Introduction :
L'étude des échanges gazeux photosynthétiques est essentielle pour savoir le
dynamique de la photosynthèse qui est un phénomène physiologique
permettant aux plantes de synthétiser des éléments organiques en présence
de lumière.L'expérience ci-après a pour but de déterminer l'intensité
photosynthétique par le volume de dioxygène dégagée sous l'effet de la
pression.Cela va s'effectuer avec l'utilisation de l'appareil de Warburg
spécifiquement avec la méthode manométrique.
Les matériels utilisés :
Matériel biologique : Lagarosiphon
Appareil de Warburg composé de : bain à 25°C, manomètre, capilaire
gauche et droite
Verreries
Réactifs : solution tampon + carbonate-bicarbonate à pH=8.69
Méthode :
Principe :
Cette méthode consiste à utiliser l'appareil de Warburg afin de suivre en
temps réel les changements de pression partiel de dioxygène dans la solution
tampon carbonate-bicarbonate contenant le Lagarosiphon.
Mode opératoire :
- Préparation des 3 fioles :
Fiole 1 : N° 212 / V=13.031ml {échantillon+solution}
Fiole 2 : N° 301 / V=13.497ml {solution}=>Thermobaromètre
Fiole 3 : N° 473 / V=14.171ml {échantillon mort+solution}
- Installation des fioles sur les manomètres dans un bain thermostaté à
T=25°C(température ambiante) et exposé à la lumière.
- Détermination de la variation de pression à la lumière et à l'obscurité toutes
les 2 minutes (intervalle de temps).
- Début de la lecture à 150 avec le robinet étant fermé.
Résultats :
À la lumière :
Thermobaromètre Manomètre
TEMPS (Fiole 2) ( Fiole 1)
Lecture Variations Lecture Variation Variation
corrigé
T0 156 168
T1 156 0 168 0 0
T2 150 -6 166 -2 4
T3 150 -6 175 7 13
T4 150 -6 170 2 8
T5 170 14 185 17 3
T6 168 12 184 16 4
T7 175 19 191 23 4
T8 175 19 193 25 6
T9 175 19 195 27 8
T10 171 15 195 27 12
T11 177 21 194 26 5
T12 173 17 197 29 12
T13 173 17 196 28 11
T14 169 13 198 30 17
T15 170 14 198 30 16
À l'obscurité :
Thermobaromètre Manomètre
TEMPS (Fiole 2) ( Fiole 1)
Lecture Variations Lecture Variation Variation
corrigé
T0 148 135
T1 144 -4 130 -5 -1
T2 138 -10 126 -9 -1
T3 138 -10 125 -10 0
T4 142 -6 124 -11 -5
T5 142 -6 123 -12 -6
T6 142 -6 123 -12 -6
T7 137 -11 122 -13 -2
T8 138 -10 121 -14 -4
T9 137 -11 120 -15 -4
T10 130 -18 112 -23 -5
T11 131 -17 110 -25 -8
T12 130 -18 106 -29 -11
T13 130 -18 104 -31 -13
T14 126 -22 103 -32 -10
T15 126 -22 100 -35 -13
Nous pouvons en déduire les courbes suivantes à partir des résultats
rapportés dans les 2 tableaux :
Calcul de l'intensité photosynthétique ou IP
À la lumière :
X1= h[(Vg×(213/T))+(Vf×~)]
Po
avec : h = 8 mm de Brodie
T = 298°K
Vg = (Vm + Vn)-(Vt + Vveg)
Vg = (1.373+13.08)-(4+0.7)
Vg = 9.753 ml
Vf = Vt + Vveg
Vf = 4ml + 0.7ml
Vf = 4.7ml
Po = 760 mm/Hg = 10000 (sous forme de liquide de Brodie)
~ = 0.03
Xl = 8 mm[((9.753 ml × (273/298)) + (4.7 ml × 0.03)]
10 000
Xl = 7.26×10-³ ml
À l'obscurité :
Xo = 9[((9.753 × (273/298)) + (4.7 × 0.03)]
10 000
Xo = 8.16×10-³ ml
IP = (Xl/Tl) × mveg
A.N :
IP = IPN = (7.26×10-³ ml/3 min) × 0.56 g
IPN = 1.3552×10-³ml/min/g
IR = (Xo/To) × mveg
IR = (8.16×10-3ml/4 min) × 0.56
IR = 1.1424×10-³ ml/g
IPN = IPb - IR
IPb = IPN + IR
IPb = 1.3552×10-³ + 1.1424×10-³
IPb= 2.4976×10-³ ml/g
Interpretation :
La mesure de l'IP dépend de plusieurs conditions qui sont là teneur en CO2 et
sa source qui est la solution de Warburg ( solution tampon carbonate-
bicarbonate) en absence ou en présence de lumière avec une température
ambiante.
La manipulation peut être effectuée à condition que le robinet soit à la
troisième voie c'est à dire il y a blocage de l'entrée de l'oxygène dans le milieu
pour maintenir la pression initiale.
La valeur de l'IPb nous montre la quantité de produit formé pendant la
photorespiration par minute par gramme de Lagarosiphon.
Conclusion :
Pour conclure,la méthode de Warburg nous a permis de comprendre le
mécanisme d'échange gazeux durant la photosynthèse et aussi de savoir que
l'intensité photosynthétique influence ce processus métaboliques des
plantes.Cependant,il faut noter aussi que la méthode de Warburg met en
évidence l'importance des voies métaboliques durant l'expérience.
