHYZOITES

 Forme végétative
intracellulaire
 Hautement réplicative
 Forme de croissant
 Noyau central
 Présente au cours de
l’infection aigue
KYSTE / BRADYZOITES

 Forme résultante de la
transformation du tachyzoite
 Noyau situe a l’ extrémité
postérieure
 Caractérise la phase
chronique de la maladie
 A division lente aboutissant
a la formation d’un kyste