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Td2 PCBM m2 Micro App

Le document présente des exercices sur la spectrophotométrie UV-visible, incluant des calculs d'absorbance, de concentration et de coefficients d'absorption molaire pour des solutions de sulfate de cuivre, de permanganate de potassium, et de sulfate de nickel. Les exercices impliquent l'application de la loi de Beer-Lambert et la détermination de propriétés optiques de divers composés. Des questions pratiques sont posées pour guider les étudiants dans la réalisation de ces calculs.

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TD 2 : Spectrophotométrie UV-visible

Exercice 01
On dispose d’une solution mère de sulfate de cuivre à 1 mol/L. On en réalise
diverses dilutions dont on mesure l’absorbance pour la longueur d’onde 655 nm qui
correspond au maximum de la courbe A = f (C) pour une solution de sulfate de cuivre.
La largeur de la cuve est de 1cm. On obtient le tableau suivant :

C (mol/L) 0.200 0.100 0.050 0.020 0.010 0.005


DO=A 0.601 0.302 0.151 0.060 0 ?031 0.016

1) Pourquoi a-t-on choisi de travailler à cette longueur d’onde ?


2) La loi de Beer-Lambert est-elle vérifiée ?
3) Déterminer le coefficient d’absorbance molaire dans ces conditions.
4) Quelle est la concentration d’une solution de sulfate de cuivre dont l’absorbance est
A 0,200.

Exercice 02

Une solution aqueuse de permanganate de potassium (C = 1,28.10-4 M) a une


transmittance de 0,5 à 525 nm, si on utilise une cuve de 10 mm de parcours optique.
1) Calculer le coefficient d’absorption molaire du permanganate pour cette longueur
d’onde.
2) Si on double la concentration, calculer l’absorbance et la transmittance de la
nouvelle solution.

Exercice 03

On veut déterminer la concentration de deux sels A et B dans un échantillon


inconnu en solution aqueuse. On enregistre un spectre dans le visible de chacun de ces
deux composés pris séparément en solution aqueuse, ainsi que la solution échantillon
à analyser. Le trajet optique des cuves utilisées est de 1 cm. Les valeurs des
absorbances mesurées à 510 et 575 nm sur les trois spectres sont les suivantes : 510
nm 575 nm Composé A (C = 0,15M) A = 0,714 A = 0,0097 Composé B (C = 0,06M)
A = 0,298 A = 0,757 Solution échantillon A = 0,4 A = 0,577

Calculer les 4 coefficients d’absorption molaires A(510), A(575), B(510), B(575).

Master 2 : Microbiologie Appliquée


Module : Purification et caractérisation des biomolécules
TD 2 : Spectrophotométrie UV-visible
Exercice 4

1)Calculez le ε max d’un composé dont l’absorption maximale (A) est de 1.2. La longueur de
la cellule L est 1 cm, la concentration est 1.9 mg/25 ml de solution et la masse moléculaire du
composé est de 100 g/mol.
2) Calculer le coefficient d’absorption molaire d’une solution de concentration 10-4 M, placée
dans une cuve de 2 cm, avec I0 = 85.4 et I = 20.3.

Exercice 5
100 mL d’une solution mère (S) de sulfate de nickel (II), de concentration 0,1 mol.L-1, est
préparée par dissolution d’une masse m de sulfate de nickel (II) heptahydraté NiSO4,7H2O. A
partir de cette solution mère on prépare cinq solution filles en introduisant un volume X (mL)
de la solution S dans des fioles jaugées de 50 mL et en complétant avec de l’eau distillée
jusqu’au trait de jauge. La mesure de l’absorbance des solutions filles, avec une cuve
d’épaisseur L = 1cm, a donné les résultats suivants :
V(mL) 5 10 15 20 25
A=DO 0,217 0,415 0,640 0,855 1,100
C

- Quelle est la masse du NiSO4,7H2O qu’il a fallu peser pour obtenir la solution S. On donne
: M(Ni) = 58,7 g.mol-1, M(S) = 32,1 g.mol-1.
- Déterminer la longueur d’onde maximale. Calculer l’énergie correspondante.
- Compléter le tableau, en donnant un exemple de calcul.
- Tracer A = f(C). En déduire le coefficient d’absorption molaire dans les conditions de mesure.

Master 2 : Microbiologie Appliquée


Module : Purification et caractérisation des biomolécules

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