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Contrôle Qualité: Diagnostics Moléculaires

Le document traite du contrôle qualité des diagnostics moléculaires, en mettant l'accent sur l'intégrité des acides nucléiques durant le prélèvement, le transport et le traitement des échantillons. Il souligne l'importance d'un circuit unidirectionnel pour éviter la contamination et la nécessité de contrôles positifs et négatifs. Enfin, il aborde les risques associés à la PCR, notamment l'optimisation des primers et l'interprétation prudente des résultats.

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Contrôle Qualité: Diagnostics Moléculaires

Le document traite du contrôle qualité des diagnostics moléculaires, en mettant l'accent sur l'intégrité des acides nucléiques durant le prélèvement, le transport et le traitement des échantillons. Il souligne l'importance d'un circuit unidirectionnel pour éviter la contamination et la nécessité de contrôles positifs et négatifs. Enfin, il aborde les risques associés à la PCR, notamment l'optimisation des primers et l'interprétation prudente des résultats.

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Contrôle Qualité :

Diagnostics
moléculaires

1
Vue générale
 Prélèvement, transport, et traitement de
l’échantillon
 maintenir l’intégrité des acides nucléique à
travers tous le processus
 Contrôle de la contamination
 établir un circuit unidirectionnel de la zone
de préparation des réactifs (ADN free) à la
zone de traitement de l’échantillon, à la zone
d’amplification et de détection
 Contrôles positif et négatif
 Référence: CLSI MM3-A (Méthode de diagnostic
moléculaire pour les maladies infectieuses)

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 2


2
Contrôle Qualité:
diagnostics moléculaires

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 3


3
Real Time-PCR (temps réel)
ECHANTILLON

Taq polymerase
Cible AN
amplifiée
PRIMER
Fluorescence
SYBR Green Quantitative

+ - In

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 5


5
Réactions d’amplification

POSITIVE

PAS d’ AMPLIFICATION

Amplification / Temps

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 6


6
Real Time-PCR (temps réel)

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 7


7
A/H3

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 8


8
A/H5

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 9


9
Risques avec la PCR
 La plupart des RT-PCR sont faîtes
« sur place »
 les primers ne sont pas nécessairement
optimisés pour le test
 les contrôles positifs sont « maison »
 les contrôles négatifs sont « maison »
 L’interprétation des tests a besoin
d’être faite prudemment

Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 11


11

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