ENCAPSULATION MICROBIENNE :

UNE APPROCHE POUR

AMÉLIORER L'EFFICACITÉ DE LA
DIGESTION ANAÉROBIE
MODULE : INTENSIFICATION DES
PROCÈDES
MASTER 2 GÉNIE DES PROCÈDES
PAR:
• BOUAZZA BOUTHEINA
• KAREB MANEL
 Introduction
L'ENCAPSULATION MICROBIENNE CONSISTE À PROTÉGER LES INOCULANT MICROBIENS

(MICROORGANISMES UTILISÉS POUR DÉMARRER LE PROCESSUS DE DIGESTION) EN LES ENCAPSULANT

DANS UNE MATRICE PROTECTRICE, CE QUI AIDE À LES PROTÉGER DES CONDITIONS

ENVIRONNEMENTALES DIFFICILES ET À AMÉLIORER LEUR SURVIE ET LEUR ACTIVITÉ.

LA DIGESTION ANAÉROBIE EST UN PROCESSUS OÙ DES MICROORGANISMES DÉCOMPOSENT LA

MATIÈRE ORGANIQUE EN L'ABSENCE D'OXYGÈNE, PRODUISANT DU BIOGAZ (PRINCIPALEMENT DU

MÉTHANE) ET RÉDUISANT LES SOLIDES VOLATILS DANS LES BOUES. AMÉLIORER CE PROCESSUS PEUT

CONDUIRE À UNE PRODUCTION DE BIOGAZ PLUS EFFICACE ET À UNE MEILLEURE GESTION DES

DÉCHETS.

LA TECHNIQUE D'ENCAPSULATION VISE À PROTÉGER LES MICROBES POUR QU'ILS RESTENT ACTIFS ET

EFFICACES, À AMÉLIORER LA STABILITÉ EN FOURNISSANT UN ENVIRONNEMENT CONTRÔLÉ, ET À

AUGMENTER L'EFFICACITÉ GLOBALE DE LA PRODUCTION DE BIOGAZ EN OPTIMISANT L'ACTIVITÉ

MICROBIENNE.
 C’est Quoi Bio
encapsulation
o La méthode d'encapsulation consiste à couvrir et protéger les micro-
organismes.
o Depuis 1993, la méthode d'encapsulation a été utilisée comme une
technologie alternative à l'enfermement, offrant l'avantage d'une charge
cellulaire plus élevée et sans fuite de cellules. Piégés dans une
o matrice
La bio-encapsulation des micro-organismes est réalisée par l'incorporation
d'une suspension d'ingrédient actif dans une matrice, suivie d'une opération
mécanique, puis stabilisation par un processus chimique ou physico-
chimique.
o Les suspensions sont des fluides non-Newtoniens.
Piégés dans des
o Les substrats et les produits diffusent facilement à travers la matrice gélifiée. gouttelettes
 Bio-encapsulation: Applications

Agriculture Industrie
pharmaceutique

Industries
agroalimentaires Industrie chimique
et laitières
 Techniques de bioencapsulation
- L'encapsulation désigne un processus physico-chimique ou mécanique visant à
piéger une substance dans un matériau afin de produire des particules/capsules/billes
de la taille souhaitée.
- La sélection de la meilleure technologie d'encapsulation doit prendre en compte de
nombreux aspects pour garantir la survie des bactéries.
- L'encapsulation est réalisée en utilisant plusieurs techniques telles que la
coacervation, l'émulsion/polymérisation interfaciale, etc.

Bio encapsulation

sécheur Refroidissement par Formation de

Coacervation gouttelettes de
par atomisation liquide
pulvérisation

Techniques Agglomération en
à base d'émulsion lit fluidisé
 Sécheur par pulvérisation (Spray-Drying)
- Technique couramment utilisée pour
la production d'ingrédients
alimentaires.
- Le premier sécheur par pulvérisation a
été construit en 1878, utilisé pour la
première fois pour encapsuler un
arôme.
- L'ingrédient actif est dissous dans
l'agent encapsulant.
- La solution obtenue est séchée,
fournissant une barrière contre
l'oxygène et les agents agressifs.

Représentation schématique de la
technique de séchage par
pulvérisation pour l'encapsulation
des bactéries
 Agglomération et enrobage en lit fluidisé

 Évolué à partir d'une série d'inventions brevetées

par le Dr. Wurster et ses collègues.
 Ces brevets sont basés sur l'utilisation d'air fluidisé
pour assurer une circulation uniforme des particules
devant une buse de pulvérisation.

Air distribution
plate

 Les techniques les plus utilisées

sont appelées le procédé en lit
fluidisé à pulvérisation par le
Bactérie
bas (Wurster) et le procédé en s
enrobée
lit fluidisé à pulvérisation par le s
Bactéries en
haut. cours
 Cependant, des variations telles d'enrobage

que la pulvérisation tangentielle

sont également pratiquées.

Diagrammes schématiques des deux types de coaters à lit fluidisé les plus couramment utilisés
 Refroidissement par pulvérisation / Refroidissement
par atomisation
 Ce processus est similaire au séchage par pulvérisation.
 Dans ce cas, une matrice fondue avec un point de fusion bas est utilisée pour encapsuler
les bactéries.
 Le mélange est injecté dans un courant d'air froid.
 Les capsules produites de cette manière ne sont généralement pas solubles dans l'eau.

Schéma de principe d’un procédé d’encapsulation par pulvérisation-refroidissement

 Techniques à base d'émulsion
 Une émulsion est la dispersion de
deux liquides non miscibles en
présence d'un composé stabilisant.
 Les émulsions sont produites par
l'ajout de la phase centrale à un
excès vigoureusement agité de la
deuxième phase qui contient
l'émulsifiant.

Schéma du processus d'encapsulation basé sur l'émulsion

A
 Lorsqu'une phase centrale hydrophobe est
appelée une émulsion huile-dans-eau (h/e)
(fig. A). B
 Quand la phase centrale est aqueuse, on parle
alors d'une émulsion eau-dans-huile (e/h) (fig.
B). C
 Il existe également des doubles émulsions,
telles que eau-dans-huile-dans-eau (e/h/e)
(fig. C).
IMAGE SCHÉMATIQUE DE LA TECHNIQUE D'ÉMULSIFICATION POUR
L'ENCAPSULATION BACTÉRIENNE
 Coacervation
 Ce processus implique la précipitation d'un polymère ou de plusieurs polymères par
séparation de phase par coacervation simple ou complexe, respectivement.
 Lors de la coacervation simple, le polymère est «salé» par l'ajout d'agents ayant une
affinité plus élevée pour l'eau que le polymère.

 En ce qui concerne la coacervation

complexe, deux colloïdes sont
mélangés à un pH auquel les deux
polymères sont chargés de manière
opposée (c'est-à-dire gélatine (+) et
gomme arabique (-)), conduisant à
une séparation de phase et à la
formation de particules solides ou de
gouttelettes liquides encapsulées.
Schéma du processus d'encapsulation par coacervation
 Formation de gouttelettes liquides

 Cela inclut deux étapes principales :

1.la phase interne, contenant les inoculant, est dispersée en petites gouttelettes,
2.puis ces gouttelettes se solidifient par gélification ou formation d'une membrane à leur
surface.
 Différentes technologies sont disponibles pour le gouttage, et le choix de la meilleure
technologie dépend de la taille souhaitée, de la taille de dispersion acceptable, de l'échelle
de production et de la contrainte maximale que les cellules peuvent tolérer.

Méthodes
de
gouttage

Génératio
n de Jet
gouttelett Breakage
es

Mécanism
Par Flux Méthode
e
gravité coaxial de coupe
vibratoire
 Matrices sont utilisées pour
l'encapsulation

 Les hydrogels extraits des algues, tels que les alginates, l'agar-agar, le
carraghénane et l'agarose, sont utilisés pour la polymérisation ou la
réticulation.

 De plus, certains polymères synthétiques ont été utilisés pour la bio-

encapsulation des cellules vivantes, tels que le polyacrylamide, le
polystyrène et le polyuréthane.
 Le gel de polyacrylamide a été le premier matériau de matrice utilisé
pour immobiliser les cellules.

 Les gommes et les protéines sont fréquemment utilisées comme

matériaux protecteurs pour les cellules, bien qu'elles soient
généralement plus coûteuses.
 L'alginate de sodium est l'un des produits les plus utilisés pour la bio-
encapsulation des microorganismes.
 Acide Alginique (Alginate)
 L'alginate est un polysaccharide naturel produit par les algues
brunes.
 Il a été isolé et nommé pour la première fois par le scientifique
écossais Dr. C.C. Stanford en 1883 et depuis lors, il est utilisé comme
hydrocolloïde dans diverses applications.
 La production d'alginate n'est pas seulement exclusive aux algues
marines ; en effet, certaines bactéries sont capables de produire de
l'alginate extracellulaire (Azotobacter vinelandii, Pseudomonas spp.).
 Les alginates sont des macromolécules linéaires comprenant deux
monomères liés par une liaison alpha 1-4 : l'acide β-D-mannuronique
et l'acide α-L-guluronique.
Azotobacter vinelandii
 Matrices couramment utilisées pour l'encapsulation
CHITOSANE

 C'EST UN DÉRIVÉ DÉACÉTYLÉ DE LA CHITINE, UN POLYMÈRE CHARGÉ POSITIVEMENT QUI FORME DES HYDROGELS IONIQUES PAR
ADDITION D'ANIONS.

 LE CHITOSANE EST BIODÉGRADABLE ET BIOCOMPATIBLE, MAIS IL EST NÉCESSAIRE DE PRENDRE EN COMPTE L'ACTIVITÉ
ANTIBACTÉRIENNE DE CE POLYMÈRE.

CARRAGHÉNANES

 LES CARRAGHÉNANES SONT DES POLYSACCHARIDES SULFATÉS OBTENUS À PARTIR DE DIFFÉRENTES ESPÈCES D'ALGUES ROUGES
MARINES.

 ILS SONT LARGEMENT UTILISÉS COMME AGENTS ÉPAISSISSANTS, GÉLIFIANTS, AMÉLIORATEURS DE TEXTURE OU STABILISANTS DANS LES
FORMULATIONS ALIMENTAIRES, PHARMACEUTIQUES ET COSMÉTIQUES.

AMIDON

 LES BACTÉRIES PEUVENT ÊTRE ENCAPSULÉES PAR ADHÉSION AUX GRANULES D'AMIDON.

 HABITUELLEMENT, L'AMIDON MODIFIÉ CHIMIQUEMENT (MALTODEXTRINE OU CYCLODEXTRINE) EST UTILISÉ POUR L'ENCAPSULATION
EN COMBINAISON AVEC LA TECHNOLOGIE DE SÉCHAGE PAR PULVÉRISATION ET LA GRANULATION EN LIT FLUIDISÉ.

GOMME DE GELLANE

 ELLE EST PRODUITE PAR FERMENTATION AÉROBIE PAR UNE CULTURE PURE DE PSEUDOMONAS ELODEA.

 UN INCONVÉNIENT EST QU'ELLE A UNE TEMPÉRATURE DE GÉLIFICATION ÉLEVÉE (80-90°C PENDANT ENVIRON 1 HEURE), CE QUI PEUT
ENTRAÎNER DES DOMMAGES THERMIQUES AUX CELLULES.
 Bio-encapsulation: Applications
o Industrie Alimentaire : Utilisée pour protéger les probiotiques,
les enzymes, les vitamines, et les arômes, assurant leur stabilité
et libération contrôlée dans les produits alimentaires. Par

Industries exemple, l'encapsulation des probiotiques dans des matrices

agroalimentaires et
laitières d'alginate pour améliorer leur viabilité dans les produits laitiers.

o Pharmaceutiques : Encapsulation de médicaments pour

améliorer leur biodisponibilité, cibler des tissus
spécifiques, et réduire les effets secondaires. Un
exemple est l'utilisation de nanoparticules de PLGA
pour la libération contrôlée de médicaments
Industrie
anticancéreux
pharmaceutique
 Bio-encapsulation: Applications

Dispositifs Médicaux :
o Application dans l'ingénierie tissulaire, les
systèmes de libération de médicaments, et les
matériaux de cicatrisation.
o Les hydrogels à base de chitosane sont utilisés
pour la cicatrisation des plaies en raison de
leurs propriétés biocompatibles et
antibactériennes.
 Bio-encapsulation:Avantages
₪ Obtenez une protection temporaire contre tout changement potentiellement

dégénératif

₪ .Favorisez une charge cellulaire localisée plus élevée.

₪ Empêche les taux de dilution élevés.

₪ Empêche le lavage de l'inoculum en raison du chargement continu du substrat et de

l'élimination de l'effluent.

₪ La nature dégradable des hydrogels offre un mécanisme de libération continue lente.

₪ Plus facile de séparer les produits et les réactifs.

₪ Aucune purification supplémentaire n'est requise car il n'y a pas de contamination

par les cellules dans le produit.

 Bioencapsulation: Défis
₪ Peut altérer l'activité de certaines cellules.

₪ Certaines enzymes sécrétées par les cellules deviennent instables.

₪ Parfois, compromet la viabilité des cellules en raison de la chaleur générée lors de la

préparation.

₪ Forme un dépôt dans les tissus ou les muscles pendant une période prolongée, ce qui

peut entraîner des douleurs après usage médical.

₪ Le polymère peut produire des effets toxiques

₪ .Coûteux.
 AVANCÉES RÉCENTES

TECHNIQUES DE NANOENCAPSULATION :
• POUR AMÉLIORER LA LIVRAISON ET L'EFFICACITÉ DES COMPOSÉS BIOACTIFS.

• LES NANOPARTICULES OFFRENT UNE PLUS GRANDE SURFACE ET DES PROPRIÉTÉS UNIQUES

QUI PEUVENT AMÉLIORER LA STABILITÉ ET LA LIBÉRATION DES COMPOSÉS ENCAPSULÉS.

POLYMÈRES INTELLIGENTS :

DÉVELOPPEMENT DE POLYMÈRES RÉACTIFS AUX STIMULI QUI PEUVENT LIBÉRER LEUR

CONTENU EN RÉPONSE À DES DÉCLENCHEURS SPÉCIFIQUES, TELS QUE LE PH, LA
TEMPÉRATURE OU LES ENZYMES.

CES POLYMÈRES PERMETTENT UNE LIBÉRATION CONTRÔLÉE PLUS PRÉCISE ET CIBLÉE.

 DIRECTIONS FUTURES

SYSTÈMES DE LIVRAISON AMÉLIORÉS :

• RECHERCHE DE NOUVEAUX MATÉRIAUX ET MÉTHODES POUR AMÉLIORER L'EFFICACITÉ DE LA

LIVRAISON ET LE CIBLAGE DES COMPOSÉS ENCAPSULÉS.

• L'INTÉGRATION DE LA BIOTECHNOLOGIE ET DE LA NANOTECHNOLOGIE OUVRE DE NOUVELLES

PERSPECTIVES POUR DES SYSTÈMES DE LIVRAISON PLUS PERFORMANTS.

APPLICATIONS BIOTECHNOLOGIQUES :

• EXPLORATION DE LA BIO-ENCAPSULATION POUR DES APPLICATIONS ENVIRONNEMENTALES,

TELLES QUE LA BIOREMÉDIATION ET LES BIOSENSEURS.

• LA CAPACITÉ D'ENCAPSULER DES MICROORGANISMES ET DES ENZYMES PEUT ÊTRE UTILISÉE

POUR DÉGRADER DES POLLUANTS ET DÉTECTER DES SUBSTANCES NOCIVES DANS

L'ENVIRONNEMENT.
 ÉTUDES DE CAS

ENCAPSULATION PROBIOTIQUE :

• UNE ÉTUDE DÉTAILLÉE SUR L'ENCAPSULATION DES PROBIOTIQUES DANS DES BILLES
D'ALGINATE POUR AMÉLIORER LEUR VIABILITÉ ET LEUR STABILITÉ DANS LES PRODUITS
LAITIERS.

• LES RÉSULTATS MONTRENT UNE AUGMENTATION SIGNIFICATIVE DE LA SURVIE DES

PROBIOTIQUES DANS DES CONDITIONS DE STOCKAGE PROLONGÉES.

SYSTÈMES DE LIBÉRATION DE MÉDICAMENTS :

• UNE ÉTUDE DE CAS SUR L'UTILISATION DE NANOPARTICULES DE PLGA POUR LA

LIBÉRATION CONTRÔLÉE DE MÉDICAMENTS ANTICANCÉREUX, METTANT EN ÉVIDENCE
L'AMÉLIORATION DES RÉSULTATS THÉRAPEUTIQUES.

• LES NANOPARTICULES OFFRENT UNE LIBÉRATION PROLONGÉE DES MÉDICAMENTS,

RÉDUISANT AINSI LA FRÉQUENCE DES DOSAGES ET LES EFFETS SECONDAIRES.
 CONCLUSION
₪ Depuis la révolution industrielle, il y a eu des progrès majeurs dans l'agriculture, la
fabrication, le transport et surtout l'industrialisation mondiale.
₪ Au cours des dernières décennies, le début de cette urbanisation rapide a conduit à une
augmentation de la demande en énergie.
₪ Une augmentation de la production de déchets est également l'une des conséquences
de la modernisation du monde.
₪ Depuis quelques années, l'élimination des déchets et la consommation accrue d'énergie
sont devenues un problème considérable.
₪ La digestion anaérobie joue un rôle important pour surmonter ces deux problèmes.
Étant donné que les anaérobies sont très sensibles aux changements environnementaux,
la technologie de la digestion anaérobie doit être modifiée.
₪ En encapsulant les anaérobies, nous pouvons éviter les chocs environnementaux
soudains pour les bactéries.
₪ Diverses recherches ont été menées pour encapsuler les bactéries anaérobies et elles
ont également été couronnées de succès.
₪ Cependant, des modifications supplémentaires devraient être apportées pour améliorer
la digestion anaérobie et obtenir "une Terre propre et verte".