29/10/2022

Les
SPIROCHETES
FMP TANGER

Plan:
• Généralités
Treponema
• Caractères bactériologiques
• Caractères épidémiologiques Leptospira

• Manifestations cliniques Borrelia

• Diagnostic bactériologique
• Eléments thérapeutiques

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Généralités:
• Les spirochètes sont des bacilles mobiles de forme
hélicoïdale
• 5 à 35 μm de long/ 0,1 à 0,3 μm de large
• Les endoflagelles : inserés aux deux extrémités de
la bactérie, enroulés autour du corps bactérien
conférant des mouvement spéciaux( torsion,
rotation et compression)
• Non observable au microscopie optique et non
colorable par la coloration de Gram!

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Classification
• Ordre: Spirochaetales
• Classés en deux familles: famille des Spirochaetaceae et
la famille de Leptosiraceae
• Très répandus dans la nature
• Trois genres pathogènes pour l’homme:
Genre treponema: syphilis
Genre leptospira: leptospirose
Genre borrelia: maladie de lyme et fièvres
récurrentes

Treponema
pallidum
«Agent de syphilis »
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Caractères bactériologiques:

Morphologie

-Bactérie très fine : structure commune à celle des

spirochètes
-Forme hélicoïdale, à spires régulières et serrées au nombre
de 6 à 12 spires
-Mobile : flagelles autour du corps bactérien (organe moteur)
-Répond mal à la coloration de Gram : T. pallidum ou "pâle"
-Bactérie très fragile, ne survie pas dans le milieu extérieur

-Bactérie non cultivable in vitro

-In vivo, culture possible par injection intra testiculaire

de lapin de Treponema pallidum avec multiplication dans
le testicule de lapin

souche Nichols ainsi entretenue: suspension

antigénique pour lame d’IFI

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Structure antigénique:
Quatre groupes d'antigènes ont été mis en évidence :
1/ le cardiolipide ou haptène lipidique de Wasserman
Présent dans les tissus animaux (coeur et foie surtout) et suscite
la formation d'anticorps appelés réagines.
2/un antigène protéique spécifique de groupe
Commun à tous les tréponèmes
3/un antigène polyosidique d'enveloppe
Spécifique de Treponema pallidum et suscite la formation
d'anticorps décelables par immunofluorescence.
4/des antigènes du corps tréponémiques
Suscitent la formation d'anticorps très spécifiques de Treponema
pallidum décelés par le test de Nelson.

PAS DE VACCIN CONTRE LA SYPHILIS! 9

Caractères épidémiologiques:

Réservoir: strictement humain

Transmission:
- Sexuelle +++
- Maternofoetale : vers 4ème mois
-Transplantation
-Exceptionnellement par transfusion, toxicomanie ou
accident de manipulation au laboratoire

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Manifestations cliniques:
1-Syphilis vénérienne

Évolue en trois phases successives

2- Syphilis congénitale
3-Syphilis et VIH

1-Syphilis vénérienne
Incubation silencieuse, 3 semaines

1- Syphilis primaire
- chancre : ulcération indolore
- adénopathie satellite

Guérison spontanée : 4 à 6 sem

Chancre syphilitique 12

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2- Syphilis secondaire
2 mois après :
- Lésions cutanéo-muqueuses très contagieuses: Roséoles ou
syphilides papuleuses
- Alopécie (perte de poils)

- Dissémination des tréponèmes par voie sanguine et

lymphatique : ce qui provoque une polyadénopathie

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3- Syphilis tertiaire

- lésions cutanées (gommes)

- lésions cardio-vasculaires

- lésions neurologiques (paralysie générale, …)

Gomme syphilitique
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2-Syphilis congénitale
-Survient chez enfant né d’une mère présentant syphilis active
-Risque de transmission faible au cours du premier trimestre et
élevé a partir du 4ème mois

a-Syphilis fœtale: évolution mortelle

b-Syphilis congénitale précoce: 2 premières années de vie

Asymptomatique ou lésions cutanéomuqueuse, atteinte osseuse,
troubles hématologiques

c-Syphilis congénitale tardive:> 2 ans

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3-Syphilis et VIH

-L’ulcération génitale facilite pénétration du VIH

-L’infection /VIH accélère l’évolution vers neurosyphilis

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Diagnostic bactériologique:

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Diagnostic bactériologique:
Diagnostic direct:
Prélèvement: Au laboratoire (germe très sensible)
- Chancre, sérosités, ponction des ganglions
- Syphilis congénitale : sang de cordon, placenta, secrétions
nasales ou buccales et de la peau.
Examen à l’état frais:
Il consiste à observer sous microscope optique à fond noir la
mobilité et la forme spiralée caractérisant le Treponema
pallidum.

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Examen après coloration:

-Coloration de Gram non réalisable,
-Imprégnation argentique de Fontana-
Tribondeau
Réalisation délicate!

Immunofluorescence :
- Frottis avec sérosité : recouvrir d’Ac anti-
Treponema pallidum marqué par substance
fluorescente
- Observation sous éclairage UV

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Méthodes moléculaires:
-Recherche d’ADN de T. pallidum par PCR dans les échantillons
biologique(gènes des protéines de membrane externe )

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Diagnostic indirect ou sérologique:+++

-Deux grands groupes de réactions sérologiques sont
pratiquées selon l'antigène utilisé:

 Réactions à antigène non tréponémique (antigène

cardiolipidique): VDRL
 Réactions à antigène tréponémique: TPHA, FTA-
Abs, ELISA

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Réactions à antigène non tréponémique

VDRL: (Veneral Disease Research Laboratory)

- Réaction d’agglutination sur lame
- Ag cardiolipidique est fixé sur particules de charbon+sérum
malade
- Observation au microscope
- Se positive: 8 à 20j après apparition du chancre, 1er à être
négative après traitement
-Faux positifs Possible (infections, grossesse..)

Réaction négatif Réaction positif

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Réactions à antigène tréponèmique:

TPHA (Treponema pallidum haemagglutination assay)

-Réaction d’hémagglutination passive utilisant :
-Sérum du malade + hématies sur lesquelles est fixé
l’antigène de T. pallidum)
-TPHA se positive 10jours après l’apparition du chancre et
reste positif longtemps même en cas de guérison

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FTA-Abs (fluorescent treponemal antibody test-absorbed )

-Réaction d’ IFI

-Sérum du patient sur lame recouverte de tréponèmes entiers

tués

-Les anticorps fixés sont révélés par une antiglobuline

humaine marqué par fluorochrome

-Ac détectable peu après le chancre, se négative lentement

après TTT puis disparaissent

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ELISA:
-Indirecte par exp
-Ag tréponémique purifié
-Méthode intéressante pour le dépistage (dosage
qualitatif)

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Test de Nelson ou Test d'immobilisation des tréponèmes:

-Très spécifique mais qui n’est plus utilisée (entretien

d’animaux vivants infecté)

-Anticorps spécifiques, dans le sérum du patient mis en

contact avec tréponèmes vivants virulents.

l’immobilisation de tréponèmes vivants, après

contact avec sérum
-Résultat exprimé en % d’immobilisation

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Test d’immuno-empreinte (Western-blot):

- Protéines spécifiques de T. pallidum sont
immobilisées sur une membrane que l’on
met en contact avec sérum du malade
- Détection par anticorps marqués à la
phosphatase alcaline

Principe de la réaction
Des immunoblots sont préparés à partir d'une suspension lavée de Treponema pallidum (souche Nichols). Les antigènes
protéiques tréponémiques sont séparés par électrophorèse en gel de polyacrylamide, puis transférés sur des membranes de
nitrocellulose qui sont séchées et découpées en bandes.
Les sérums dilués des patients sont incubés avec les bandes. Si le sérum contient des anticoprs spécifiques de Trepenoma
pallidum, ceux-ci se fixent sur les antigènes correspondants. Les anticorps fixés sont révélés par un deuxième anticorps dirigé
contre les immunoglobulines humaines anti-IgG ou anti-IgM et marqué à la phosphatase alcaline
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INTERPRETATION DES RESULTATS

VDRL Diagnostic probable

TPHA FTA

- - - Syphilis exclue ou
contamination très récente

+ + + Forte probabilité de syphilis

Syphilis récente traitée ou

- + + ancienne (traitée ou non

traitée)

Il faut confirmer le TPHA

+ - - négatif par une autre réaction

(FTA)/ ou faux positif en VDRL
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Traitement:
La pénicilline G Benzathine : traitement de choix

Prévention :
-Mesure d’hygiène individuelle: préservatif+++
-Prophylaxie sociale: dépistage et traitement des cas
-Pas de vaccin pour la syphilis

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Leptospira
« leptospirose »

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Généralités:

-Maladie infectieuse d’actualité provoquée par un spirochète

: Leptospira interrogans.

-Zoonose de répartition mondiale avec prédominance: zone

tropicale et sub tropicale

-Le genre Leptospira appartient à la famille de

Leptospiraceae

-Espèces: - Leptospira interrogans (pathogène)

Plusieurs sérotypes
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Caractères bactériologiques:
Aspect morphologique:
Bacille de forme: hélicoïdale avec des extrémités en crochet (microscope à
fond noir)
-Mobile: endoflagelle, mobilité très évocatrice: mouvements de «ressort»
Caractères culturaux:
Aérobies, culture très lente en milieu liquide spécifique à 30° à l’obscurité
pendant 8 sem

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Caractères épidémiologiques:

• Réservoir animal très diversifié: rongeurs (rat+++) ou

animaux d’élevage
• Contamination: contact direct ou indirect avec les urines
d’animaux infectés
• Contamination plus fréquente dans les professions à
risque: Les égoutiers, …

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Manifestations cliniques:
Forme classique : «Fièvre ictéro-hémorragique»
(jaunissement)= maladie de Weil

Évolue en 4 phases:
-Phase d’incubation: silencieuse d'environ 10 jours
-Phase pré-ictérique : c’est la période d’invasion ou
leptospirémique: fièvre, céphalées, douleurs musculaires,
hémorragie conjonctivale, syndrome méningé.
-Phase ictérique: atténuation de la fièvre + ictère
-Phase de recrudescence : disparition de l’ictère et
réapparition de la fièvre
Mortalité survient : 5 à 15%

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Diagnostic bactériologique:

Prélèvement:
Sang: hémoculture positif au cours des dix 1er j
LCR: positif entre le 7-14ème j
Urines: après la 3ème sem

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Diagnostic direct:
Examen direct: microscope à fond noir

Morphologie:
• Bacilles très grêles, Taille 6-12µ m/0,25 µm
• Enroulés en spirale/BGN, mais prend mal le Gram (autres
colorations)

Culture: difficile, milieux spéciaux, lente

Amplification génique:
-Amplification de l’ARN r
-Rapide,
-Précoce, sur différents prélèvements
-Mais réservé aux laboratoires spécialisé

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Diagnostic indirect: sérologie

Méthode la plus utilisée pour diagnostic de leptospirose

Plusieurs tests sérologiques sont disponibles pour la détection d’anticorps

Test d’agglutination microscopique MAT+++

• Appelé également la réaction d’agglutination–lyse de Martin et Pettit
( test de référence)

• Il repose sur la détection au microscope à fond noir, le pourcentage

d’agglutination, de leptospires en présence de dilutions du sérum du
patient

Réaction d’agglutination macroscopique sur lame

Réaction ELISA
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Traitement/Prophylaxie:

Forme grave : Pénicilline/IV, ampicilline ou ceftriaxone

Forme mineure: Doxycycline
Prévention:
- Dératisation, ports de vêtements protecteurs, surtout les
gants et les bottes.
- Contact accidentel: antibioprophylaxie efficace (doxycycline
200 mg prise unique)
- La vaccination: SPIROLEPT
Indiqué chez les personnes à risque
Vaccin bactérien tué inactivé

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Borrelia

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• Agents de borrélioses humaines, transmis par des vecteurs:

des arthropodes (tiques ou poux)
• Bactéries spiralés.
• Une trentaines d’espèce
• Borréliose de Lyme (ville à USA): répandue dans tout
l’hémisphère nord, presque absente au pourtour
méditerranéen, transmise par des tiques dures du genre
Ixodes
• Borrelia burgdorferi : B. burgdorferi sensu stricto (USA), B.
afzelii, B. garinii en Europe.
• Fièvre récurrente: B. reccurentis transmise par les poux

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Caractères bactériologiques:
Les Borrelia sont spiralées et comportent une quinzaine de
spires. Elles sont mobiles et colorables par Giemsa ou acridine
orange.

Culture pour B. bugdorferi sensu lato

• Difficile: milieux spécifiques, riche
• Délais de positivité est de 10 à 20 jours à température de 32
à 34°
• Laboratoires spécialisés

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Caractères épidémiologiques:

Réservoir: petits rongeurs++ , oiseaux, mammifères des

zones humides et boisées et qui sont parasités par les tiques

Tiques se contaminent

Contamination de
l’homme(hôte accidentel) par
piqure de tique en forêt

-Maladie professionnelle (ouvriers forestiers)

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Clinique:
Maladie de lyme (B. bugdorferi): Évolution en trois phase:

Phase primaire: Erythème chronique migrant pathognomonique:

s’étend de façon centrifuge en cocarde (nœud décoratif)
Phase secondaire: Dissémination bactérie
Signes: cardiaques, neurologiques, articulaires, cutanés
Phase tertiaire: Plusieurs mois après contamination:
complications articulaires, cutanées, ou neurologiques
(Paralysie faciale d’origine borrélienne)

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Fièvre récurrente borélienne (B. reccurentis):

• Après quelques jours d’incubation, une forte fièvre survenant
brutalement, avec nausées et maux de tête
• La fièvre chute au bout de cinq ou six jours, laissant place à
une grande fatigue.
• L'épisode peut se répéter dans le temps

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Diagnostic bactériologique:

Diagnostic direct:
Prélèvement: Sang, LCR, liquide articulaire, …
Examen direct :
Borrelia des fièvres récurrentes: examen microscopique est la
méthode la plus courante
B. burgdorferi: Possible mais difficile (charge bactérienne
faible)

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Culture: Surtout pour les biopsies cutanées

Techniques moléculaires:
-Amplification génique par PCR
-Réservés aux laboratoires spécialisés

Diagnostic sérologique:
-Premier plan du diagnostic+++, dans les formes disséminés
et tardives de la maladie de Lyme
-Immuo fluorescence indirecte
-La technique ELISA: pour le dépistage si positive on réalise
un Western Blot: pour la confirmation

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Traitement:
• Stade de L’érythème centrifuge migrant: amoxicilline ou
tetracycline/ si forme sévère: C3G (Ceftriaxone)

Prophylaxie:
• Port de vêtement protecteurs contre les tiques
• Examiner soigneusement son corps dès la fin d’une balade
dans les herbes et enlever les tiques par une pince

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Conclusion:

• Les spirochètes groupe hétérogène de bactéries ayant des

caractères en commun
• Responsables de maladies graves
• Le diagnostic bactériologique direct difficile, place
importante de la sérologie+++

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