F cus 07
Les autoanticorps dans
les dermatoses bulleuses auto-immunes
Définitions Le Pemphigus profond ou vulgaire (PV) : forme rare,
touchant les personnes entre 40 et 50 ans, caractérisée par des
érosions muqueuses buccales douloureuses qui s’étendent
Clinique : ensuite à la peau.
caractérisée par des lésions cutanées (et/ou muqueuses) bul- Les Pemphigus superficiels (PS) : P. érythémateux
leuses liées à la présence d’auto-anticorps se fixant sur les endémiques foliacés caractérisés par les lésions érythémato-
structures assurant la cohésion de l’épiderme ou de la jonction squameuses sur des zones séborrhéiques mais sans lésion des
dermo-épidermique. Ces anticorps sont déposés sur leur muqueuses. La distinction entre (PV) et (PS) se fait sur l’histologie.
cible (peau) ou sont circulants. Le Pemphigus paranéoplasique (PPN) associé à
D’après les critères du GOLD STANDARD : le diagnostic de certaines affections néoplasiques surtout lymphoprolifératives.
DBAI (dermatose bulleuse auto-immune) est posé sur l’asso-
ciation des 3 critères suivants : clinique, histologique et im- Diagnostic des Pemphigus établi sur les 3 critères suivants :
munopathologique. La recherche d’anticorps circulants est
demandée devant toute suspicion de DBAI, car elle aide au Clinique : aspect et localisation des bulles/ signe de Nikolsky.
diagnostic et au suivi des patients. Histologie : réalisée à partir d’une biopsie de bulle intraé-
pidermique intacte. Les bulles sont essentiellement acantho-
lytiques, avec site de clivage profond pour le PV et superficiel
Histologie de la peau : pour le PS.
Immunofluorescence directe : marquage de la jonction
interkératinocytaire “en résille”, pouvant être associé à un
marquage linéaire dans les PPN. Le groupe des Pemphigus
est caractérisé par la présence d’anticorps anti-desmosomes.
Les DBAI sous épidermiques
(pemphigoïdes) :
Les DBAI sous-épidermiques ou groupe des Pemphigoïdes,
sont caractérisées par une altération de la jonction dermo-
épidermidique.
On distingue :
Pemphigoïde bulleuse : sa fréquence est en augmenta-
tion et concerne les sujets de plus de 70 ans, caractérisée par
des lésions eczématiformes avec bulles de grande taille.
Pemphigoïde cicatricielle : concerne les muqueuses ocu-
La peau est constituée de l’extérieur vers l’intérieur, de l’épi- laire (avec risque de cessité), buccale et génitale.
derme qui comprend 80 % de kératinocytes suivi par la jonc-
Pemphigoïde de la grossesse : ou herpes gestationis est
tion dermo-épidermique (JDE), du derme et de l’hypoderme.
une forme rare de pemphigoïde qui se caractérise par un pru-
En fonction de la cible des autoanticorps, on distingue :
rit abdominal intense au premier trimestre de la grossesse,
les DBAI intra-épidermiques
régresse à l’accouchement mais avec risque de récidives aux
les DBAI sous-épidermiques
grossesses ultérieures.
Autres : Epidermolyse bulleuse acquise (EBA), dermatose
à IgA linéaire, dermatite herpétiforme.
Les DBAI intra épidermiques
(groupe des pemphigus) : Diagnostic des Pemphigoïdes :
se caractérisent par une perte de cohésion interkératinocytaire. Clinique : cf ci-dessus
Histologie : on observe des bulles tendues avec décolle-
On distingue 3 grands groupes en fonction de la localisation ment dermo-épidermique.
cutanée ou muqueuse des lésions :
Les DBAI Focus 07
L’immunofluorescence directe montre un marquage Matériel :
linaire le long de la membrane basale. Les DBAI sous-épider- 48 Pemphigus : 29 PV, 12 PS, 4 PPN, 3 inclassables
miques sont caractérisées par la présence d’anticorps dirigés 103 Témoins : 54 non DBAI, 43 PB, 6 autres
contre les antigènes de la jonction dermo-épidermique (JDE). Anti- Dsg 1 et anti- Dsg 3
L’IFI dans les DBAI est la méthode de référence pour 57 Pemphigoides bulleuses
dépister et titrer les anticorps sériques. 103 témoins : 54 non DBAI, 43 Pemphigus, 6 autres porteurs
Dans le Pemphigus, on observe un marquage “en résille” d’autres auto-anticorps suspectés d’être à l’origine de faux positifs.
de la substance inter-kératinocytaire sur œsophage de rat et Anti-BP180
œsophage de singe, appelés anticorps anti-substance inter- 18 Pemphigoïdes de la grossesse
cellulaire (anti-SIC). 10 témoins : femmes enceintes
Dans la Pemphigoïde bulleuse : on observe un mar- Anti-BP180
quage linéaire le long de la JDE sur œsophage de rat et peau
humaine, appelés anticorps anti-membrane basale (anti MB).
Résultats :
Les antigènes des anticorps présents dans les DBAI ont été Les sensibilités et spécificités des tests ELISA et de l’IFI sur 3
identifiés par différentes techniques, dont le WBlot et l’IME. substrats sont présentées ci-dessous:
C’est ainsi que les principales cibles identifiées dans les pemphi-
gus, sont les desmosomes (principales structures responsables
de l’adhésion interkératinocytaire). Ils sont composés de 3 parties,
dont une région extracellulaire comportant desmogléines
(Dsg) et desmocollines permettant le lien entre les cellules. Il
existe 3 isoformes de Dsg. Par ailleurs, il a été montré que les an-
tigènes cibles principaux des pemphigus V, S et PPN sont les des-
mogléines 1 et 3 : anti- Dsg 3 pour le PV et anti- Dsg 1 pour le PS.
Dans les DBAI sous-épidermiques, les antigènes cibles sont
des molécules impliquées dans l’adhésion dermo-épider-
mique, comprenant les hémidesmosomes et la membrane
basale. Dans les hémidesmosomes situés au niveau du pôle
basal des kératinocytes basaux, on a mis en évidence la
protéine BP 230 et la partie intracellulaire de la protéine BP
180. Au niveau de la membrane basale, la lamina lucida est
traversée par des filaments d’ancrage dont la partie externe de
la protéine BP 180 . Il a été montré que l’antigène BP 180 était
la cible des auto-anticorps dans les PB et les PG .
Les tests ELISA dans les DBAI : En IFI, il est nécessaire d’associer au moins 2 substrats pour
avoir une bonne sensibilité dans le diagnostic des DBAI.
Les principales protéines ayant été identifiées, des protéines Dans les Pemphigus, en particulier les PV et les PPN,
recombinantes ont été fabriquées et utilisées pour la mise au l’œsophage de singe et l’œsophage de rat sont les substrats
point de tests ELISA. Ainsi, l’antigène utilisé est fixé sur une les plus sensibles. L’étude a permis de mettre en évidence une
microplaque ; le sérum du patient est déposé, les complexes corrélation entre le titre sur ces substrats (OR et OS) et l’index
sont des antiglobulines marquées par une enzyme et la réaction en anti-Dsg1, ce qui est particulièrement intéressant dans le
est révélée par colorimétrie . L’équipe japonaise du Professeur suivi des patients.
Amagai a mis au point des tests ELISA anti-Dsg 1 et Dsg 3 Dans les Pemphigoïdes bulleuses, les résultats sont
pour le diagnostic des Pemphigus grâce à des épitopes cibles très différents, le substrat le plus sensible est la peau hu-
constitués à partir de la partie extra-cellulaire de ces protéines. maine, particulièrement la peau humaine clivée, qui permet,
Cette même équipe a également mis au point et commercialisé de plus, de faire le diagnostic différentiel entre les PB et l’EBA.
un test ELISA dirigé contre l’épitope cible de la protéine BP
180, appelé région NC16 a.
Conclusion :
Evaluation des tests Elisa pour le Elisa anti-Dsg 1 et anti-Dsg3 :
diagnostic de DBAI : Excellentes sensibilité et spécificité pour le diagnostic des
Le travail a été fait dans le cadre des objectifs affichés par Pemphigus.
le centre de référence des maladies bulleuses en Ile de France. Permet la discrimination PV/PS et pourrait remplacer l’IFI
L’objectif du travail a été d’évaluer les tests Elisa commer- quand le diagnostic de pemphigus est posé avec IFD positif.
cialisés anti-Dsg1, anti-Dsg3 et anti-BP180 dans le diagnostic
des DBAI, en particulier les pemphigus : PB et PG. Les résul- Elisa anti-BP 180 NC16a :
tats obtenus en ELISA ont été comparés aux résultats obtenus Insuffisant pour le diagnostic des PB, l’IFI reste la technique
en IFI sur 3 substrats (œsophage de rat, de singe et de peau de référence, en particulier sur la peau clivée pour le diagnostic
humaine). différentiel PB/ EBA.
Les critères d’inclusion ont été définis pour nos différentes Peut remplacer l’IF de type complément dans le diagnostic
populations : résultats cliniques, histologie et IFD de patients des PG car la technique est plus facile et plus rapide.
dont le sérum a été reçu et conservé au laboratoire entre 1993
et 2005. La population témoin a été judicieusement choisie. L’Elisa est une méthode standardisée et automatisable, cepen-
La question posée est de savoir si les tests ELISA peuvent se dant l’IFI permet le dépistage en une seule fois de toutes les DBAI.
substituer à l’IFI dans le diagnostic des Pemphigus, PB et PG ?
