Ministère de l’Enseignement Supérieur et République du Mali
Da Recherche Scientifique (M.E.S.R.S) Un peuple-Un but-Une foi
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Université des Sciences Techniques et
Technologique de Bamako (U.S.T.T.B)
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Institut des Sciences Appliquées (I.S.A)
DER de la Génie Biologiques (G.B)
Rapport du travaux pratiques N°1 de la Parasitologie
GOUTTE ÉPAISSE ET FROTTIS SANGUIN
Réaliser par : Encadrant :
DEMBELE Bekaye FOFANA Mahamadou Dr M’BAYE Mohamed
DENON Lassine KEITA Salimata Dr TRAORÉ Aboubacar
DIALLO Kadidiatou KOME Ali
DIARRA Kamissa KONATE Mariam
DIARRA Oumar MARICO Seriba
DIARRA Sekou N'DAOU Awa
DOUMBIA Brehima SOUMARE Mamy
TOURE Assitan
GB L2 S4
GROUPE 4 SG 2
SALLE B3-13
Table des matières
DÉFINITION ......................................................................................... 3
INDICATIONS ....................................................................................... 3
TECHNIQUE ......................................................................................... 3
Qualité d’un bon frottis .................................................................... 4
Intérêt du frottis sur la goutte épaisse ............................................. 4
Différence entre frottis mince et goutte épaisse .............................. 4
Coloration de la goutte épaisse et du frottis mince .......................... 4
FM.................................................................................................. 4
GE .................................................................................................. 4
Formule de quantification ................................................................ 4
Différentes espèces plasmodiques ................................................... 5
CONCLUSION ....................................................................................... 5
DÉFINITION
o Paludisme : Le paludisme est une parasitose due à des hématozoaires du genre
Plasmodium, transmise par des moustiques du genre Anophèles.
o Goutte épaisse : étalement sanguin permettant de mettre en évidence les parasites sanguins
principalement le plasmodium.
INDICATIONS
Les indications d’une GE sont les suivants :
o Maux de tête
o Courbature
o Vomissement
o Fièvre
o Malaise ou manque d’appétit
TECHNIQUE
GE :
Mettre environ 20 µl de sang du une lame
A l’aide du coin d’une seconde lame étalée en mouvement rotatoire à atteindre un diamètre environ
1 à 1,5 cm
FM :
Poser environ 10 -15 µL de sang sur une lame
Tenir cette lame d’une main, poser le second lame en avant de la goutte
Pousser en arrière vers l’autre bout du sang de telle sorte que l’échantillon est réparti tout le long du
bord de la lame
Tirer le frottis en maintenant la lame d’environ 45°
Qualité d’un bon frottis
Un bon frottis ne doit pas déborder la largeur de la lame
Il doit être ni très dense ni trop mince ni trop long
Il ne doit avoir ni bulles ni rayures ni de bordures irréguliers
Il doit compter 3 parties :
o La tête
o Le corps
o Une queue
Intérêt du frottis sur la goutte épaisse
Le frottis permet une étude qualitative de la goutte épaisse
Différence entre frottis mince et goutte épaisse
Une goutte épaisse permet de vérifier la présence de parasite sanguine (plasmodium) tandis que le
frottis mince permet d’identifier l’espèce plasmodiques.
Coloration de la goutte épaisse et du frottis mince
FM
Fixation au Methanol
May Grunewald 3min
Giemsa diluer au 1/10 10 à 15 min
GE
May Grunewald 3min
Giemsa diluer au 1/10 10 à 15 min
NB : la coloration se fait après séchage,
La fixation au méthanol concerne seulement le frotti mince,
A défaut du May Grünewald on peut utiliser uniquement du Giemsa,
Après coloration la lame est rincé à l’eau tamponné, égoutté, séchée avant la lecture.
Formule de quantification
La parasitémie est calculée en fonction du nombre réel de globules rouges du patient mais si celui-ci
n’est pas connue on prend :
𝑁𝑜𝑚𝑏𝑟𝑒 𝑑𝑒 𝑔𝑙𝑜𝑏𝑢𝑙𝑒 𝑟𝑜𝑢𝑔𝑒𝑠 𝑝𝑎𝑟𝑎𝑠𝑖𝑡é 𝑐𝑜𝑚𝑝𝑡é𝑠×5000000
𝑁𝑜𝑚𝑏𝑟𝑒 𝑑𝑒 𝑔𝑙𝑜𝑏𝑢𝑙𝑒 𝑟𝑜𝑢𝑔𝑒𝑠 𝑝𝑎𝑟𝑎𝑠𝑖𝑡é 𝑝𝑎𝑟 µ𝑙 =
20 𝑐ℎ𝑎𝑚𝑝𝑠×250
𝑛𝑜𝑚𝑏𝑟𝑒 𝑑𝑒 𝑝𝑎𝑟𝑎𝑠𝑖𝑡𝑒 × 8000
𝑁𝑜𝑚𝑏𝑟𝑒 𝑑𝑒 𝑃𝑎𝑟𝑎𝑠𝑖𝑡𝑒 𝑝𝑎𝑟 µ𝑙 =
500 - 200 𝑙𝑒𝑢𝑐𝑜𝑐𝑦𝑡𝑒𝑠
Différentes espèces plasmodiques
o Plasmodium falciparum
o Plasmodium malariae
o Plasmodium vivax
o Plasmodium knowlesi
o Plasmodium ovale
CONCLUSION
Ce TP nous a permis de savoir comment réaliser une goutte épaisse
Les bonnes techniques d’étalement, de coloration et de numération parasitaires.
