Institut Supérieur des Sciences Biologiques

Appliquées de Tunis

MASTERE EN : Technologies du Vivant et de l’Environnement

Parcours : Génie de l’Environnement

Optimisation de la production de laitue de la

variété Augusta, Espèce Lactuca sativa dans un
système aquaponique
Membres du jury Réalisé par :Soukaina Sélmi
Président du jury : Dr Ichrak BEN REJAB
Examinateur: Dr Issam NOUAIRI
Encadreur: Dr Wided BEN AMMAR
Co-Encadreur: Mr Mohamed
HAMMAMI 1
 Plan

Introduction

Matériel et méthodes

Résultats et discussion
Conclusions et perspectives
Définition de
l’aquaponie
« Aquaponie »
« aquaculture » « hydroponie »
Nitrosomon
as Sp

Nitrobacter
Sp
Impacts de l’aquaponie sur l’environnement
Les différents types des systèmes aquaponique

 Il s’agit de trois type de système d’aquaponie:

-Le lit de culture en eau profonde (DWC )

-La technique du film nutritif (NFT)

- Le lit de média (Media bed)

Le lit de culture en eau profonde (DWC )
La technique du film nutritif (NFT)
Le lit de média (Media bed)
Introduction

Matériels et méthodes

Résultats et discussion
Conclusions et perspectives

11
Germination
- désinfection à l’eau de javel 10%
pendant 10 minutes
- Rinçage
- Ensemencement dans les boites de
Petri
- 10 jours a l'obscurité + température
Repiquage
20°C

-Repiquage des plantules sur un milieu

hydrique contenant une solution
nutritive

-Repiquage sur l'unité d’aquaponie

Mesure des paramètres
physicochimique

À laide de ce multi paramètres,

on a mesuré :
-pH

-Température

-taux d’oxygéne
Multi paramètre de type «Multi 350i/SET»
Analyse des formes d’azote et de
phosphate

L'analyse des formes d’azote et

de phosphate était réalisée par
Spectrophotomètre par
l’utilisation des kites.

Spectrophotomètre de type «WTW photolabSpektral 280025»

L’analyse bactérienne : Les bactéries
pathogènes

- Dénombrement des micro-organismes en milieu liquide (NPP)

milieu de ROTHE
une incubation à 37 °C / 48h
streptocoques fécaux
le milieu LITSKY
une incubation à 37 °C / 48h

milieu de bouillon de lactose au pourpre de bromocrésol (blbp)

une incubation à 37 °C / 48h

coliformes totaux
bouillon lactose au vert brillant et à la bile (BLBVB)
une incubation à 37 °C / 48h
L’analyse bactérienne : Les bactéries
nitrifiantes Composition du milieu

Eau distillée
(NH4)2S04
NaN02
MgSO4 .7H20
- le dénombrement des bactéries nitrifiantes (MPN) CaCl2·2H20
K2HPO4
-L’incubation à 38 °C pendant un mois à 4 mois Chelatediron(13%)
Na2MoO4.2H2O
MnCI2.4H20
CoCI2·6H20
CuSO4 . 5H20
ZnSO4 . 7H20
Phenol red
(0,04%)
Analyses des échantillons

matière sèche (MS):

60°C dans une étuve pendant une semaine

matière Frêche (MF):

-fixés à l’état frais dans l’azote liquide

- stockés à -80°C.
Analyses des paramètres de
photosynthèse

Dosage des chlorophylles et des caroténoïdes

Extraction :

Matière Frêche
5ml d’acétone 80%.
Conservés à 4°C à l’obscurité

Dosage :
Des lectures des DO aux longueurs d’ondes à l’aide d’un
spectrophotomètre UV visible

Mesure des échanges gazeux :

L’assimilation nette de CO2 (A), la conductance stomatique (gs) et la
transpiration (E) ont été déterminées à l’aide d’un analyseur de gaz infrarouge,
Analyses biochimiques

Analyse des teneurs en sucres solubles :

Extraction :
Analyse des teneurs en protéines :
L’extraction
Une masse de était réaliser
matière à partir
lyophilisé de la matière
(correspond à 300sèche
mg deselon la
matière fraiche)
méthode de Yemm et Willis (1954)

Dosage :
Extraction :
Le dosage était réaliséer en utilisant une gamme étalon
- broyage dans l’azote liquide
d’Anthrone Sulfurique à 640nm. à l’aide d’un
- 1ml de tampon d’extraction
spectrophotomètre UV visible
- Centrifugation à 14000 rpm (30 min à 4°C)
Dosage :
Le dosage a été effectué selon la méthode de Bradford
(1976) à 595 nm. à l’aide d’un spectrophotomètre UV
visible (AUTO CELL UVS-2700).
Analyses biochimiques

Analyse des teneurs en lipides totaux :

Extraction :
L’extraction des lipides totaux des feuilles et des racines a été
effectuer selon la méthode de Bligh et Dyer (1959)

Analyse des acides gras :

La méthylation des acides gras des lipides totaux s’est
effectués par la technique de Metcalfe et al. (1966)

Les esters méthyliques sont dosé par CPG

Introduction

Matériels et méthodes

Résultats et discussion
Conclusions et perspectives

20
Etude physico-chimique des différents systèmes
d’aquaponie
8 8
MEDIA BED NFT DWC MEDIA BED NFT DWC
7

7 6

4
6

pH
3

2
5
1
Taux d'oxygéne en mg/L

0
19 avril 24 avril 29 avril 4 mai 9 mai 14 mai 20 mai 24 mai 29 mai
4
30

MEDIA BED NFT DWC

3 25

Temperature en °c
20
2
15

1 10

0
19 24 29 4 9 14 20 24 29 0
avril avril avril mai mai mai mai mai mai 19 avril 24 avril 29 avril 4 mai 9 mai 14 mai 20 mai 24 mai 29 mai
L’analyse microbiologique
Bactéries nitrifiantes

La concentration La concentration
Le type du des bactéries des bactéries
système oxydantes de oxydantes des
l'ammoniac (AOB) nitrites (NOB) par
par 100 mL 100 mL

DWC 3,5 .103 1,1 .104

MEDIA BED 1,1 .103 0,62 .103

NFT 2 .102 2,8 .103

La faible concentration des AOB enregistrée au niveau du

système NFT est due à la faible concentration d'oxygéne
 fécaux
coliformes
Bactéries pathogènes

système

système

Concentration en
Concentration en

100 ml d'échantillon
100 ml d'échantillon

micro-organismes par
micro-organismes par

l'unité de l'unité de
4,3

pisciculture
0,92
pisciculture

biofiltre
0,92
DWC

biofiltre
0,92
DWC

l'unité
4,3

d'hydroponie
l'unité
2,3

d'hydroponie
l'unité de
0,93

pisciculture
l'unité de
0

pisciculture l'unité
15
Media Bed

d'hydroponie
l'unité
Media Bed

9,3

d'hydroponie l'unité de
0,23

pisciculture
l'unité de
1,1

biofiltre
9,3
NFT

pisciculture
NFT

l'unité
9,3

biofiltre
1,5

d'hydroponie
L’analyse des différentes formes d’azote et de phosphate
 DWC Media Bed NFT

hydroponique

hydroponique
hydroponique
pisciculture

pisciculture
pisciculture
l'unité de

l'unité de
l'unité de
biofiltre

biofiltre
système

l'unité

l'unité
l'unité
Concentration de
0,825 0,38 0,113 0,36 0,113 0,55 0,55 0,113
l'ammonium en mg par litre
Concentration de nitrite en
0,285 0,34 0,16 0,485 0,16 0,59 0,39 0,16
mg par litre
Concentration de nitrate en
3,65 3,95 4,65 3,45 4,65 3 3,2 4,65
mg par litre
Concentration de phosphate
0,27 0,33 0,34 0,39 0,34 0,39 0,58 0,34
en mg par litre
Etude de la croissance feuilles jeunes

la masse de la matière sèche

La croissance de la partie végétative des

(g)
laitues cultivées dans le système DWC
était la plus élevée

DWC MEDIA BED NFT

0.18

0.16
Racine feuilles âgées

La masse de la matière sèche

La masse de la matière sèche (g)

0.14

0.12

0.1

0.08

(g)
0.06

0.04

0.02

0 DWC MEDIA NFT

DWC MEDIA NFT
BED BED
 L’état hydrique 91

90
feuilles jeunes
89

Teneur en eau (g/MF)

88

Les laitues étaient bien hydrater ce qui indique que 87

les trois types de milieux de culture ne sont pas 86

hypertoniques 85

84

83

82

81
DWC MEDIA NFT
BED

94
92
feuilles âgées
93
Racine 90

92
88
91

teneur d'eau (g/MF)

Teneur d'eau (g/MF)

90 86

89
84
88

87 82

86
80
85

84 78
DWC MEDIA NFT DWC MEDIA NFT
BED BED
Effet des différents systèmes d’aquaponie sur l’Activité
photosynthétique
 3.5 0.6
feuilles jeunes feuilles jeunes 2 feuilles jeunes

Teneur de chl" b"(mg/g MF)

Teneur du caroténoide (mg/g MF)

3 0.5 1.8
Teneur de chl" a" (mg/g MF)

1.6
2.5
0.4 1.4

2 1.2
0.3 1
1.5 0.8
0.2 0.6
1
0.4

0.5 0.1 0.2

0
DWC MEDIA BED NFT
0 0
DWC MEDIA BED NFT DWC MEDIA BED NFT

Teneurs en chlorophylle a Teneurs en chlorophylle b Caroténoïdes

0.5
3.5
feuilles âgées feuilles âgées 1.4 feuilles âgées
Teneur de chl" b"(mg/g MF)
0.45

Teneur du caroténoide (mg/g MF)

3 1.2
0.4
Teneur de chl" a" (mg/g MF)

2.5 0.35 1

0.3
2 0.8
0.25
0.6
1.5 0.2

0.15 0.4
1
0.1 0.2
0.5
0.05
0
DWC MEDIA BED NFT
0 0
DWC MEDIA BED NFT DWC MEDIA BED NFT
 3
Feuilles 1.6
Feuilles
0.18
Feuilles
jeunes

Conductance stomatique (1 mol H2O/m-

jeunes 1.4 jeunes 0.16

assimilation de CO2 (umol H2O/m-2.S-1)

2.5
Echanges gazeux (1 mmol H2O/m-2.S-1)

0.14
1.2

2 0.12
1
0.1

2.S-1)
1.5 0.8
0.08

0.6 0.06
1

0.4 0.04

0.5
0.2 0.02

0
0 0 DWC MEDIA BED NFT
DWC MEDIA BED NFT DWC MEDIA BED NFT

3 Echange gazeux 1
Assimilation de CO2 Conductance
0.12
stomatique
Feuilles 0.9 Feuilles Feuilles
âgées âgées âgées

Conductance stomatique (1 mol H2O/m-

2.5 0.1

assimilation de CO2 (umol H2O/m-2.S-1)

L'échange gazeux (1 mmol H2O/m-2.S-1)

0.8

0.7
2 0.08
0.6

1.5 0.5 0.06

2.S-1)
0.4
1 0.04
0.3

0.2
0.5 0.02
0.1

0 0 0
DWC MEDIA BED NFT DWC MEDIA BED NFT DWC MEDIA BED NFT
Effet des différents systèmes d’aquaponie sur l’activité
métabolique de la laitue
Sucre 25
feuilles jeunes

teneur de sucre ug/g MS

20

15

10
16
Racine 5
14

12 0
Teneurs en sucres ug/gMS

DWC MEDIA BED NFT

10

8
25

6
feuilles âgées
4 20

teneur de sucre ug/gMS

2
15
0
DWC MEDIA BED NFT
10

0
DWC MEDIA NFT
BED
protéine 12
feuilles jeunes

Teneur de proteine ug/gMF

10

1.95 4
Racine
Teneur de proteine ug/gMF

1.9
1.85 2
1.8
1.75 0
1.7 DWC MEDIA BED NFT

1.65
6
1.6 feuilles âgées
1.55

Teneur de proteine ug/gMF

5
1.5
1.45
DWC MEDIA BED NFT 4

0
DWC MEDIA BED NFT
 250
Lipide
feuilles jeunes

teneur de lipide (mg/gMS)

200

150

100
120
Racine 50
teneur de lipide( mg/gMS)

100

80 0
DWC MEDIA BED NFT

60

140
40 feuilles âgées
120

teneur de lipide (mg/gMS)

20
100
0
DWC MEDIA BED NFT
80

60

40

20

0
DWC MEDIA BED NFT
Introduction

Matériels et méthodes

Résultats et discussion
Conclusions et perspectives

37
 le système DWC était le système le plus performant ,Ceci était l’éffet de:

La présence des paramètres physicochimique (oxygène, pH, température) adéquats

une concentration importante des rejets ammoniacal et des bactéries nitrifiante

une concentration considérable de l’azote assimilable par les laitues

En perspective, on compte :

 changer la nature du substrat du système Media Bed

 Pour le système NFT, on se propose d’analyser les

molécules marqueurs de stress(les DPPH) ainsi que les
protéines de stress pour les plantules cultivés sur cette
même composition du système NFT

 On se propose également pour ce même système (NFT)

de bien adopter le volume de la solution nutritive au
nombre de plantes cultivées pour le système NFT.
MERCI POUR VOTRE
ATTENTION