LES MILIEUX D’ISOLEMENT DES COQUES GRAM +
La gélose trypticase soja
Composition
Peptone trypsique de caséine 15 g Source de C et N
Peptone papaïnique de soja 5g
Chlorure de sodium 5g Source minérale
Agar (gélose) 15 g
ED qsp 1 L
pH = 7,2
Milieu d’isolement riche qui convient à tous les microorganismes exigeants
La gélose COLUMBIA
Composition
Mélange de peptones 23 g Source de C et N
Amidon 1g Source glucidique de C
Chlorure de sodium 5g Source minérale
Agar (gélose) 15 g
ED qsp 1 L
pH = 7,1
Milieu d’isolement , servant de base pour la préparation
des géloses au sang.
Gélose riche qui peut être additionnée de nombreux
suppléments, et la rendre sélective à certains groupes
bactériens.
La gélose au sang frais
Composition
Base trypticase soja, Columbia
Peptones riches en acides aminés et vitamines
Amidon
NaCl
agar
A ce milieu de base, il faut ajouter 5% de sang frais de mouton ou de
chevald’isolement
Milieu défibriné etriche
stérile
qui convient à tous les microorganismes exigeants
ou non. Il permet aussi une orientation en fonction du caractère hémolytique
pour les streptocoques
Préparation du milieu
Pipette Pasteur
stérile
Couler par-dessus les
Déposer le volume de sang gouttes de sang la gélose
nécessaire en faisant des en surfusion à 45°C
gouttes séparées dans le Homogénéiser en faisant
fond de la boîte de pétri. des petits cercles
concentriques.
La gélose BEA (bile – esculine – azide de sodium)
Composition Source de C et N
Peptone 20 g Source de C, N, vitamines et
Extrait de levure 5g minéraux
Bile de boeuf 10 g Inhibiteur de croissance
Chlorure de sodium 5g
Citrate de sodium 1g
Esculine 1g Source glucidique
Citrate de fer ammoniacal 0,5 g Ind des produits d’hydrolyse
Azide de sodium 0,25 g de l’esculine
Agar (gélose) 13,5 g
ED qsp 1 L
Inhibiteur de croissance
pH = 7,1
Milieu d’isolement simple, sélectif et d’orientation
L’azide de sodium empêche la croissance des bactéries Gram
– et de tous les streptocoques sauf ceux du groupe D.
La bile inhibe les bactéries Gram + sauf les streptocoques du
groupe D.
L’azide de sodium et la bile sélectionnent la culture des
entérocoques et des streptocoques du groupe D.
Colonies d’ascpect variable, sans
Lecture noircissment du milieu:
ESCULINE –
Orientation vers d’autres germes
différents des Streptococcus D
Petites colonies
translucides entourées
d’un halo noir:
ESCULINE +
Orientation vers les
Streotococcus D dont fait
partie le genre
Enterococcus.
Lecture
Halo clair (éclaircissement autour
des colonies)
Hémolyse totale des globules
rouges : HEMOLYSE β
Halo verdâtre autour des colonies
Hémolyse partielle des globules
Milieu inchangé autour des rouges : HEMOLYSE α
colonies
Absence d’hémolyse.
