‫ﺑﺴﻢ ﺍﷲ ﺍﻟﺮﺣﻤﺎﻥ ﺍﻟﺮﺣﻴﻢ‬

‫ﺳﺒﺤﺎﻧﻚ ﻻ ﻋﻠﻢ ﻟﻨﺎ ﺇﻻ ﻣﺎ ﻋﻠﻤﺘﻨﺎ‬

‫ﺇﻧﻚ ﺃﻧﺖ ﺍﻟﻌﻠﻴﻢ ﺍﻟﺤﻜﻴﻢ‬
‫ﺳﻮﺭﺓ ﺍﻟﺒﻘﺮﺓ‬
‫ﺍﻵﻳﺔ ‪31‬‬
 MOHAMMED V DE RABAT

FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE - RABAT

DOYENS HONORAIRES :

1962 – 1969 : Professeur Abdelmalek FARAJ

1969 – 1974 : Professeur Abdellatif BERBICH
1974 – 1981 : Professeur Bachir LAZRAK
1981 – 1989 : Professeur Taieb CHKILI
1989 – 1997 : Professeur Mohamed Tahar ALAOUI
1997 – 2003 : Professeur Abdelmajid BELMAHI

2003 - 2013 : Professeur Najia HAJJAJ – HASSOUNI

ADMINISTRATION :
Doyen
Professeur Mohamed ADNAOUI

Vice-Doyen chargé des Affaires Académiques et estudiantines

Professeur Brahim LEKEHAL

Vice-Doyen chargé de la Recherche et de la Coopération

Professeur Toufiq DAKKA

Vice-Doyen chargé des Affaires Spécifiques à la Pharmacie

Professeur Jamal TAOUFIK

Secrétaire Général
Mr. Mohamed KARRA
1 - ENSEIGNANTS-CHERCHEURS MEDECINS ET PHARMACIENS

PROFESSEURS :
DECEMBRE 1984

Pr. MAAOUNI Abdelaziz Médecine Interne – Clinique Royale

Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajdi Anesthésie -Réanimation
Pr. SETTAF Abdellatif Pathologie Chirurgicale

NOVEMBRE ET DECEMBRE 1985

Pr. BENSAID Younes Pathologie Chirurgicale

JANVIER, FEVRIER ET DECEMBRE 1987

Pr. LACHKAR Hassan Médecine Interne

Pr. YAHYAOUI Mohamed Neurologie

DECEMBRE 1989

Pr. ADNAOUI Mohamed Médecine Interne –Doyen de la FMPR

Pr. OUAZZANI Taïbi Mohamed Réda Neurologie

JANVIER ET NOVEMBRE 1990

Pr. HACHIM Mohammed* Médecine-Interne

Pr. KHARBACH Aîcha Gynécologie -Obstétrique
Pr. TAZI Saoud Anas Anesthésie Réanimation

FEVRIER AVRIL JUILLET ET DECEMBRE 1991

Pr. AZZOUZI Abderrahim Anesthésie Réanimation- Doyen de FMPO

Pr. BAYAHIA Rabéa Néphrologie
Pr. BELKOUCHI Abdelkader Chirurgie Générale
Pr. BENCHEKROUN Belabbes Abdellatif Chirurgie Générale
Pr. BENSOUDA Yahia Pharmacie galénique
Pr. BERRAHO Amina Ophtalmologie
Gynécologie Obstétrique Méd. Chef Maternité des
Pr. BEZAD Rachid
Orangers
Pr. CHERRAH Yahia Pharmacologie
Pr. CHOKAIRI Omar Histologie Embryologie
Pr. KHATTAB Mohamed Pédiatrie
Pr. SOULAYMANI Rachida Pharmacologie- Dir. du Centre National PV Rabat
Pr. TAOUFIK Jamal Chimie thérapeutique V.D à la pharmacie+Dir. du CEDOC +
Directeur du Médicament
DECEMBRE 1992

Pr. AHALLAT Mohamed Chirurgie Générale Doyen de FMPT

Pr. BENSOUDA Adil Anesthésie Réanimation
Pr. CHAHED OUAZZANI Laaziza Gastro-Entérologie
Pr. CHRAIBI Chafiq Gynécologie Obstétrique
Pr. EL OUAHABI Abdessamad Neurochirurgie
Pr. FELLAT Rokaya Cardiologie
Pr. GHAFIR Driss* Médecine Interne
Pr. JIDDANE Mohamed Anatomie
Pr. TAGHY Ahmed Chirurgie Générale
Pr. ZOUHDI Mimoun Microbiologie
MARS 1994

Pr. BENJAAFAR Noureddine Radiothérapie

Pr. BEN RAIS Nozha Biophysique
Pr. CAOUI Malika Biophysique
Endocrinologie et Maladies Métaboliques Doyen de la
Pr. CHRAIBI Abdelmjid FMPA
Pr. EL AMRANI Sabah Gynécologie Obstétrique
Pr. EL BARDOUNI Ahmed Traumato-Orthopédie
Pr. EL HASSANI My Rachid Radiologie
Pr. ERROUGANI Abdelkader Chirurgie Générale – Directeur du CHIS-Rabat
Pr. ESSAKALI Malika Immunologie
Pr. ETTAYEBI Fouad Chirurgie Pédiatrique
Pr. HASSAM Badredine Dermatologie
Pr. IFRINE Lahssan Chirurgie Générale
Pr. MAHFOUD Mustapha Traumatologie – Orthopédie
Pr. RHRAB Brahim Gynécologie –Obstétrique
Pr. SENOUCI Karima Dermatologie
MARS 1994

Pr. ABBAR Mohamed* Urologie Directeur Hôpital My Ismail Meknès

Pr. ABDELHAK M’barek Chirurgie – Pédiatrique
Pr. BENTAHILA Abdelali Pédiatrie
Pr. BENYAHIA Mohammed Ali Gynécologie – Obstétrique
Pr. BERRADA Mohamed Saleh Traumatologie – Orthopédie
Pr. CHERKAOUI Lalla Ouafae Ophtalmologie
Pr. LAKHDAR Amina Gynécologie Obstétrique
Pr. MOUANE Nezha Pédiatrie
MARS 1995

Pr. ABOUQUAL Redouane Réanimation Médicale

Pr. AMRAOUI Mohamed Chirurgie Générale
Pr. BAIDADA Abdelaziz Gynécologie Obstétrique
Pr. BARGACH Samir Gynécologie Obstétrique
Pr. DRISSI KAMILI Med Nordine* Anesthésie Réanimation
Pr. EL MESNAOUI Abbes Chirurgie Générale
Pr. ESSAKALI HOUSSYNI Leila Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. HDA Abdelhamid* Cardiologie Inspecteur du Service de Santé des FAR
Pr. IBEN ATTYA ANDALOUSSI Ahmed Urologie
Pr. OUAZZANI CHAHDI Bahia Ophtalmologie
Pr. SEFIANI Abdelaziz Génétique
Pr. ZEGGWAGH Amine Ali Réanimation Médicale
DECEMBRE 1996

Pr. AMIL Touriya* Radiologie

Pr. BELKACEM Rachid Chirurgie Pédiatrie
Pr. BOULANOUAR Abdelkrim Ophtalmologie
Pr. EL ALAMI EL FARICHA EL Hassan Chirurgie Générale
Pr. GAOUZI Ahmed Pédiatrie
Pr. MAHFOUDI M’barek* Radiologie
Pr. OUZEDDOUN Naima Néphrologie
Pr. ZBIR EL Mehdi* Cardiologie DirecteurHôp.Mil. d’Instruction Med V Rabat
NOVEMBRE 1997

Pr. ALAMI Mohamed Hassan Gynécologie-Obstétrique

Pr. BEN SLIMANE Lounis Urologie
Pr. BIROUK Nazha Neurologie
Pr. ERREIMI Naima Pédiatrie
Pr. FELLAT Nadia Cardiologie
Pr. KADDOURI Noureddine Chirurgie Pédiatrique
Pr. KOUTANI Abdellatif Urologie
Pr. LAHLOU Mohamed Khalid Chirurgie Générale
Pr. MAHRAOUI CHAFIQ Pédiatrie
Pr. TOUFIQ Jallal Psychiatrie Directeur Hôp.Ar-razi Salé
Pr. YOUSFI MALKI Mounia Gynécologie Obstétrique
NOVEMBRE 1998

Pr. BENOMAR ALI Neurologie Doyen de la FMP Abulcassis

Pr. BOUGTAB Abdesslam Chirurgie Générale
Pr. ER RIHANI Hassan Oncologie Médicale
Pr. BENKIRANE Majid* Hématologie
JANVIER 2000

Pr. ABID Ahmed* Pneumo-phtisiologie

Pr. AIT OUAMAR Hassan Pédiatrie
Pr. BENJELLOUN Dakhama Badr.Sououd Pédiatrie
Pr. BOURKADI Jamal-Eddine Pneumo-phtisiologie Directeur Hôp. My Youssef
Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Al Montacer Chirurgie Générale
Pr. ECHARRAB El Mahjoub Chirurgie Générale
Pr. EL FTOUH Mustapha Pneumo-phtisiologie
Pr. EL MOSTARCHID Brahim* Neurochirurgie
Pr. MAHMOUDI Abdelkrim* Anesthésie-Réanimation
Pr. TACHINANTE Rajae Anesthésie-Réanimation
Pr. TAZI MEZALEK Zoubida Médecine Interne
NOVEMBRE 2000

Pr. AIDI Saadia Neurologie

Pr. AJANA Fatima Zohra Gastro-Entérologie
Pr. BENAMR Said Chirurgie Générale
Pr. CHERTI Mohammed Cardiologie
Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Selma Anesthésie-Réanimation
Pr. EL HASSANI Amine Pédiatrie - Directeur Hôp.Cheikh Zaid
Pr. EL KHADER Khalid Urologie
Pr. EL MAGHRAOUI Abdellah* Rhumatologie
Pr. GHARBI Mohamed El Hassan Endocrinologie et Maladies Métaboliques
Pr. MDAGHRI ALAOUI Asmae Pédiatrie
Pr. ROUIMI Abdelhadi* Neurologie
DECEMBRE 2000

Pr.ZOHAIR ABDELLAH * ORL

Pr. BALKHI Hicham* Anesthésie-Réanimation
Pr. BENABDELJLIL Maria Neurologie
Pr. BENAMAR Loubna Néphrologie
Pr. BENAMOR Jouda Pneumo-phtisiologie
Pr. BENELBARHDADI Imane Gastro-Entérologie
Pr. BENNANI Rajae Cardiologie
Pr. BENOUACHANE Thami Pédiatrie
Pr. BEZZA Ahmed* Rhumatologie
Pr. BOUCHIKHI IDRISSI Med Larbi Anatomie
Pr. BOUMDIN El Hassane* Radiologie
Pr. CHAT Latifa Radiologie
Pr. DAALI Mustapha* Chirurgie Générale
Pr. DRISSI Sidi Mourad* Radiologie
Pr. EL HIJRI Ahmed Anesthésie-Réanimation
Pr. EL MAAQILI Moulay Rachid Neuro-Chirurgie
Pr. EL MADHI Tarik Chirurgie-Pédiatrique
Pr. EL OUNANI Mohamed Chirurgie Générale
Pr. ETTAIR Said Pédiatrie - Directeur Hôp. d’EnfantsRabat
Pr. GAZZAZ Miloudi* Neuro-Chirurgie
Pr. HRORA Abdelmalek Chirurgie Générale
Pr. KABBAJ Saad Anesthésie-Réanimation
Pr. KABIRI EL Hassane* Chirurgie Thoracique
Pr. LAMRANI Moulay Omar Traumatologie Orthopédie
Pr. LEKEHAL Brahim Chirurgie Vasculaire Périphérique
Pr. MAHASSIN Fattouma* Médecine Interne
Pr. MEDARHRI Jalil Chirurgie Générale
Pr. MIKDAME Mohammed* Hématologie Clinique
Pr. MOHSINE Raouf Chirurgie Générale
Pr. NOUINI Yassine Urologie - Directeur Hôpital Ibn Sina
Pr. SABBAH Farid Chirurgie Générale
Pr. SEFIANI Yasser Chirurgie Vasculaire Périphérique
Pr. TAOUFIQ BENCHEKROUN Soumia Pédiatrie
DECEMBRE 2002

Pr. AL BOUZIDI Abderrahmane* Anatomie Pathologique

Pr. AMEUR Ahmed * Urologie
Pr. AMRI Rachida Cardiologie
Pr. AOURARH Aziz* Gastro-Entérologie
Pr. BAMOU Youssef * Biochimie-Chimie
Pr. BELMEJDOUB Ghizlene* Endocrinologie et Maladies Métaboliques
Pr. BENZEKRI Laila Dermatologie
Pr. BENZZOUBEIR Nadia Gastro-Entérologie
Pr. BERNOUSSI Zakiya Anatomie Pathologique
Pr. BICHRA Mohamed Zakariya* Psychiatrie
Pr. CHOHO Abdelkrim * Chirurgie Générale
Pr. CHKIRATE Bouchra Pédiatrie
Pr. EL ALAMI EL Fellous Sidi Zouhair Chirurgie Pédiatrique
Pr. EL HAOURI Mohamed * Dermatologie
Pr. FILALI ADIB Abdelhai Gynécologie Obstétrique
Pr. HAJJI Zakia Ophtalmologie
Pr. IKEN Ali Urologie
Pr. JAAFAR Abdeloihab* Traumatologie Orthopédie
Pr. KRIOUILE Yamina Pédiatrie
Pr. MABROUK Hfid* Traumatologie Orthopédie
Pr. MOUSSAOUI RAHALI Driss* Gynécologie Obstétrique
Pr. OUJILAL Abdelilah Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. RACHID Khalid * Traumatologie Orthopédie
Pr. RAISS Mohamed Chirurgie Générale
Pr. RGUIBI IDRISSI Sidi Mustapha* Pneumo-phtisiologie
Pr. RHOU Hakima Néphrologie
Pr. SIAH Samir * Anesthésie Réanimation
Pr. THIMOU Amal Pédiatrie
Pr. ZENTAR Aziz* Chirurgie Générale
JANVIER 2004

Pr. ABDELLAH El Hassan Ophtalmologie

Pr. AMRANI Mariam Anatomie Pathologique
Pr. BENBOUZID Mohammed Anas Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. BENKIRANE Ahmed* Gastro-Entérologie
Pr. BOULAADAS Malik Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale
Pr. BOURAZZA Ahmed* Neurologie
Pr. CHAGAR Belkacem* Traumatologie Orthopédie
Pr. CHERRADI Nadia Anatomie Pathologique
Pr. EL FENNI Jamal* Radiologie
Pr. EL HANCHI ZAKI Gynécologie Obstétrique
Pr. EL KHORASSANI Mohamed Pédiatrie
Pr. EL YOUNASSI Badreddine* Cardiologie
Pr. HACHI Hafid Chirurgie Générale
Pr. JABOUIRIK Fatima Pédiatrie
Pr. KHARMAZ Mohamed Traumatologie Orthopédie
Pr. MOUGHIL Said Chirurgie Cardio-Vasculaire
Pr. OUBAAZ Abdelbarre * Ophtalmologie
Pr. TARIB Abdelilah* Pharmacie Clinique
Pr. TIJAMI Fouad Chirurgie Générale
Pr. ZARZUR Jamila Cardiologie
JANVIER 2005

Pr. ABBASSI Abdellah Chirurgie Réparatrice et Plastique

Pr. AL KANDRY Sif Eddine* Chirurgie Générale
Pr. ALLALI Fadoua Rhumatologie
Pr. AMAZOUZI Abdellah Ophtalmologie
Pr. AZIZ Noureddine* Radiologie
Pr. BAHIRI Rachid Rhumatologie Directeur Hôp. Al Ayachi Salé
Pr. BARKAT Amina Pédiatrie
Pr. BENYASS Aatif Cardiologie
Pr. DOUDOUH Abderrahim* Biophysique
Pr. EL HAMZAOUI Sakina * Microbiologie
Pr. HAJJI Leila Cardiologie (mise en disponibilité
Pr. HESSISSEN Leila Pédiatrie
Pr. JIDAL Mohamed* Radiologie
Pr. LAAROUSSI Mohamed Chirurgie Cardio-vasculaire
Pr. LYAGOUBI Mohammed Parasitologie
Pr. RAGALA Abdelhak Gynécologie Obstétrique
Pr. SBIHI Souad Histo-Embryologie Cytogénétique
Pr. ZERAIDI Najia Gynécologie Obstétrique
AVRIL 2006

Pr. ACHEMLAL Lahsen* Rhumatologie

Pr. AKJOUJ Said* Radiologie
Pr. BELMEKKI Abdelkader* Hématologie
Pr. BENCHEIKH Razika O.R.L
Pr. BIYI Abdelhamid* Biophysique
Pr. BOUHAFS Mohamed El Amine Chirurgie - Pédiatrique
Pr. BOULAHYA Abdellatif* Chirurgie Cardio – Vasculaire.
Pr. CHENGUETI ANSARI Anas Gynécologie Obstétrique
Pr. DOGHMI Nawal Cardiologie
Pr. FELLAT Ibtissam Cardiologie
Pr. FAROUDY Mamoun Anesthésie Réanimation
Pr. HARMOUCHE Hicham Médecine Interne
Pr. HANAFI Sidi Mohamed* Anesthésie Réanimation
Pr. IDRISS LAHLOU Amine* Microbiologie
Pr. JROUNDI Laila Radiologie
Pr. KARMOUNI Tariq Urologie
Pr. KILI Amina Pédiatrie
Pr. KISRA Hassan Psychiatrie
Pr. KISRA Mounir Chirurgie – Pédiatrique
Pr. LAATIRIS Abdelkader* Pharmacie Galénique
Pr. LMIMOUNI Badreddine* Parasitologie
Pr. MANSOURI Hamid* Radiothérapie
Pr. OUANASS Abderrazzak Psychiatrie
Pr. SAFI Soumaya* Endocrinologie
Pr. SEKKAT Fatima Zahra Psychiatrie
Pr. SOUALHI Mouna Pneumo – Phtisiologie
Pr. TELLAL Saida* Biochimie
Pr. ZAHRAOUI Rachida Pneumo – Phtisiologie
DECEMBRE 2006

Pr SAIR Khalid Chirurgie générale Dir. Hôp.Av.Marrakech

OCTOBRE 2007

Pr. ABIDI Khalid Réanimation médicale

Pr. ACHACHI Leila Pneumo phtisiologie
Pr. ACHOUR Abdessamad* Chirurgie générale
Pr. AIT HOUSSA Mahdi * Chirurgie cardio vasculaire
Pr. AMHAJJI Larbi * Traumatologie orthopédie
Pr. AOUFI Sarra Parasitologie
Pr. BAITE Abdelouahed * Anesthésie réanimation Directeur ERSSM
Pr. BALOUCH Lhousaine * Biochimie-chimie
Pr. BENZIANE Hamid * Pharmacie clinique
Pr. BOUTIMZINE Nourdine Ophtalmologie
Pr. CHERKAOUI Naoual * Pharmacie galénique
Pr. EHIRCHIOU Abdelkader * Chirurgie générale
Pr. EL BEKKALI Youssef * Chirurgie cardio-vasculaire
Pr. EL ABSI Mohamed Chirurgie générale
Pr. EL MOUSSAOUI Rachid Anesthésie réanimation
Pr. EL OMARI Fatima Psychiatrie
Pr. GHARIB Noureddine Chirurgie plastique et réparatrice
Pr. HADADI Khalid * Radiothérapie
Pr. ICHOU Mohamed * Oncologie médicale
Pr. ISMAILI Nadia Dermatologie
Pr. KEBDANI Tayeb Radiothérapie
Pr. LALAOUI SALIM Jaafar * Anesthésie réanimation
Pr. LOUZI Lhoussain * Microbiologie
Pr. MADANI Naoufel Réanimation médicale
Pr. MAHI Mohamed * Radiologie
Pr. MARC Karima Pneumo phtisiologie
Pr. MASRAR Azlarab Hématologie biologique
Pr. MRANI Saad * Virologie
Pr. OUZZIF Ez zohra * Biochimie-chimie
Pr. RABHI Monsef * Médecine interne
Pr. RADOUANE Bouchaib* Radiologie
Pr. SEFFAR Myriame Microbiologie
Pr. SEKHSOKH Yessine * Microbiologie
Pr. SIFAT Hassan * Radiothérapie
Pr. TABERKANET Mustafa * Chirurgie vasculaire périphérique
Pr. TACHFOUTI Samira Ophtalmologie
Pr. TAJDINE Mohammed Tariq* Chirurgie générale
Pr. TANANE Mansour * Traumatologie-orthopédie
Pr. TLIGUI Houssain Parasitologie
Pr. TOUATI Zakia Cardiologie
DECEMBRE 2008

Pr TAHIRI My El Hassan* Chirurgie Générale

MARS 2009
Pr. ABOUZAHIR Ali * Médecine interne
Pr. AGADR Aomar * Pédiatrie
Pr. AIT ALI Abdelmounaim * Chirurgie Générale
Pr. AIT BENHADDOU El Hachmia Neurologie
Pr. AKHADDAR Ali * Neuro-chirurgie
Pr. ALLALI Nazik Radiologie
Pr. AMINE Bouchra Rhumatologie
Pr. ARKHA Yassir Neuro-chirurgie Directeur Hôp.des Spécialités
Pr. BELYAMANI Lahcen* Anesthésie Réanimation
Pr. BJIJOU Younes Anatomie
Pr. BOUHSAIN Sanae * Biochimie-chimie
Pr. BOUI Mohammed * Dermatologie
Pr. BOUNAIM Ahmed * Chirurgie Générale
Pr. BOUSSOUGA Mostapha * Traumatologie-orthopédie
Pr. CHTATA Hassan Toufik * Chirurgie Vasculaire Périphérique
Pr. DOGHMI Kamal * Hématologie clinique
Pr. EL MALKI Hadj Omar Chirurgie Générale
Pr. EL OUENNASS Mostapha* Microbiologie
Pr. ENNIBI Khalid * Médecine interne
Pr. FATHI Khalid Gynécologie obstétrique
Pr. HASSIKOU Hasna * Rhumatologie
Pr. KABBAJ Nawal Gastro-entérologie
Pr. KABIRI Meryem Pédiatrie
Pr. KARBOUBI Lamya Pédiatrie
Pr. LAMSAOURI Jamal * Chimie Thérapeutique
Pr. MARMADE Lahcen Chirurgie Cardio-vasculaire
Pr. MESKINI Toufik Pédiatrie
Pr. MESSAOUDI Nezha * Hématologie biologique
Pr. MSSROURI Rahal Chirurgie Générale
Pr. NASSAR Ittimade Radiologie
Pr. OUKERRAJ Latifa Cardiologie
Pr. RHORFI Ismail Abderrahmani * Pneumo-Phtisiologie
OCTOBRE 2010

Pr. ALILOU Mustapha Anesthésie réanimation

Pr. AMEZIANE Taoufiq* Médecine Interne
Pr. BELAGUID Abdelaziz Physiologie
Pr. CHADLI Mariama* Microbiologie
Pr. CHEMSI Mohamed* Médecine Aéronautique
Pr. DAMI Abdellah* Biochimie- Chimie
Pr. DARBI Abdellatif* Radiologie
Pr. DENDANE Mohammed Anouar Chirurgie Pédiatrique
Pr. EL HAFIDI Naima Pédiatrie
Pr. EL KHARRAS Abdennasser* Radiologie
Pr. EL MAZOUZ Samir Chirurgie Plastique et Réparatrice
Pr. EL SAYEGH Hachem Urologie
Pr. ERRABIH Ikram Gastro-Entérologie
Pr. LAMALMI Najat Anatomie Pathologique
Pr. MOSADIK Ahlam Anesthésie Réanimation
Pr. MOUJAHID Mountassir* Chirurgie Générale
Pr. NAZIH Mouna* Hématologie
Pr. ZOUAIDIA Fouad Anatomie Pathologique
DECEMBRE 2010

Pr.ZNATI Kaoutar Anatomie Pathologique

MAI 2012

Pr. AMRANI Abdelouahed Chirurgie pédiatrique

Pr. ABOUELALAA Khalil * Anesthésie Réanimation
Pr. BENCHEBBA Driss * Traumatologie-orthopédie
Pr. DRISSI Mohamed * Anesthésie Réanimation
Pr. EL ALAOUI MHAMDI Mouna Chirurgie Générale
Pr. EL KHATTABI Abdessadek * Médecine Interne
Pr. EL OUAZZANI Hanane * Pneumophtisiologie
Pr. ER-RAJI Mounir Chirurgie Pédiatrique
Pr. JAHID Ahmed Anatomie Pathologique
Pr. MEHSSANI Jamal * Psychiatrie
Pr. RAISSOUNI Maha * Cardiologie

* Enseignants Militaires
FEVRIER 2013

Pr.AHID Samir Pharmacologie

Pr.AIT EL CADI Mina Toxicologie
Pr.AMRANI HANCHI Laila Gastro-Entérologie
Pr.AMOR Mourad Anesthésie Réanimation
Pr.AWAB Almahdi Anesthésie Réanimation
Pr.BELAYACHI Jihane Réanimation Médicale
Pr.BELKHADIR Zakaria Houssain Anesthésie Réanimation
Pr.BENCHEKROUN Laila Biochimie-Chimie
Pr.BENKIRANE Souad Hématologie
Pr.BENNANA Ahmed* Informatique Pharmaceutique
Pr.BENSGHIR Mustapha * Anesthésie Réanimation
Pr.BENYAHIA Mohammed * Néphrologie
Pr.BOUATIA Mustapha Chimie Analytique et Bromatologie
Pr.BOUABID Ahmed Salim* Traumatologie orthopédie
Pr BOUTARBOUCH Mahjouba Anatomie
Pr.CHAIB Ali * Cardiologie
Pr.DENDANE Tarek Réanimation Médicale
Pr.DINI Nouzha * Pédiatrie
Pr.ECH-CHERIF EL KETTANI Mohamed Ali Anesthésie Réanimation
Pr.ECH-CHERIF EL KETTANI Najwa Radiologie
Pr.EL FATEMI NIZARE Neuro-chirurgie
Pr.EL GUERROUJ Hasnae Médecine Nucléaire
Pr.EL HARTI Jaouad Chimie Thérapeutique
Pr.EL JAOUDI Rachid * Toxicologie
Pr.EL KABABRI Maria Pédiatrie
Pr.EL KHANNOUSSI Basma Anatomie Pathologique
Pr.EL KHLOUFI Samir Anatomie
Pr.EL KORAICHI Alae Anesthésie Réanimation
Pr.EN-NOUALI Hassane * Radiologie
Pr.ERRGUIG Laila Physiologie
Pr.FIKRI Meryem Radiologie
Pr.GHFIR Imade Médecine Nucléaire
Pr.IMANE Zineb Pédiatrie
Pr.IRAQI Hind Endocrinologie et maladies métaboliques
Pr.KABBAJ Hakima Microbiologie
Pr.KADIRI Mohamed * Psychiatrie
Pr.MAAMAR Mouna Fatima Zahra Médecine Interne
Pr.MEDDAH Bouchra Pharmacologie
Pr.MELHAOUI Adyl Neuro-chirurgie
Pr.MRABTI Hind Oncologie Médicale
Pr.NEJJARI Rachid Pharmacognosie
Pr.OUBEJJA Houda Chirugie Pédiatrique
Pr.OUKABLI Mohamed * Anatomie Pathologique
Pr.RAHALI Younes Pharmacie Galénique
Pr.RATBI Ilham Génétique
Pr.RAHMANI Mounia Neurologie
Pr.REDA Karim * Ophtalmologie
Pr.REGRAGUI Wafa Neurologie
Pr.RKAIN Hanan Physiologie
Pr.ROSTOM Samira Rhumatologie
Pr.ROUAS Lamiaa Anatomie Pathologique
Pr.ROUIBAA Fedoua * Gastro-Entérologie
Pr SALIHOUN Mouna Gastro-Entérologie
Pr.SAYAH Rochde Chirurgie Cardio-Vasculaire
Pr.SEDDIK Hassan * Gastro-Entérologie
Pr.ZERHOUNI Hicham Chirurgie Pédiatrique
Pr.ZINE Ali* Traumatologie Orthopédie
AVRIL 2013

Pr.EL KHATIB MOHAMED KARIM * Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale

MAI 2013

Pr.BOUSLIMAN Yassir Toxicologie

MARS 2014

Pr. ACHIR Abdellah Chirurgie Thoracique

Pr.BENCHAKROUN Mohammed * Traumatologie- Orthopédie
Pr.BOUCHIKH Mohammed Chirurgie Thoracique
Pr. EL KABBAJ Driss * Néphrologie
Pr. EL MACHTANI IDRISSI Samira * Biochimie-Chimie
Pr. HARDIZI Houyam Histologie- Embryologie-Cytogénétique
Pr. HASSANI Amale * Pédiatrie
Pr. HERRAK Laila Pneumologie
Pr. JANANE Abdellah * Urologie
Pr. JEAIDI Anass * Hématologie Biologique
Pr. KOUACH Jaouad* Gynécologie-Obstétrique
Pr. LEMNOUER Abdelhay* Microbiologie
Pr. MAKRAM Sanaa * Pharmacologie
Pr. OULAHYANE Rachid* Chirurgie Pédiatrique
Pr. RHISSASSI Mohamed Jaafar CCV
Pr. SABRY Mohamed* Cardiologie
Pr. SEKKACH Youssef* Médecine Interne
Pr. TAZI MOUKHA Zakia Gynécologie-Obstétrique
AVRIL 2014

Pr.ZALAGH Mohammed ORL

PROFESSEURS AGREGES :
DECEMBRE 2014

Pr. ABILKASSEM Rachid* Pédiatrie

Pr. AIT BOUGHIMA Fadila Médecine Légale
Pr. BEKKALI Hicham * Anesthésie-Réanimation
Pr. BENAZZOU Salma Chirurgie Maxillo-Faciale
Pr. BOUABDELLAH Mounya Biochimie-Chimie
Pr. BOUCHRIK Mourad* Parasitologie
Pr. DERRAJI Soufiane* Pharmacie Clinique
Pr. DOBLALI Taoufik* Microbiologie
Pr. EL AYOUBI EL IDRISSI Ali Anatomie
Pr. EL GHADBANE Abdedaim Hatim* Anesthésie-Réanimation
Pr. EL MARJANY Mohammed* Radiothérapie
Pr. FEJJAL Nawfal Chirurgie Réparatrice et Plastique
Pr. JAHIDI Mohamed* O.R.L
Pr. LAKHAL Zouhair* Cardiologie
Pr. OUDGHIRI NEZHA Anesthésie-Réanimation
Pr. RAMI Mohamed Chirurgie Pédiatrique
Pr. SABIR Maria Psychiatrie
Pr. SBAI IDRISSI Karim* Médecine préventive, santé publique et Hyg.
AOUT 2015

Pr. MEZIANE Meryem Dermatologie

Pr. TAHRI Latifa Rhumatologie
JANVIER 2016

Pr. BENKABBOU Amine Chirurgie Générale

Pr. EL ASRI Fouad* Ophtalmologie
Pr. ERRAMI Noureddine* O.R.L
Pr. NITASSI Sophia O.R.L
JUIN 2017

Pr. ABI Rachid* Microbiologie

Pr. ASFALOU Ilyasse* Cardiologie
Pr. BOUAYTI El Arbi* Médecine préventive, santé publique et Hyg.
Pr. BOUTAYEB Saber Oncologie Médicale
Pr. EL GHISSASSI Ibrahim Oncologie Médicale
Pr. OURAINI Saloua* O.R.L
Pr. RAZINE Rachid Médecine préventive, santé publique et Hyg.
Pr. ZRARA Abdelhamid* Immunologie
* Enseignants Militaires
2 - ENSEIGNANTS-CHERCHEURS SCIENTIFIQUES

PROFESSEURS/Prs. HABILITES

Pr. ABOUDRAR Saadia Physiologie

Pr. ALAMI OUHABI Naima Biochimie-chimie
Pr. ALAOUI KATIM Pharmacologie
Pr. ALAOUI SLIMANI Lalla Naïma Histologie-Embryologie
Pr. ANSAR M’hammed Chimie Organique et Pharmacie Chimique
Pr .BARKIYOU Malika Histologie-Embryologie
Pr. BOUHOUCHE Ahmed Génétique Humaine
Pr. BOUKLOUZE Abdelaziz Applications Pharmaceutiques
Pr. CHAHED OUAZZANI Lalla Chadia Biochimie-chimie
Pr. DAKKA Taoufiq Physiologie
Pr. FAOUZI Moulay El Abbes Pharmacologie
Pr. IBRAHIMI Azeddine Biologie moléculaire/Biotechnologie
Pr. KHANFRI Jamal Eddine Biologie
Pr. OULAD BOUYAHYA IDRISSI Med Chimie Organique
Pr. REDHA Ahlam Chimie
Pr. TOUATI Driss Pharmacognosie
Pr. ZAHIDI Ahmed Pharmacologie

Mise à jour le 10/10/2018

Khaled Abdellah
Chef du Service des Ressources Humaines
Dédicaces
A ceux qui se sont investis corps et âme pour m’aider et m’encourager à aller
de l’avant

A ceux qui m'ont encouragé et soutenu dans les moments les plus difficiles

A ceux à qui je dois tant.

 Mes Parents
Je n’oublierai jamais les sacrifices que vous avez fais pour moi ainsi que
tous les efforts que vous avez consentis pour mon éducation et ma
formation.

J’espère que vous êtes fiers de moi.

 A ma famille
Un grand merci à mon frère, mes oncles, mes tantes et surtout mes deux
grands-mères, pour vos prières et l’amour exceptionnel que vous portez pour
moi depuis mon enfance. J'espère que votre bénédiction m'accompagnera
pour toujours.
 A mes amis
Je dédie ce travail à toute la 29éme promotion de pharmacie. Merci pour
tous les bons moments passés ensemble, je les espère encore nombreux.

Merci de rendre ce travail une source d’épanouissement.

Remerciements
 A mon maître et Président de thèse
Monsieur Rachid EL JAOUDI
Professeur de Toxicologie
En présidant ce jury, vous nous faites un grand honneur. Votre compétence,
votre rigueur et vos qualités humaines exemplaires, ont toujours suscité
notre admiration. Veuillez trouver, cher maître, dans ce modeste travail,
l’expression de ma haute considération et profonde gratitude.
 A mon maître et Rapporteur de thèse
Monsieur Yassir BOUSLIMAN
Professeur de Toxicologie
Monsieur BOUSLIMAN, je ne vous remercierai jamais assez de
m’avoir confié ce travail tant intéressant, de m’avoir guidé à chaque étape
de sa réalisation et ce, malgré vos nombreuses obligations professionnelles.
Merci pour la qualité de votre encadrement, pour votre exigence afin que ce
travail soit de la meilleure qualité possible et pour vos encouragements qui
me poussaient à donner le meilleure de moi-même. Veuillez agréer,
Monsieur l’expression de ma haute considération et profonde gratitude.
 A mon maître et juge de thèse
Monsieur Jaouad ELHARTI
Professeur de Chimie Thérapeutique
Je voudrai vous remercier monsieur pour l’honneur que vous nous faites en
acceptant de faire partie de notre jury et nous consacrer avec beaucoup
d’amabilité́ une partie de votre temps précieux.

Je tiens à vous remercier également d’avoir si gentillement accépter de faire

partie du jury de ma thèse. Veuillez agréer, monsieur, l’expression de ma
haute considération et profonde reconnaissance.
 A mon maître et juge de thèse
Monsieur Mustapha BOUATIA
Professeur de Chimie Analytique et Bromatologie
Je voudrai vous remercier monsieur pour l’honneur que vous nous faites en
acceptant de faire partie de notre jury et nous consacrer avec beaucoup
d’amabilité́ une partie de votre temps précieux. Je vous remercie également
pour votre relecture minutieuse et pour l’intérêt que vous avez accordé à
mon sujet. Veillez trouver ici, Monsieur, l’expression de ma haute
considération et profonde reconnaissance.
 Liste
des abréviations
ADN : Acide désoxyribonucléique

AMM : Autorisation de mise sur le marché

ICH : International conference of harmonisation

IgE : Immunoglobulibe type E

HPLC : High performance liquid chromatography

IGF : Insulin-like growth factor

MCB : Master cell bank

PCR : Polymerase chain reaction

WCB : Work cell bank

GM-CSF : Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor

UI : Unité internationale

OMS : Organisation mondiale de santé

CTD : Common Technical Document

hGH : Human growth factor

GH-RH : Growth hormone-releasing hormone

IGF : Insulin-like growth factor

MCJ : Maladie de Creutzfeld-Jakob

rhGH : Recomabinat human growth factor

IL-1 : Interleukine-1

TNF : Tumor necrosis factor

IFN : Interferon

CD : Clusters of differentiation

NK : Natural killer
FDA : Food and drug administration

PEG : Nolyéthylène glycol

BHE : Barrière hémato-encéphalique

EPO : Erythropoïétine

HIF : Hypoxia Inductible Factor

ASE : Agents stimulant l’érythropoïèse

CHO : Chinese Hamster Ovary

G-CSF : Granulocyte colony-stimulating factor

CSP : Cellules souches progénitrices

ACM : Anticorps monoclonal

CDR : Complementarity determining region

EMA : European Medicines Agency

PD : Pharmacodynamique

PK : Pharmacocinétique

AUC : Aire sous la courbe

Vd : Volume de distribution

HS : Hypersensibilité

PGR : Plan de gestion de risque

CA : Chiffre d’affaire
 Liste
des illustrations
 Liste des figures
Figure 1: Les dates clés des biotechnologies médicales. ........................................................ 10
Figure 2: la composante génétique de certaines maladies ...................................................... 11
Figure 3: Choix du système hôte pour la production d'une protéine recombinante ................. 14
Figure 4: système de banques cellulaires............................................................................... 15
Figure 5: Tube de la banque cellulaire de travail congelé ...................................................... 16
Figure 6: Etapes de purification de produits recombinants .................................................... 19
Figure 7: Facteurs d'influence de la stabilité de la protéine.................................................... 21
Figure 8: Hétérogénéité du mélange produit ......................................................................... 24
Figure 9: Principaux paramètres à évaluer et exemples de méthodes utilisées pour la
caractérisation des produits biologiques ................................................................ 31
Figure 10: Place des guidelines ICH dans le procédé de fabrication ...................................... 37
Figure 11: Production d’insuline par technique d’ADN recombinant .................................... 41
Figure 12: Structure primaire et formules des principaux analogues de l’insuline humaine ... 44
Figure 13: mécanisme d’action de GH .................................................................................. 45
Figure 14: Anomalies provoquées par différents taux d’hormones de croissance................... 47
Figure 15: Effet redondance et effet pléiotropie .................................................................... 48
Figure 16: Cibles des biothérapies anti-inflammatoires ......................................................... 51
Figure 17: structure primaire de l’EPO humaine ................................................................... 55
Figure 18: action de l’EPO ................................................................................................... 56
Figure 19: fabrication de l’EPO ............................................................................................ 57
Figure 20: Principaux effets indésirables .............................................................................. 58
Figure 21: Représentation schématique d’une molécule d’anticorps (Type IgG) ................... 62
Figure 22: Procédé de production d’Ac monoclonaux spécifiques d’un antigène donné, selon
G. Köhler et C. Milstein........................................................................................ 64
Figure 23: Les syllabes renseignant sur l’origine des anticorps monoclonaux. ...................... 65
Figure 24: Les syllabes renseignant sur la cible thérapeutique ............................................... 66
Figure 25: ACM murins........................................................................................................ 68
Figure 26: ACM chimériques ............................................................................................... 68
Figure 27: ACM humanisés .................................................................................................. 69
Figure 28: ACM humains ..................................................................................................... 70
Figure 29: Types des ACM ................................................................................................... 70
Figure 30: Mécanisme d’action d’un anticorps monoclonal................................................... 72
Figure 31: Date d'expiration des brevets de certains biomédicaments.................................... 79
Figure 32: Illustration du nombre de cas de PRCA de 1989 à 2007 ....................................... 81
Figure 33: Exemple de variabilité entre un médicament biosimilaire et le médicament de
référence ............................................................................................................... 82
Figure 34: Comparaison des données requises pour l’approbation d’un médicament
biosimilaire........................................................................................................... 83
Figure 35: Étude de liaison au récepteur ............................................................................... 85
Figure 36: chromatogramme à échange d’ion pour NIVESTIM® (A) NEUPOGEN®(B), le
produit de référence. ............................................................................................. 86
Figure 37: parametres PK et PD d’un biosimilaire en developpement et son réferent ............ 89
Figure 38: Pharmacocinétique et pharmacodynamique pour Zarzio® et Neupogen® ............ 90
Figure 39: caractéristiques d'un essai d'équivalence .............................................................. 91
Figure 40: caractéristiques d'un essai de non-inferiorité ........................................................ 92
Figure 41: Facteurs influencant l’immunognicité des proteines therapeutiques...................... 94
Figure 42: Plan de gestion des risques : nouvelle conception de l’évaluation des bénéfices et
des risques acceptables ......................................................................................... 96
Figure 43: biomédicaments commercialisé par aire therapeutique ....................................... 102
Figure 44: biosimilaire commercialisé au Maroc................................................................. 105
Figure 45: Top 10 des médicaments biologiques aux états unis ........................................... 106
Figure 46: Les dix premières thérapies vendues dans le monde (en milliard USD) .............. 107
 Liste des tableaux

Tableau 1: Différences entre le biosimilaire et le générique .................................................. 80

Tableau 2: Critères de comparabilité physico-chimiques entre Binocrit® et son comparateu. 85

Tableau 3: Etudes nécessaires pour la comparabilité pré clinique .......................................... 87

Sommaire
Introduction ..........................................................................................................................4
Définitions .............................................................................................................................6
1. Médicament biologique................................................................................................7
2. Médicament biologique de référence ............................................................................7
Histoire des médicaments biologiques .................................................................................8
1. Le contexte d'apparition des médicaments biologiques : ............................................. 10
2. La nouvelle médecine : .............................................................................................. 11
Développement et production des médicaments biologiques ............................................ 12
A. Développement d’une lignée cellulaire :..................................................................... 13
B. Culture cellulaire ou upstream process : ..................................................................... 16
C. Purification ou downstream process : ......................................................................... 17
1. Récolte : ................................................................................................................. 17
2. Purification............................................................................................................. 18
3. Analyse de la protéine recombinante : .................................................................... 19
D. Formulation : ............................................................................................................. 20
1. Défis de formulation à haute concentration : ........................................................... 20
2. Choix d'une formulation liquide ou lyophilisée : ..................................................... 20
3. Conditionnement pharmaceutique :......................................................................... 21
Contrôle des médicaments biologiques .............................................................................. 23
A. Contrôle des matières premières :............................................................................... 25
B. Cellule hôte et vecteur d’expression : ......................................................................... 26
C. Contrôle des milieux de culture et autres matières premières ...................................... 27
D. Contrôle du procédé de fabrication :........................................................................... 27
1. Contrôle en ligne ou in situ/in-line monitoring :...................................................... 27
2. Contrôle hors-ligne ou off-line monitoring : ........................................................... 28
E. Contrôle de la substance active biologique et du produit fini : .................................... 29
1. Caractérisation : ..................................................................................................... 29
Réglementation des médicaments biologiques.................................................................. 32
A. Lignes directrices internationales ICH :...................................................................... 33
Principales classes des biomédicaments ............................................................................ 40
A. Les hormones :........................................................................................................... 41

1
 1. L’insuline : ............................................................................................................. 41
2. L’hormone de croissance humaine : somatotropine ................................................. 45
B. Les cytokines : ........................................................................................................... 47
1. Interleukines : ......................................................................................................... 48
2. Interférons : ............................................................................................................ 52
C. Les facteurs de croissance : ........................................................................................ 54
1. Erythropoïétine :..................................................................................................... 54
2. Le granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF): ................................................ 59
D. Les anticorps monoclonaux : ...................................................................................... 61
1. Structure des ACM ................................................................................................. 61
2. Obtention des anticorps monoclonaux : .................................................................. 62
2.1. Obtention et sélection des hybridomes : ........................................................... 62
3. Production des anticorps monoclonaux : ................................................................. 63
4. Nomenclature des ACM : ....................................................................................... 65
4.1. La cible : ......................................................................................................... 66
4.2. La nomenclature finale : .................................................................................. 66
5. Classification des ACM : ........................................................................................ 67
5.1. Les anticorps monoclonaux murins :................................................................ 67
5.2. Les anticorps monoclonaux chimériques : ....................................................... 68
5.3. Anticorps monoclonaux humanisés : ............................................................... 69
5.4. Les anticorps monoclonaux humains : ............................................................. 69
6. Mécanisme d’action : ............................................................................................. 71
7. Les nouveaux formats d’ACM : .............................................................................. 73
Biosimilaires ....................................................................................................................... 77
A. Définition internationale : .......................................................................................... 78
1. Pour l’organisation mondiale de la santé (OMS):.................................................... 78
2. Pour l’agence européenne du médicament (EMA) : ................................................ 78
3. Pour la Food and Drug Administration (FDA) : ...................................................... 78
4. Pour le Maroc : ....................................................................................................... 78
B. Naissance du concept de biosimilaires : ..................................................................... 81
C. Principes généraux de la législation du médicament biosimilaire : .............................. 82

2
 1. Comparabilité au niveau de la qualité : ................................................................... 84
1.1. Choix du produit de référence :........................................................................ 84
1.2. Caractérisation du produit de référence : .......................................................... 84
1.3. Comparabilité physico-chimique : ................................................................... 84
1.4. Comparabilité biologique : .............................................................................. 85
1.5. Impuretés: ....................................................................................................... 86
2. Comparabilité Pré Clinique : .................................................................................. 87
3. Comparabilité Clinique :......................................................................................... 88
3.1. Etude clinique de pharmacocinétique et de pharmacodynamique : ................... 88
3.2. Etude clinique d’efficacité: .............................................................................. 90
3.3. Sécurité d’emploi: ........................................................................................... 93
3.4. Immunogénicité : ............................................................................................ 93
4. Plan de gestion des risques et pharmacovigilance : ................................................. 94
D. Interchangeabilité, permutation et substitution : ......................................................... 96
E. Extrapolation des études d’efficacité et de sécurité d’une indication thérapeutique à une
autre :................................................................................................................................ 97
1. Critères d’extrapolation : ........................................................................................ 98
1.1. Mécanisme d’action : ...................................................................................... 98
1.2. Population de l’étude visée : ............................................................................ 98
1.3. Extrapolation des données de sécurité :............................................................ 98
1.4. Extrapolation des données d’immunogénicité : ................................................ 99
Marche des biomedicaments et biosemilaires : .............................................................. 100
Rôle du pharmacien d’officine ........................................................................................ 108
1. Prévention des effets indésirables exemple : le syndrome mains-pieds .................. 109
2. Conseils associés au moment de la délivrance d’EPO : ......................................... 110
Conclusion ........................................................................................................................ 112
Résumés
Références

3
Introduction

4
 La biotechnologie moderne a permis de développer de nombreuses thérapies innovantes
utilisées dans le traitement de pathologies lourdes et chroniques comme le cancer, la sclérose
en plaques ou la polyarthrite rhumatoïde. Aujourd'hui, les médicaments biologiques occupent
une part importante du marché global des médicaments. Les chutes de nombreux brevets de
biomédicaments innovants dans le domaine public, à l'origine d'un chiffre d'affaires
conséquent et attractif, ont entraîné le développement de versions non innovantes appelées
biosimilaires. De plus, cette croissance des biosimilaires est motivée d'une part par les
pressions des pays développés pour réduire les dépenses de santé et d'autre part par les pays
émergents, comme l'Inde, pour faciliter l'accès aux soins à leur population souvent pauvre et
non couverte par un régime de sécurité sociale. Les biosimilaires sont définis comme des
produits similaires, mais pas identiques, à un médicament biologique de référence déjà
approuvé par les autorités, dont le brevet de protection a expiré. Les biosimilaires, de par leur
nature intrinsèque, la complexité de leur production, de leurs contrôles de qualité et de leur
évaluation réglementaire, ne peuvent pas être considérés comme des génériques de
médicaments biologiques.

Dans ce travail nous souhaitons définir le médicament biologique, en le comparant au

médicament issu de la chimie de synthèse, et en soulignant leurs différences. Nous mettrons
également en avant leurs intérêts thérapeutiques.

Dans un premier temps nous allons caractériser le biomédicament par rapport au

médicamentchimique classique, ensuite nous présenterons rapidement les grandes familles de
cette classe et nous insisterons sur l’une des majeurs particularités de cette classe qui est la
production par biotechnologie. On s’intéressera finalement à la démarche générique appliquée
aux médicaments biologiques lorsque les brevets tombent dans le domaine public appelé
biosimilarité . Puis et dans une deuxième partie cette thèse decrira le concept de biosimilarité
ainsi que la place des biomédicaments et des biosimilaires dans le marché international.

5
Définitions

6
 1. Médicament biologique

Un médicament biologique est définit comme un produit dont la substance active est
produite à partir d'une source biologique, ou en est extraite, et dont la caractérisation et la
détermination de la qualité nécessitent une combinaison d'essais physico-chimiques et
biologiques, ainsi que la connaissance de son procédé de fabrication et de son contrôle.[1]

2. Médicament biologique de référence

Un médicament biologique de référence est un médicament biologique pour lequel une

autorisation de mise sur le marché a été délivrée au vu d’un dossier d’enregistrement
totalement original et complet de demande comportant, dans des conditions fixées par voie
réglementaire, l’ensemble des données nécessaires et suffisantes à elles seules pour
l’évaluation des données de qualité, d’efficacité et de sécurité.[2]

7
Histoire des médicaments
biologiques

8
 L’utilisation des biotechnologies par l’homme remonte à l’antiquité (Brassage de la
bière, Tannage). Cependant, le terme « biotechnologie » n’est apparu qu’en 1919 en Europe
[3]pour décrire l’utilisation de nouvelles techniques appliquées à la biologie pour la
fabrication industrielle de composés biologiques ou chimiques.

Le début de l’utilisation médicinale des procédés de biotechnologie a été marqué par la

découverte fortuite de la pénicilline par Alexandre Flemming en 1928. Cet antibiotique est un
champignon naturellement synthétisé par la moisissure Penicillium Notanum. Cependant, la
quantité synthétisée directement par cette moisissure dans des conditions normales était
largement insuffisante pour permettre de traiter des infections.

De nombreuses recherches débutèrent afin de mettre au point des techniques plus

performantes pour accroitre la production de pénicilline : criblage, sélection de nouvelles
souches, changement des milieux de culture et construction d'un nouveau type de
fermentateur… Ces recherches sont aujourd’hui considérées comme le point de départ des
biotechnologies à visée médicinale. [4]

En parallèle, de nombreux travaux de la fin du 19éme siècle (notamment ceux de Louis

Pasteur, Robert Koch et Gregor Mendel) ont permis d’aboutir à des progrès spectaculaires
dans la connaissance de la génétique et de la microbiologie.

Ces progrès ont été accompagnés de la découverte de la structure de l’ADN (par Boyer
en 1974) ; ils ont donné naissance à la biotechnologie moderne telle que définie
aujourd’hui.[5]

L’Allemand Georges Köhler et l’Anglais César Milstein ont publié une technique de
production d’anticorps monoclonaux en 1975 et en 1977 l’Américain biochimiste et physicien
Walter Gilbert et le biochimiste Anglais Frederick Sanger développent parallèlement deux
méthodes pour permettre le décodage du code génétique.[6]

La première substance à avoir été entièrement synthétisée par les techniques de

biotechnologie est l’insuline. Initialement, cette hormone était produite par extraction à partir
du pancréas de porc ou de bœuf puis purifiée avant d’être administrée aux patients
diabétiques. Rapidement, deux questions se sont posées : Comment accroître la production

9
pour faire face à des besoins mondiaux en pleine expansion ? Quel sera l’effet d’un traitement
à long terme par une hormone animale ? La recherche d’un procédé plus rentable et
permettant de produire des protéines moins allergisantes a ainsi débuté. En 1978, H. Boyer
réussit à appliquer les techniques de biotechnologies modernes en transformant l’insuline
porcine en insuline humaine et en la faisant produire par une bactérie E.coli. Ces deux
insulines différant par un seul acide aminé, il a remplacé l’acide aminé en question en utilisant
un processus de catalyse enzymatique. Puis, par réintroduction de cette séquence d’ADN dans
le génome de la bactérie, celle-ci a commencé à produire de l’insuline humaine.[7]

Figure 1: Les dates clés des biotechnologies médicales.[8]

1. Le contexte d'apparition des médicaments biologiques :

 Les pathologies humaines : deux catégories

 Les maladies génétiques héréditaires : 6 000. 50 d’entre elles représentent 80% des
malades.
Ex. : myopathie, …

 Les maladies non héréditaires (acquises), dues à l’environnement (beaucoup plus

fréquentes).

Ex. : maladies cardiovasculaires, infectieuses, cancer …

 Génétique et maladie:

10
 La plupart des maladies sont favorisées (prévenues) par des variations dans la séquence
d’ADN de gènes déterminés.

Figure 2: la composante génétique de certaines maladies[9]

 L’importance de la génétique dans la médecine du futur, un exemple : les approches

nouvelles du cancer :

 Prévention :

- Identification des gènes de prédisposition au cancer.

 Traitement :

- cartes génétiques de la tumeur et de ses métastases.

- cartes génétiques du patient.

- approche personnalisée de la maladie.

2. La nouvelle médecine :

 L’ingénierie moléculaire : protéines recombinantes, hormones, etc La cellule

(bactéries, virus, levures, etc) devient une usine de production de molécules
complexes. Largement utilisée actuellement et dans certains cas depuis
longtemps (ex : insuline, hormone de croissance).

 Pathologies éligibles : diabète (insuline), nanisme (hormone de croissance),

cancers (anticorps monoclonaux), sclérose en plaques (interféron).[9]

11
Développement et production
des médicaments biologiques

12
 Le procédé de fabrication représente une étape critique dans le développement d’un
médicament biologique puisqu’il impacte le profil de pureté du produit fini. Le
développement du médicament doit être conforme au guide des « Bonnes Pratiques de
Fabrication » des produits pharmaceutiques, qui nous donne la définition d’une étape critique:
« phase pouvant entrainer des variations dans la qualité du produit fini » [10]

A. Développement d’une lignée cellulaire :

La production d’une protéine recombinante fait appel à la technique de l’ADN

recombinant. Cette étape consiste à isoler et transférer le gène d’intérêt doté d’un potentiel
thérapeutique dans un organisme hôte, le plus souvent une bactérie, une levure ou une cellule
d’origine animale, qui assurera la synthèse de la protéine par transcription et traduction de
l’ADN. Le gène d’intérêt issu de l’ADN humain est isolé et inséré dans un vecteur
d’expression. Le vecteur d’expression est un système qui sert de "véhicule" pour le clonage
génétique, il a la capacité de transférer un gène et de le faire exprimer dans une cellule hôte.

Le transfert dans une bactérie s’appelle transformation tandis que celui dans une cellule
de mammifère est appelé transfection.[11]

13
 Figure 3: Choix du système hôte pour la production d'une protéine recombinante[12]

La banque cellulaire maîtresse est créée à partir de la mise en culture du clone

recombinant sélectionné. La population ainsi obtenue est répartie en une centaine de fractions
aliquotes (environ 106 cellules par tube) et cryo-conservée dans de l’azote liquide
généralement. La banque cellulaire de travail est ensuite préparée à partir de cette MCB. Un

14
ou plusieurs tubes de la MCB sont amplifiés par sous culture en série puis cryo-conservés.
Chaque lot de production sera initié à partir d’un tube de cette banque cellulaire de travail.
Puis quand la WCB commence à être épuisée, il suffit de recommencer ces étapes à partir de
la banque cellulaire maîtresse pour créer une nouvelle WCB et initier la production à partir de
la même cellule génétiquement modifiée. Grâce à ce système de banques cellulaires, la
production des différents lots de protéines recombinantes sera toujours initiée à partir du
même clone recombinant sélectionné, ce qui contribue grandement à la reproductibilité du
procédé.[13]

Figure 4: système de banques cellulaires[14]

15
 B. Culture cellulaire ou upstream process :

La bioproduction sur cellules animales suit toujours le même protocole. Elle démarre
par une phase d'upstream où la molécule d'intérêt est produite dans un bioréacteur, puis d'une
phase de downstream consistant à isoler et purifier la biomolécule. La bioproduction s'achève
par une mise en forme pharmaceutique. Ces trois étapes clés doivent s'enchaîner dans des
temps relativement courts, de l'ordre de trois semaines. En effet, les protéines thérapeutiques
et les anticorps monoclonaux ont des durées de vie limitées qui imposent d'aller rapidement
jusqu'à la formulation pour les stabiliser.

L'étape upstream démarre par une préparation du milieu de culture avec une phase de
montée en échelle pour atteindre une concentration cellulaire optimale à innoculer dans le
bioréacteur final. Pour cela, l'industriel puise un échantillon cellulaire dans sa « working cell
bank » (WCB), constituée à partir d'une « master cell bank » (MCB). Ces réserves cellulaires,
conçues pour couvrir plusieurs dizaines d'années de production, sont conservées dans
plusieurs endroits distincts, ultra sécurisés. La perte de la « master cell bank » conduirait à un
arrêt définitif de la production et de la commercialisation de la biomolécule.

La production d’un lot à l’échelle industrielle commence à cette étape. Un tube de la

banque cellulaire de travail est décongelé et mis en culture dans un milieu de culture
approprié contenant des nutriments essentiels.[15]

Figure 5: Tube de la banque cellulaire de travail congelé

16
 La première étape de la culture cellulaire correspond à une étape appelée expansion
cellulaire ou scale up. Il s’agit d’amplifier la culture cellulaire par des passages successifs
dans des contenants ou des bioréacteurs de taille croissante. Une fois la concentration
cellulaire optimale obtenue, la culture est inoculée dans un bioréacteur dit industriel
généralement en inox pour assurer la production à l’échelle industrielle.

Il existe trois modes de culture dans les bioréacteurs, le batch (ou culture discontinue),
le fed-batch (ou culture semi-continue alimentée) et la perfusion (ou culture continue). Les
deux modes les plus couramment utilisés dans l’industrie pharmaceutique pour la production
des protéines recombinantes sont les modes fed-batch et perfusion.

Dans l’industrie pharmaceutique, le mode fed-batch est préféré au mode continu en

raison de ses nombreux avantages comme sa simplicité d’utilisation et son rendement élevé.
Un des seuls inconvénients relevés par rapport à la perfusion est la taille très importante du
bioréacteur industriel. Bien que la perfusion offre d’autres avantages intéressants, elle
présente un risque d’engendrer des modifications post-traductionnelles et glycosylations
variables du fait du changement continu du milieu et de la durée importante de la culture.[16]

C. Purification ou downstream process :

La partie dowstream a pour objectif de réaliser une purification complète de la

biomolécule.

Le downstream process consiste à récolter la protéine d’intérêt puis à la purifier grâce à

diverses étapes de chromatographies afin d’éliminer les impuretés potentiellement
dangereuses qu’elle contient et de proposer un produit pur et sûr pour le patient.[17]

1. Récolte :

Les techniques de récolte dépendent du type de système d’expression de la protéine.

Dans le cas d’un système d’expression intracellulaire, la protéine se trouve à l’intérieur de la
cellule. Il faut alors séparer les cellules du milieu de culture afin de les récupérer, puis les
lyser par choc osmotique par exemple, pour libérer la protéine. Dans le cas d’un système
d’expression extracellulaire, la protéine est sécrétée à l’extérieur de la cellule dans le milieu
de culture. Les cellules sont donc éliminées et le milieu de culture qui contient la protéine est

17
recueilli. La récolte s’effectue généralement par filtration et/ou centrifugation pour séparer la
protéine d’intérêt des différents constituants indésirables tels que le milieu et les débris
cellulaires. De plus, les fabricants cherchent fréquemment à concentrer le mélange contenant
la protéine afin de réduire le volume à purifier.

2. Purification

Après l'expression réussie de protéines recombinantes, la protéine se retrouve mélangée

à de nombreuses impuretés, il est donc nécessaire d’avoir recours à différentes étapes de
purification pour éliminer ces impuretés et obtenir une protéine d’une pureté optimale pour la
commercialisation.

18
 Figure 6: Etapes de purification de produits recombinants

3. Analyse de la protéine recombinante :

Une protéine thérapeutique doit être fonctionnelle pour avoir l’effet escompté chez le
malade, si une ou plusieurs zones diffèrent de la protéine de référence, l’organisme pourra se
défendre et diriger des anticorps contre cette protéine pour cela les industriels peuvent avoir
recours à des modifications post-traductionnelles (la glycosylation ou la phosphorylation) qui
assurent la stabilité du repliement des structures, l’ancrage dans les membranes, la
solubilité…

19
 D. Formulation :

La formulation d’un médicament consiste en l’association de la substance active à des

excipients dans une forme galénique appropriée. Dans le cas des protéines, il est en général
impossible de les administrer par voie orale, la forme galénique utilisée est alors une
préparation liquide ou une préparation cryo-desséchée.

Cette étape est très importante car elle concerne directement la stabilité de la protéine au
niveau de la structure et de l’activité biologique. Cela va permettre au produit de lui conférer
sa forme galénique optimale. A l’issue de cette étape, le produit, doté de sa composition et de
sa concentration finale est prêt à être conditionné.

La diversité structurelle des protéines appelle le développement d’une formulation

unique et spécifique pour chaque produit.[18]

1. Défis de formulation à haute concentration :

L’administration sous-cutanée simple et facile d'un médicament protéique nécessite le

développement d'une formulation à concentration élevée en raison d'une grande quantité de
médicament nécessaire à l'efficacité et de la tolérabilité limitée d'un volume d'injection
important. Deux problèmes majeurs sont potentiellement associés aux formulations de
protéines à haute concentration:

 Une viscosité en solution élevée.

 Une agrégation de protéines améliorée.

2. Choix d'une formulation liquide ou lyophilisée :

Les produits pharmaceutiques protéinés sont généralement commercialisés sous forme

liquide ou lyophilisée, bien que d'autres formes avancées puissent être développées. La
proportion relative de produits protéiques liquides par rapport aux produits lyophilisés est
d’environ 2 :1.

20
 Une forme posologique liquide est relativement facile à fabriquer et convient à
l’administration du médicament, tandis que les produits lyophilisés sont mieux adaptés au
transport et au stockage difficile plus longtemps. En général, un produit liquide est préféré si
la stabilité de la protéine n’est pas un problème pendant le développement.

Le développement d'une formulation consiste à évaluer les principaux facteurs

d'influence de la stabilité et à trouver une composition de formulation appropriée pour une
stabilité maximale.

Les facteurs clés suivants peuvent être évalués de manière séquentielle:

PH ------ tampons ----- forces ioniques ----- excipients.[18]

Figure 7: Facteurs d'influence de la stabilité de la protéine

3. Conditionnement pharmaceutique :

L’étape de conditionnement du médicament est l’étape ultime dans la production d’un

médicament avant sa mise sur le marché. Cette étape suit l’étape de fabrication et a comme
rôles principaux l’identification et la protection du médicament.

Les protéines recombinantes sont sensibles à leur environnement. Leur conditionnement

doit garantir la stabilité et l’intégrité du médicament.[19]

21
Figure : Schéma de production d’un médicament biologique

22
Contrôle des médicaments
biologiques

23
 Afin de minimiser les risques liés à sa consommation et de protéger au maximum les
patients des effets indésirables, le médicament biologique est soumis à des mesures de
surveillance particulièrement importantes de la part des autorités sanitaires. Ceci concerne
également, plus généralement, l’industrie du médicament. Ce processus de contrôle de la
qualité et de la sécurité du produit a lieu à toutes les phases de la vie du médicament.[20]

Le contrôle de la qualité des produits biologiques est un exercice difficile. En effet, la

substance active biologique n’est pas une simple entité chimique bien définie mais plutôt un
ensemble hétérogène de molécules complexes. Cette complexité moléculaire est appelée
micro-hétérogénéité intrinsèque. La substance active biologique contient la substance désirée
mais aussi des isoformes et des variants ou produits de structure proche non éliminés lors de
la purification, pouvant être dotés également d’une activité biologique équivalente ou proche
du produit désiré. Elle contient également des impuretés de dégradation qui sont liées au
produit et des impuretés liées au procédé de fabrication.[14]

Figure 8: Hétérogénéité du mélange produit[14]

24
 La substance active biologique est soumise à des variabilités suivant le mode de
production utilisé qui apporte des différences en termes de profil de pureté et d’impuretés
d’un médicament biologique ou biosimilaire. Du fait de la production dans des systèmes
vivants et selon la nature de la cellule hôte utilisée, la substance active subit des réactions
biochimiques différentes. Ainsi, la séquence peptidique peut être soumise à des variations
suite à diverses réactions.

La structure spatiale peut également faire l’objet de modifications de conformation ou

bien les molécules peuvent s’agréger/se dissocier. De plus, les modifications post-
traductionnelles apportées ne sont par exemple pas les mêmes entre les bactéries et les
cellules de mammifères. Il existe différents types de modifications post-traductionnelles,
comme les glycosylations, méthylations, acétylations, acylations, phosphorylations ou
sulfatations, contribuant aussi à la variabilité de la substance active biologique.[14]

La principale mission du Contrôle Qualité est de vérifier que les médicaments fabriqués
correspondent à ce qui est attendu et qu’ils sont conformes aux spécifications définies. Le
contrôle de la qualité des médicaments biologiques et biosimilaires repose, comme pour tout
médicament, sur les contrôles des matières premières, du procédé de fabrication, de la
substance active et du produit fini.

Après une caractérisation extensive du produit biologique, qui permettra d’apporter des
connaissances indispensables sur la façon de procéder, la qualité sera garantie par le contrôle
de l’identité, de la pureté et de la sécurité.[21]

A. Contrôle des matières premières :

Le contrôle de la qualité des matières premières utilisées pour la fabrication des

médicaments biologiques repose principalement sur les contrôles du vecteur d’expression, de
la cellule hôte, des banques cellulaires et des milieux de culture.

25
 B. Cellule hôte et vecteur d’expression :

La guideline ICH Q5D "Quality of Biotechnological Products: Derivation and

Characterisation of Cell Substrates Used for Production of Biotechnological/Biological
Products" définit trois principes clés pour le contrôle de la qualité des banques cellulaires que
sont l’identité, la pureté et la stabilité. L’identité de la banque cellulaire maîtresse et de la
banque cellulaire de travail est confirmée à partir de l’étude des caractéristiques
phénotypiques et/ou génotypiques. De plus, il est nécessaire de s’assurer de l’expression de la
protéine recombinante et/ou de la présence de la construction dans la cellule hôte.

Les banques cellulaires doivent être exemptes d’agents étrangers potentiellement

oncogènes ou infectieux, une attention particulière doit être portée aux virus contaminant
couramment les espèces dont est issue la lignée cellulaire. En effet, certaines lignées
cellulaires contiennent des virus endogènes, par exemple des rétrovirus, ou peuvent faire
l’objet d’une infection virale latente ou persistante (Herpesvirus) suite à l’utilisation
d’animaux infectés. Les banques cellulaires peuvent également être contaminées
accidentellement lors de la manipulation, de la fabrication ou de l’utilisation de réactifs
contaminés et être vecteurs d’organismes exogènes (étrangers).

La sécurité virale des médicaments biologiques repose aujourd’hui sur deux éléments
clés : la sélection des matières premières pour leur absence de virus et la capacité du procédé
de production à éliminer et/ou inactiver les virus.[22]

L’étude de la stabilité des banques cellulaires consiste à évaluer la viabilité des cellules
et déterminer une limite d’âge in vitro pour la production. Les tests effectués dépendent de la
cellule hôte, du procédé de fabrication et du produit. Il est possible de vérifier l’intégrité de la
séquence codant la protéine d’intérêt ainsi que d’analyser des caractéristiques spécifiques de
la cellule telles que la morphologie, la croissance ou la productivité.[23, 24]

26
 C. Contrôle des milieux de culture et autres matières premières

La qualité des milieux de culture utilisés en microbiologie au laboratoire est cruciale

pour obtenir des résultats optimaux et fiables. Certains milieux de culture sont essentiels pour
isoler certains microbes, il est donc impératif qu’ils fonctionnent comme prévu.

Les procédures de contrôle de qualité permettent de s’assurer que les milieux n’ont pas
été contaminés avant leur utilisation et qu’ils permettent la croissance de l’organisme avec
lequel ils ont été ensemencés.[25]

D. Contrôle du procédé de fabrication :

Le contrôle du procédé de fabrication d’une protéine recombinante consiste d’une part à

surveiller in situ les paramètres liés au pilotage de la culture cellulaire tels que le pH, la
température, la concentration en oxygène dissous et CO2 dissous ou l’agitation. Et d’autre
part à réaliser des échantillonnages pour réaliser divers contrôles comme la concentration en
produit, substrats et métabolites ou la densité cellulaire. Une perturbation, même légère, de
ces paramètres peut avoir des conséquences négatives sur la productivité et la qualité du
produit désiré. La croissance cellulaire et la viabilité des cellules sont des éléments clé de la
productivité, il est donc primordial d’instaurer des contrôles en ligne (monitoring) et hors
ligne (échantillonnage) pour maintenir des conditions optimales de production et vérifier le
bon déroulement du procédé.

1. Contrôle en ligne ou in situ/in-line monitoring :

Le contrôle in situ implique l’utilisation de capteurs directement placés dans la cuve ou

les lignes de flux périphériques pour la surveillance du procédé. Le pH d’une culture de
cellules de mammifère se situe dans une gamme étroite, entre 6,8 et 7,4. Une faible
perturbation du pH peut impacter la croissance cellulaire et être responsable d’une baisse du
taux de production de la protéine ou même de mort cellulaire dans le cas de perturbation plus
importante. La température doit être contrôlée car elle influence la multiplication cellulaire,
elle se situe généralement autour de 37°C avec une marge de manœuvre étroite de +/- 0,5 °C
voire moins pour les cellules de mammifères.[26]

27
 Le pourcentage de saturation en oxygène dissous doit se situer entre 20 et 100 %, une
baisse de celui-ci peut influencer la viabilité des cellules et perturber notamment la
glycosylation.

Une concentration élevée en dioxyde de carbone dissous peut inhiber la croissance

cellulaire, le métabolisme cellulaire et perturber la glycosylation de la protéine. Généralement
le degré de saturation en dioxyde de carbone dissous est maintenu entre 5 % et 10 %.
Contrairement aux bactéries, les cellules de mammifère sont très sensibles au cisaillement, un
système d’agitation adapté à faible tour par minute (généralement 150 tour/minute maximum)
est nécessaire pour éviter de les détruire. La formation de mousse peut également être
problématique selon les cultures (due à l’introduction de gaz, la présence de protéines et
l'agitation) et impose d’être contrôlée selon les besoins à l’aide d’ajout d’antimousse.[27]

2. Contrôle hors-ligne ou off-line monitoring :

En parallèle de ces contrôles en ligne, des échantillonnages sont réalisés

quotidiennement pour vérifier le bon déroulement de la production. Les nutriments comme le
glucose et la glutamine sont essentiels pour l’apport en énergie et la culture cellulaire. Les
cellules produisent également des métabolites ou déchets tels que l’ammonium et le lactate
qui peuvent avoir des impacts négatifs en termes d’inhibition de la culture cellulaire et de
rendement. Les concentrations en nutriments et en métabolites doivent donc être surveillées
via leur dosage à travers des techniques comme l’HPLC ou une immunoessai.

La densité cellulaire est un contrôle important car elle est également impliquée dans la
croissance cellulaire et le rendement. Enfin, le dosage de la concentration en protéine produite
est effectué pour contrôler le rendement de la production, celle-ci est déterminée par
chromatographie à titre d’exemple. Par ailleurs, pour pallier aux inconvénients du contrôle
hors-ligne qui est déconnecté du temps réel de la production (les résultats sont obtenus en
retard car il est nécessaire de faire un prélèvement et de préparer l'échantillon pour l'analyse),
il est possible grâce à des instruments innovants d’effectuer ces contrôles en ligne. Ces
contrôles appelés également online monitoring consistent en une combinaison des systèmes in
situ et hors-ligne : un échantillon in situ est prélevé automatiquement puis analysé par un
capteur ex situ.[28]

28
 E. Contrôle de la substance active biologique et du produit fini :

1. Caractérisation :

La caractérisation complète de la protéine recombinante est principalement effectuée

lors du développement d’un nouveau biomédicament mais aussi lors du développement d’un
biosimilaire à une référence choisie pour la soumettre à comparaison auprès des autorités
compétentes. A la chute du brevet du médicament biologique, le procédé de production n'est
généralement pas révélé. Il est alors indispensable pour le fabricant de biosimilaires de
multiplier les étapes de séquençage moléculaire et de caractérisation analytique du
biomédicament afin d’établir un procédé de production le plus proche possible et d’obtenir un
produit hautement similaire. La caractérisation permet également de confirmer la qualité du
produit lors d’un changement dans le procédé de fabrication et de déterminer les
spécifications employées pour la libération des produits en routine. Les propriétés
physicochimiques, l’activité biologique, les propriétés immunochimiques et le profil de
pureté/impuretés font partis des caractéristiques à étudier de manière approfondie afin de
garantir la qualité, la sécurité et l’efficacité du médicament.[29]

 Caractéristiques physicochimiques :

Les principales caractéristiques physicochimiques analysées sont la séquence

peptidique, le poids moléculaire, la conformation spatiale et les éventuelles modifications
post-traductionnelles. D’autres spécificités peuvent être évaluées comme la charge, le point
isoélectrique ou l’hydrophobicité de la protéine par exemple.

L’étude de la conformation spatiale doit être complétée par des tests biologiques afin de
confirmer l’activité biologique.[30]

 Activité biologique :

L’activité biologique décrit la capacité d’un produit à réaliser un effet biologique

déterminé. Elle est quantifiée au travers de la mesure de la puissance sur la base d’un attribut
du produit lié à des propriétés biologiques pertinentes et s’exprime par exemple en Unité
Internationale (UI).[29]

29
  Propriétés immunochimiques :

La caractérisation des propriétés immunochimiques concerne notamment les anticorps

monoclonaux. Il est nécessaire de réaliser des tests de liaisons antigène-anticorps afin de
déterminer l’affinité, l’avidité et l’immunoréactivité de ces anticorps. Les fonctions effectrices
des anticorps et la structure de l’épitope de la molécule cible de l’anticorps monoclonal
doivent être également caractérisées dans la mesure du possible.

 Pureté et impuretés :

L’analyse des impuretés en routine pour la commercialisation du médicament consiste à

contrôler certaines impuretés liées au procédé de fabrication et au produit, dont l’élimination
par le process n’a pas été démontrée. Concernant les impuretés liées au procédé de
fabrication, il s’agit de contrôler les protéines résiduelles de la cellule hôte, qui peuvent être
analysées par ELISA, et l’ADN résiduel, qui est évalué par qPCR. Pour les impuretés liées au
produit, il est recommandé de contrôler les variants de masse, de charge et du profil
glycosidique si ce dernier intervient dans l’activité biologique du produit. Les agrégats
solubles sont contrôlés par exemple par une chromatographie d’exclusion de taille couplée à
une détection UV (SEC-UV).[31]

30
Figure 9: Principaux paramètres à évaluer et exemples de méthodes utilisées pour la
caractérisation des produits biologiques

31
 Réglementation
des médicaments biologiques

32
 La réglementation des produits issus de biotechnologie a pour objectif d‘assurer la
qualité, la sécurité et la constance dans leur production. Cela s‘explique par la nature des
produits concernés, ce sont des protéines glycosylées généralement très complexes qui sont
sensibles à l‘environnement et aux conditions de production et qui peuvent subir des
modifications post-traductionnelles par des modifications minimes des conditions
d‘obtention. Ces produits sont pour cela difficiles à caractériser structuralement. Ils sont donc
essentiellement définis par leur procédé de fabrication qui doit être rigoureusement
reproductible. Le contrôle de qualité au cours de fabrication est ainsi essentiel. Des lignes
directrices ont été élaborées dans le cadre des ICH pour permettre aux intervenants dans ce
domaine de se conformer aux réglementations en matière de stabilité génétique, de nature des
substances, de sécurité virale des cellules auxiliaires, des conditions de la banque de cellule,
de fermentation, de transformation cellulaire, des modalités de la purification, de
caractérisation des produits et de stabilité.[32]

A. Lignes directrices internationales ICH :

La Conférence internationale sur l’harmonisation des critères d’homologation des

produits pharmaceutiques à l’usage de l’homme (ICH) a été créée en 1990 par les autorités de
réglementation pharmaceutique et les laboratoires pharmaceutiques de l’Union Européenne,
du Japon et des États Unis dans le but de définir les normes à appliquer pour la mise au point
des nouveaux médicaments. L’ICH est une initiative tripartite regroupant 17 pays à revenus
élevés. A ce jour, elle a publié plus de 50 directives qui précisent les conditions techniques à
respecter pour des étapes spécifiques du processus d’homologation des médicaments. Ces
directives ont été élaborées par des groupes de spécialistes délégués par les autorités de
réglementation pharmaceutique et par l’industrie pharmaceutique des pays membres de la
Conférence. Chaque directive reflète un haut niveau scientifique, à l’avant-garde de la
technologie. Le coût lié à l’application intégrale des directives peut être considérable dans
certains cas, mais l’argument avancé est qu’il est compensé par une plus grande rapidité
d’homologation des nouveaux médicaments dans les pays membres de l’ICH.
L’ICH a été créée afin d’harmoniser la documentation devant nécessairement
accompagner la mise au point de médicaments et l’évaluation réglementaire des produits

33
contenant de nouvelles molécules ou des nouveaux produits issus de la biotechnologie.
L’OMS est admise au comité directeur de l’ICH en qualité d’observateur mais n’intervient
pas directement dans la rédaction ou l’élaboration des directives et n’exerce aucun contrôle
sur leur approbation.[33]

1. Q5A(R1) Viral Safety Evaluation of Biotechnology Products Derived

from Cell Lines of Human or Animal Origin – Evaluation de la sécurité
virale des produits biotechnologiques dérivés des lignées cellulaires
d’origine humaine ou animale :

Cette guideline fournit des recommandations pour l’évaluation du risque de

contamination virale des produits biotechnologiques et fournit également une explication
claire des méthodes et des normes pour la détection et l‘élimination des virus. Elle décrit
également les données à fournir lors de la demande d’AMM.

2. Q5B Analysis of the Expression Construct in Cells Used for Production

of r-DNA Derived Protein Products – Analyse de la construction
d’expression dans les cellules utilisées pour la production de produits
protéiques dérivés de l’ADN recombinant :

Cette guideline énonce des recommandations concernant la caractérisation de la

construction d’expression utilisée pour la production de protéines recombinantes dans des
cellules procaryotes et eucaryotes. Le but de l’analyse de la construction d’expression est de
vérifier que la séquence codante d’intérêt a été intégrée dans le vecteur d’expression et qu’elle
est maintenue dans la cellule hôte tout au long de la production.

3. Q5C Stability Testing of Biotechnological/Biological Products – Etudes

de stabilité des produits biotechnologiques/biologiques :

Les produits biologiques contiennent des substances actives comme les protéines dont le
maintien de la conformation moléculaire est essentiel à l’activité biologique. Ces produits sont
particulièrement sensibles aux facteurs environnementaux tels que la température,
l’oxydation, la lumière ou le cisaillement. Afin d’assurer le maintien de l’activité biologique

34
et d’éviter la dégradation du produit, des conditions de stockage rigoureuses sont donc
nécessaires. L‘évaluation de la stabilité peut nécessiter des méthodes d‘analyse complexes.
Les essais d‘activité biologique, doivent être inclus dans les études de stabilité. En outre, dans
la mesure où la pureté et les caractéristiques moléculaires du produit le permettent, on doit
analyser la molécule et quantifier les produits de dégradation par des épreuves
physicochimiques, biochimiques et immunochimiques appropriées Le but de la guideline ICH
Q5C est de donner des indications sur les études de stabilité à fournir lors du dépôt de la
demande d’AMM.

4. Q5D Derivation and Characterisation of Cell Substrates Used for

Production of Biotechnological / Biological Products – Dérivation et
caractérisation des substrats cellulaires utilisés pour la production des
produits biotechnologiques/biologiques :

Cette guideline énonce des critères pour la préparation et la caractérisation de banques

de cellules fournit des recommandations et des standards, à soumettre lors de la demande
d’AMM, concernant la création des lignées cellulaires humaines, animales et bactériennes,
ainsi que la préparation et la caractérisation des banques cellulaires utilisées pour la
production des biomédicaments.

5. Q5E Comparability of Biotechnological/Biological Products Subject to

Changes in their Manufacturing Process – Comparabilité des produits
biotechnologiques/biologiques sous réserve de modifications dans leur
procédé de fabrication :

L’objectif de cette guideline est de fournir des principes pour évaluer la comparabilité
des biomédicaments avant et après des changements effectués dans le procédé de fabrication.
Elle apporte une aide pour le recueil d’informations pertinentes qui serviront à prouver que le
changement n’a pas d’impact négatif en termes de qualité, de sécurité et d’efficacité du
biomédicament.[34]

35
 6. Q6B Specifications : Test Procedures and Acceptance Criteria for
Biotechnological/Biological Products – Méthodes analytiques et critères
d’acceptation pour les produits biotechnologiques/biologiques :

Cette ligne directrice précise une liste de tests de références de méthodes analytiques et
de critères d‘acceptation appropriés qui sont des limites numériques, intervalles et autres
critères pour les tests décrits. Elle établit un ensemble de critères auxquels une substance
médicamenteuse, un produit médicamenteux ou une matière à différents stades de leur
fabrication doivent se conformer afin d‘être jugés conformes pour l‘usage auquel ils sont
destinés. La «conformité à la norme » signifie que la substance médicamenteuse, lorsqu‘elle
est testée selon les méthodes analytiques décrites, satisfera aux critères d‘acceptation. Les
spécifications sont des normes de qualité critiques qui sont proposées et justifiées par le
fabricant et approuvées par les autorités réglementaires.

Elle présente des principes généraux pour l’établissement et la justification d’un

ensemble de spécifications internationales pour les produits issus des biotechnologies et les
produits biologiques afin d’appuyer les nouvelles demandes d’AMM.[35]

7. S6(R1) Preclinical Safety Evaluation of Biotechnology-Derived

Pharmaceuticals – Evaluation préclinique de la sécurité des produits
pharmaceutiques issus des biotechnologies :

Cette ligne directrice définit les principes généraux pour la conception et l'exécution des
programmes scientifiquement fondés pour l‘évaluation de la sécurité préclinique. L'accent est
mis sur les spécifications du matériel d'examen, l'activité biologique, la pharmacodynamie, la
sélection du modèle animal / espèce / nombre, voie d‘administration / fréquence de
l'administration, la sélection de dose, et l'immunogénicité ainsi que le potentiel carcinogène.

Malgré des spécificités, la réglementation qui s’applique aux biomédicaments est

identique à celle des médicaments chimiques, seuls des textes particuliers viennent compléter
celle-ci ou la détailler. Ainsi, du développement jusqu’à la mise sur le marché puis la
vigilance, les biomédicaments doivent respecter le contexte réglementaire général ainsi que la
réglementation spécifique à leur catégorie. La complexité du procédé de fabrication, la

36
microhétérogénéité et la variabilité des produits des biotechnologies induisent des risques de
contamination (vecteur virale, lignée cellulaire bactérienne, impuretés…) et des challenges
pour la qualification, la qualité et la sécurité d’utilisation des produits obtenus. Afin de
prévenir ces risques et de pouvoir assurer la qualité du produit obtenu, des recommandations
ICH ont été émises afin de décrire les principaux tests et validations à mettre en œuvre lors du
développement et de la fabrication du biomédicament.[36]

Figure 10: Place des guidelines ICH dans le procédé de fabrication

37
 Numéro de la
Sujet
Catégorie Recommandat date Titre Résumé
principal
ion
Développem Viral Safety evaluation of Résume l’ensemble des tests
ent biotechnology product conseillés à chaque étape ou pour
Q5A 1999 et derived from cell lines in chaque lignée afin de qualifier au
Fabrication human or animal origin mieux l’absence de contamination
virale.
Analyse du vecteur d’expression de
la protéine recombinante pour
vérifier que la séquence codante
Quality of
introduite est correctement
Biotechnological products
incorporée et que son expression est
Développem : analysis of the
maintenue tout au long de la
ent expression construct in
fabrication.
Q5B 1995 et cells used for production
Les techniques d’analyse de la
Fabrication of r-DNA derived protein
protéine et d’analyse des acides
product
Qualité nucléiques doivent être combinées.
Résume les tests conseillés pour
assurer l’intégrité de la protéine
recombinante.

Quality of
Résume l’ensemble des tests
Biotechnological products
conseillés pour assurer la stabilité
Q5C 1995 Stabilité :stability testing of
des produits biotechnologiques
biotechnological/biologica
dans le temps
l products
Développem Derivation and
Résume l’ensemble des tests
ent characteristic of cell
conseillés pour assurer la qualité
Q5D 1997 et substrates used for
des substrats utilisés lors de la
Fabrication production of
production de la lignée cellulaire
biotechnological/biologica

38
 l products
Résume les informations devant
Développem Comparability of
être obtenues et comparées pour
ent biotechnological/biologica
assurer qu’un changement dans la
Q5E 2004 et l products subjects to
procédure n’a pas eu d’impact sur
Fabrication changes in their
la qualité, la sécurité et l’efficacité
manufacturing process
du produit.
Specification test Résume les spécifications pour les
Développem procedures and acceptance biomédicaments (liste de
ent criteria for critères testés par des procédures
Q6B 1999 et biotechnological/biologica analytiques définies auxquels
Fabrication l products les biomédicaments doivent
répondre pour être considérés
comme conformes)
Résume l’approche à adopter pour
Development and
Développem développer un procédé de
manufacture of drug
ent fabrication pour un biomédicament
substances (chemical
Q11 2012 et (présente les 2 approches
entities and
Fabrication existantes) ainsi que les
biotechnological/biologica
informations devant être présentées
l entities)
dans le CTD
Preclinical Safety Résume les principaux tests pre
Evaluation of cliniques avant et en parallèle du
Etude biotechnology-derived développement clinique devant être
Sécurité S6 2011
préclinique pharmaceuticals réalisés pour des produits
issus des biotechnologies, en
considérant leurs spécificités

39
Principales classes
des biomédicaments

40
 A. Les hormones :
1. L’insuline :
L‘insuline est une hormone constituée de 2 chaines polypeptidiques reliées entre elles
par deux ponts disulfures et un pont disulfure intra-chaine dans la chaine A. La chaine A
possède un pont di-sulfure interne et est formée de 21 acides aminés et la chaine B est
constituée de 30 acides aminés.

L’insuline est secrétée sous forme d’une chaine polypeptidique unique : la pro-insuline
qui est scindée par une protéase libérant ainsi la molécule d’insuline et un peptide C.[37]

Les insulines extractives ont été d’origine porcine, bovine, ou mixte. Ces insulines
animales, à l’origine de fréquentes manifestations allergiques de type IgE, ont été remplacées
par les insulines humaines hémi-synthétiques (insuline porcine modifiée grâce à des procédés
enzymatiques) Elles ont été diversement purifiées par chromatographie (apparition dans les
années 1980 des insulines « mono-composé » ou « mono-pic »).

Les progrès du génie génétique ont permis d’obtenir l’insuline par les techniques
d’ADN recombinant selon des procédés différents à partir de deux vecteurs Saccharomyces
cerevisiae et Escherichia coli.[38]

Figure 11: Production d’insuline par technique d’ADN recombinant

41
 Il est important de disposer d’insulines dont la cinétique et la reproductibilité permettent
d’obtenir les objectifs de glycémies proches de la normale sans augmenter le risque
d’hypoglycémie.

Les principaux problèmes de l’insuline humaine auxquels les analogues ont essayé de
répondre sont :

 Le manque de stabilité de l’insuline affectant la molécule pendant la

manipulation, le stockage prolongé et l’utilisation.
 L’absorption trop lente des insulines humaines à action brève conduisant à
injecter ces préparations d’insuline 30 minutes avant le repas afin d’éviter une
hyperglycémie postprandiale.
 L’élimination trop lente des insulines humaines à action brève induisant une
insulinémie après l’injection, ce qui augmente le risque de survenue
d’hypoglycémie postprandiale et nécessite fréquemment un apport alimentaire
supplémentaire après le repas avec comme conséquence une prise de poids
indésirable.
 La durée d’action trop brève des insulines intermédiaires et prolongées conduisant
à des injections multiples.
 La présence d’un pic plasmatique d’insulinémie prononcé après injection des
insulines intermédiaires et prolongées exposant les patients à un risque
d’hypoglycémie, en particulier nocturne lorsque l’insuline est administrée le soir.
 Une variabilité inter- mais surtout intra-individuelle de l’absorption sous-cutanée
trop importante.
Les principales modifications chimiques apportées à l’insuline de séquence humaine
pour en faire des analogues sont des mutations dans sa séquence par la technique de l’ADN
recombinant et des hémi-synthèses chimiques, par exemple la greffe de groupements
chimiques sur les acides aminés (zinc, protamine…) au niveau de C terminal de la chaine
B.[39]

42
 1.1. Analogues de l’insuline :

Analogues de Déclenchement Temps d'action Durée

Altération
l'insuline de l'action maximum d'action

 Insuline à action rapide :

Lispro Inversion de l'acide aminé proline à ~ 15 min 30–70 min 2-5 h
(Humalog) B28 et de la lysine à B29
Aspart Remplacement de la proline en B 28 10–20 min 1à3h 3-5
(Novorapid par de l'acide aspartique heures

 Insuline à action intérimaire :

Insuline Insuline protaminée neutre 1,5 à 4 h 2,8–13 h Jusqu'à
isophane;NPH 24 h
(Humulin-N)

 Insuline à longue durée :

Glargine Asparagine remplacée par de la 1 à 3 h Pas de pic Jusqu'à
(lantus) glycine en A21 et deux acides aminés 24 h
d'arginine ajoutés en position B31 et
B32
Detemir Acylation de l'acide myristique en 1-2 h 6-8 h Jusqu'à
(Levemir) résidus de lysine en position B-29 et 24 h
délétion de la thréonine à partir de B30

43
Figure 12: Structure primaire et formules des principaux analogues de l’insuline
humaine[40, 41]

44
 2. L’hormone de croissance humaine : somatotropine

L'hormone de croissance humaine (hGH) est un petit peptide à chaîne unique de 191
résidus, dont environ 50% sont de conformation en hélice α. Il est produit et sécrété par
l'hypophyse antérieure de façon pulsatile, à prédominance nocturne sous le contrôle de trois
facteurs essentiellement. Deux facteurs hypothalamiques : growth hormone-releasing
hormone (GH-RH) qui a une action stimulatrice, et la somatostatine à action inhibitrice. Le
troisième facteur, la ghréline, synthétisée par l’estomac, stimule la sécrétion de GH, en
agissant à la fois au niveau hypothalamique et hypophysaire. De nombreux neuromédiateurs
régulent ces trois facteurs, sous l’influence de la glycémie, des taux d’acides aminés, des
stéroïdes sexuels, du sommeil, du stress, et du rétrocontrôle de la GH et de l’IGF-1.[42]

La somatotropine favorise la synthèse des protéines, la consommation des graisses,

diminue la fragilité des os et participe à la sensation de bien-être. Chez l'enfant, elle stimule la
croissance. Son action se fait :

 Soit directement sur les tissus cibles (os, muscles, tissus adipeux)
 Soit par les facteurs de croissance l'IGF-1 qui stimule la croissance et la
prolifération cellulaire, et inhibe l'apoptose.

Figure 13: mécanisme d’action de GH

45
 2.1. Rôle métabolique de la somatotropine :

 Métabolisme lipidique : la somatropine est un inducteur des récepteurs

hépatiques du LDL-cholestérol et modifie le profil des lipides et des lipoprotéines
sériques. Une diminution du cholestérol total sérique peut également être
observée.
 Métabolisme Glucidique : la somatropine augmente le taux d’insuline, mais la
glycémie à jeun est généralement inchangée.
 Métabolisme Hydroélectrolytique : le déficit en hormones de croissance
s’accompagne d’une diminution des volumes plasmatique et extracellulaire, qui
augmentent rapidement avec un traitement par la somatropine. Celle-ci entraîne
une rétention sodée, potassique et du phosphore.
 Métabolisme Osseux : la somatropine stimule le renouvellement osseux. Le
contenu minéral osseux et la densité osseuse au niveau des sites de charge
corporelle augmentent après une administration à long terme de somatropine.
 Capacité physique : la force musculaire et la capacité à l’exercice physique sont
améliorées après un traitement au long cours avec la somatropine. Elle augmente
aussi le débit cardiaque, mais le mécanisme n’est pas encore élucidé.[43, 44]
La première utilisation thérapeutique de hGH exogène extraite de l'hypophyse humaine
pour le déficit en hormone de croissance a été rapportée par Raben, MS (1962). La hGH
dérivée d'hypophyse a ensuite été administrée à un grand nombre de patients pour un déficit
en hormone de croissance. Cependant, en 1985, l'utilisation de la hGH d'origine hypophysaire
a été brutalement arrêtée lorsque l'association entre les préparations de hGH et la maladie de
Creutzfeld-Jakob (MCJ) a été établie.

46
 Figure 14: Anomalies provoquées par différents taux d’hormones de croissance

Comme la hGH n'est pas glycosylée, la rhGH a été exprimée pour la première fois dans
Escherichia coli en 1979. Un gène hybride assemblé composé d'une séquence d'ADN de hGH
synthétisée chimiquement et d'une séquence d'ADN de hGH dérivée de manière enzymatique
à partir d'ADN hypophysaire humain a été inséré dans un plasmide d'expression sous le
contrôle de la transcription de l'opéron lac. La traduction de l'ARN messager a entraîné une
synthèse de rhGH impossible à distinguer de la hGH hypophysaire, à l'exception d'une
méthionine supplémentaire au niveau de l'extrémité N-terminale. La rhGH a été approuvée
par la suite aux États-Unis pour le traitement en 1986.[45]

B. Les cytokines :

Les cytokines sont des glycoprotéines qui constituent des messagers inter-cellulaires
permettant la coordination de la réponse immunitaire Les cytokines sont produites par des
cellules spécifiques ou non, et agissent le plus souvent dans l’environnement de celles-ci,
sécrétion paracrine, voire autocrine lorsque les cytokines agissent sur les cellules productrices.
Parfois, elles agissent à distance via la circulation sanguine leur sécrétion peut donc être
également endocrine.

47
 Les cellules productrices peuvent être des cellules de l’immunité : des macrophages
pour l’interleukine 1 (IL-1), l’IL-12, le tumor necrosis factor alpha (TNFα), le granulocyte
colony-stimulating factor (G-CSF), le granulocyte-macrophage colony-stimulating factor
(GM-CSF), etc. ; des cellules T pour l’IL-2, le TNFα, l’interféron gamma (IFNγ), le GM-
CSF, etc. ; des fibroblastes pour le GM-CSF et l’IFNβ ; des leucocytes pour l’IFNα.[46]

L’action des cytokines se fait généralement en cascade, avec des interdépendances pouvant
aller dans le sens d’un antagonisme ou d’une synergie. De même, différentes cytokines
peuvent avoir le même effet (redondance), et une même cytokine peut avoir des effets
différents selon la cible (pléiotropie).

Figure 15: Effet redondance et effet pléiotropie

Les cytokines peuvent être exploitées à des fins thérapeutiques, mais peuvent être
limitées par la toxicité et par la perte de l’activité due à des substances contre-régulatrices, y
compris les molécules suppressives qui sont importantes pour une protection physiologique
normale contre la sur réaction aux agents pathogènes et les dommages cellulaires ainsi que
l’auto réactivité.[47]

1. Interleukines :

L'interleukine-2 (IL-2) est une cytokine pléiotrope nécessaire à la fois à la prolifération /

différenciation des lymphocytes effecteurs et l’expansion des lymphocytes T régulateurs. IL-2
a été découvert il y a plus de 40 ans comme un stimulateur soluble de leucocytes , produit par
les lymphocytes T . L'IL-2 est principalement produite par les cellules T CD4 + à la suite de
l'activation du TCR et de la co-stimulation du CD28. L'IL2 a de nombreuses fonctions

48
importantes dans les lymphocytes, notamment l'induction de la prolifération, la survie
cellulaire et l'apoptose (via la mort cellulaire induite par l'activation), ainsi que la régulation
positive de l'activité cellulaire cytotoxique. Les signaux IL-2 passent par un complexe
récepteur hétérotrimérique composé de chaînes distinctes α, β et γ (également appelées
respectivement CD25, CD122 et CD132). Le CD132 est utilisé universellement par toutes les
cytokines de la famille IL-2.

L'identification et le clonage du gène de l'IL-2 humaine dans les années 80 et

l'avènement de la technologie de l' ADN recombinant ont permis l'administration sur-
physiologique de l'IL-2 recombinante. L'IL-2 a été reconnue comme facteur de croissance des
cellules T et des cellules NKet a montré un effet anti-tumoral favorisant l'activité de ces
cellules. Après avoir démontré son efficacité lors d'essais cliniques, la FDA a approuvé
l'utilisation d'IL-2 à haute dose dans les carcinomes à cellules rénales métastatiques (1992) et
le mélanome métastatique (1998).[48]

Le problème le plus restrictif du traitement par l'IL2 est probablement sa toxicité

limitant la dose.

Une autre limitation importante de la thérapie IL-2 est sa nature conflictuelle en tant que
promoteur de l'immunosuppression via T reg et de l'activation immunitaire via d'autres
cellules CD4 +, CD8 + T et NK. Ce résultat dépend en fin de compte de la dose d'IL-2
administrée, les fortes doses étant immunostimulantes, mais les faibles doses se révélant
immunosuppressives. Cela crée une situation dans laquelle de faibles doses pourraient nuire à
l'efficacité antitumorale, tandis que des doses élevées sont nécessaires pour l'activité
antitumorale.

De nombreuses stratégies ont été tentées au niveau de la clinique pour atténuer les
limites de l'IL2, notamment des modifications de la voie d'administration et des combinaisons
avec d'autres médicaments. Cependant, les problèmes de toxicité et d'efficacité demeurent et
les approches moléculaires modifiant l'IL-2 devraient être utiles pour améliorer encore l'IL-2
dans ces domaines.

49
 1.1. Principales stratégies d’amélioration :

 Les mutéines IL-2 :

L'approche la plus simple pour modifier la fonction de l'IL2 a été d'introduire des
mutations ciblées, où même quelques changements spécifiques peuvent avoir des effets
profonds sur l'activité. Les mutations introduites dans IL-2 visent généralement des sites
connus pour se lier à CD25, CD122 ou CD132

 Complexes d'anticorps IL-2 et protéines de fusion IL-2 :

Au lieu d'introduire des mutations dans IL2, il est également possible de complexer IL-2
avec des anticorps anti-IL2 qui obtiennent une liaison de CD25 ou CD122 pour obtenir des
effets analogues.

L'administration de complexes d'anticorps IL-2 / IL-2 peut également résoudre le

problème de la fuite vascul aire en réduisant la dose requise d'IL-2 pour obtenir des effets
antitumoraux.

 Ciblage des cellules exprimant IL-2R (par exemple, Tregs) en vue de

leur épuisement :

Il consiste en acides aminés 1-389 de la toxine diphtérique (DAB389) fusionnée à IL-2

humaine. Lors de la liaison à IL2R, la toxine diphtérique est endocytée et subit une
protéolyse, permettant la libération du fragment A enzymatiquement actif dans le cytosol. Ici,
le fragment A inhibe puissamment la synthèse des protéines via la ribosylation par l'ADP du
facteur d'élongation eucaryote 2, induisant finalement la mort cellulaire.[49]

 IL-2 pegylée :

Les avantages potentiels d'améliorer la demi-vie de l'IL-2 ont été identifiés tôt dans son
développement clinique avec l'émergence de l'IL-2 pégylée au milieu des années 1980. L'IL2
pégylée a été développée par Cetus (plus tard Chiron) Corporation et consistait en 2-3 chaînes
PEG conjuguées à l'IL-2 via la réactivité des esters succinimidyliques en amines primaires
présentes dans le polypeptide. Le PEG-IL-2 a montré une activité antitumorale supérieure à
l'IL-2 non conjuguée à des doses équitoxiques dans plusieurs modèles de tumeurs et une

50
activité en corrélation avec les concentrations sériques maximales d'IL2. Cependant, PEG –
IL-2 n'a pas montré d'activité accrue et avait une toxicité similaire à celle du schéma
posologique à haute dose d'IL-2 lors d'un essai clinique de phase I sur le mélanome
métastatique et le carcinome à cellules rénales.[50, 51]

Les cytokines pro-inflammatoires sont largement impliquées dans ces pathologies et

agissent à différents niveaux : local, amplifiant la réaction inflammatoire par une influence sur
la néo-vascularisation, l’hyperprolifération cellulaire et la dégradation tissulaire, et
systémique cytokines majeures, le TNF, l’IL-6, l’IL-1 et l’IL-17 devenues des cibles
importantes pour de nouvelles thérapies

De nouvelles modalités d’utilisation des cytokines sont également en train de voir le

jour, avec pour objectif essentiel de limiter l’action des cytokines à leur cible cellulaire
immédiate, permettant ainsi d’optimiser les effets thérapeutiques en évitant leurs effets
secondaires.[52]

Figure 16: Cibles des biothérapies anti-inflammatoires

51
 2. Interférons :

Sont un sous-groupe de cytokines qui ont une action importante dans l’immunité.
Décrits pour la première fois en 1957, un certain nombre d’IFN ont été découverts depuis

Ils sont classés en trois types principaux, type I, type II et type III, selon la nature du
récepteur qu’ils utilisent pour la transduction des signaux, leurs caractéristiques structurelles
et leurs activités biologiques.

2.1. Structures protéiques d'interféron :

Les IFN-alfas humains sont synthétisés sous forme de protéine précurseur longue de
188 à 189 résidus. Les 23 premiers résidus correspondent à un peptide signal, donnant une
protéine de masse moléculaire calculée de 18,5 kDa. La gamme de masses moléculaires
déterminée expérimentalement de 19 à 26 kDa, en raison de la présence de modifications
post-traductionnelles. Les séquences de gènes codant pour la sous-famille IFN-alpha
présentent un niveau élevé de similarité de séquence globale et les séquences protéiques
correspondantes se partagent entre 70% et 80% d’homologie et environ 35% d'identité avec
l'IFN-beta humain.

2.2. Applications cliniques :

Les IFN sont des produits biopharmaceutiques puissants, mais ils posent de nombreux
obstacles pour les applications cliniques. Parce qu'ils sont synthétisés dans l'organisme en
faibles quantités et présentent des niveaux variables de spécificité d'espèce, seul l'IFN
recombinant humain peut être utilisé pour des applications médicales. De plus, il est vite
devenu évident que, les IFN agissant principalement au niveau des interactions entre cellules,
leur application systémique, principalement par injection intramusculaire ou parfois par voie
sous-cutanée, n’est pas simple, bien qu’elle soit assez bien tolérée.[53]

2.3. Interféron-Alfa dans le traitement antiviral :

L'application clinique la plus efficace et la plus répandue de (alfa) -IFN a été le

traitement des infections chroniques par l'hépatite, en particulier l'hépatite C (HCV). En
monothérapie ou en association avec la ribavirine, l'IFN-alfa a été le traitement de choix des
patients présentant une infection chronique par le VHC. De nouveaux outils de chimiothérapie
sont devenus disponible et l’utilisation de l’IFN pourrait bientôt prendre fin.

52
 Le sous-type IFN-alpha 2 est le seul IFN utilisé pour le traitement des hépatites
chroniques B et C et de la leucémie. Les IFN alpha recombinants naturels approuvés par la
FDA comme agents thérapeutiques sont principalement les sous-types IFN-alpha2a et IFN-
alpha2b, ainsi que leurs formes pégylées. L’introduction de l’IFN pégylé en 2001 a permis
d’améliorer son efficacité antivirale, principalement en raison de la demi-vie plus longue dans
le sang, qui ne nécessitait qu’une injection par semaine au lieu des deux à trois précédentes et
en association avec un traitement à la ribavirine. Cependant, des taux de réussite variables ont
été observés dans différents pays, notamment avec différents sous-types de VHC. Ainsi, il y a
eu une recherche intensive de nouvelles thérapies. Souvent, des médicaments antiviraux
supplémentaires tels que la protéase des inhibiteurs.[54]

2.4. Traitement anti-tumoral :

Les activités antiprolifératives de préparations brutes d'IFN-alpha signalées à la fin des

années 1970 et au début des années 1980 ont suscité de grands espoirs en matière de
traitements anticancéreux. Des résultats encourageants ont été obtenus pour le cancer du sein,
les lymphomes et certains myélomes et sarcomes.

Les études cliniques portant sur l'IFN-alfa recombinant purifié dans les années 1980 ont
eu moins de succès, principalement en raison d'effets collatéraux, et l'utilisation clinique de
l'IFN-alfa est devenue plus restreinte. de Schering Plough (IFN-alfa2b produit dans
Escherichia coli) est sur le marché depuis 1986. Les IFN-alfa2a et 2b ont continué de traiter
avec succès la leucémie à tricholeucocytes mais aussi mélanome malin, condylomes acuminés
(condylomes génitaux), carcinome de l'ovaire, lymphome folliculaire, carcinome à cellules
rénales métastatique et sarcome de Kaposi lié au sida[55]. L’IFN-alpha est également utilisé
en tant que adjuvant avec d'autres agents thérapeutiques pour traiter les patients atteints de
cancers de la vessie et du rein et du mélanome.[56]

2.5. Interféron bêta

L’IFN-bêta, qui a été cloné, séquencé et exprimé pour la première fois en 1982 , n’a pas
immédiatement trouvé une application médicale satisfaisante, mais a ensuite été utilisé pour
traiter la sclérose en plaques récurrente et ralentir la progression de la maladie. On pense que
l'IFN-bêta inhibe la production d'IFN-gamma et de TNF-alpha, régulant ainsi négativement la
réponse pro-inflammatoire.

53
 Le traitement à l'IFN-bêta peut réduire le trafic de cellules inflammatoires au travers de
la BHE et augmenter la production de facteur de croissance nerveuse, entraînant une
augmentation potentielle de la survie et de la réparation neuronales.[57]

Globalement, le traitement par IFN-bêta conduit à une réduction de l'inflammation des

neurones. L'IFN-bêta recombinant peut être exprimé et purifié avec une relative facilité dans
les cellules de E. coli ou d'ovaires de hamster chinois (CHO). La production dans E. coli, telle
que, donne un produit non glycosylé, qui n'a pas affecté négativement ses activités
biologiques.[58]

2.6. Interféron-Gamma

L’IFN-gamma, un IFN de type II, anciennement appelé IFN immunitaire, est une
cytokine essentielle de l’immunité inné, et l'immunité adaptative contre l'infection par divers
agents pathogènes viraux et certaines infections bactériennes et à protozoaires. Il active
d'autres cellules immunitaires, telles que les macrophages et les cellules tueuses naturelles, et
a un effet immuno-stimulateur et immuno-modulateur essentiel. Cependant, il est également
impliqué dans plusieurs maladies auto-immunes.

Du fait de son rôle complexe et pivot dans le système immunitaire, les applications
cliniques n’ont pas été simples et l’IFN-gamma n’est utilisé que peu de fois, comme dans le
cas de la maladie granulomateuse chronique. Il est normalement produit dans E. coli et est
purifié par des techniques de chromatographie standard.[59]

C. Les facteurs de croissance :

1. Erythropoïétine :

L’érythropoïétine (EPO) est une glycoprotéine synthétisée principalement par les

cellules rénales péritubulaires, mais également par des cellules hépatiques chez l’adulte. Sa
production est stimulée par l’hypoxie tissulaire via un facteur de transcription hétéro
dimérique induit par l’hypoxie appelé Hypoxia Inductible Factor (HIF).[60]

54
 1.1. Structure de l’érythropoïétine :

Sa structure a été déterminée en 1985 et la production d’érythropoïétines-médicaments a

pu être réalisée quelques années plus tard par des méthodes biotechnologiques notamment la
technique recombinant à partir de cellules animales (ovaires de hamster chinois).

L’érythropoïétine est synthétisée sous la forme d'un polypeptide de 193 acides aminés
dont les 27 premiers forment un peptide signal. Ce peptide signal très hydrophobe est excisé
au moment de l’excrétion. La protéine circulante ne comporte que 165 acides amines car
l’arginine en position carboxy terminale est, elle aussi, éliminée rapidement après la mise en
circulation de l’hormone. [61]

Figure 17: structure primaire de l’EPO humaine

Les EPO sont des facteurs de croissance hématopoïétiques, et plus particulièrement des
agents stimulant l’érythropoïèse (ASE), mécanisme conduisant à la formation des globules
rouges à partir de la moelle osseuse. Ainsi, le rôle de l’EPO est :

 Déclencher la différenciation des cellules souches (CFU-E) en

55
  proérythroblastes.
 Augmenter la vitesse de synthèse de l’hémoglobine dans les
érythroblastes
 Accélérer la sortie de la moelle osseuse des réticulocytes vers le sang.

Figure 18: action de l’EPO

1.2. Etapes de production de l’érythropoïétine recombinante :

 Préparation des cellules ovaires de hamsters chinois CHO recombinantes

 Fermentation

 Production de l’hormone

 Purification

56
 Figure 19: fabrication de l’EPO[62]

Quatre érythropoïétines humaines recombinantes (rHu-EPO) sont commercialisées en France:

 L’époétine alpha (Eprex®)

 L’époétine bêta (Néorécormon®).

Deux formes à libération prolongée, la darbépoétine alpha (Aranesp®) et une forme

pégylée, la méthoxy polyéthylène glycol-époétine bêta (Mircéra®). Les brevets des époétines
alpha et bêta sont récemment arrivés à terme. Ainsi, deux biosimilaires de l’époétine alpha
sont actuellement disponibles : Binocrit® (époétine alpha) et Rétacrit ® (époétine zêta).

57
 1.3. Principales indications :

 Insuffisance rénale chronique chez les patients dialysés/non dialysés.

 Chimiothérapies.

 Prévention de l’anémie du nouveau-né prématuré.

1.4. : Principaux effets indésirables :

Outre les rashs cutanés et les symptômes grippaux non spécifiques, les effets
indésirables des EPOs sont dominés par le risque hypertensif. Les époétines ont été
impliquées dans le décès de cyclistes professionnels par complications thrombo-emboliques
liées à des hématocrites très élevés dans un contexte de déshydratation à l’effort entraînant
une augmentation de la viscosité sanguine obligeant le cœur à un plus grand travail.
Récemment, des cas d’érythroblastopénie grave ont été recensés chez des patients insuffisants
rénaux chroniques traités par une époétine, avec un plus grand nombre sous époétine alpha.

Figure 20: Principaux effets indésirables [63]

58
 2. Le granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF):

Le G-CSF, ou facteur de croissance granulocytaire, est une glycoprotéine de 174 acides

aminés libérée par les macrophages, les cellules endothéliales et les fibroblastes en réponse à
divers stimuli. Il permet de stimuler la différenciation, la prolifération et la maturation des
cellules la lignée granulocytaire permettant, en particulier, la formation de polynucléaires
neutrophiles à partir des cellules progénitrices.

Le G-CSF est connu pour stimuler la production des neutrophiles et activer leurs
fonctions antimicrobiennes in vitro et in vivo. Ainsi, la production d’anions superoxydes est
facilitée, de même que la migration, la phagocytose et la cytotoxicité dépendante des
anticorps. En outre, la survie des neutrophiles est augmentée par retard du passage en
apoptose.[64]

Le filgrastim, r-metHuG-CSF, est un facteur recombinant humain stimulant des

colonies de granulocytes qui permet d’entraîner une augmentation marquée du nombre des
polynucléaires neutrophiles circulants et une augmentation mineure des monocytes dans les
24 heures suivant son administration parentérale. Aux posologies recommandées,
l’augmentation du taux de polynucléaires neutrophiles est dose dépendante. Après arrêt du
traitement, le nombre de polynucléaires neutrophiles circulants diminue de 50 % en 1 à 2
jours et se normalise dans un délai de 1 à 7 jours.

Le pegfilgrastim, produit par la technique de l’ADN recombinant à partir d’une souche

d’Escherichia coli, est une forme conjuguée covalente de G-CSF humain recombinant (r-
metHuG-CSF) attaché à une molécule de polyéthylène-glycol (PEG) de 20 kDa.

Le lenograstim ou rHuG-CSF, produit par la technique de l’ADN recombinant sur des

cellules d’ovaire de hamster chinois, est également capable de stimuler les progéniteurs des
polynucléaires neutrophiles. Ainsi, il entraîne une augmentation notable du nombre des
polynucléaires neutrophiles du sang périphérique dans les 24 heures suivant son
administration. Cette élévation des polynucléaires neutrophiles est dose-dépendante entre 1 et
10 μg/kg/jour.

59
 Le facteur stimulant les colonies de granulocytes (G-CSF), le filgrastim, est l'un des
facteurs de croissance hématopoïétiques utilisés dans la gestion de la neutropénie. Son
avantage sur les autres facteurs de croissance hématopoïétiques est sa capacité à franchir la
barrière hémato-encéphalique. Récemment, il a présenté des potentialités neurotrophes,
antioxydantes , anti-apoptotiques , immunomodulatrices et neuroprotectrices. En outre, il a
amélioré l'issue de nombreux troubles neurologiques tels que l'ischémie cérébrale , les lésions
de la moelle épinière et la maladie d'Alzheimer[65]

2.1. Indications :

 Réduction de la durée des neutropénies et de l’incidence des neutropénies fébriles

chez les patients traités par une chimiothérapie cytotoxique pour une pathologie
maligne (à l’exception des leucémies myéloïdes chroniques et des syndromes
myélodysplasiques).

 Réduction de la durée des neutropénies chez les patients recevant une thérapie
myélosuppressive suivie de greffe de moelle et présentant un risque accru de
neutropénie sévère prolongée.

 Mobilisation de cellules souches progénitrices (CSP) dans le sang circulant.

 Administration à long terme chez les patients, enfants ou adultes, atteints de

neutropénies sévères congénitale (taux de polynucléaires neutrophiles ≤ 0,5 x 109
/L et des antécédents d’infections sévères ou récurrentes).

 Traitement des neutropénies persistantes (taux de polynucléaires neutrophiles ≤ 1 ×

109/L) chez les patients infectés par le VIH à un stade avancé.

2.2. Principaux effets indésirables :

 Manifestations gastro-intestinales : nausées, vomissements. Manifestations

hépatiques et métaboliques : élévation des Gamma GT, des phosphatases alcalines,
de lactate déshydrogénase et de l’uricémie.

 Effets généraux : fatigue, faiblesse généralisée et céphalées.

 Manifestations gastro-intestinales : constipation, anorexie, diarrhée et mucite.

60
  Manifestations ostéo-articulaires : douleurs thoraciques et osseuses.

 Manifestations respiratoires : toux, maux de gorge et infiltrations pulmonaires.

 Manifestations dermatologiques : alopécie, rash cutané et vascularites cutanées.

 Effets rénaux : dysuries.[66]

D. Les anticorps monoclonaux :

Les anticorps monoclonaux sont des molécules protéiques de grande taille dirigées
contre un antigène circulant ou un récepteur cellulaire. L'anticorps identifiera l'antigène grâce
à la complémentarité entre une partie de l'anticorps et une partie de l'antigène, l'épitope.
Chaque anticorps est synthétisé par une population cellulaire issue d'un seul lymphocyte
nommé clone et reconnait un seul épitope.

L'action sur un antigène circulant sera de le neutraliser et sur un récepteur cellulaire

sera de déclencher un effet agoniste, antagoniste, d'apoptose ou de cytolyse par l'intermédiaire
d'effecteurs immunitaires.

1. Structure des ACM

Les anticorps monoclonaux utilisés chez l'Homme sont des immunoglobulines

généralement de type IgG. Ils possèdent tous une structure comportant :

 Deux chaînes glycoprotéiques lourdes (Heavy ou H).

 Deux chaînes glycoprotéiques légères (Light ou L).

Ces chaînes sont reliées entre elles par des ponts disulfures. Ces quatre chaînes
possèdent en outre des domaines constants (C) et des domaines variables (V) : un domaine
variable (VL) et un domaine constant (CL) pour les chaînes légères L, un domaine variable
(VH) et trois domaines constants (CH1, CH2, CH3) pour les chaînes lourdes H. La partie
variable de l'anticorps est responsable de la liaison avec l'antigène ou épitope ; les boucles
situées à l'extrémité des parties variables constituent le site de reconnaissance de l'antigène et
sont appelées domaines hypervariables, ou CDR (Complementarity Determining Region). La
partie constante est responsable de la liaison avec des molécules appelées «effecteurs» qui
participent à la réaction immunologique.[67] [68]

61
 Figure 21: Représentation schématique d’une molécule d’anticorps (Type IgG) [69]

2. Obtention des anticorps monoclonaux :

Grâce à la mise au point de la technologie des hybridomes en 1975, Georges Köhler,

immunologiste allemand, et César Milstein, biochimiste britannique d’origine argentine, ont
fabriqué pour la première fois des anticorps (Ac) monoclonaux, ce qui leur a valu le prix
Nobel Médecine et de Physiologie en 1984.

Dans la technique de base, la production des Ac monoclonaux se déroule en deux étapes

principales, à savoir, la production in vivo (immunisation) de cellules lymphoïdes sécrétant
des Ac, leur hybridation et la sélection in vitro d’un hybridome producteur d’Ac, puis la
multiplication de clones de l’hybridome, soit in vitro, soit in vivo, afin d’obtenir de grandes
quantités d’Ac.

2.1. Obtention et sélection des hybridomes :

L’antigène contre lequel on veut préparer des Ac est injecté à l’animal avec ou sans
adjuvant. Les cellules lymphoïdes de la rate ou des ganglions lymphatiques de l’animal sont
isolées. Elles sont ensuite fusionnées, en présence de polyéthylène glycol, avec des cellules

62
myélomateuses préalablement cultivées et sélectionnées in vitro pour leur déficience en
hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransférase (HGPRT) ou, plus rarement, en thymidine
kinase (TK). Le mélange de toutes ces cellules (hybrides et cellules parentales) est placé sur
un milieu de culture sélectif appelé milieu HAT (Hypoxanthine, Aminoptérine et Thymidine).

La sélection par le milieu HAT dépend du fait que les cellules de mammifères peuvent
synthétiser les nucléotides par deux voies différentes : la voie de novo et la voie de
récupération.

La voie de novo, dans laquelle un groupe méthyle ou formyle est transféré à partir d’une
forme activée du tétrahydrofolate, est bloquée par l’aminoptérine, qui est un analogue de
l’acide folique. Lorsque la voie de novo est bloquée, les cellules utilisent la voie de
récupération, qui contourne le blocage par l’aminoptérine en incorporant directement les
purines et les pyrimidines dans les nucléotides nécessaires à la synthèse du DNA et du RNA.
Les enzymes qui catalysent la voie de récupération incluent HGPRT et TK. Une mutation de
l’un ou l’autre de ces deux enzymes bloque la capacité de la cellule à utiliser la voie de
récupération et entraîne sa mort dans le milieu HAT.

3. Production des anticorps monoclonaux :

Les hybridomes qui produisent les Ac monoclonaux désirés sont sélectionnés et ensuite
clonés. On peut alors multiplier les clones producteurs de l’Ac d’intérêt soit en continuant de
les cultiver in vitro, soit en utilisant l’animal immunisé pour une production in vivo.
Lorsqu’un hybridome est cultivé dans des flacons de culture de tissu, l’Ac est sécrété dans le
milieu, habituellement à de très faibles concentrations (1-20 µg/mL). Un hybridome introduit
par injection dans la cavité péritonéale d’une souris compatible s’y développe et sécrète l’Ac
monoclonal dans le liquide d’ascite à des concentrations beaucoup plus élevées
(habituellement, 1-10 mg/mL environ). L’Ac peut être ensuite purifié par chromatographie du
liquide d’ascite. Pour répondre à la demande croissante d’Ac monoclonaux.

63
Figure 22: Procédé de production d’Ac monoclonaux spécifiques d’un antigène donné, selon G.
Köhler et C. Milstein.[70]

64
 4. Nomenclature des ACM :

La nomenclature des anticorps monoclonaux est très complexe et fait intervenir des
syllabes imposées. Les dénominations communes internationales (DCI) ainsi obtenues sont
complexes et font travailler la prononciation. Néanmoins, cette nomenclature est très
intéressante car elle permet de les classer en fonction de leur origine ou de la cible
thérapeutique.

Le suffi xe “mab” Les anticorps monoclonaux possèdent tous la même terminaison, à

savoir le suffixe “mab”. Celui-ci provient de la langue anglaise, signifiant monoclonal anti-
bodies.

La source ou l’origine Ce qui précède le suffixe “mab” concerne la source de

l’anticorps monoclonal, il s’agit donc de son origine

Actuellement, en thérapeutique, seules les syllabes -o-, -u-, -xi-, -zu- et -axo- sont
utilisées pour les nomenclatures.

Figure 23: Les syllabes renseignant sur l’origine des anticorps monoclonaux.

65
 4.1. La cible :

La syllabe située avant la source désigne la cible des anticorps monoclonaux.

Figure 24: Les syllabes renseignant sur la cible thérapeutique

4.2. La nomenclature finale :

Le préfixe du nom de la molécule est fantaisiste et déterminé par le laboratoire lors de

la création du dossier d’autorisation de mise sur le marché (AMM). Il s’agit donc de la seule
syllabe du nom du médicament n'ayant aucune signification dans la nomenclature.

La nomenclature finale est donc ainsi constituée : préfixe de fantaisie – cible – origine –
mab (exemple : toci-li-zumab).[71]

Cette nomenclature, a directement accès à deux données importantes :

 la cible des médicaments, permettant de connaître la maladie du patient sans lui

poser la question, ce qui est intéressant, surtout dans le cas d'un cancer ;
 leur origine, importante pour évaluer l’hypersensibilité éventuelle à ces substances.

66
 5. Classification des ACM :

Dès 1975, les Ac monoclonaux produits par la technique des hybridomes sont utilisés
en thérapeutique Cependant, ces anticorps étant d’origine murine, les patients traités par ces
médicaments produisaient des anticorps anti-souris (HAMA, Human Anti-Mouse Antibody).
De plus, ces anticorps de première génération avaient une demi-vie très courte après injection
et n’étaient pas capables d’exercer certaines fonctions effectrices. Ces lacunes ont donc
conduit, en 1984, à la production d’une nouvelle génération d’anticorps, les anticorps
chimériques Dans ce cas, les domaines constants de l’anticorps murin sont substitués par les
domaines constants humains équivalents mais le caractère immunogène est toujours présent.
Afin de diminuer leur immunogénicité, des anticorps, dits humanisés, ont été développés
entre 1988 et 1991 Cette troisième génération d’Ac monoclonaux est constituée
d’immunoglobulines humaines dont seules les parties hypervariables (CDR, Complementary
Determining Regions) sont d’origine murine Enfin, de 1994 à 1999, une dernière génération
d’anticorps a vu le jour, les anticorps totalement humains.[70]

5.1. Les anticorps monoclonaux murins :

L’obtention des anticorps monoclonaux murins découle des expériences de Köhler et

Milstein. Il s’agit de faire fusionner des lymphocytes B (issus de splénocytes de souris) avec
des cellules de myélome murin via un agent de fusion membranaire.Des hybridomes sont
ainsi obtenus, puis un clonage par dilution limite est effectué. Le criblage des clones se fait
grâce à la technique ELISA. Lorsque les clones spécifiques sont obtenus, leur stockage
commence. Il s’agit d’une cryopréservation dans un cocktail contenant 10 % de diméthyl-
sulfoxide et de l’azote liquide. Pour les produire, il suffit de placer les hybridomes dans des
incubateurs spéciaux appelés cytoculteurs. Ainsi est obtenu un surnageant qui, après
purification, donne les anticorps monoclonaux recherchés.

67
 Figure 25: ACM murins

5.2. Les anticorps monoclonaux chimériques :

Pour obtenir des anticorps monoclonaux chimériques, il s’agit de cloner les ADN
codant pour les régions variables des chaînes lourdes et légères des anticorps, et de générer
une construction avec des séquences codant pour les régions constantes des mêmes chaînes,
mais d’origine humaine. L’anticorps a donc deux origines :

 Les régions variables sont d’origine murine.

 Les régions constantes sont d’origine.

Figure 26: ACM chimériques

68
 5.3. Anticorps monoclonaux humanisés :

Afin d’obtenir des anticorps monoclonaux humanisés, les régions hypervariables

murines (CDR) sont greffées, à l’aide de la technique de l’ADN recombinant, sur des régions
“charpentes” des gènes d’immunoglobulines humaines. Cela consiste à greffer les régions
murines spécifiques de l’antigène sur une immunoglobuline humaine. L’anticorps obtenu est
encore moins murin que les deux précédents, donc moins immunogènes. La méthode utilisée
consiste en une sélection guidée basée sur des techniques de présentation à la surface de
bactériophages.

Figure 27: ACM humanisés

5.4. Les anticorps monoclonaux humains :

Pour obtenir les anticorps monoclonaux humains, il faut utiliser des souris
transgéniques, dont le génome sera modifié. En effet, les gènes codant pour les
immunoglobulines murines sont remplacés par des gènes codant pour les immunoglobulines
humaines. En immunisant la souris avec un antigène donné, elles produisent des anticorps
“100 % humains”. Les anticorps humains ainsi obtenus.[68, 71]

69
 Figure 28: ACM humains

Figure 29: Types des ACM [71]

70
 6. Mécanisme d’action :

L'anticorps monoclonal va se fixer par sa fraction Fab sur l'antigène contre lequel il est
dirigé. Selon les événements secondaires à cette liaison, nous pouvons distinguer différents
modes d'action.

Des modes d'action «directs »

Cas 1 : La portion Fab se lie à une molécule circulante qui est directement visée pour
les effets qu'elle provoque. La liaison avec l'anticorps monoclonal inhibe alors son action par
un mécanisme d'antagonisme non-compétitif. La molécule circulante est alors appelée «
antigène soluble» et l'anticorps «anticorps neutralisant».

Cas 2 :L'antigène sur lequel se lie la portion Fab est un récepteur membranaire. L'action
de la liaison de l'anticorps au récepteur peut alors être un blocage (effet antagoniste), une
stimulation (effet agoniste) du récepteur ou un effet cytolytique par apoptose

Des modes d'action « indirects »

L'anticorps peut être indirectement à l'origine de la cytolyse d'une cellule particulière

préalablement ciblée. L'anticorps est dirigé contre l'un de ses antigènes de surface, une protéine,
un récepteur…, qui se fixe spécifiquement sur l'antigène CD20 porté par certains lymphocytes B.
Comme pour les cas précédents, la partie Fab spécifique va servir au ciblage de la cellule
considérée et l'anticorps monoclonal va se fixer sur la cellule. En revanche, l'effet recherché n'est
pas lié à cette fixation mais à la mise en jeu d'un effet cytolytique propre à la portion Fc. Cette
cytolyse est alors possible par deux voies : le système du complément (fraction C1q), ou le
recrutement d'effecteurs cellulaires de l'immunité comme les macrophages ou les cellules Natural
Killer (cellules NK) portant un récepteur FcγR (ou CD16).

Cas 3 : L'action par recrutement de la fraction du complément C1q, ou CDC

(Complement-Dependent Cytotoxicity). La voie dite «classique» du complément est activée
par le complexe antigène-anticorps. La fixation de C1q sur Fc va déclencher une cascade
d'activations de protéines, dont le résultat est la formation de C3-convertase puis de C5-
convertase. La C5-convertase va permettre la transformation de C5 en différentes fractions
dont C5b-9, à l'origine de la lyse de la membrane cellulaire.

71
 Cas 4 : L'action par liaison sur un récepteur FcγR (ou CD16) d'un effecteur cellulaire,
ou ADCC (Antibody-Dependent Cell-mediated Cytotoxicity). En effet, certaines cellules
effectrices, comme les cellules Natural Killer (cellules NK) ou les macrophages, expriment la
protéine de surface CD16, qui est un récepteur à Fc (FcγR). La fixation de l'anticorps à la
cellule effectrice par l'intermédiaire du récepteur FcγR (ou CD16) va être à l'origine de la
libération de cytokines cytotoxiques par la cellule effectrice.

Figure 30: Mécanisme d’action d’un anticorps monoclonal[67]

72
 7. Les nouveaux formats d’ACM :

Les techniques d’ingénierie et de production d’anticorps monoclonaux permettent

d’envisager et de mettre régulièrement au point des formats innovants avec un éventail de
possibilités immense, donnant l’occasion de tailler sur mesure les propriétés
pharmacologiques escomptées.

7.1. Immunoconjugués :

Le terme d’immunoconjugué est utilisé pour décrire des anticorps monoclonaux (ou
d’autres sous-unités) utilisés comme porteurs de substances actives, par ex. des radio-
isotopes, des toxines, des enzymes, des cytokines ou des nanoparticules. L’activité
immunologique de ces anticorps est alors sans importance. Les effets qu’ils développent sont
ceux de la substance qu’ils transportent.

7.2. Anticorps conjugués à des radioisotopes :

Les anticorps peuvent être associés aux radioisotopes. Les radioisotopes subissent une
désintégration en raison de l’instabilité inhérente de leur noyau et émettent certains types de
particules qui vont traverser les tissus sur différentes distances. Les particules  peuvent
traverser quelques millimètres à quelques centimètres de tissus et donc déposer leur énergie
au voisinage du point d’émission. Elles seront utilisées pour détruire des tumeurs
volumineuses. Pour cibler des tumeurs de petit volume, ou si on souhaite épargner des
cellules normales immédiatement adjacentes aux cellules tumorales, le choix se portera sur
des radioisotopes émettant des particules α. En pratique, l’iode 131 et l’yttrium 90, qui
émettent tous deux des particules, sont les agents les plus souvent utilisés. L’iode 131, en
raison de l’émission également de particules γ, présente l’avantage de pouvoir être utilisé en
scintigraphie pour évaluer la distribution du tissu tumoral.

7.3. Anticorps conjugués à des toxines :

Les immunotoxines sont des molécules chimériques composées d’une molécule

permettant l’adhésion aux cellules (ici un anticorps) et d’une toxine ou une de ses
sous-unités. Les toxines dérivées des plantes ou des bactéries sont des protéines
possédant habituellement un domaine de fixation non spécifique aux cellules et un domaine

73
capable d’inhiber la synthèse protéique. En remplaçant le domaine de fixation
non spécifique de la toxine par un anticorps, la toxine peut être dirigée spécifiquement
vers des cellules tumorales. Après liaison à la surface de la cellule, le complexe anticorps-
toxine est internalisé dans des vésicules et les compartiments de l’appareil de Golgi où la
présence d’un pH faible facilite la protéolyse de la toxine. La sous-unité toxique de la toxine
est transportée vers le cytosol de la cellule. Dans le cytosol, le domaine catalytique de la
toxine peut modifier le facteur d’élongation ou inactiver l’ARN ribosomial 28S, et de cette
manière, inhiber la synthèse protéique indispensable à la survie de la cellule. Comme exemple
de cette association le couplage de gentuzumab (anti-CD33) à la calicheamicine utilise pour le
traitement de leucémie myéloïde aiguë exprimant le CD33.

7.4. Anticorps conjugués à une enzyme :

Cette technologie appelée ADEPT (antibody directed enzyme prodrug therapy) procède
en deux étapes : des prodrogues non toxiques sont d’abord conjuguées à l’anticorps, puis
l'anticorps se fixe sur la cellule cible en transformant la prodrogue en drogue active :
Carboxypeptidases, Phosphatase alcaline, Glucuronidase et - Lactamase ont été ainsi
conjuguées. L’avenir de cette approche concerne les maladies infectieuses à germe résistant à
certain antibiotiques ou certaines parasitoses.[72]

7.5. Anticorps conjugués à des nanoparticules :

Les anticorps peuvent être couplés de façon covalente à la surface des nanoparticules
pour un ciblage localisé des cellules qui expriment les récepteurs d'antigène correspondant. La
conception de nanoparticules immuno-polymère exige non seulement la création de structures
bien définies, mais aussi l'optimisation de la chimie de conjugaison d’anticorps. Nous
rapportons ici la conception d'un système de nanoparticules polymériques biodégradables en
utilisant de nouveaux copolymères greffés qui s'auto-assemblent dans des nanoparticules en
solution aqueuse micellaire et de fournir des groupes fonctionnels réactifs pour le couplage
d'anticorps par des réactions de Diels-Alder.

74
 7.6. Anticorps bispécifique :

De nombreux formats ont été développés depuis l’avènement des anticorps

bispécifiques en raison des contraintes de qualité et de quantité. Si l’AcBs doit être une
molécule efficace, il doit également pouvoir être produit et purifié en quantités suffisantes
pour des applications cliniques. La première stratégie pour créer des AcBs a consisté à
fusionner les 2 hybridomes produisant les AcM correspondant aux 2 spécificités visées. Cette
stratégie présentait un défi technique important puisque l’appariement aléatoire des chaînes
lourdes et légères des AcM originaux générait une dizaine d’anticorps différents et que la
purification de l’anticorps d’intérêt était très difficile. L’avantage de ces AcBs produits par
quadroma était la présence de la partie Fc qui en faisait des molécules « trispécifique » avec
des avantages et des inconvénients potentiels. La liaison de 2 Fab’ par un lien thioether,
initialement décrite par Glenny, a permis de préparer de nombreux anticorps bispécifiques
évalués en préclinique et lors d’études cliniques. Si cette technologie permet de préparer des
molécules efficaces avec un degré de pureté compatible avec un usage clinique, les
nombreuses étapes de purification et les rendements ne sont pas compatibles avec une activité
commerciale. Récemmentle développement et la production d’AcBs bivalents et
trifonctionnels très proches du format des anticorps intacts amplifient les perspectives
d’utilisation en clinique des AcBs.

7.7. Anticorps intracellulaire (antrabody)

Un anticorps intracellulaire est un anticorps conçu pour être exprimé de manière

intracellulaire par l'incorporation dans sa structure d’un peptide signal de trafic intracellulaire.
Ces anticorps ont été développés contre différents antigènes présent dans divers
compartiments cellulaires tels que le cytosol, le noyau, le réticulum endoplasmique, les
mitochondries, les peroxysomes et la membrane plasmique. Leur liaison avec l’antigène cible
offre la possibilité de bloquer ou de modifier des interactions moléculaires spécifiques menant
à des changements dans l'activité biologique des protéines cibles. Ils ont été, par exemple,
employés pour diminuer l'expression membranaire du récepteur de 38 facteurs de croissance
endothélial vasculaire oncogénique, menant à une inhibition significative de la croissance
tumorale. Assurément, l'obstacle principal dans l’utilisation de ces anticorps demeure

75
l'absence de méthodes efficaces in vivo pour introduire le matériel génétique codant l'Ac dans
des cellules cibles vivantes. Jusqu’ici, toutes les études ont employé des systèmes in vitro où
les cellules sont transfectées en employant des vecteurs d'expression, tandis que les
applications cliniques exigeraient des protocoles efficaces de thérapie génique qui ne sont pas
encore disponibles. Actuellement, des tentatives sont faites pour délivrer les gènes de ces
anticorps en employant des génomes de virus ou des immunoliposomes. Cette technologie ne
pourra montrer son potentiel thérapeutique que lorsque ce goulot technologique aura été
franchi.[73, 74]

76
Biosimilaires

77
 A. Définition internationale :

1. Pour l’organisation mondiale de la santé (OMS):

Un médicament biosimilaire est un médicament biologique qui est similaire en termes

de qualité, de sécurité et d’efficacité par rapport au médicament de référence.[75]

2. Pour l’agence européenne du médicament (EMA) :

Un médicament biosimilaire est un médicament biologique qui est dveloppé pour être
similaire à un médicament biologique existant (le «médicament de référence »). Les
biosimilaires sont à distinguer des génériques, qui ont des structures chimiques plus simples et
sont considérés comme identiques à leur médicament de référence ». Un médicament
biologique qui contient le même principe actif que le médicament de référence. Il doit
démontrer une similarité en termes de qualité, d’activité biologique, de sécurité et
d’efficacité.[39]

3. Pour la Food and Drug Administration (FDA) :

Un médicament biologique est biosimilaire à un médicament de référence si les données

montrent qu’il est hautement similaire au médicament de référence avec quelques différences
mineures sur les composants inactifs cliniquement et s’il n’existe aucune différence clinique
en termes de sécurité, pureté et de puissance.[76]

4. Pour le Maroc :

Est un médicament biologique de même composition qualitative et quantitative en

substance active et de même forme pharmaceutique qu'un médicament biologique de
référence, mais qui ne peut être considéré comme une spécialité générique en raison de
différences liées notamment à la variabilité de la matière première ou aux procédés de
fabrication et nécessitant que soient produites des données précliniques et cliniques
supplémentaires.[77]

78
 Depuis 1995, l’OMC a uniformisé la protection de droits de propriété intellectuelle avec
l’accord ADPIC (Accord sur les aspects de droits de propriété intellectuelle qui touchent au
commerce) : les produits pharmaceutiques et processus utilisés entrent dans le champ de cet
accord et tous les pays membres doivent assurer la protection d’une durée minimale de 20 ans
à compter de la date de dépôt de demande de brevet. Cet accord permet d’assurer un
monopole de vente des produits pharmaceutiques d’environ 10 ans. L’échéance des brevets
des médicaments biologiques ouvre la possibilité de commercialisation de médicaments
biosimilaires, copies des médicaments biologiques de référence. Ces biosimilaires suscitent
l’intérêt, dans la mesure où ils sont susceptibles d’apporter un progrès en termes d’efficience
et d’accessibilitépour les patients. De nombreux biomédicaments ont (1erbiomédicament
ayant perdu son brevet : OMATROPINE® en 2006) ou vont voir leurs brevets expirer.[78]

Figure 31: Date d'expiration des brevets de certains biomédicaments

79
Tableau 1: Différences entre le biosimilaire et le générique

80
 B. Naissance du concept de biosimilaires :
Les réflexions sur les copies des biomédicaments ont, notamment, débuté avec le cas de
l’EPREX® qui a soulevé la question de la similitude entre les biomédicaments.

L’administration d’EPREX a été corrélée à l’augmentation des cas d’érythroblastopénie

à partir de 1997 (78 cas d’érythroblastopénie chez des patients recevant de l’EPREX® de
juillet 1997 à décembre 2001.

Figure 32: Illustration du nombre de cas de PRCA de 1989 à 2007[79]

Compte tenu de la variabilité naturelle de la source biologique et du procédé de

fabrication propre à chaque fabricant, de légères différences peuvent apparaître entre le
médicament biosimilaire et son médicament de référence. Des contrôles stricts sont toujours
en place pendant la fabrication pour veiller à ce que ces légères différences n’influencent pas
le mode d’action du médicament ou sa sécurité. Ces différences ne sont donc pas
cliniquement significatives en ce qui concerne la sécurité et l’efficacité.

81
 Figure 33: Exemple de variabilité entre un médicament biosimilaire et le médicament
de référence[80]

C. Principes généraux de la législation du médicament biosimilaire :

L’évaluation d’un médicament biosimilaire requiert la démonstration d’une haute
similarité au médicament de référence sur la base des données suivantes : sa structure, son
activité biologique, sa sécurité et son efficacité ainsi que son profil d’immunogénicité. Cette
démonstration de haute similarité repose sur un exercice de comparabilité versus un
médicament biologique de référence ayant déjà son AMM.

Étant donné que les biosimilaires ont de nombreuses considérations spécifiques et

uniques liées à l'approbation réglementaire, des directives spécifiques ont été élaborées par
l'EMA, la FDA et l'Organisation mondiale de la santé (OMS). Il existe des différences
mineures entre les recommandations, mais toutes suggèrent de suivre une approche par étapes
pour démontrer la biosimilarité avec l’initiateur.[81]

82
 Les exigences réglementaires de développement d’un médicament biosimilaire
impliquent :

 Des données sur la qualité du produit (dossier complet et exercice de

comparabilité)
 Des données non-cliniques comparatives
 Des données cliniques comparatives
 Un plan de gestion des risques
Cet exercice de comparabilité consiste en une comparaison effectuée pas à pas entre les
deux produits pour démontrer la biosimilarité à tous les niveaux. La démonstration de la
biosimilarité débute avec une comparabilité de la qualité qui repose principalement sur la
caractérisation physicochimique et biologique suivie d’une comparabilité préclinique et phase
III. L'exercice de comparabilité, décrit également dans la guideline "Evaluation of similar
biotherapeutic products" de l'Organisation Mondiale de la Santé (OMS), se déroule de la
façon suivante :

Figure 34: Comparaison des données requises pour l’approbation d’un médicament biosimilaire

83
 1. Comparabilité au niveau de la qualité :
1.1. Choix du produit de référence :

Pour réaliser l’ensemble des tests, le choix du produit de référence est primordial : Le
médicament de référence doit être unique (un seul produit de référence pour comparer la
qualité, sécurité et efficacité du médicament biosimilaire) et autorisé.
Afin de confirmer la biosimilarité, le produit en développement doit être hautement
similaire au produit de référence du point de vue physico-chimique et biologique. Si toutefois
des différences existent entre les deux, il faut les justifier au regard de leur impact au niveau
de la sécurité et de l’efficacité.

1.2. Caractérisation du produit de référence :

Ces molécules sont sensibles et difficilement copiables à la perfection. C’est pourquoi la

législation européenne et internationale admet la notion de « comparabilité » pour ces produits.
Cette notion permet de déterminer un seuil d’acceptabilité (spécifications) entre le
produit de référence et le produit en développement, depuis la caractérisation du produit de
référence jusqu’aux études cliniques de phase 4. La caractérisation du médicament de
référence est indispensable puisqu’elle permet d’identifier des différences susceptibles
d’affecter la sécurité, l’efficacité et la qualité du produit. Elles peuvent être observées dans la
structure primaire, secondaire ou tertiaire. Cependant, certaines différences n’affectent pas les
séquences d’AA et l’activité biologique du médicament.
Les méthodes employées doivent être conformes à l’état de l’Art et utiliser la
chromatographie, l’électrophorèse ou la spectrométrie de masse pour évaluer ces variants,
isoformes ou autre.

1.3. Comparabilité physico-chimique :

Tous les aspects de la qualité et de la micro-hétérogénéité doivent être évalués par des
comparaisons directes avec le produit de référence. La comparaison de la qualité est établie
sur la comparaison de la structure moléculaire (structure primaire à quaternaire), des
propriétés physico chimiques, de l’activité biologique, des spécifications, des impuretés et de
la stabilité des deux produits.[82]

84
Tableau 2: Critères de comparabilité physico-chimiques entre Binocrit® et son comparateur[83]

1.4. Comparabilité biologique :

L'activité biologique qui est la capacité d'un produit à réaliser un effet biologique donné,
doit être comparée entre le biosimilaire et la référence. Elle est démontrée in vitro en
comparant les cinétiques de liaison au récepteur et in vivo.

Figure 35: Étude de liaison au récepteur[83]

85
 1.5. Impuretés:

Les impuretés liées au produit et au procédé de fabrication, bien que le procédé de

fabrication du médicament biologique de référence ne soit pas connu, doivent être identifiées,
quantifiées et comparées entre le biosimilaire et la référence. Etant donné la différence de
procédé de fabrication, des différences significatives au niveau du profil d'impuretés peuvent
être attendues et doivent faire l'objet d'une évaluation de l'impact potentiel sur la sécurité et
l'efficacité. Des études non cliniques et cliniques seront peut être nécessaires pour confirmer
l'absence d'impact. Dans le cadre de l’exemple de l’exercice de comparabilité entre le
Zarzio® et le Neupogen®, des méthodes analytiques telles que la RP-HPLC et autres ont
montré que le profil de pureté était hautement similaire entre les deux produits.

Figure 36: chromatogramme à échange d’ion pour NIVESTIM® (A) NEUPOGEN®(B), le

produit de référence.[84]

86
 2. Comparabilité Pré Clinique :

Les études précliniques sont comparatives et comprennent généralement des études in

vitro, fixations des récepteurs et essais sur des cellules déjà trouvées dans les données de
qualité fournies pour l’évaluation de l’activité biologique. Ces études peuvent établir la
comparabilité du mécanisme d’action entre les produits comparés et identifier des facteurs de
causalité au cas où la comparabilité n’aurait pu être établie. Des études in vivo sur des études
animales pertinentes doivent être ajoutées, tout en tenant compte lignes directrices en vigueur.
L’étude préclinique doit évaluer, lorsque le modèle animal le permet :
 L’activité liée à l’effet pharmacodynamique pertinent pour l application clinique.
 La toxicité non clinique déterminée avec une dose unique et répétée; il n’est pas
nécessaire d’avoir des études recherches sur les doses toxiques, comme on les
connaît déjà.
Les mesures de la toxicocinétique comprennent la détermination du niveau de les
anticorps avec l’étude des réactions croisées et de la capacité de neutralisation; les études
doivent durer assez longtemps pour montrer toute différence pertinente en termes de toxicité
et/ou réponse immunitaire entre le biosimilaire et le produit de référence;
si nécessaire, des études comparatives de tolérance locale. Autres tests toxicologiques
de routine (pharmacologie de sécurité, tests de reproduction, mutagénicité, cancérogénicité)
ne sont pas nécessaires. Le programme d’études précliniques est un programme limité en
raison du fait que les données toxicologiques sont connues pour médicament de référence et il
n’est pas nécessaire de répéter toutes les études pour savoir le biosimilaire.
Tableau 3: Etudes nécessaires pour la comparabilité pré clinique[85]

PRE CLINIQUE Analyses Paramètres analysés

 Activité PD
IN VIVO Evaluation du profil  Liaison au récepteur
pharmacologique et toxicologique  Activité biologique et PD
IN VITRO  Toxicité non-clinique :
dose unique et dose répétée
et étude toxicocinétique

87
 3. Comparabilité Clinique :

Les études cliniques permettent de démontrer la comparabilité de l'efficacité et de la

sécurité entre le biosimilaire et le médicament biologique de référence. Pour ce faire, des
études de pharmacocinétique, pharmacodynamie suivies d'un essai clinique de phase III seront
réalisés.
Les études cliniques comparatives sont adaptées pour examiner les dissimilitudes
observées dans les propriétés physicochimiques, biologiques ou in vitro. Le but final est
d'exclure chacun des différences cliniquement pertinentes entre le biosimilaire et le
biomedicament de référence et confirmer la biosimilarité.[86]

L’objectif des études menées chez l’être humain ne consiste pas à démontrer la sécurité
et l’efficacité chez les patients, celles-ci ayant déjà été établies pour le médicament de
référence. Les essais cliniques sont conçus pour confrmer la biosimilarité et répondre à toute
question encore en suspens à l’issue des études analytiques ou fonctionnelles précédentes.

L’application d’un plan de développement clinique complet aux biosimilaires pourrait

être considérée comme non-éthique, le biosimilaire étant utilisé dans le but de traiter la même
maladie, aux mêmes doses et conditions d’utilisation. L’efficacité de cette classe de molécule
ayant également été démontrée pour le produit de référence, des essais cliniques ne seraient
ainsi éthiquement pas justifiés. C’est pourquoi les essais cliniques pour un biosimilaire sont
réduits à des études PK/PD comparatives et comparaison d’efficacité pour limiter le nombre
de sujets inclus.[80]

3.1. Etude clinique de pharmacocinétique et de pharmacodynamique :

Les paramètres pertinents à évaluer au cours d’une étude PK menés dans le cadre des
essais cliniques sont notamment l’AUC, Cmax, Tmax, Vd, et demi-vie. Cependant ces
paramètres peuvent varier au cours des essais.

Les études PD doivent permettre de confirmer que les deux molécules ont des profils
identiques avant la réalisation d’essais cliniques, spécifiquement si des différences dans les
profils PK ont été observées.

88
 Des critères d’évaluation mesurant l’activité pharmacodynamique peuvent être utilisés
lorsqu’ils sont disponibles et pertinents pour ce qui est de l’effet clinique du médicament.
Dans la plupart des études ces critères sont plus sensibles que les indicateurs cliniques pour
détecter d’éventuelles différences entre un médicament biosimilaire et le médicament de
référence.

Les critères PD reposent généralement sur des tests de laboratoire. Exemples de critères
PD:

 Vitesse de perfusion du glucose mesurée durant une épreuve de clamp glycémique pour
les insulines biosimilaires (plutôt que la mesure de l’HbA1c ou des conséquences à long
terme du diabète)
 Taux absolu de neutrophiles pour un biosimilaire du facteur de croissance
granulocytaire (plutôt que le nombre d’infections graves)
 Nombre d’ovocytes recueillis lors de la fécondation in vitro pour un biosimilaire de
l'hormone folliculostimulante (plutôt que le nombre de grossesses ou de naissances)[87]

Figure 37: parametres PK et PD d’un biosimilaire en developpement et son réferent[87]

89
 Figure 38: Pharmacocinétique et pharmacodynamique pour Zarzio® et Neupogen®[88]

3.2. Etude clinique d’efficacité:

L’efficacité similaire doit être démontrée dans un essai avec une puissance adéquate, un
dosage et une voie d’administration identique, randomisé et en double aveugle. Des essais
d’équivalence ou/et de non-infériorité sont recommandés, dans une population homogène et
sensible aux effets du biosimilaires .Les essais de supériorité ne sont pas adaptés pour des
biosimilaires : le but étant de démontrer la comparabilité et non la supériorité.

Les essais d’équivalence permettent de démontrer que le biosimilaire et le

biomédicament sont thérapeutiquement équivalents. L’essai d’équivalence demande de définir
une marge d’équivalence à partir d’une grandeur ∆eq qui correspond à la plus large différence
en efficacité qui n’aura pas d’impact en clinique (on parle de MCID « minimally clinically
important difference »). On part de l’hypothèse nulle que les deux produits sont non

90
équivalents (soit mieux soit moins bien que le biomédicament de référence). En conséquence,
le but est de démontrer que l’efficacité du biosimilaire n’est pas plus importante ou moins
importante.[89] Pour ce type d’essai les points limitants sont le fait que plus la MCID est
petite (donc intéressante pour montrer la similarité) plus la taille de l’échantillon nécessaire
sera importante et que pour déterminer la MCID de nombreuses données provenant du
comparateur sont nécessaires (méta analyse des études du comparateur versus placebo…)[90]

Figure 39: caractéristiques d'un essai d'équivalence

Les essais de non-infériorité permettent de démontrer que le biosimilaire n’est pas

moins efficace que le biomédicament. On part de l’hypothèse nulle que le produit A est moins
efficace que le produit B. En conséquence, le but est de démontrer que la différence
d’efficacité entre le biosimilaire et le biomédicament n’est pas inférieure à la MCID (∆eq).
L’avantage des essais cherchant à démontrer la non-infériorité est une taille d’échantillon

91
nécessaire moins importante. Cependant, ces essais de non-infériorité peuvent montrer que le
biosimilaire n’est pas inférieur mais ne statuent donc pas sur une possible supériorité : cela
peut être associé à plus d’effets indésirables et donc amener les autorités à demander un
développement indépendant de la molécule. Pour cette raison également, les essais
d’infériorité ne permettant pas d’appliquer l’extrapolation d’indication. Ainsi, les essais
d’équivalence sont recommandés par les autorités pour démontrer la biosimilarité.
Néanmoins, les essais de non-infériorité sont justifiés et acceptés lorsque le biomédicament de
référence a déjà une marge de sécurité large.[91]

Figure 40: caractéristiques d'un essai de non-inferiorité

Pour ces deux types d’essais l’analyse doit se baser sur la population PP (perprotocol)
et sur la population ITT (Intend-to-treat). L’analyse en ITT suppose des déviations au
protocole semblables dans les 2 groupes, et diminue l’efficacité estimée pouvant entrainer des
biais pour ce type d’essai.

Il ne s'agit pas de produire un médicament plus efficace mais un médicament hautement

similaire.

92
 3.3. Sécurité d’emploi:

Les essais cliniques comparant biosimilaires et produits princeps sont nécessaires car le
profil de sécurité peut être différent en termes de nature, sévérité ou effets indésirables. La
taille de la population à inclure dans les essais de pré-commercialisation et la durée
d’observation nécessaires pour affirmer la sécurité d’emploi du produit biosimilaire évalué
sont des questions difficiles à résoudre. Les études évaluant la toxicité à dose unique ou
répétée ou la tolérance locale sont requises pour certains produits, mais ne sont parfois pas
suffisantes.

Les données de sécurité collectée à partir des essais cliniques s’avèrent suffisante pour
l’enregistrement de médicament mais pas complète d’où la nécessité d’une surveillance plus
étroite de la tolérance clinique du produit biosimilaire dans la phase post-commercialisation.

3.4. Immunogénicité :

L’immunogénicité est la capacité à développer une réponse immunitaire vis-à-vis du

biomédicament conduisant à la production d’anti-drug antibodies (ADA).[92]

Il est admis que certains facteurs peuvent influencer la réponse à un traitement

biologique. Ces facteurs peuvent être dépendants du patient et de la maladie :

Liés au médicament :

 Séquences peptidiques de la molécule

 Glycosylation de la molécule

 Présence d’agrégats

 Galénique

 Impureté

 Formation de complexes immuns

Liés au patient et au schéma thérapeutique :

 Tolérance aux antigènes portés par la molécule

 Physiopathologie de la maladie

93
  Médicaments associés

 Dose, fréquence d’administration

 Voie d’administration

 Caractéristiques génétique

Les risques relatifs à l’immunogénicité sont essentiellement détectables en clinique. Les

conséquences potentielles peuvent impacter : L’efficacité : formation d’ADAs accélère
l’élimination du biomédicament de l’organisme (réduction de la demi-vie et de la
concentration sérique, augmentation de la clairance), peut être associée à une moindre réponse
thérapeutique et à un plus faible maintien thérapeutique au cours du temps.
La sécurité : HS retardée ou anaphylaxie, réaction croisée avec élément endogène.[80, 93]

Figure 41: Facteurs influencant l’immunognicité des proteines therapeutiques

4. Plan de gestion des risques et pharmacovigilance :

Le PGR contribue à la surveillance des médicaments, notamment pour ceux récemment

mis sur le marché. Un PGR est requis pour tout médicament contenant une nouvelle substance
active. Il peut aussi être mis en place après la commercialisation du produit si des
changements significatifs interviennent (nouvelle indication, nouveau dosage, nouvelle voie
d’administration, nouveau procédé de fabrication) ou si un risque important a été identifié
après la mise sur le marché.

94
 Il implique, si besoin, des mesures complémentaires comme :

 Une pharmacovigilance renforcée sur certains des risques mis en évidence.

 Des études de sécurité d’emploi post-AMM et/ou des études d’utilisation

 Des mesures de minimisation du risque (documents d’information pour les

professionnels de santé ou les patients).

Dans le PGR, il convient d’accorder toute l’importance qu’elle mérite à la présentation

de l’immunogénicité : les mesures prises pour obtenir des données complémentaires sur
l’immunogénicité doivent quant à elles faire l’objet d’une discussion argumentée.[94]
Dans le PPV un concept complet de pharmacovigilance post-autorisation doit être
décrit :

 Etudes PASS (Post Authorization Safety Study) qui ont pour but d’identifier, de
caractériser ou de quantifier un risque pour la sécurité, de confirmer le profil de
sécurité du médicament ou encore de mesurer l’efficacité des mesures de gestion
des risques au long de sa durée de vie.[95]

 études PAES (Post Authorization Efficacy Study) exigées en cas de motifs de

préoccupation sur les aspects liés à l’efficacité ne pouvant être résolus qu’après
la mise sur le marché du médicament.

Il y a lieu à cet égard de prendre en considération les risques identifiés et potentiels

inhérents au biomédicament de référence ainsi que, le cas échéant, les risques potentiels
supplémentaires découverts au cours du programme de développement du biosimilaire. Il
s’agit de décrire avec précision la manière dont les risques sont surveillés et étudiés après la
délivrance de l’autorisation.[96]

95
 Figure 42: Plan de gestion des risques : nouvelle conception de l’évaluation des bénéfices et des
risques acceptables

D. Interchangeabilité, permutation et substitution :

L’interchangeabilité désigne la possibilité de remplacer un médicament par un autre
médicament censé avoir le même effet clinique. Il peut s’agir de remplacer un produit de
référence par un médicament biosimilaire (ou inversement) ou de remplacer un médicament
biosimilaire par un autre médicament biosimilaire. Ce remplacement peut s’opérer par:
 permutation, qui désigne le fait, pour le prescripteur, de remplacer un
médicament par un autre médicament avec le même objectif thérapeutique.
 substitution (automatique), qui désigne la pratique consistant, pour le
pharmacien, à délivrer un médicament à la place d’un autre médicament
équivalent et interchangeable sans en référer au prescripteur.
L’interchangeabilité représente un acte médical qui consiste, à l’initiative du
prescripteur, à remplacer un médicament biologique par un biosimilaire figurant dans la liste
des biosimilaires. Ceci diffère de la substitution d’une molécule princeps par un générique,
qui n’est pas un acte médical puisque pouvant être proposée par le pharmacien, voire
demandée par le malade.

96
 Les trois conditions suivantes doivent être respectées :

 Informer le patient et recueillir son accord.

 Assurer une surveillance clinique appropriée lors du traitement.

 Assurer une traçabilité sur les produits concernés (le produit prescrit doit être
inscrit dans le dossier du patient).

Au USA ils ont pensés à la création d’un statut de « biosimilaire interchangeable », le

fabricant du biosimilaire devant alors apporter la preuve par un essai clinique que l’alternance
des traitements ne présente pas plus de risque de perte d’efficacité ou d’intolérance que la
poursuite du biomédicament initialement prescrit.

E. Extrapolation des études d’efficacité et de sécurité d’une

indication thérapeutique à une autre :
Extension des données relatives à l’efcacité et à la sécurité d’une indication
thérapeutique pour laquelle le médicament biosimilaire a fait l’objet d’essais cliniques à une
autre indication thérapeutique approuvée pour le médicament de référence.

L’extrapolation est un principe scientifque bien établi utilisé régulièrement depuis de

nombreuses années, par exemple lorsqu’un médicament biologique pour lequel plusieurs
indications sont approuvées connaît d’importantes modifications au niveau de son procédé de
fabrication (par exemple un nouveau site de fabrication ou le développement d’une nouvelle
formulation). L’effet potentiel de ces modifcations sur la performance clinique du
médicament biologique est soigneusement évalué au moyen d’études de comparabilité (études
relatives à la qualité et études in vitro, principalement). Si des études cliniques sont
nécessaires, elles sont menées pour une indication pertinente et, sur la base de l’ensemble de
ces données, l’extrapolation aux autres indications est généralement possible.

L’extrapolation des données à d’autres indications est toujours étayée par des éléments
de preuves scientifques tirés d’études de comparabilité (qualité, cliniques et non cliniques)
solides.

97
 1. Critères d’extrapolation :

D’importantes considérations doivent être prises en compte avant d’autoriser une

indication pour un médicament biosimilaire sur la base de données de sécurité et d’efcacité
extrapolées. Parmi ceux-ci fgurent les éléments suivants:

1.1. Mécanisme d’action :

Le mécanisme d’action de la substance active doit dépendre du ou des mêmes

récepteurs pour l’indication initiale et l’indication extrapolée. Si le mécanisme d’action de la
substance active est complexe et fait intervenir de multiples récepteurs ou sites de liaison
(comme c’est souvent le cas pour les anticorps monoclonaux), il peut s’avérer difficile de
définir la contribution de chacun des récepteurs ou sites de liaison pour chaque indication.
Dans ce cas, des études supplémentaires (non cliniques ou cliniques) seront nécessaires pour
prouver que le médicament biosimilaire et le médicament de référence se comporteront de la
même manière pour l’indication extrapolée.

1.2. Population de l’étude visée :

Des études exhaustives de comparabilité doivent montrer que le médicament

biosimilaire présente une forte similarité avec le médicament de référence (au moyen de
données relatives à la sécurité, l’efficacité et l’immunogénicité) pour une indication clé chez
une population dans laquelle d’éventuelles différences en matière de performance clinique
peuvent être détectées.

1.3. Extrapolation des données de sécurité :

Les données de sécurité ne peuvent être extrapolées qu’après l’établissement d’un profil
de sécurité comparable pour le médicament biosimilaire pour une indication thérapeutique.
Si la comparabilité est démontrée au niveau structurel, fonctionnel, pharmacocinétique et
pharmacodynamique, et que l’efcacité est comparable, alors, les effets indésirables liés à
l’action pharmacologique du médicament biosimilaire devraient être les mêmes et se produire
à des fréquences similaires.

98
 1.4. Extrapolation des données d’immunogénicité :

L’extrapolation des données d’immunogénicité n’est pas automatique, car elle requiert
toujours une justifcation. Cela s’explique par le fait que l’immunogénicité ne dépend pas
uniquement de caractéristiques liées au produit. Il convient également de prendre en
considération des facteurs liés aux patients (âge, statut immunitaire), aux maladies
(pathologies associées, traitements concomitants) ou au traitement (voie d’administration,
durée de l’exposition)

99
Marche des biomedicaments
et biosemilaires :

100
 Le marché mondial des médicaments biologiques devrait dépasser 390milliards USD
d'ici 2020, par lequel les produits biologiques de temps représenteront jusqu'à 28% en valeur
du marché mondial des produits pharmaceutiques. Les médicaments biosimilaires ont donc un
rôle plus important à jouer. Par compétition avec les médicaments biologiques originaux à
travers une gamme croissante de domaines thérapeutiques, les biosimilaires permettent aux
parties prenantes - y compris les payeurs, les médecins et les patients - de bénéficier d'un plus
grand choix en ce qui concerne les options de traitement.
En 2020, les biosimilaires ont le potentiel d'entrer sur les marchés pour un certain
nombre de produits biologiques clés qui ont les ventes actuelles de plus de 40 milliards
d'euros. Les économies potentielles cumulées aux systèmes de santé dans les cinq principaux
marchés de l'Union européenne (UE) et aux ÉtatsUnis, à la suite de l'utilisation de
biosimilaires, pourrait dépasser 50 milliards d'euros au total au cours des cinq prochaines
années et atteindre jusqu'à 100 milliards d'euros. Notamment, près de 50 biosimilaires
distincts sont actuellement en développement et entraîneront probablement une place de
marché très concurrentiel au cours des cinq prochaines années. Cela représente un important
potentiel inexploité[1]

Les médicaments biologiques représentent un marché très important au sein du marché

pharmaceutique et une part croissante des dépenses de médicaments pour les systèmes de
soins.

Les médicaments biologiques dans le monde :

 170 milliards d’euros de CA en 2014 ;

 250 milliards d’euros de CA en 2020 ;

 200 médicaments actuellement disponibles ;

 30% du pipeline de l’industrie pharmaceutique (900 produits en

développement).[2]

101
 Les 173 biomédicaments disponibles sur le marché français se répartissent en neuf
classes pharmacologiques majeures. Dans les classes les plus représentées, il y a les vaccins
(35 %), les anticorps monoclonaux (17 %), les facteurs de croissance (9 %), les hormones (9
%) et les enzymes (8 %). Ces cinq classes majoritaires représentent 78 % des biomédicaments
sur le marché français recouvrant 16 aires thérapeutiques principalement l’infectiologie et
l’hémato-oncologie.[3]

Figure 43: biomédicaments commercialisé par aire therapeutique[3]

14 C’est le nombre de médicaments biosimilaires autorisés dans l’Union européenne1

depuis2006 représentant 3 substances actives différentes : des facteurs de croissance (GCSF),
de l’hormone de croissance et des érythropoïétines avec 2,3 Mrd€ part du marché mondial des
biosimilaires en 2016 et 15,6 Mrd€ C’est le montant estimé du marché mondial des
biosimilaires à l’horizon 2020.

102
 Entre 2013 et 2014, les dépenses en médicaments de spécialité, y compris les produits
biologiques, ont augmenté de 32,4%, alors que celles en médicaments à petites molécules ont
augmenté de seulement 6,8%. D'ici 2016, 8 des 10 médicaments les plus vendus devraient
être des produits biologiques.[4]

Les biosimilaires enregistrés au Maroc :

Au Maroc nous avons 65 biosimilaires enregistrés, la pluparts sont des insulines, des
immunoglobulines ainsi que les facteurs de croissances hématopoïétiques et l’hormone de
croissance somatropine. Avec quatre anticorps monoclonaux.

103
104
Figure 44: biosimilaire commercialisé au Maroc

105
 Au Maroc Sothema a fabrication et ommercialisation des biosimilaires
anticancéreux qui suite à l’obtention de l’autorisation de mise sur le marché (AMM) du
ministère de la Santé, leux produits seront commercialisés avec30% moins chers que ceux
que les mlolécules d'origine, les princeps.
Il s’agit de:
- Ypeva (Bévacizumab): indiqué notamment dans le traitement des cancers du
sein, du col de l’utérus, de l’ovaire, du rein, du cancer colorectal et celui du
poumon ;
- Zelva (Rituximab): indiqué principalement dans le traitement des lymphomes
non hodgkiniens et de la leucémie lymphoïde chronique.
La biothérapie occupe 15.2% du volume des achats, les biosimilaires ne représentent que 5%
des biomédicaments achetés d’après les appels d’offres lancés pour l’année 2016 au niveau du
centre hospitalier universitaire IBN SINA.[5]
Nom de CA
Range DCI Indication Société
spécialité (Mds$)
-Polyarthrite rhumatoïde
1 Humira Adalimumab Abbott 18.4
-Spondylarthrite ankylosante
Rituxan -Lymphome non-hodgkinien
2 Rituximab Roche 9.2
-Leucémie lymphoïde chronique
-Polyarthrite rhumatoïde
3 Enbrel Etanercept Pfizer 7.9
-Psoriasis
4 Herceptin trastuzumab -Cancer du sein Roche 7.4
-Cancer du sein
5 Avastin Bevacizumab Roche 7.1
-Cancer colorectal
-Maladie de crohn
6 Remicade Infliximab Merck 7.1
-Psoriasis
7 Lantus Insuline glargine -Diabète Sanofi 5.7
-Neutropénie induite par
8 Neulasta Pegfilgrastim Amgen 4.7
chimiothérapie
Avonex
9 Interferon beta-1a -Sclérose Biogen Idec 2.1

10 Lucentis Ranibizumab Roche 1.5

Figure 45: Top 10 des médicaments biologiques aux états unis[6]

106
 Parmi les 10 médicaments les plus vendus au monde en 2016, 8 étaient biologiques
avec 82.6 Milliards de dollars.

Figure 46: Les dix premières thérapies vendues dans le monde (en milliard USD)

107
Rôle du pharmacien
d’officine

108
 1. Prévention des effets indésirables exemple : le syndrome mains-pieds
 Le syndrome mains-pieds est lié à l’altération de la vascularisation terminale des
extrémités entraînée par le traitement. Les symptômes sont une hyperesthésie et une
hyperkératose avec présence d’un halo inflammatoire, voire la disparition des empreintes
digitales. La douleur est parfois vive, notamment au niveau des points de friction/pression.
Le syndrome évolue vers un handicap complet avec impossibilité de tenir ses couverts pour
manger. Très invalidant, il est toutefois facile à diagnostiquer et à prendre en charge

Quelques conseils pratiques pour la prévention ou la prise en charge du syndrome

mains-pieds peuvent être donnés au comptoir :

 utiliser un savon/gel douche surgras pour la toilette quotidienne (éviter les

produits parfumés) ;
 se laver avec une eau pas trop chaude et bien sécher les pieds après le bain ;
 hydrater la peau généreusement une à deux fois par jour ;
 appliquer du froid (bains de pieds et de mains, semelles en gel, crèmes
conservées au réfrigérateur) ;
 limiter les frottements et les pressions sur la peau (pansements, bijoux,
jardinage...) ;
 réaliser des soins de pédicurie douce afin de respecter la règle des “3 C” :
contrôler les cornes de pied, couvrir les zones à risque par de la crème, conforter
les zones de frottement (semelles, chaussettes en coton).
 En prévention, il convient de proposer une crème émolliente, un savon surgras et
de rappeler quelques règles : éviter les talons, privilégier les chaussures larges, les chaussettes
en coton, l’utilisation de semelles siliconées et d’orthèses permettant de limiter les frictions ou
utiliser des chaussettes avec gel intégré. Les crèmes émollientes peuvent aussi être conservées
au réfrigérateur pour un effet fraîcheur.
 En curatif, une prise en charge par un pédicure est importante pour retirer le
surplus de corne et limiter l’inflammation. L’utilisation de crèmes kératolytiques riches en
urée doit être conseillée. Le dermatologue peut également avoir recours à des

109
dermocorticoïdes puissants comme Dermoval® ou Diprolène®. Dans de rares cas, et en
ultime recours, une corticothérapie systémique est envisageable
 Le traitement des verrues, des folliculites sous cetuximab , très invalidantes
mais peu connues à l’officine, a été évoqué. De même que celui des pemphigus, groupe de
maladies dermatologiques de type maladies bulleuses et autoimmunes, notamment la
pemphigoïde bulleuse très suintante qui atteint plutôt le sujet âgé, traitée par éosine ou
fluorescéine permettant d’assécher les bulles et de faciliter la cicatrisation. L’échange a aussi
porté sur les risques multiples de toxicité de l’aromathérapie. Une bonne connaissance de cet
univers est essentielle.[7]
2. Conseils associés au moment de la délivrance d’EPO :

Les EPO doivent être conservées au réfrigérateur entre + 2 et + 8° C, et à l’abri de la

lumière. La conservation à température ambiante n’est possible que sur une période unique de
quelques heures à quelques jours selon la spécialité (tableau1). F Lors de l’injection intraveineuse
(IV), mais aussi souscutanée (SC), il est nécessaire de vérifier l’absence de particules en
suspension et/ou d’un changement de coloration du produit. La seringue ne doit pas être agitée
avant l’administration. De plus, il est conseillé de la sortir du réfrigérateur 30 minutes avant
l’injection afin de la ramener à température ambiante. Si le patient réalise lui-même les injections
par voie SC, il est nécessaire de s’assurer qu’il respecte les conditions d’asepsie. Le site
d’injection doit être alterné à chaque administration (abdomen, bras, cuisse). Le matériel doit être
éliminé dans un conteneur à aiguilles réservé aux déchets d’activités de soins à risque infectieux
(DASRI). F Le suivi thérapeutique consiste à s’assurer de la compréhension du traitement et à
insister sur la nécessité d’une stricte observance. Le patient doit, de plus, avoir le réflexe de
contacter le médecin en cas de symptômes inhabituels tels que diarrhée, fièvre ou hypotension. En
cas de supplémentation martiale, et notamment en cas de prise en dehors des repas et de trop forte
consommation de thé inhibant l’absorption du fer), le patient doit être prévenu de la possible
coloration noire des selles.

Afin d’éviter un syndrome pseudogrippal consécutif à l’injection, une prise de 1 g de

paracétamol, 1 heure avant et 4 heures après l’injection, peut être proposée. Par ailleurs, le
patient doit éviter au maximum tout recours à l’automédication. En effet, la prise de certains
médicaments comme les AINS pourrait aggraver l’insuffisance rénale, majorer l’effet

110
hypertenseur et l’hyperkaliémie, ainsi que le risque thrombo-embolique. La consommation de
tabac, d’alcool éthylique et d’acide glycyrrhizique (présent dans la réglisse) doit être évitée
car elle pourrait augmenter la pression artérielle. De plus, l’intoxication tabagique accélère la
progression de l’insuffisance rénale chronique. F Le suivi clinique est important. En effet, le
patient anémique doit apprendre à gérer sa fatigue, c’est à-dire hiérarchiser l’importance des
activités à réaliser, répartir les tâches sur la semaine, prévoir des pauses, recourir à une aide-
ménagère si besoin… La pression artérielle doit être contrôlée une fois par semaine et le
patient doit également savoir reconnaître les signes d’une potentielle hypertension artérielle
tels que des maux de tête intenses, un état confusionnel, des troubles moteurs ou de
l’élocution ou de l’équilibre. L’alimentation du patient anémique doit être suffisante et
équilibrée. En effet, les besoins énergétiques augmentent particulièrement lors des traitements
anticancéreux. F L’importance du respect de la surveillance biologique régulière (bilan
hématologique, ionogramme plasmatique, statut martial) doit être rappelée au pateint. [8]

111
Conclusion

112
 Les brevets de nombreux biomédicaments tomberont dans le domaine public d'ici 2020,
lesbiosimilaires représentent donc un enjeu important pour l'industrie pharmaceutique. Le
marché des biosimilaires est à ce jour en pleine croissance mais reste encore incertain. Avec
un coût en moyenne de 20 à 30 % moins cher que la référence, les économies engendrées
pourraient cependant être inférieures à celles espérées. En effet, l'implantation des
biosimilaires dépend de divers facteurs et il existe de nombreux freins tant technologiques,
avec la complexité et le coût important de la production, que réglementaires avec le coût
des études requises pour l'autorisation.

Par ailleurs, certains points réglementaires sont encore en cours de débats. La question
de lasubstitution biomédicament de référence par un biosimilaire sous certaines conditions,
L'extrapolation des indications thérapeutiques et la dénomination des biosimilaires sont
également controversées. Enfin, la pénétration des biosimilaires dans le marché dépendra
fortement de l'accueil par les professionnels de santé et les patients.

Cependant ces produits étant présents a la fois dans le milieu hospitalier et a l’officinele
pharmacien se doit d’être sensibilisé sur les effets indésirables. Il doit également jouer son
rôle de soutien psychologique dans le traitement de pathologies lourdes cancéreuses et
souvent délicates pour ces patients
Résumés
 Résumé
Titre : Les médicaments biologiques, production, réglementation, Etats des
lieux au Maroc.

Rapporteur : Pr BOUSLIMAN yassir

Auteur: HAJJIOUI ismail

Mots clés : médicaments biologiques, production, réglementation, biosimilaires,

interchangeabilité.

Les médicaments biologiques représentent une part croissante de l’innovation

thérapeutique. Ce sont des produits biologiques complexes issus de la biotechnologie de
l’ADN recombinant et définis par leur procédé de fabrication. Les copies de ces produits
sont appelées biosimilaires car elles ne sont pas identiques à leur référence. Des
changements minimes à tous les stades du procédé de fabrication peuvent avoir une
influence sur l’innocuité et l’efficacité du médicament biologique.

Par conséquent, pour évaluer la biosimilarité et octroyer une autorisation de mise sur
le marché, les agences réglementaires demandent la soumission de données
supplémentaires en termes de qualité, de sécurité et d'efficacité clinique. Les biosimilaires
soulèvent également de nouvelles problématiques comme l'apparition d'effets indésirables
liés à l'immunogénicité et la question de l'autorisation de la substitution.

Les biomédicaments constituent une avancée thérapeutique majeure dans le

traitement de pathologies pour lesquelles les traitements antérieurs étaient insatisfaisants
voire absentes ils constituent une part croissante des innovations thérapeutiques et sont
présentés comme l’avenir du médicament et de l’industrie pharmaceutique en général.

Les laboratoires de l’usine pharmaceutique marocaine Sothema lancent la

fabrication et la commercialisation des premiers biosimilaires anticancéreux sur le marché
Marocain. D’un point de vue économique, la fabrication locale de ces biosimilaires
anticancéreux permettra le passage du Maroc du statut d’importateur distributeur de
produits d’oncologie à celui d'industriel fabricant à part entière.
 Abstract
Title: biopharmaceuticals, production, regulation, Situation in Morocco.

Raporter: Pr BOUSLIMAN yassir

Author: HAJJIOUI ismail

Key words: biopharmaceuticals, production, regulation, biosimilars,

interchangeability

Biopharmaceuticals is a growing part of therapeutic innovation. They are complex

biological products derived from recombinant DNA biotechnology and defined by their
manufacturing process. Copies of these products are called biosimilars because they are
not identical to their reference. Minimal changes at all stages of the manufacturing process
can influence the safety and effectiveness of biomedical science.

Therefore, in order to assess biosimilarity and grant a marketing authorisation,

regulatory agencies request the submission of additional data in terms of quality, safety
and clinical effectiveness. Biosimilars also raise new issues such as the appearance of
adverse effects related to immunogenicity, the issue of authorisation of substitution.

Biomedicine is a major therapeutic advance in the treatment of pathologies for

which the previous treatments were unsatisfactory or even absent they constitute an
increasing part of the therapeutic innovations and are presented as the future of the drug
and the pharmaceutical industry in general.

The laboratories of the Moroccan pharmaceutical plant Sothema are launching the
manufacture and marketing of the first cancer biosimilars on the Moroccan market. From
an economic point of view, the local manufacture of these cancer biosimilars will allow
Morocco to move from being a distributor of oncology products to a full-fledged
manufacturer.
 ‫ﻣﻠﺧص‬

‫اﻟﻌﻧوان ‪:‬اﻷدوﯾﺔ اﻟﺑﯾوﻟوﺟﯾﺔ‪ ،‬اﻹﻧﺗﺎج‪ ،‬اﻟﺗﻧظﯾم‪ ،‬اﻟوﺿﻊ ﻓﻲ اﻟﻣﻐرب‬

‫اﻟﻣﺷرف‪ :‬ﺑوﺳﻠﯾﻣﺎن ﯾﺎﺳر‬

‫اﻟﻣؤﻟف ‪:‬ﺣﺎﺟﯾوي اﺳﻣﺎﻋﯾل‬

‫اﻟﻛﻠﻣﺎت اﻷﺳﺎﺳﯾﺔ ‪ :‬اﻷدوﯾﺔ اﻟﺑﯾوﻟوﺟﯾﺔ‪ ،‬اﻧﺗﺎج‪ ،‬ﺗﻧظﯾم‪ ،‬ﺑﯾوﻣﺗﺷﺎﺑﮫ‪ ،‬اﻟﺗﺑﺎدﻟﯾﺔ‪.‬‬

‫اﻷدوﯾﺔ اﻟﺑﯾوﻟوﺟﯾﺔ ھﻲ ﺟزء ﻣﺗزاﯾد ﻣن اﻻﺑﺗﻛﺎر اﻟﻌﻼﺟﻲ‪ .‬ھذه ھﻲ اﻟﻣﻧﺗﺟﺎت اﻟﺑﯾوﻟوﺟﯾﺔ اﻟﻣﻌﻘدة‬
‫اﻟﻣﺳﺗﻣدة ﻣن اﻟﺗﻛﻧوﻟوﺟﯾﺎ اﻟﺣﯾوﯾﺔ ﻟﻠﺣﻣض اﻟﻧووي اﻟﻣؤﺗﻠف واﻟﺗﻲ ﺗﺣددھﺎ ﻋﻣﻠﯾﺔ اﻟﺗﺻﻧﯾﻊ اﻟﺧﺎﺻﺔ ﺑﮭم‪.‬‬
‫ﻧﺳﺦ ﻣن ھذه اﻟﻣﻧﺗﺟﺎت ﺗﺳﻣﻰ ﺑﯾوﻣﺗﺷﺎﺑﮫ ﻷﻧﮭﺎ ﻟﯾﺳت ﻣﺗطﺎﺑﻘﺔ ﻣﻊ ﻣرﺟﻌﮭﺎ‪ .‬ﯾﻣﻛن أن ﺗؤﺛر اﻟﺗﻐﯾﯾرات‬
‫اﻟطﻔﯾﻔﺔ ﻓﻲ أي ﻣرﺣﻠﺔ ﻣن ﻣراﺣل ﻋﻣﻠﯾﺔ اﻟﺗﺻﻧﯾﻊ ﻋﻠﻰ ﺳﻼﻣﺔ وﻓﻌﺎﻟﯾﺔ اﻟدواء اﻟﺑﯾوﻟوﺟﻲ‪.‬‬

‫ﻟذﻟك‪ ،‬ﻣن أﺟل ﺗﻘﯾﯾم اﻟﺗﺷﺎﺑﮫ اﻷﺣﯾﺎﺋﻲ وﻣﻧﺢ إذن اﻟﺗﺳوﯾق‪ ،‬ﺗطﻠب اﻟﮭﯾﺋﺎت اﻟﺗﻧظﯾﻣﯾﺔ ﺗﻘدﯾم ﺑﯾﺎﻧﺎت‬
‫إﺿﺎﻓﯾﺔ ﺗﺗﻌﻠق ﺑﺎﻟﺟودة واﻟﺳﻼﻣﺔ واﻟﻔﻌﺎﻟﯾﺔ اﻟﺳرﯾرﯾﺔ ﻛﻣﺎ أﻧﮭﺎ ﺗﺛﯾر ﻗﺿﺎﯾﺎ ﺟدﯾدة ﻣﺛل ظﮭور ﺗﺄﺛﯾرات ﺿﺎرة‬
‫ﻣﺗﻌﻠﻘﺔ ﺑﺎﻟﻣﻧﺎﻋﺔ وﻣﺳﺄﻟﺔ إذن اﻻﺳﺗﺑدال‪.‬‬

‫ﺗﺷﻛل اﻷدوﯾﺔ اﻟﺣﯾوﯾﺔ ﺗﻘدﻣًﺎ ﻋﻼﺟﯾًﺎ رﺋﯾﺳﯾًﺎ ﻓﻲ ﻋﻼج اﻷﻣراض اﻟﺗﻲ ﻛﺎﻧت اﻟﻌﻼﺟﺎت اﻟﺳﺎﺑﻘﺔ ﻏﯾر‬
‫ﻣرﺿﯾﺔ أو ﺣﺗﻰ ﻏﺎﺋﺑﺔ‪ ،‬وھﻲ ﺗﺷ ﻛل ﻧﺻﯾﺑًﺎ ﻣﺗزاﯾدً ا ﻣن اﻻﺑﺗﻛﺎرات اﻟﻌﻼﺟﯾﺔ وﯾﺗم ﺗﻘدﯾﻣﮭﺎ ﻛﻣﺳﺗﻘﺑل اﻟدواء‬
‫واﻟﺻﻧﺎﻋﺔ اﻟدواﺋﯾﺔ ﺑﺷﻛل ﻋﺎم‪.‬‬

‫أطﻠﻘت ﻣﺧﺗﺑرات ﻣﺻﻧﻊ اﻷدوﯾﺔ ﺻوطﯾﻣﺎ اﻟﻣﻐرﺑﻲ ﺗﺻﻧﯾﻊ وﺗﺳوﯾق أول ﺑﯾوﻣﺗﺷﺎﺑﮫ ﻣﺿﺎدة‬
‫ﻟﻠﺳرطﺎن ﻓﻲ اﻟﺳوق اﻟﻣﻐرﺑﻲ‪ .‬ﻣن وﺟﮭﺔ اﻟﻧظر اﻻﻗﺗﺻﺎدﯾﺔ‪ ،‬ﻓﺈن اﻹﻧﺗﺎج اﻟﻣﺣﻠﻲ ﻷﻣراض اﻟﺳرطﺎن‬
‫اﻟﺣﯾوﯾﺔ ھذه ﺳوف ﯾﻣﻛّن اﻟﻣﻐرب ﻣن اﻻﻧﺗﻘﺎل ﻣن ﻛوﻧﮫ ﻣﺳﺗوردا ً ﻟﻣﻧﺗﺟﺎت اﻷورام إﻟﻰ ﻣﻧﺗﺞ ﺻﻧﺎﻋﻲ‬
‫ﻣﺗﻛﺎﻣل‪.‬‬

‫‪‬‬
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 Serment de Galien

Je jure en présence des maîtres de cette faculté :

- D’honorer ceux qui m’ont instruit dans les préceptes de

mon art et de leur témoigner ma reconnaisse en restant
fidèle à leur renseignement.
- D’exercer ma profession avec conscience, dans l’intérêt
de la santé public, sans jamais oublier ma responsabilité
et mes devoirs envers le malade et sa dignité humain.
- D’être fidèle dans l’exercice de la pharmacie à la
législation en vigueur, aux règles de l’honneur, de la
probité et du désintéressement.
- De ne dévoiler à personne les secrets qui m’auraient été
confiés ou dont j’aurais eu connaissance dans l’exercice
de ma profession, de ne jamais consentir à utiliser mes
connaissances et mon état pour corrompre les mœurs et
favoriser les actes criminels.
- Que les hommes m’accordent leur estime si je suis fidèle
à mes promesses, que je sois méprisé de mes confrères si
je manquais à mes engagements.
 ‫‪ -‬أن أراﻗﺐ ﷲ ﻓﻲ ﻣﮭﻨﺘﻲ‬

‫‪ -‬أن أﺑﺠﻞ أﺳﺎﺗﺬﺗﻲ اﻟﺬﯾﻦ ﺗﻌﻠﻤﺖ ﻋﻠﻰ أﯾﺪﯾﮭﻢ ﻣﺒﺎدئ ﻣﮭﻨﺘﻲ وأﻋﺘﺮف‬
‫ﻟﮭﻢ ﺑﺎﻟﺠﻤﯿﻞ وأﺑﻘﻰ دوﻣﺎ وﻓﯿﺎ ﻟﺘﻌﺎﻟﯿﻤﮭﻢ‪.‬‬
‫‪ -‬أن أزاول ﻣﮭﻨﺘﻲ ﺑﻮازع ﻣﻦ ﺿﻤﯿﺮي ﻟﻤﺎ ﻓﯿﮫ ﺻﺎﻟﺢ اﻟﺼﺤﺔ اﻟﻌﻤﻮﻣﯿﺔ‪،‬‬
‫وأن ﻻ أﻗﺼﺮ أﺑﺪا ﻓﻲ ﻣﺴﺆوﻟﯿﺘﻲ وواﺟﺒﺎﺗﻲ ﺗﺠﺎه اﻟﻤﺮﯾﺾ وﻛﺮاﻣﺘﮫ‬
‫اﻹﻧﺴﺎﻧﯿﺔ‪.‬‬
‫‪ -‬أن أﻟﺘﺰم أﺛﻨﺎء ﻣﻤﺎرﺳﺘﻲ ﻟﻠﺼﯿﺪﻟﺔ ﺑﺎﻟﻘﻮاﻧﯿﻦ اﻟﻤﻌﻤﻮل ﺑﮭﺎ وﺑﺄدب‬
‫اﻟﺴﻠﻮك واﻟﺸﺮف‪ ،‬وﻛﺬا ﺑﺎﻻﺳﺘﻘﺎﻣﺔ واﻟﺘﺮﻓﻊ‪.‬‬
‫‪ -‬أن ﻻ أﻓﺸﻲ اﻷﺳﺮار اﻟﺘﻲ ﻗﺪ ﺗﻌﮭﺪ إﻟﻲ أو اﻟﺘﻲ ﻗﺪ أطﻠﻊ ﻋﻠﯿﮭﺎ أﺛﻨﺎء‬
‫اﻟﻘﯿﺎم ﺑﻤﮭﺎﻣﻲ‪ ،‬وأن ﻻ أواﻓﻖ ﻋﻠﻰ اﺳﺘﻌﻤﺎل ﻣﻌﻠﻮﻣﺎﺗﻲ ﻹﻓﺴﺎد اﻷﺧﻼق‬
‫أو ﺗﺸﺠﯿﻊ اﻷﻋﻤﺎل اﻹﺟﺮاﻣﯿﺔ‪.‬‬
‫‪ -‬ﻷﺣﻈﻰ ﺑﺘﻘﺪﯾﺮ اﻟﻨﺎس إن أﻧﺎ ﺗﻘﯿﺪت ﺑﻌﮭﻮدي‪ ،‬أو أﺣﺘﻘﺮ ﻣﻦ طﺮف‬
‫زﻣﻼﺋﻲ إن أﻧﺎ ﻟﻢ أف ﺑﺎﻟﺘﺰاﻣﺎﺗﻲ‪.‬‬