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Principe Gram

La coloration de GRAM permet de distinguer les bactéries à GRAM + qui apparaissent violettes des bactéries à GRAM - qui apparaissent roses en fonction de la nature de leur paroi. Le procédé utilise successivement un colorant violet, un mordant, de l'alcool comme décolorant et un colorant rose pour contre-colorer.

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La coloration de GRAM permet de distinguer les bactéries à GRAM + qui apparaissent violettes des bactéries à GRAM - qui apparaissent roses en fonction de la nature de leur paroi. Le procédé utilise successivement un colorant violet, un mordant, de l'alcool comme décolorant et un colorant rose pour contre-colorer.

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PRINCIPE DE LA COLORATION DE GRAM

La coloration de GRAM permet de distinguer 2 grands groupes de bactéries qui se


différencient par la nature de leur PAROI :

- les bactéries à GRAM – qui apparaissent ROSES

- les bactéries à GRAM + qui apparaissent VIOLETTES

Cette coloration permet de renseigner sur :

- le type GRAM + ou GRAM –

- la FORME des bactéries

- leur TAILLE

- leur MODE DE REGROUPEMENT


PRINCIPE DE LA COLORATION DE GRAM

AGENTS BACTERIE 1 BACTERIE 2 REMARQUES


Cristal Violet ou Le colorant pénètre dans les 2
Violet de Gentiane types de bactéries (Gram + et
(colorant violet) Gram -)

Lugol Le mordançage permet


(mordant) d’intensifier la coloration

Bactérie 1 : peptidoglycane épais


 Pas de pénétration de l’alcool
Alcool = Ethanol
(décolorant) Bactérie 2 :l’éthanol dissout la
membrane externe et passe la
fine couche de peptidoglycane
Fuschine ou
Contre-coloration des bactéries
Safranine
décolorées (bactérie 2)
(colorant rose)
OBSERVATIONS Violet donc Rose donc
MICROSCOPIQUES GRAM + GRAM -

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