EXAM LABO
1. Les phases d’un processus analytique
La phase pré-analytique :
C'est la phase la plus importante. Regroupeles étapes avant l'ANALYSE ( la réception
du patient à ,l'enregistrement deZRPs données Le prélèvement est effectué par un
infirmier et doit respecter les règles de temps trop serré et de jeûne pour éviter le sang
hémodilué. Cette étape est responsable de 70% des erreurs potentielles.)
Recouvrant toute les étapes qui se déroulent depuis la prescription médicale
La demande d’analyse
La préparation et l’identification de patient
Le prélevement
Leur acheminement
La phase analytique :
Correspond à l'analyse des échantillons avec des équipements spécifiques. Et inclut
les contrôles de qualité interne pour garantir des résultats fiables.
La phase post-analytique :
Inclut la validation technique et l biologique (par le médecin/biologiste).
L'interprétation des résultats et la transmission puis l’archifage
2. Les types d’analyseurs en biochimie
Analyseur en chimie liquide : Utilisent des solutions pour effectuer les réactions
chimiques et mesurent l'absorbance selon la loi de Beer-Lambert.
Analyseur en chimie sèche : Utilisent des bandelettes réactives sur des supports
solides imprégnés de réactifs chimiques pour détecter les réactions.
La différence
1/ utilise des bondelettes/supports solides
2/utilise des échantillons liquides
3. intérêt et principe de chromatographie
intérêt :: La chromatographie est une technique utilisée pour séparer, identifier et
analyser les composants d'un mélangeElle permet de purifier des substances, de
mesurer leur concentration, et d'analyser la composition chimique d'échantillons
complexes.
Principe : Le principe de la chromatographie repose sur la séparation des composants
d'un mélange en fonction de leurs affinités différentes pour deux phases :
Phase mobile : Un fluide qui transporte le mélange à séparer (gaz ou liquide).
Phase stationnaire : Un matériau solide ou visqueux qui interagit différemment
avec les composants du mélange.
Les composants d’un système de HPLC
1. Réservoir : Contient la phase mobile (solvant).
2. Pompe haute pression : Fait circuler la phase mobile à travers le système sous
haute pression.
3. Injecteur : Introduit l'échantillon dans la phase mobile.
4. Colonne : Où se fait la séparation des composants en fonction de leur interaction
avec la phase stationnaire.
5. Détecteur : Mesure les composants séparés qui sortent de la colonne.
Exemple d’application
4. Techniques pour réaliser un hémogramme automatisé
Analyse par impédance :
Mesure la variation de résistance électrique lorsque les cellules passent à travers un
orifice. Chaque cellule provoque une variation, permettant de déterminer sa taille et
son nombre.
Analyse par photométrie
Analyse parCytométrie
Utilise un laser pour analyser les propriétés optiques des cellules (taille, forme,
complexité).
5. Méthodes de stérilisation courantes en microbiologie médicale
Autoclave : Stérilisation par vapeur sous pression (121-134°C). Efficace pour tuer les
micro-organismes, y compris les spores, et utilisé pour les instruments, milieux de
culture et liquides.
Chaleur sèche (étuve) : Utilise des températures élevées (160-180°C) pour tuer les
micro-organismes par dénaturation. Idéale pour les objets sensibles à l'humidité,
comme les verreries et les poudres.
6. Étapes principales de la technique ELISA indirect
Fixation de l'antigène : L'antigène est fixé à la plaque de microtitration.
Ajout de l'anticorps à doser : L'échantillon avec l'anticorps spécifique à l'antigène
est ajouté
Ajout de l'anticorps de détection : Un anticorps secondaire marqué avec une
enzyme est ajouté.
Révélation : Un substrat réagit avec l'enzyme, produisant un signal visible
proportionnel à la quantité d'anticorps ou d'antigène.
Exemple d’application
“”
1. Fixation de l'antigène : Antigènes du VIH (ex. protéine p24) sont fixés sur la
plaque.
2. Ajout de l'anticorps à doser : L'échantillon de sérum du patient est ajouté. Si
le patient a des anticorps anti-VIH, ils se lient aux antigènes.
3. Ajout de l'anticorps de détection : Un anticorps secondaire marqué avec une
enzyme est ajouté.
4. Révélation : Un substrat réagit avec l'enzyme, produisant un signal coloré qui
indique la présence d'anticorps anti-VIH.
5.
