UNIVERSITE DE KARA REPUBLIQUE TOGOLAISE
SCIENCES DE LA VIE ET DE LA TERRE
SEMESTRE VI
Unité d’Enseignement BIO 16201
PHYSIOLOGIE VEGETALE
Chargés de Cours :
¬ Dr TOUNDOU Outéndé
¬ Dr SOGO Membassolim
MEMBRES DU GROUPE 6
NOM Prénoms N0 cartes
ANIYA Kondo 76853
BATASSA Didé Didier 77643
GNAMSA Mazabalo 76970
LIGBEZIM Samtou Félix 74795
POULI Brhama Essodjolopideng 75601
I. Introduction
Le sol est un support sur lequel se trouve les êtres vivants, permettant aux paysans et aux scientifiques de
connaître les niveaux de fertilisation des sols , des cultures et plantes forestières. Dans ce TP nous aurons
à faire un dosage du calcium ,de la matière organique dans le sol ,faire une technique de sédimentation et
mesurer le PH du sol.L’objectif de ce TP est d’obtenir le meilleur rendement au niveau de la productivité,
maîtriser le coup de la production et de protéger l’environnement .
II. Matériel
• Sol
• Hcl : Acide chlorhydrique
• H2O2 : Eau oxygénée
• Papier ph
• Pipete graduer
• Balance
• Boite de pétrie
PROTOCOLE EXPERIMENTAL
1. Expérience 1. : Dosage du Calcaire
• Un gramme ( 1g ) de sol pesé sur lequel on ajoute une solution d’acide chlorhydrique HCl ( 1 N ) .
• Ajout d’une quantité d’eau distillée après effervescence .Remuement et versement sur le litre .
• Recueille de résidus sur le filtre et mise à l’étuve à 105! 𝐶 jusqu’à poids constant .
"# $# %
Mesure du pourcentage de calcaire dans le sol par la formule # !×'!!
"
•
!
𝑃( = Poids initiale du sol
𝑃) = Poids finale du sol
2. Préparation du sol
• Séchage : Pour obtenir un sol uniforme
• Broyage pour augmenter la surface de contact entre le sol et les réactifs
[Link] 2 Dosage de la matière organique
• Ajout de 5mm de H2O2 concentré sur 1 g de sol
• Rinçage avec de l’eau distillé puis filtration
• Séchage à l’étuve à 105! 𝐶 du résidu jusqu’au poids constant.
"# $# %
Mesure du pourcentage de la matière organique selon l’équation : %MO = # !×'!!
"
•
!
[Link] 3 Sédimentation
• Mélange d’un volume de terre et 3 volumes d’eau et laisser décanter pendant 48 h
• Détermination de la catégorie du sol .
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5. Expérience 4 : Mesure du 𝑃 !
• Mélange de 5 g du sol et 10 ml d’eau distillée et mesure du 𝑃* à l’aide d’un papier 𝑃*
III. Résultats et Interprétation
§ Expérience 1 : Dosage du Calcaire
• Poids initial : 𝑃( = 1,053 𝑔
• Poids final : 𝑃) = 0,811 𝑔
• 𝑷𝒊 − 𝑷𝒇 = 𝟎, 𝟐𝟒𝟐 𝒈
Cette diminution du poids du sol est due à la perte de la proportion du calcaire qui a été détruite par
l’acide chlorhydrique ( HCl)
#! $#"
• Pourcentage du Calcaire : % 𝐶𝑎𝑙 = × 100 Þ % 𝑪𝒂𝒍 = 𝟐𝟐, 𝟗𝟖 %
#!
• Réaction : 𝑪𝒂 𝑪𝑶𝟑 + 𝟐𝑯𝑪𝒍 → 𝑪𝒂 𝑪𝒍𝟐 + 𝑯𝟐 𝑶 + 𝑪𝑶𝟐
§ Expérience 2 : Dosage de la matière organique
• Poids initial du sol : 𝑷𝒊 = 1,019 g
• Poids final du sol : 𝑷𝒇 = 0,753 g
• 𝑷𝒊 − 𝑷𝒇 = 𝟎, 𝟐𝟔𝟔 𝒈
Cette différence du poids du sol est due à la dégradation de la matière organique par de l’eau
oxigénée concentrée en 𝐶𝑂0 ,𝐻0 𝑂 , 𝑁𝑂0 et 𝑆𝑂0 .
#! $#"
• Pourcentage de la matière organique : % 𝑀1 = × 100 Þ % 𝑴𝑶 = 𝟐𝟔, 𝟏𝟎 %
#!
Il est compris entre 9 et 30 % : Donc c’est un sol à teneur élevée en 𝑀3
§ Expérience 3 : Proportions des différents constituants du sol étudié
• Sable : 80%
• Limon : 15 %
• Argile : 5 %
Ce sol étudié est un sol à sable limoneux selon le triangle des textures .
§ Expérience 4
• A l’aide du papier 𝑃* ,le 𝑃* obtenu est égal à 9. Donc notre sol
étudié est basique selon le tableau : Très acide Faiblement acide Sol équilibré Sol basique
𝑃* < 4,5 4,5 < 𝑃* < 6 6 < 𝑃* < 7 𝑃* > 7
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Généralement nos sols ici sont acides : donc le 𝑃* obtenu est dû à la méthode utilisée ( Papier 𝑃* ) qui
n’est pas efficace pour une détermination précise.
Conclusion
Ce travail pratique nous a permis de mieux comprendre les caractéristiques physiques, chimiques et
biologiques du sol. L’analyse a révélé que le sol étudié présente une structure ,une texture et une
composition spécifique influençant sa fertilité et sa capacité à retenir l’eau. Ces observations
confirment l’importance du sol dans l’équilibre des écosystèmes .Ainsi , la connaissance du sol est
essentielle pour une gestion durable des ressources agricoles et environnementales.
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T P : CHLOROPHILE
INTRODUCTION
La photosynthèse est un processus fondamental qui se repose sur la présence des pigments
photo synthétiques chez les végétaux, permettant de convertir l’énergie lumineux en énergie
chimique et de synthétiser les matières organiques a partir de l’eau et des sels minéraux . La
chlorophylle a , la chlorophylle b ,les caroténoïdes et les xanthophylles sont les principaux
pigments impliques dans ce processus.
Ce TP consiste à extraire et séparer les différents pigments photosynthétiques par la méthode
de spectrophotométrie , la méthode de solution différentielles finir par la chromatographie .
Ce TP a pour objet d’extraire ces pigments à partir des tissus de la feuille de papayer à l’aide
des solvants organiques en suite les séparer et les identifier par chromatographie sur couche
mince .
Ceci permet d’illustrer les différents pigments et leur rôle dans la photosynthèse.
I. Materiel
• Feuilles de papayer • Pipette graduée
• Pilon et mortier • Alcool
• Éprouvette • Acétone
• Papier rame • Benzène
• Becher • Sable
• Spectrophotomètre • Balance
• Eau distillée
II. Protocole
1. Spectrophometrie
• Lavage , séchage puis prise de poids précisément 1,5g de feuilles de papayer
• Découpage du matériel végétal en petit fragments
• Ajout de 4 ml d’acétone ( Pour obtenir un mélange acétone/eau de concentration
finale 80% si l’on tient compte de l’eau présente dans les feuilles ) et broyer
jusqu’à obtenir un mélange homogène.
• Ajout de 6 ml d’acétone a 80% et broyage de nouveau soigneusement.
• Décantation pendant quelques minutes ( 10 minutes )
• Le surnageant récupère dans un erlen 10 ml et complété à 10 ml avec de
l’acétone a 80 %
• Couverture avec du papier mouchoir puis agitation
• L’extrait conserve a labrit de la lumière
• Lecture de l’absorbance a laide d’un spectrophotomètre
2. Solution differentielle
• Broyage des feuilles
• Ajout d’alcool
• Ajout d’eau distillée
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• Ajout de benzène
3. Chromatographie
• Broyage des feuilles
• Ajout d alcool
• Préparation du solvant ( éther de pétrole 85 ml + Acétone 10ml + Benzène 5
ml )
• Utilisation du broyat contenant l’alcool a du solvant prépare puis lecteur
chromatographique
[Link] et interpretation
1. Spectrophotométrie
Notre extrait de pigment photosynthétique au spectrophotomètre donne a la longueur
d’onde de 645 nm une absorbance de 2,492 et 663 nm une absorbance de 3
§ Calcul de concentration de chlorophylle a et b
- [𝑎] = 12,7 𝐴!!" − 2,63𝐴!#$
A = Absorbance
Þ [𝑎] = 12,7(3) − 2,63(2,492)
Þ [𝒂] = 𝟑𝟏, 𝟓𝟓 𝒎𝒈/𝒍
- [𝑏] = 22,9 𝐴!#$ − 4,68𝐴!!"
Þ [𝑏] = 22,9(2,492) − 4,68(3)
[ ]
Þ 𝒃 = 𝟒𝟑, 𝟎𝟑 𝒎𝒈/𝒍
¬ Histogramme
D’après ces résultats ,les concentrations montrent que notre échantillon est plus concentre
en chlorophylle b qu’en chlorophylle a. Le réglage de notre spectrophotomètre est limite sur
3 et nous ne pouvons pas aller au delà avec la longueur d’onde 663 . La chlorophylle a est le
pigment principal qui intervient directement dans les réactions photochimiques.
• La chlorophylle b : Pigment accessoire qui élargit le spectre d’absorption et transfert
l’énergie à la chlorophylle a.
• La lumière permet l’activation des pigments et le déclenchement des réactions
photochimiques dans les chloroplastes.
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2. Solution différentielle
Après la décantation , nous avons observe deux types de séparations .Une partie claire au
fond et une partie verte renferme les chlorophylles a et b qui ont une couleur verte et la partie
claire renferme les caroténoïdes et autre pigment accessoires des feuilles de papayers.
3. Chromatographie
Après observation ,nous avons constate une migration des pigments sur le papier rame
plonge dans le solvant préparé . Cette migration ne s’est pas faites différemment selon les
types de pigments chlorophylliens contenus dans l’échantillon. Cela serait dû a l’utilisation
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du papier WATMAN et aux erreurs lors de la manipulation. Les pigments devraient migrer
différemment si le TP était réalisé dans de bonnes normes.
Conclusion
L’extraction des pigments chlorophylliens a permis de mettre en évidence la diversité des
pigments présents dans les cellules végétales ,notamment les chlorophylles a et b , ainsi que
d’autres pigments accessoires comme les caroténoïdes .Grace a la méthode de la solution
différentielle, nous avons pu séparer les pigments hydrosolubles et liposolubles ,démontrant
ainsi leur solubilité différenciée dans divers solvants. La spectrophotométrie a permis
d’obtenir les spectres d’absorption des extraits ,mettant en évidence les pics caractéristiques
des chlorophylles a et b , confirmant leur rôle dans la capture de l’énergie lumineuse pour la
photosynthèse.
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TP : Mise en évidence de la plasmolyse et la détermination de la pression osmotique
Introduction
La cellule végétale , entourée d’une parois rigide réagit aux variations du milieu environnant par des
phénomènes physiques comme la plasmolyse ou la turgescence. Ces phénomènes sont lies aux échanges
d’eau par osmose . Dans ce TP nous présenterons la mise en évidence de ces phénomènes en utilisant la
pomme de terre . L’objectif de ce TP est d’observer ces phénomènes et de déterminer la pression
osmotique ( Po) dune cellule végétale.
I. Materiel
• Saccharose ( Sucre )
• Eau distillée
• Portoir de 11 tubes à essai
• Pomme de terre
• Règle
• 11 verres jetables
• Pipette graduée
II. Protocole
• Préparation de 500 ml de la solution de saccharose à 1 mol/l (171,001 g/l de sucre dans 500
ml d’eau )
• Préparation d’une série de 11 verres jetables contenant des concentrations croissantes (
0 ;0,1 ; 0,2 ; 0,3 ; 0,4 ; 0,5 ; 0,6 ; 0,7 ; 0,8 ; 0,9 et 1mol/l ) de saccharose à partir de la solution
mère ( 1 mol/l )
• Mise de 10ml de chaque solution dans 11 tubes à essai.
• Ajout de petits fragment cylindrique de 2cm de longueur et de diamètre de 0,6 cm de pomme
de terre dans chaque tube.
• Observation et mesure de la longueur et de diamètre du fragment dans chaque tubes après.
III. Résultats
Les résultats de notre manipulation sont contenus dans le tableau suivant :
𝑇! 𝑇" 𝑇# 𝑇$ 𝑇% 𝑇& 𝑇' 𝑇( 𝑇) 𝑇!* 𝑇!!
C( ml/l ) 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1
Taille ( Cm ) 2,3 2,2 2,1 2,1 2,1 2 1,9 1,8 1,8 1,8 1,7
Diamètre ( Cm ) 0,7 0,6 0,6 0,6 0,6 0,6 0,5 0,5 0,5 0,4 0,4
Histogrammes
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IV. Interpretations
• Dans les tubes de concentration 0 ; 0,1 ; 0,2 ; 0,3 et 0,4 mol/l , la taille du fragment augmenté par rapport
à la taille initiale ( 2 Cm ).Cela est dû à l’entrée d’eau dans cet échantillon .Le milieu est donc hypotonique
.Il se produit donc le phénomène de turgescence .
• Dans le tube de concentration 0,5 mol/l , la taille de l’échantillon reste inchangée. La concentration dans
ce milieu est proche ou égale à celle du cytoplasme de l’échantillon : il y a équilibre osmotique. Le milieu
est donc isotonique.
La concentration du saccharose dans la pomme de terre est égale à 0,5 mol/l .
• Dans les tubes de concentration 0,6 ; 0,7 ; 0,8 ; 0,9 et 1mol/l , la taille de l’échantillon a diminué par
rapport à la taille initiale ( 2 Cm ).Cela est dû à la sortie d’eau dans l’échantillon : le milieu est donc
hypertonique. Il se produit donc le phénomène de plasmolyse.
V. Calcul de la Pression Osmotique ( 𝑷𝒐 )
𝑷𝒐 = 𝑰𝑪𝑹𝑻
I = Coefficient de Van’t Hoff = 1 pour le saccharose
C = Concentration du saccharose ( 0,5 mol/l )
R = Constante Universelle des gaz parfaits ( 8,314 J .mol/K )
T = Température en Kelvin ( 273 + 25 = 298 K )
AN : 𝑷𝒐 = 𝟏 × 𝟎, 𝟓 × 𝟖, 𝟑𝟏𝟒 × 𝟐𝟗𝟖 𝑷𝒐 = 𝟏𝟐𝟑𝟖, 𝟕𝟖𝟔 𝑱
Conclusion
Ce TP nous a permis de visualiser les phénomènes d’osmose des les cellules végétales ( comme la pomme
de terre ) , de comprendre la plasmolyse et la turgescence . Ensuite de pouvoir déterminer
expérimentalement la pression osmotique. Il est donc important de noter que ces expériences nous
permettent d’expliquer la réaction des cellules végétales dans une solution moins concentrée ou plus
concentrée .
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