REPUBLIQUE DU CAMEROUN REPUBLIC OF CAMEROON

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Paix – Travail – Patrie Peace – Work – Fatherland
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MINISTERE DE LA SANTE MINISTRY OF PUBLIC HEALTH
PUBLIQUE **************
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SECRETARIAT GENERAL GENERAL SECRETARIAT
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RENFORCEMENT DES CAPACITES DU

PERSONNEL A LA PRISE EN CHARGE DE LA
MENINGITE AU LABORATOIRE NATIONAL
DE SANTE PUBLIQUE

DU 25 AU 31 AOUT 2023 A YAOUNDÉ

Rapporteurs : M. DAIBOU MAHAMAT

Matricule : 692823-M

Indice : 485

Service : Direction de Coordonation des soins HGG

TABLE DES MATIERES
TABLE DES MATIERES................................................................................................................1
I. GENERALITES SUR LES MENINGITES : DEFINITIONS, SIGNES CLINIQUES,
DIAGNOSTIC ET TRAITEMENT.................................................................................................3
1. Contexte et justification........................................................................................................3
2. Objectifs................................................................................................................................3
2.1. Objectif général.............................................................................................................3
Renforcer les compétences des personnels des laboratoires au diagnostic biologique des 10
pathologies prioritaires ciblées.....................................................................................................3
2.2. Objectifs spécifiques.....................................................................................................3
INTRODUCTION...........................................................................................................................5
1. Définition..............................................................................................................................6
2. Physiopathologie...................................................................................................................6
3. Signes cliniques: TDD: méningite aigue de l’adulte non compliquée..................................8
a. Signes Généraux...............................................................................................................8
b. Examen physique..............................................................................................................8
c. Signes cliniques: critères de gravité..................................................................................8
4. Diagnostic.............................................................................................................................9
a. Diagnostic positif:.............................................................................................................9
b. Diagnostic étiologique:.....................................................................................................9
5. Différentiel..........................................................................................................................12
a. Hémorragie méningée.........................................................................................................12
b. Méningisme........................................................................................................................12
6. Traitement...........................................................................................................................12
7. Corticothérapie...................................................................................................................14
8. Surveillance........................................................................................................................14
9. Complications.....................................................................................................................14
II. LA PONCTION LOMBAIRE : INDICATIONS, PRECAUTIONS ET TECHNIQUES......15
1. Indications...........................................................................................................................15
2. Précautions..........................................................................................................................15
3. Contre-indications...............................................................................................................15
4. Techniques..........................................................................................................................16

1
 5. Analyse du LCR.................................................................................................................17
6. Biochimique :......................................................................................................................17
7. Cytologie :..........................................................................................................................17
8. Bactériologie.......................................................................................................................17
III. PRELEVEMENT, CONDITIONNEMENT ET ACHEMINEMENT DES
ECHANTILLONS DE LCR..........................................................................................................18
1. Prélèvement........................................................................................................................18
2. Indications...........................................................................................................................18
3. Contre-indications...............................................................................................................18
4. Matériel de prélèvement :...................................................................................................19
5. Technique............................................................................................................................19
6. Conditionnement et acheminement des échantillons..........................................................21
6.1. Importance du conditionnement et d’un transport approprié :....................................21
6.2. Réalisation de la pcr....................................................................................................21
6.3. Inoculation du trans-isolate.........................................................................................23
6.4. Acheminement des échantillons : trans-isolate...........................................................23
6.5. Triple emballage..........................................................................................................25
IV. DIAGNOSTIC DE LA MENINGITE BACTERIENNE AU LABORATOIRE....................27
1. Démarche diagnostique sur le liquide céphalorachidien....................................................27
2. Importance de différentes techniques.................................................................................27
CONCLUSION..............................................................................................................................27

2
 I. GENERALITES SUR LES MENINGITES : DEFINITIONS, SIGNES CLINIQUES,
DIAGNOSTIC ET TRAITEMENT

1. Contexte et justification

Le Laboratoire National de Santé Publique (LNSP), créé par arrêté n° 2964/MINSANTE du 09

octobre 2013, a pour missions de :

 Mener des activités de diagnostic de santé publique et de contrôle de qualité ;

 Appuyer sur le plan technique la surveillance épidémiologique ;
 Contribuer au développement des activités des laboratoires de santé publique.

Pour accomplir efficacement ces missions, il est utile de mettre en place un cadre organisé de
collaboration permanente et d’échange entre les différents laboratoires à tous les niveaux de la
pyramide sanitaire pour la surveillance, la prévention, la lutte contre les maladies, la réponse aux
urgences de santé publique et l’assurance qualité des laboratoires.

Par ailleurs, l’apparition des nouveaux agents pathogènes et la réémergence de certaines

pathologies dangereuses met en évidence la nécessité de développer les outils de formation
pertinents et adéquats.

Le LNSP en collaboration avec tous les secteurs impliqués avait développé et actualiser les
modules de formation pour renforcer les compétences des personnels des laboratoires au
diagnostic biologique de la meningite.
Afin de contribuer à la surveillance épidémiologique en laboratoire, le LNSP organise cet atelier
de formation du personnel des laboratoires dans les formations sanitaires des régions du Centre,
de l’Est, du Littoral, de l’Ouest? du Sud, nord et extreme-nord sur le diagnostic de la meningite.

3
 2. Objectifs
2.1. Objectif général

Renforcer les compétences des personnels des laboratoires au diagnostic de la meningite.

2.2. Objectifs spécifiques

Décrire les mécanismes physiopathologiques d’une méningite aiguë.
 Décrire les principaux agents infectieux responsables des méningites aiguës en fonction
de l’âge et du terrain.
 Reconnaître à partir des données anamnestiques et cliniques les signes évocateurs
d’une méningite en fonction de l’âge.
 Identifier à partir des données cliniques et paracliniques les critères de gravité
d’une méningite aiguë.
 Etablir le diagnostic étiologique d’une méningite aiguë à partir des données
anamnestiques, cliniques et paracliniques en fonction de l’âge.
 Planifier le traitement curatif et préventif devant une méningite aiguë en fonction de
l’âge.
 Etablir les éléments de surveillance clinique et paracliniques d’une méningite aiguë.
 Décrire les modalités évolutives de la méningite aiguë.
 Identifier les contre-indications et les précautions à prendre avant la réalisation d’une
ponction lombaire devant un patient présentant un syndrome méningé fébrile.
 Décrire les repères de la ponction lombaire
 Interpréter les données de la ponction lombaire en cas de méningite aiguë.

4
 INTRODUCTION

La méningite est une maladie infectieuse résultant de l'inflammation des méninges. Dans
70 à 80 % des cas elle est d'origine virale et dans 20 à 25 % des cas elle est d'origine bactérienne.
Elle peut également être d'origine fungique et parasitaire. Une variété agents pathogènes de la
méningite bactérienne qui sont : Neisseria meningitidis, avec ses 13 sérogroupes dont le A, le
B, le C et le W135 sont reconnus comme les causes principales d'épidémies Streptococcoque
pneumonae et Hémophilus influenzae. Le laboratoire joue un rôle crucial dans le diagnostic de
cette maladie en identifiant : L’organisme responsable et en déterminant la sensibilité aux
antimicrobiens, le type de vaccins spécifiques aux souches circulante à introduire au sein de la
population, la surveillance syndromique clinique doit être complétée par une forte composante
de laboratoire. Le laboratoire est primordial dans: L’orientation du clinicien, ssurveillance
microbiologique, eépidémiologie moléculaire, la classification et confirmation des cas. Une fois
arrivé au laboratoire, la conformité de l’échantillon doit être vérifiée (étiquetage, température,
délai….). La qualité des résultats d’une analyse médicale dépend avant tout de : La qualité du
prélèvement, sa bonne conservation et son transport à temps au laboratoire.

5
 1. Définition

La méningite est l'inflammation des méninges et du liquide cérébro-spinal (LCS)

circulant dans les espaces sous-arachnoïdiens, ayant une cause bactérienne, virale ou
parasitaire (ou non infectieuse). Le diagnostic de la méningite repose sur la ponction
lombaire. Selon l'aspect du LCS, on distingue les méningites purulentes et les méningites à
liquide clair.

2. Physiopathologie

Il existe trois mécanismes essentiels d’infection du LCS par un germe :

• Infection par voie hématogène: portes d’entrée oropharyngée

• Infection par contiguïté : brèche ostéoméningée, sinusite, otite compliquée,

spondylodiscite, abcès du cerveau

• Infection par inoculation directe (accidentelle): neurochirurgie, traumatisme

Physiopathologie: Agents Infectieux

• Les méningites purulentes: généralement d'origine bactérienne, avec une cellularité

à prédominance de polynucléaires neutrophiles

• Méningocoque, pneumocoque, Haemophilus influenzae, Escherichia coli,

streptocoque B

• Urgences thérapeutiques, évolution spontanée pratiquement mortelle

Les méningites à liquide clair: cellularité à prédominance lymphocytaire, l'origine virale,

fongique et parasitaire

• Contexte épidémique

• Echovirus, coxsachie virus, adénovirus,

6
3. Signes cliniques: TDD: méningite aigue de l’adulte non compliquée
a. Signes Généraux
• Début brutal ou rapide

• Fièvre

• Syndrome méningé franc:

• Céphalées intenses, diffuses, predominance frontale, continue avec paroxysme

lors des efforts

• Sonophobie, photophobie

• Rachialgie

• Vomissement en jet, sans effort

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 b. Examen physique
• Position antalgique (chien de fusil)

• Raideur douloureuse de la nuque à la flexion passive

• Signe de brudzinsky

• Signe de kernig

• Signes d’irritation pyramidale : exaggeration des reflexes ostéotendineux

• Obnubilation (score de Glasgow)

• somnolence excessive, désorientation, délire aigu, coma, convulsions en contexte fébrile

c. Signes cliniques: critères de gravité

• Purpura extensif

• Marbrure

• Altération de l’état de conscience

• Altération de l’état hémodynamique

• Signes de focalisation neurologique (anisocorie, hémiparésie): scanner avant PL

4. Diagnostic
a. Diagnostic positif:
 Fièvre

 Syndrome méningé

 PL: réaction cellulaire supérieure à 5 éléments/mm3 pour l’adulte, l’enfant

et le nourrisson et supérieure à 30 éléments/mm3 pour le nouveau-né.

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 b. Diagnostic étiologique:
a. Méningites purulentes bactériennes
* liquide trouble ou franchement purulent

* hypercytose importante (>500 élé/mm3) avec prédominance de PNN

(≥75%) dont beaucoup sont altérés ;

* hyperprotéinorachie importante (> 1 g/l) ;

* fréquemment, hypoglycorachie (< 0,40 g/l ; <2,2 mmol/l)

b. Méningites à liquide clair

* liquide clair

* hypercytose avec formule lymphocytaire ou parfois mixte

* hyperprotéinorachie modérée en cas de méningite virale, variable selon les

causes, parfois une hyperprotéinorachie importante = en cas de tuberculose ou de
listériose ;

* glycorachie normale dans méningites virales, hypoglycorachie en cas de

méningite tuberculeuse.

c. Formes cliniques: selon le germe

c.1. Méningites Purulentes
- Méningocoque (Neisseria meningitidis) :

Manifestation sur un mode sporadique et épidémique. C'est une maladie à déclaration

obligatoire. Une éruption purpurique diffuse, rapidement extensive et d'aspect
nécrotique est très évocatrice du germe et constitue un élément de gravité

d. Méningites Purulentes
- Pneumocoque, (Streptococcus pneumoniae) :

Peut se voir à tout âge dans trois types de circonstances :

- secondaire à un foyer infectieux des voies aériennes ou ORL,

9
 - dans les suites d'un traumatisme crânien (brèche ostéo-méningée),

- chez les individus dont les défenses contre les germes capsulés sont
amoindries (splénectomisés, drépanocytaires, cirrhotiques, etc..).

- Listeria monocytogenes :

- La méningite à Listeria se voit essentiellement chez le sujet âgé, éthylique, la femme

enceinte, le nouveau-né et l'immunodéprimé (corticoïdes, chimiothérapie). Le tableau
clinique est celui de rhombencéphalite avec syndrome méningé. Le LCS est
typiquement panaché mais il peut être à prédominance lymphocytaire ou
polynucléaire. L'hyperproteinorachie et l'hypoglycorachie sont nettes. Le pronostic
est réservé en cas detroubles de la conscience.

e. Méningites Purulentes aseptiques: méningites décapitées

e.1. Méningites à liquide clair: virales, listériose, tuberculeuses
-Formes cliniques: selon l’âge

Chez le nouveau-né, La présentation clinique n’est pas spécifique

- Refus de boire

- Hypotonie axiale.

- Fièvre ou hypothermie

- Troubles de la réactivité

- Troubles de la conscience.

- Convulsions.

- Troubles respiratoires : apnée, irrégularité respiratoire.

- Accès de cyanose.

Chez le nourrisson: Il s’agit d’un enfant fébrile avec troubles de comportement (agité,
somnolent), fixité du regard, refus de l’alimentation, geignard, l’examen doit chercher un
bombement de la fontanelle antérieure en dehors des cris en position assise et une
hypotonie axiale qui remplace souvent à cet âge la raideur rachidienne.

10
Parfois le diagnostic est encore plus difficile (tableau de diarrhée aigüe fébrile ou de fièvre
isolée sans signes accompagnateurs)

NB : La survenue de convulsion dans un contexte de fièvre indique systématiquement une

PL avant l’âge de 6 mois. Entre 6 et 12 mois l’indication de la PL est discutée au cas par cas.

Chez l’enfant : Le diagnostic est plus facile :

Le début est en règle brutal, marqué par une ascension thermique à 39° - 40°, des
céphalées, des vomissements, parfois une somnolence.

A la phase d’état :

* Syndrome infectieux : fièvre, frissons, altération de l’état général.

* Syndrome méningé :

Chez le sujet âgé :

Souvent il s’agit d’un tableau clinique trompeur avec un syndrome confusionnel aigu,
un syndrome psychiatrique ou une forme comateuse d’emblée. Les germes en cause c’est
surtout pneumocoque, mais aussi méningocoque et Listeria.

Formes atypiques

La difficulté est ici de penser à la méningite et de ne pas omettre la PL. Les signes méningés
peuvent être discrets ou absents :

– coma fébrile ;

– purpura fébrile ;

– convulsions fébriles ;

– troubles psychiatriques fébriles ;

– déficit neurologique fébrile (après avoir éliminé un abcès du cerveau) ;

– fièvre au long cours inexpliquée.

11
 5. Différentiel
a. Hémorragie méningée
- De début brutal (en coup de poignard) avec une fièvre retardée, elle est reconnue à la PL
devant un LCS hémorragique, incoagulable et uniformément teinté à l’épreuve des trois
tubes.

- certaines méningites ont un LCS hémorragique, d’où la mise en culture systématique de

tout LCS hémorragique.

b. Méningisme
Il s’agit d ²’un tableau clinique de méningite non compliqué, mais le LCS est normal. Il est
fréquent, surtout chez l’enfant, au cours de diverses maladies fébriles infectieuses en
particulier ORL (virose, angine, pneumopathie) et la fièvre typhoïde.

6. Traitement
• Antibiothérapie:

• Urgente

• Voie parentérale

• Orientée par l’examen direct, l’âge, le terrain, secondairement adaptée à la culture

• ATB avant PL si : purpura fulminans, forte suspicion de méningite et PL cntre

indiquée

Antibiothérapie de 1ère intention en fonction de l'âge (si examen direct -)

12
NB : Durée du traitement

Méningocoque : 7 jours

Pneumocoque : 10 à 14 jours

Streptocoque B : 14 à 21 jours

Haemophilus : 7 jours

Listéria: 21 jours

E coli: 21 jours

Antibiothérapie de 1ère intention en fonction de l’examen direct

13
7. Corticothérapie
• Bénéfice sur la mortalité et les séquelles audiditive

• Méningite à Méningocoque, Pneumocoque, Haemophilus

• Dexaméthasone injectable, à débuter avant ou de façon concomitante

• À l'antibiothérapie. La posologie : 10 mg/6 heures pendant 4 jours (adulte), 0,15

m/kg/6 heures pendant 4 jours (enfant)

8. Surveillance
• Clinique : c’est la surveillance de la température, l’état neurologique, l’état
hémodynamique, l’examen cutané et pour le nouveau-né et le nourrisson : la
mesure quotidienne du périmètre crânien, la prise de poids (sécrétion inappropriée
d’ADH).

• Paraclinique : La PL de contrôle (à 48 - 72h) ne doit pas être systématiquement,

elle est indiquée si : évolution défavorable (imagerie avant), méningite à
Pneumocoque ou germes inhabituels

14
 9. Complications
• On distingue les complications neurologiques et extra-neurologiques :

• Encéphalite, Ventriculite

• Suppuration intra-cérébrale (abcès, empyème..)

• Cloisonnement méningé, hydrocéphalie

• Thrombophlébite cérébrale

• Vascularite cérébrale per et post-infectieuse

• Etat de choc septique (purpura fulminans)

• Décompensation d’une comorbidité

• Troubles hydro-électrolytiques

II. LA PONCTION LOMBAIRE : INDICATIONS, PRECAUTIONS ET TECHNIQUES

1. Indications
Le diagnostic de méningite repose exclusivement sur l’analyse du LCS obtenu par la PL
pratiquée à l’hôpital et en urgence à la moindre suspicion, devant un tableau typique ou
atypique.

2. Précautions
 Le scanner cérébral doit précéder la PL en cas d’altération profonde de l’état de
conscience (GSG ≤10), en cas de convulsions hémicorporelles avant l’âge de 5 ans et
quel que soit le type de convulsions après cet âge ou en cas de signes neurologiques de
localisation cérébral (Troubles de la vigilance, Anomalies pupillaires, ou dysautonomie,
réaction de décortication ou de décérébration).

 Manipuler le LCR avec précaution.

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  Informer le laboratoire en cas de : suspicion de germes anaerobie, germes atypiques, ATB
en cours.

3. Contre-indications
- Infection cutanée étendue au site de ponction ;

- Instabilité hémodynamique ou respiratoire ;

- Troubles de l’hémostase connus (hémophilie, autre oagulopathie, nombre de plaquettes

inférieur à 50 000/mm3)

- Prise de traitement anticoagulant à dose efficace quel qu’il soit (héparine fractionnée ou
non, antivitamine K oral ou anticoagulants oraux directs),

- Saignements spontanés évoquant une CIVD

- Les signes d’engagement cérébral ou la présence d’un effet de masse à l’imagerie

cérébrale.

4. Techniques
Entretien avec le patient le garde malade

• Matériel: Plateau sterile, haricot, Masque, gants stériles, champs stériles, sur blouse,
compresses stériles, adhésif, aiguille à PL (G22 enfant, G20 ou G22 adulte), tubes,
necessaire pour l’anesthésie locale

• Position:

• Décubitus lateral gauche, recroqueviller

• Assis au bord du lit, avec apuis sur une table

• Asepsie:

• Solution hydroalcolique

• Alcool, solution iodée

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• Repères:

• Intersection ligne des épineuses et crêtes iliaques : L4

• Ponction: Entre L4L5, L3L4

• Biseau de l’aiguille parallèle à l’axe vertébrale, légère orientation raustrale de

l’aiguille vers l’ombilic du patient. L’entrée dans l’espace sous arachnoidien
s’accompagne d’une sensation de la chute de résistance (franchissement du
ligament jaune). On retire le mandarin pour permettre l’écoulement du LCR.
Retrait de l’aiguille et pansement adhésif stérile

5. Analyse du LCR
Aspect :

- Clair eau de roche

- Pression d’écoulement
- Trouble
- Purulent
- Hématique
- Xanthochromique

6. Biochimique :
* protéinorachie (valeur normale : 0,20 g/l à 0,40 g/l ; pour le nouveau-né : valeur normale
≤1,2 g/l)

* glycorachie, à comparer avec la glycémie simultanée (normale ≥à la moitié de la glycémie,

soit 0,50 à 0,60 g/l ou 2,8 à 3,3 mmol/l) ;

* chlorurorachie (valeur normale : 120 mmol/l) ;

*Lactates dans le LCS (si < 3,2 mmol/l, méningite bactérienne très peu probable).

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 7. Cytologie :
La PL permet d'affirmer le diagnostic de méningite en montrant

Une réaction cellulaire supérieure à 5 éléments/mm3 pour l’adulte, l’enfant et le nourrisson et

supérieure à 30 éléments/mm3 pour le nouveau-né.

8. Bactériologie
- Examen direct,
- Cultures,
- Recherche Ag solubles,
- PCR.

III. PRELEVEMENT, CONDITIONNEMENT ET ACHEMINEMENT DES

ECHANTILLONS DE LCR

1. Prélèvement
Analyse au laboratoire du Liquide céphalo-rachidien (LCR) obtenu après une ponction lombaire
(PL) est un acte médical, utiliser pour le diagnostic de certitude de la méningite.

Le prélèvement se fait par introduction d’une très fine aiguille entre les vertèbres lombaires,
situées dans la partie basse du dos (L3-L4).

18
2. Indications
• Syndrome méningé (tout syndrome méningé nécessite une ponction lombaire)

• Comas (surtout fébriles, tableaux cliniques évoquant une maladie du sommeil ou une
hémorragie méningée).

3. Contre-indications
• Hypertension intracrânienne

• Mal de Pott (Tuberculose vertébrale)

• Syndrome hémorragique (saignement diffus)

4. Matériel de prélèvement :
• Désinfectant pour la peau : eau de Javel 1%, alcool 70% et povidone iodée 2%.

• Alcool

• Gants stériles

• Masque chirurgical

• Gaze stérile

• Pansement adhésif

Aiguille de ponction lombaire (PL) 22 gauge/89 mm (3.5") pour les adultes 23 gauge/64 mm
(2.5") pour les enfants.

19
5. Technique
• Être assisté par un aide facilitant le maintien du patient en bonne position

• Utiliser un matériel parfaitement stérile (aiguilles spéciales, à biseau court et à mandrin)

• Respecter une bonne asepsie (lavage des mains à l'eau et au savon en se brossant les
ongles, désinfection à l'alcool à 90° et ensuite port des gants)

• Mettre le patient en position assise ou couchée avec un dos le plus rond possible

• Vérifier que le mandrin coulisse bien (Aiguille)

• Repérer le site avec le doigt désinfecté à l'alcool

20
• Piquer entre les deux épineuses (L3-L4), allant un peu vers le haut, mais en restant sur la
ligne médiane jusqu’à l’espace sous-arachnoïdien (juste après avoir vaincu cette
résistance).

• Retirer le mandrin pour le recueil du LCR (laisser couler en gouttes rapprochées; ne

jamais aspirer)

• Recueillir dans deux tubes (environ 5 cc pour un adulte et 3 cc chez un enfant)

• Une 1er partie du LCR (1 à 1,5 ml) sera placée dans un tube sec

• La 2e partie du LCR (0,5 ml) sera inoculé dans le TI (Trans-Isolate)

• La 3e partie (0,5 à 1 ml) sera placée dans un cryotube

• Réinsérer le mandrin dans l’aiguille

• Retirer doucement l'aiguille

• Appliquer un pansement adhésif

21
6. Conditionnement et acheminement des échantillons
• Étiqueter les échantillons

• Date et heure de prélèvement

• Nom du patient (si possible)

• Numéro EPID (CCC-RRR-DDD-AA-NNNN)

• Tout autre identifiant nécessaire

• Tous les spécimens et échantillons cliniques doivent être accompagnés d'un formulaire
d'investigation de cas.

6.1. Importance du conditionnement et d’un transport approprié :

• Réduire le risque d'exposition à l'homme et l'environnement

• Maintenir l'intégrité de l'échantillon

• Garantir un diagnostic précis et sauver des vies

6.2. Réalisation de la pcr

• La PCR est l’un des tests de confirmation de la méningite bactérienne aigue

• Aliquoter entre 250-500µL de LCR de façon aseptique dans un cryotube stérile et

l’étiqueter (code Epi, nom, date de prélèvement)

• Congeler immédiatement (si possible) ou le garder réfrigérer et le transporter dans le

triple emballage avec les Ice packs vers le laboratoire de référence

• Acheminer Le LCR dans un triple emballage immédiatement dans l’heure qui suit le
prélèvement en vue des tests microbiologique

• Coordonner avec le laboratoire de réception pour assurer le traitement immédiat de

l'échantillon dès son arrivée

• Ne pas réfrigérer le LCR

• Les bactéries de la méningite sont fragiles et meurent rapidement à température ambiante

ou basse (sauf congélation dans un milieu approprié)

22
• S'il est impossible de transporter les LCR vers un laboratoire de référence dans l’heure, il
faut utiliser un milieu de transport

• T-I est un milieu biphasique utile pour la culture primaire et transport des bactéries de la
méningite

• Les flacons doivent être stockés à +4°C

• Avant de l’utiliser, le laisser à revenir température ambiante avant d’inoculer le LCR pour
éviter la lyse bactérienne par le froid

6.3. Inoculation du trans-isolate

• Soulever le couvercle en métal et désinfectez avec 70 % d'éthanol

• Inoculer 0,5 à 1,0 ml de LCR dans le mileu T-I,

• Désinfecter le bouchon avec 70 % d'éthanol.

• Étiqueter le tube et retourner plusieurs fois pour mélanger

• Acheminer dans les 24 heures qui suivent l’inoculation

23
6.4. Acheminement des échantillons : trans-isolate
• Si le transport dépasse 24h, ventiler le TI

• Insérez une aiguille bouchée de coton stérile pour ventiler ce support (ne pas toucher le
support) et incuber à 35-37 °C avec 5 % de CO2 (Jarre à bougie)

• Retirer de l'incubateur et placer à température ambiante si transport pas possible dans les
4 jours,

• Retirer l'aiguille, désinfecter avec 70 % d'éthanol et replacer le capuchon métallique

avant le transport

• Utiliser un triple emballage pour l'expédition à température ambiante

24
6.5. Triple emballage

• Placer les échantillons dans un sac transparent pour risques biologiques avec un tampon
absorbant liquide qui absorbera rapidement les fluides corporels en cas de fuite

• Le sac doit avoir une fermeture à glissière pour permettre plusieurs accéder à l'échantillon
et être imprimé avec un danger biologique

• Placez tous les échantillons et formulaires de rapport de cas dans une glacière à risque
biologique et transportez-les immédiatement au laboratoire (si possible) à température
ambiante dans l'heure qui suit.

Récapitulatif

• Nature de l’échantillon : LCR tube stérile

• Prélever dans un maximum de 72h après le début des symptômes

• Prélever avant le début de toute antibiothérapies de préférence, (mais ne pas empêcher la

thérapie)

25
 • Transporter dans un milieu Trans-Isolate

• Conserver à la T° ambiante

• Transporter dans un Triple emballage

• Porter systématiquement un EPI

• Détruire les déchets dans un autoclave/incinérateur

IV. DIAGNOSTIC DE LA MENINGITE BACTERIENNE AU LABORATOIRE

1. Démarche diagnostique sur le liquide céphalorachidien

2. Importance de différentes techniques

• Ag solubles : test rapide (<1heure) mais est moins sensibles, problème d’agglutination
croisée Y/W, non détection du X),

26
 • Gram : rapide mais moins sensible,

• Culture est le Gold standard permet la surveillance de la RAM,

• PCR permet le diagnostic précoce et le typage des bactéries responsable de la méningite

(environ1 heure), mais ne permet pas la surveillance de la RAM.

CONCLUSION

Les causes courantes de méningites bactériennes: N. méningitidis, [Link] chez les

enfants et les adultes et listeria chez les nouveaux nés et le sujet âgé. Les caractéristiques
typiques peuvent être subtiles ou absentes chez le nourrisson, le sujet âgé, les personnes
immunodéprimés. PL doit être différé en attendant les résultats de l’imagerie en cas de signes
neurologiques focaux. Traiter la méningite bactérienne dès que possible. Antibiothérapie
empirique comprend les C3G (N. méningitidis, [Link]), l’ampicilline (listeria), la
vancomycine (souches résistantes de S Pneumoniae.

27