MINISTERE DE LA SANTE DE LA POPULATION ET DE LA REFORME HOSPITALIERE

INSTITUT NATIONALE DE FORMATION SUPERIEURE

PARAMEDICALE d’ALGER

MÉMOIRE PROFFESIONNEL DE FIN D’ETUDE

Option : Laborantin de santé publique

Le dosage d’IgE spécifiques aux protéines du lait de

vache chez les enfants Agés de moins de deux ans :
Technique de détection et allergène le plus
fréquent.

Elaboré par : Dirigé par :

 Benkhelifa yousra Dr. Benyahia Amel
 Bouderba mayssa
Promotion 2015-2018
14-05-2018
INTRODUCTION Le Plan
PROBLEMATIQUES

HYPOTHESES
Généralités
PARTIE THEORIQUE
Diagnostic
PARTIE PRATIQUE

CONCLUSION
INTRODUCTION Le Plan
PROBLEMATIQUES

HYPOTHESES

PARTIE THEORIQUE
Présentation de l’étude

PARTIE PRATIQUE Matériels et méthodes

Résultats et discussion
CONCLUSION
INTRODUCTION PROBLEMATIQUE HYPOTHESES
Le Lait est l’aliment de base des Nourrissons Indispensable
à la croissance.
Les protéines du lait sont séparésCaséine
en : Lactoséru
m
L’amélioration des connaissances à conduit les industriels à établir des
Allergie aux protéines de lait
formules lactées bovines par leur
de origine
vache provoque :
L’intolérance au
lactose
L’APLV 4 eme
Allergie alimentaire chez l’enfant , Connue depuis
plusieurs siècles, l’incidence est en augmentation Problème de
santé publique.
Le Dosage d’IgE spécifiques est une étape importante du diagnostic
et le suivi de la maladie allergique
INTRODUCTION PROBLEMATIQUE HYPOTHESES

1. Quel est l’apport du dosage d’IgE spécifiques dans le

diagnostic et le suivi d’une APLV chez les enfants âgées
< 2ans au niveau de l’unité d’immunologie du
laboratoire centrale de CHU N’FISSA HAMOUD
2. Quel est l’allergène le plus
fréquent
INTRODUCTION PROBLEMATIQUE HYPOTHESES

1. Le dosage d’IgE spécifiques a un intérêt dans le

diagnostic et le suivi d’une APLV.

2. L’allergène le plus fréquent semble être la

caséine.
 PARTIE
THEORIQUE
 Généralités Diagnostic
Définition :
• Réaction du système immunitaire vis-à-vis d’une ou
plusieurs PLV

à
Médiée
Hypersensibilité Hypersensibilité médiati
par les
on
IgE Immédiate (Type 1) retardée (Type 4) cellulair
e

• Apparaissent chez les jeunes

enfants ++++
• Complication : Manifestation légère, Modéré
peuvent affecter :
Le système L’apparail
La peau
digestif respiratoire
 Généralités Diagnostic

Epidémiolo 12,6% d’AA de l’enfant

gie : Anglete
rre:
Incidence : 0,3-7,5%
5-6%
Fran
Amériq ce:
ue: 2-7% Turqu
3,5% ie:
AA Algér 0,8%
ie: AA
3,6%
 Généralités Diagnostic
Physiopathol
ogie :
1/ Les acteurs de la réaction
allergique :
L’allergène
80%
Les protéines lactées bovines α-
caséine
20% lactalbumine
β-
Réactions lactosérum
lactoglobuline
Plusieurs Allergènes
croisées : se ressemble aux niveaux de la
composition\Structure
IgE dirigé contre un tel
allergène
Reconnaitre les épitopes d’allergène
semblable
déclencher des symptômes
 Généralités Diagnostic
Physiopathol
ogie :
1/ Les acteurs de la réaction
allergique :
L’immunoglobuline E
 AC thermolabile/ homocytotrope
 Le support immunologique de l’hypersensibilité
immédiate
 Facteur sérique responsable de transfert passif
:
Réaction allergique sujet
sensibilisé
Demi-vie : Circulante : 2,5
jours
Fixées : (plusieurs
sem/mois)
 Généralités Diagnostic
Physiopathol
ogie :
1/ Les acteurs de la réaction
allergique :
Les cellules effectrices

Porteuses de Porteuses de
FCɛRI FCɛRII

 Mastocyte  Macrophag
 Basophile e
 Eosinophile
 Généralités Diagnostic
Physiopathol
ogie :
1/ Les acteurs de la réaction
allergique :
Les médiateurs

Préformés
Néoformés
(L’histamine
(Lipidiques)
)
Les mastocytes • Leucotriènes
et les basophiles • Prostaglandine
Sont les s
principales IL-4,IL-10,IL-12,IL-
sources 5
 Généralités Diagnostic

2/ Rappel sur le tissu lymphoïdes associés au tube

digestif (GALT) :
Les cellules
lymphocytaires :
Les plaques de
payer
Lymphocytes intra-
épithéliums
Lymphocyte de lamina
propria
 Généralités Diagnostic

2/ Mécanisme de l’APLV :
Phase de sensibilisation Phase de déclenchement
2eme
1er Allergène
Sensibilisati
contact
contact Cellules présentatrice Cytokines Synthèse
d’IgE on

Allergène LTh2 LB Plasmocy

te Mastocyt
Barrière intestinal e

Libération
Manifestations des
cliniques médiateurs
inflammatoi
re
 Généralités Diagnostic
Manifestation
clinique :
Manifestation Manifestation
immédiate retardées

Emissio Gonfleme Dermati

Toux
n de nt de la Eczé te
gaz lèvre atopiqu
ma
Eternu e
Vomisse ment Eruptio
ment n
cutané Tou
e Diarrhée x
Choc chroniqu
Urticair anaphy e
e
lactiqu
e
 Généralités Diagnostic
Manifestation
clinique :
Manifestation Manifestation
immédiate retardées

Emissio Gonfleme Dermati

Toux
n de nt de la Eczé te
gaz lèvre atopiqu
ma
Eternu e
Vomisse ment Eruptio
ment n
cutané Tou
e Diarrhée x
Choc chroniqu
Urticair anaphy e
e
lactiqu
e
 Généralités Diagnostic
Manifestation
clinique :
Manifestation Manifestation
immédiate retardées

Emissio Gonfleme Dermati

Toux
n de nt de la Eczé te
gaz lèvre atopiqu
ma
Eternu e
Vomisse ment Eruptio
ment n
cutané Tou
e Diarrhée x
Choc chroniqu
Urticair anaphy e
e
lactiqu
e
 Généralités Diagnostic
Manifestation
clinique :
Manifestation Manifestation
immédiate retardées

Emissio Gonfleme Dermati

Toux
n de nt de la Eczé te
gaz lèvre atopiqu
ma
Eternu e
Vomisse ment Eruptio
ment n
cutané Tou
e Diarrhée x
Choc chroniqu
Urticair anaphy e
e
lactiqu
e
 Généralités Diagnostic
Facteurs de
risque :
Facteurs
Exposition à L’hyperpermiabilit
génétique
l’allergène é
Le trop d’hygiène L’environnement
• Prédispositio Intestinale
n génétique Protéines de Maturité fœtal
• pas lait de vache imparfaite Modification
héréditaire du SI des vaccins Le fœtus peut
intestinale + traitement être exposé
chez ATB aux allergène
l’enfant alimentaire
 Généralités Diagnostic
Evolution de l’APLV
:
L’APLV est de bon
pronostic
Présence d’une APLV dans la petite
enfance
Développement ultérieur d’autre manifestations
allergiques

18% 41% 31%

Autre
allergie Rhinite
Un
alimentai allergiqu
asthme
re e
 Généralités Diagnostic
L’anamnès
e
Tests in vivo :
Test cutanée Test de provocation
 Vont chercher à démontrer la présence d’AC d’un
Allergène dans la peau  Ou (réintroduction)

Prick-test Patch-test  provoquer et reproduire les

o Immédiate o Sont des épicutaneo- symptômes d’allergie.

o MEC les réaction
o Retardée
mastocytes de la
peau Avec un ou
plusieurs Orale Labiale
Il
Allergènes. existe deux types :
 Généralités Diagnostic
Tests in
Tests non
spécifiques
vitro : Tests spécifiques

FNS :
IgE total IgE spécifique Autre
Hyperéosinophilie

 Test de
• Définie par un • Rôle dans • Détermination
dégranulation des
chiffre absolu l’hypersensibilité I quantitative de la
 basophiles
Dosage des
supérieure à • Permet la recherche concentration des
médiateurs
400 els/mm³ terrain atopique IgE produit dans le  Test de stimulation
• N’est qu’ un • Elisa simple sérum humain . cellulaire CAST
élément Sandwich. • s’adresse aux
 Les
d’orientation réactions à immunoempreintes
médiation IgE
 Généralités Diagnostic
Traitement
Traitement: :

régime diététique adapté et strict l'éviction complète du

Lait deUn lait de
vache
formule à
hydrolyse
extensive
Les laits
hypoallergéniques

Les laits à base

d’autres
protéines de lait
animales
 PARTIE
Pratique
 Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

Lieux et date de l’étude :

 Unité d’immunologie du laboratoire
central de biologie du CHU N’FISSA
HAMOUD
 Une étude rétrospective allant du Janvier
2016 à Février 2018

 Une étude prospective allant du 18 février au 26 avril 2018

Evaluer la survenue de l’APLV

Objectifs : chez les enfants Agés < 2ans.

Déterminer le taux d’IgE spécifiques aux

protéines de lait de vache et préciser l’allergène
le plus fréquent.
 Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

Présentation de la population étudiées :

Inclusion Non
 158 enfants inclusion
Les enfants qui
(<2ans) :
Un tableau n’ont pas de fiche
clinique de renseignements
Non Hospitalisés Les enfants ayant
En service de évocateur
hospitalisé des fiches de
pédiatries. d’APLV.
s Une fiche de renseignements
(externes) qui manque des
renseignement
dument remplie . informations utiles
pour notre études.
 Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

Matériel :
Biologique Non Biologique
 Le sérum du 1/
sang des Consommable :
enfants
recueilli par
ponction
veineuse sur
tube sans
anticoagulant.
 Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

Matériel :
Biologique Non Biologique
 Le sérum du 2/
sang des L’équipements :
enfants
recueilli par
ponction
veineuse sur
tube sans
anticoagulant.
 Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

Matériel :
Biologique Non Biologique
 Le sérum du 2/Réactif du
sang des kit :
enfants
recueilli par  Tout ces réactif sont conservé à une T˚=2-
ponction 8˚C.
veineuse sur  Il faut éviter:
tube sans  Une contamination microbienne .
anticoagulant.  Une lumière directe sur la solution de
coloration .
Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

Méthode : Principe et mode Elisa sur

opératoire :
Pré incubation :
immunoblot
45 Préparation de
Diluer le sérum dans le la solution de
min
CCD
1 lavage
Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

Méthode : Principe et mode

opératoire :
Pré incubation : 45 Préparation de
Diluer le sérum dans le la solution de
min
CCD
1 lavage

45
300 ulmin
de sérum dans les 1er incubation
cuvettes
2
Lavage + tapottment
Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

Méthode : Principe et mode

opératoire :
Pré incubation : 45 Préparation de
Diluer le sérum dans le la solution de
min
CCD
1 lavage

45
300 ulmin
de sérum dans les 1er incubation
cuvettes
2
• Remplir les cuvettes de
réaction 3 / 4 fois +
1er Lavage • agitation douce.
Egoutter les cuvettes par
3 simple retournement du
Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

Méthode : Principe et mode

opératoire :
45
2 ème
Incubation min
300 ul de solution de détection
4
Lavage + tapottement
Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

Méthode : Principe et mode

opératoire :
45
2 ème
Incubation min
300 ul de solution de détection
4
Lavage
20
min
300 ul solution de 3ème Incubation
conjugué 5
Lavage + tapottement

4ème Incubation
Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

Méthode : Principe et mode

opératoire :
45
2 ème
Incubation min
300 ul de solution de détection
4
Lavage
20
min
300 ul solution de 3ème Incubation
conjugué 5
Lavage

20
44ème Incubation
Incubation
ème 54
300 ul de substrat
min
6
Séchage
Lavage à l’au de robinet + tapottement
 Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

Evaluation et interprétation :

Traitment
informatique

À l’aide du logiciel MEDIWISS

installé dans l’équipement
informatique relié au scanner
(Improvio C)
Les résultats sont
exprimées

En UI/ml En classes
 Présentation de l’étude Matériels et méthodes Résultats et discussion

1/ Description de la population ciblée :

2/ Selon le test d’IgE
spécifique : Selon le test d’IgE spécifiques

0.405063291
positif 139241
Négatif
0.59493670
8860759

La majorité des patients considéré

comme atteint d’APLV sont
sensibilisé vis-à-vis d’une/ plusieurs
PLV identifiées.
2/ Selon la
positivité : Selon le type d’allergène

35.00%
30.00%
25.00%
20.00%
15.00%
10.00%
5.00%
0.00%
α-lactalbumine β-lactoglobuline Caséine sérum albumine
Allergènes

Nos resultats ne concordent pas avec les

autres etudes (Michel, 2011)
2/ Selon les
allergènes :
Selon le sexe Selon les classes d’âge
90.00% 60.00%
80.00%
50.00%
70.00%
60.00% 40.00%
50.00%
30.00%
40.00%
30.00% 20.00%
20.00%
10.00%
10.00%
0.00% 0.00%
Masculin Féminin [0 - 6] ]6 - 12] ]12 - 18] ]18 - 24]
lait de vache α-laclalbumine β-lactoglobuline caséine
lait de vache α-lactalbumine β-lactoglobuline caséine serum albumine
sérum albumine

Prédominance de la beta-lactoglobuline
[0-6] : béta-lactoglobuline (56,52%)
(86,96%)
]6-12] : L’alpha-lactalbumine (27,12%)
Chez le sexe masculin
Prédominance de L’alpha-lactalbumine ]12-18] : Caséine (21,95%)
(32,20%) ]18-24] : L’alpha-lactalbumine
2/ Selon les
allergènes : Selon les signes cliniques
40.00%
36.54%
34.88%

25.00%
24.42%
21.67% 23.08%
19.77%
18.33%

13.33% 12.79%
9.62%
8.14%
6.67% 5.77%

Digestives Respiratoires Cutanés

Lait de vache α-lactalbumine β-lactoglobuline caséine serum albumine

l’alpha-lactalbumine est l’allergéne le plus responsable

de l’apparition de toutes les signes cliniques dont les
signes digestives sont les plus fréquent.
 Selon les ATCD familiaux Selon les ATCD personnels
70.00%

60.00%
Resiratoire 0.12765957
50.00% 4468085

40.00% Alimentaire
30.00% 25.53% 0.5212765957
4468

20.00%
Respiratoire/Al- 0.1914893617
02128
imentaire
10.00%

0.00% Pas d'ATCD 0.1595744680

85107
ATCD Familiaux Personnelle
Parents Fratrie parents/Fratrie
Pas d'ATCD

Nos résultats concordent avec l’etudes Les plus prédominants sont les ATCD
(Matarazro, et al., 1998)(Navarro, et alimentaires
al., 1987)
 Selon d’autres allergènes
F24 (crevette)
F13 (arachide) 6%
6% D1
F10 (sésame) (Derm,petron)
6% 26%

F1 (Blan d'œuf)
15%

D2 (Derm,farine)
T23 (cypréne) 18%
6%
F14 (soja)
9% F75 (jaune d'œuf)
9%

Nos résultats concordent avec (Holgate-Church,

1995)
 Selon les années

43.30%

29.90%
23.71%

3.09%
2015 2016 2017 2018

La fréquence de l’APLV est de plus en

plus en augmentation
(Rancé F, et al., 2000)
 CONCLUSION
 Notre étude confirme la fréquence de l'APLV chez les enfants âgés de moins de
deux ans, Particulièrement chez ceux qui ont des antécédents familiaux
d'atopie. Elle est la première à apparaitre dès les premiers mois de la vie, où le
lait constitue l'aliment de base de tous les nouveau-nés.
 L'APLV s'exprime cliniquement par des manifestations très variable
implique donc un diagnostic particulier basé sur les tests cutanés et le test d’IgE
spécifiques, qui est indispensable dans le suivi de cette allergie .
 L'allergène le plus fréquent et le plus évocateur de l'APLV chez la population
infantiles de base âge est l'α-lactalbumine.

 En effet, L'enfant atteint d'APLV peut être allergique à deux, voire à plusieurs
allergènes.
 Enfin, l'allaitement maternel reste nécessaire afin de différer l'introduction des
laits artificiels mis en cause de cette affection.
 Merci pour
votre attention
MINISTERE DE LA SANTE, DE LA POPULATION ET DE LA REFORME HOSPITALIERE

INSTITUT NATIONALE DE FORMATION SUPERIEUR

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Option : Laborantine de santé publique

Le dosage d’IgE spécifiques aux protéines du lait de

vache chez les enfants Agés de moins de deux ans :
Technique de détection et allergène le plus
fréquent.

Elaboré par : Dirigé par :

 Benkhelifa yousra Dr. Benyahia Amel
 Bouderba mayssa

Promotion 2015-2018