TEISSIER Thomas MADET Nicolas Licence IUP SIAL
Universit de Crteil-Paris XII
COMPTE-RENDU DE TP DE SPECTROPHOTOMETRIE:
Infrarouge
Anne universitaire 2003/2004
Sommaire.
I II OBJECTIF........................................................................................................................ 3 MATERIEL. ..................................................................................................................... 3 II.1 SPECTROMETRE DISPERSIF. ......................................................................................... 3 II.1.1 Principe. ............................................................................................................. 3 II.1.2 Avantages. .......................................................................................................... 4 II.1.3 Inconvnients...................................................................................................... 4 II.2 SPECTROMETRE A TRANSFORMEE DE FOURIER (IRTF OU FTIR)................................. 5 II.2.1 Principe. [1] ....................................................................................................... 5 II.2.2 Le Principe de la Transforme de Fourier [1] .................................................. 6 II.2.3 Avantages. .......................................................................................................... 6 II.2.4 Inconvnients...................................................................................................... 6 II.3 AUTRES MATERIELS. ................................................................................................... 6 II.3.1 Informatique. ...................................................................................................... 6 II.3.2 Fentres.............................................................................................................. 6 II.3.3 Matriaux et produits. ........................................................................................ 6 III MANIPULATIONS ET INTERPRETATIONS. ...................................................... 7 III.1 LES PARAMETRES. ....................................................................................................... 7 III.1.1 Lapodisation. .................................................................................................... 7 III.1.2 La rsolution. ..................................................................................................... 7 III.1.3 Le nombre de scans. ........................................................................................... 7 III.2 NOTION DE REFERENCE............................................................................................... 8 III.2.1 Observations....................................................................................................... 8 III.2.2 Interprtation. .................................................................................................... 8 III.3 ETUDE DES PARAMETRES DU SPECTROMETRE FTIR. ................................................... 8 III.3.1 La rsolution. ..................................................................................................... 8 III.3.2 Lapodisation. .................................................................................................... 9 III.3.3 Conclusion.......................................................................................................... 9 III.4 COMPARAISON DES TECHNIQUES DIRTF ET DIR DISPERSIF. ..................................... 9 III.5 DOMAINES DUTILISATION DE DIFFERENTS MATERIAUX OU SOLVANTS. ...................... 9
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Les donnes acquises par les spectrophotomtres constituent des spectres. Il sagit densemble dun grand nombre de variables exploitables en analyse chimique quantitative moyennant ltablissement de modles de calibrage par des mthodes chimiomtriques. Lavantage de cette mthode danalyse instrumentale est utilise dans lindustrie alimentaire et pharmaceutique pour lidentification des substances de base (analyse qualitative) et le contrle de qualit des produits finis (analyse quantitative). La spectroscopie moyen infrarouge (IR) a t longtemps utilise uniquement pour llucidation de structure des molcules. Depuis prs de vingt ans grce lavnement des spectrophotomtres interfromtre de Michelson et transforme de Fourier (TF) lutilisation de la spectroscopie IR sest gnralise aussi en analyse quantitative. Le dosage des constituants du lait tel quil sest dvelopp dans les laboratoires de contrle laitier est un exemple rvlateur des capacits de la technique dans lanalyse rapide et le contrle de qualit systmatique des produits agroalimentaires. [1 : mon rapport]
Objectif.
Cette manipulation a pour objectif de nous initier lappareillage infrarouge et aux diffrents paramtres et rglages impliqus pour cette technique, et danalyser les spectres de produits en condition de routine. Nous utiliserons donc pour la plus grande partie de ce TP un spectromtre infrarouge transforme de Fourier (FTIR) pour tudier les paramtres de ce type dappareil et analyser les spectres, et un spectromtre dispersif pour comparer ces deux mthodes de spectromtrie.
II
Matriel.
II.1 Spectromtre dispersif.
Ce type dappareil nest presque plus fabriqu mais pour des raisons historiques reste encore trs prsents dans les laboratoires.
II.1.1 Principe.
La spectroscopie proche IR est base sur labsorption de radiations lumineuses par la matire. Le principe de fonctionnement gnral des appareils peut tre dcompos comme suit : Le faisceau lumineux issu dune source proche IR est envoy sur un disperseur, qui fournit le spectre de cette lumire. Aprs la traverse du disperseur, il y a irradiation de lchantillon analyser. 2 modes possibles : rflexion (totale ou attnue) ou transmission suivant que le faisceau incident se rflchit ou traverse lchantillon. Rception du faisceau rflchi ou transmis sur des capteurs, conversion en signal : le spectre NIRS est alors obtenu. [2 : http://membres.lycos.fr/nirspectroscopy/principal/accueil.htm (ENSCR : NIRS)]
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transmission
rflexion
II.1.2 Avantages.
Peu ou pas de prparation de lchantillon. - Analyse non destructrice. - Analyse en transmission sur des chantillons relativement pais. - Analyse en rflexion sans contact (peu dinfluence de CO2 ou de H2O). Analyse rapide multicomposant. Cot de lanalyse peu lev. Cellule de mesure rsistante et assez bon march (verre ou quartz). Gamme importante dappareils robustes pour lanalyse en ligne. Possibilits danalyse de produits toxiques ou dangereux distance (plus de 100 m en utilisant les fibres optiques). Amortissement de linvestissement gnralement rapide. Mthode puissante pour ltude de la liaison hydrogne. Mthode de choix pour le contrle industriel, analyse et monitoring in situ en temps rel.
II.1.3 Inconvnients.
La taille des particules ainsi que lorientation modifient les spectres (mme problme quen IR moyen). Manque de bibliothques de spectres diversifis. Comme lIRTF dans le proche infrarouge, nest gnralement pas une technique danalyse de traces. Analyse longue : 20min par chantillon.
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II.2 Spectromtre transforme de Fourier (IRTF ou FTIR).
La spectromtrie FTIR a connu un essor considrable au cours de ces 15 dernires annes grce la rapide volution de linformatique.
II.2.1 Principe. [1]
Compare aux techniques traditionnelles, linterfromtrie est une mthode trs comptitive. Toutes les frquences de la source infrarouge sont traites ensemble sans slection pralable, ce qui permet de capter le spectre entier en moins dune seconde. Contrairement aux mthodes danalyse par raction colore ou enzymatique qui ragissent ave une molcule donne, lanalyse par infrarouge est une mthode danalyse structurale qui rvle la nature des liaisons entre atomes dans une molcule. Les composs organiques ont en effet la particularit de possder des liaisons inter-atomiques qui entrent en vibration sous laction dun rayonnement infrarouge des longueurs donde caractristiques. Ce phnomne saccompagne dune consommation dnergie lumineuse la longueur donde considre. LIRTF permet de mesurer les absorbances dnergie des liaisons chimiques (fonctions alcool, acides, mthyles, mthylne) de tous les composants prsents dans les produits analyss et de les corrler leurs concentrations, puisque lintensit de labsorption est directement proportionnelle la concentration de la molcule considre. La longueur donde dabsorption va dpendre de la liaison elle-mme(C-H, C-O, C-C,) mais aussi de lenvironnement molculaire dans lequel elle se trouve. Ainsi, une molcule donne va prsenter plusieurs longueurs donde dabsorption caractristiques dans le spectre infrarouge. Le spectre infrarouge dune solution organique comme le vin ou le mot prsente donc des absorptions, certaines longueurs donde, caractristiques des diffrentes molcules prsentes. Cet appareil permet la dtection de nombreux paramtres. En se basant sur le principe des interfrences lumineuses, qui modulent lamplitude dun signal comme une fonction de la diffrence de trajet entre deux sources interfrentes, un interfromtre enregistre lintensit de la lumire capte par le dtecteur comme une fonction de la diffrence de trajet gnre par le dplacement dun miroir mobile. La mesure du dplacement minime de ce miroir est effectue au moyen dun rayon laser qui suit le mme trajet que le rayon infrarouge. Cependant, ce niveau, linterfrogramme se rfre la position du miroir mobile et non la longueur donde qui est intressante. Le rayon infrarouge de la source I.R. frappe le sparateur de rayons qui envoie la moiti du rayon un miroir fixe et lautre moiti un miroir mobile. De ces miroirs, les rayons I.R. se refltent et se recombinent avant datteindre le dtecteur. Toutes les frquences I.R. voyagent en mme temps dans linterfromtre et des dplacements rapides de courte distance du miroir permettent la formation simultane de la totalit du spectre I.R.
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II.2.2 Le Principe de la Transforme de Fourier [1]
Le Principe de Transformation de Fourier (TF) se base sur le fait que chaque fonction peut tre dcompose en une somme de fonctions sinusodales, chaque fonction sinusodale tant dfinie par deux valeurs: sa frquence (longueur dondes) et son amplitude (intensit). La Transformation de Fourier est une procdure mathmatique qui permet de dcomposer un interfrogramme en une somme de fonctions sinusodales, reprsentant chacune une onde donne. La frquence et lamplitude de ces ondes sont calcules partir des donnes de linterfrogramme. En quelques secondes, linterfrogramme est recueilli par le spectromtre, trait par le calcul de transformation de Fourier et converti pour donner le spectre entier de lchantillon. A partir de l, nous revenons la thorie gnrale de la spectromtrie, de lintensit lumineuse, de la transmission, de labsorption et de leur relation avec les lments constitutifs dun chantillon spcifique.
II.2.3 Avantages.
Rapidit de lanalyse : 30 secondes par chantillon. Idem que dans I.1.2.
II.2.4 Inconvnients.
Cf. I.2.3 (sauf lenteur).
II.3 Autres matriels.
II.3.1 Informatique.
Le spectromtre est reli via une carte dacquisition de donnes un ordinateur (PC) disposant du logiciel Spectrum pour lacquisition et lanalyse des donnes.
II.3.2 Fentres.
Nous disposons de fentres de cristaux de NaCl, de CaF2 et de cristaux de KBr que lon place sur un support adapt.
II.3.3 Matriaux et produits.
Filtre de verre interne. Film de polystyrne interne. Film de polythylne. Huile de Nujol. CCl4 Solutions notes A,B,D,E,F,G,H de dodcane, butanol, butanal, butan-2-one acide 3-phnylbutanoque, actonitrile, , actate dthyle, de tolune (dans un ordre inconnu) et une inconnue.
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III
Manipulations et interprtations.
III.1 Les paramtres.
III.1.1 Lapodisation.
La diffrence de chemin optique finie de linterfromtre conduit une fonction instrumentale qui possde des lobes alternativement ngatifs et positifs autour du pic principal Si la largeur des lobes (1/2L) est grande par rapport la largeur de la raie dabsorption, leur effet est visible et peut tre gnant. Dans ce cas il peut tre souhaitable de rduire leur effet en appliquant une fonction dapodisation linterfrogramme. Une fonction dapodisation dcrot de manire continue vers 0 pour viter le passage brutal du signal 0 lorsque le miroir mobile est en fin de course. Il existe plusieurs fonctions dapodisation courantes dont les fonctions de Norton et Beer [1976]. Quelque soit la fonction utilise, lapodisation conduit un largissement des raies spectrales et donc une moins bonne rsolution. [3 : www.oma.be/ESACII/Documents/these_BBarret.pdf]
III.1.2 La rsolution.
Cest un paramtre trs important qui dfinira la prcision du signal enregistr. Cest dire que plus la rsolution est grande, plus le spectre est bien dfini. On observera alors le maximum de dtail de lenregistrement. Mais une rsolution trop grande peut conduire une trop importante masse dinformations qui rend premire vue le spectre illisible. La rsolution (en cm-1) est donc un paramtre que lon rglera selon le type de prcision danalyse que lon dsire : routine ou exprimentale. Lappareil effectue une mesure tous les X cm-1 du spectre infrarouge. X est dfini en dbut de mesure par lexprimentateur.
III.1.3 Le nombre de scans.
Lappareil effectue n fois lenregistrement du spectre selon le dsir de lutilisateur et le logiciel fait une moyenne des n spectres enregistrs.
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III.2 Notion de Rfrence.
On enregistre la rfrence en laissant le compartiment vide avec les paramtres suivants : . Apodisation forte . Rsolution : 4cm-1 . Nombre de scans : 4 Pour simplifier, on enregistre le spectre IR de lair (annexe 1). Cela permet de dfinir le bruit de fond de lappareil, cest dire les enregistrements parasites queffectue invitablement le spectromtre cause de la prsence de molcules de lair interagissant avec les rayons IR mis.
III.2.1 Observations.
On observe un spectre dont la ligne de base est instable et en pente. Plusieurs bandes sont enregistres, la premire constitue de nombreux pics est situe de 4000 3500 cm-1, la deuxime de 3 pics aux alentours de 3000 cm-1, un grand pic 2300 cm-1, une large bande de nombreux pics de 1800 1300cm-1 et quelques pics ponctuels sur une pende dcroissante 1100 cm-1, 900 cm-1 et 600 cm-1 .
III.2.2 Interprtation.
de 4000 3500 cm-1 : prsence de vapeurs deau dans lair 2300 cm-1 : prsence de CO2 dans lair de 1800 1300cm-1 : prsence de vapeurs deau. Les 3 pics aux alentours de 3000 cm-1, et les 3 derniers 1100 cm-1, 900 cm-1 et 600 cm-1, peuvent tre dus une ou des vapeurs de produits organiques utiliss pour les TP dans le laboratoire. Nous pouvons en conclure quil est important de connatre cette rfrence car ces molcules parasiterons les mesures sur nos chantillons. Les rsultats obtenus doivent donc tenir compte des conditions initiales et environnementales de la mesure. La rfrence permet donc lappareil dvaluer le bruit de fond.
III.3 Etude des paramtres du spectromtre FTIR.
On enregistre les spectres de rfrence (air) et dun filtre interne de polystyrne en gardant constant 2 paramtres sur 3 (apodisation et nombre de scans, ou rsolution et nombre de scans) en modifiant le 3me(respectivement rsolution ou apodisation).
III.3.1 La rsolution.
Une forte apodisation et un nombre de 4 scans sont fixs, on fait vari la rsolution de la mesure de 64 16 puis 1 cm-1 . On observe sur les courbes que plus la rsolution est grande (la plus grande est 1 cm-1) plus la prcision du spectre est lev, cest dire que le nombre de pics est plus lev. Pour une mme longueur donde, le pic est dfini soit par une vague 64 cm-1, soit par une valle et des pics plus affirms 16 cm-1, soit par une valle et des pics trs accidents encore plus affirms 1 cm-1. (voir annexes 2 et 3).
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III.3.2 Lapodisation.
Une rsolution de 4 cm-1 et un nombre de 4scans sont fixs, on fait varier limportance de lapodisation sur la mesure de forte faible puis nulle. Daprs les courbes enregistres (annexes 4 et 5), on observe que plus lapodisation est forte plus les pics diminuent de hauteur et sont applatis. Ce paramtre joue donc aussi sur la prcision de la mesure.
III.3.3 Conclusion.
Lapodisation influe selon les ordonnes et la rsolution selon les abscisses.
III.4 Comparaison des techniques dIRTF et dIR dispersif.
On enregistre le spectre dun film de polystyrne dans les conditions suivantes en IRTF: - 1 scan - forte apodisation - rsolution = 4 cm-1 puis le spectre du mme filtre est enregistr sur lappareil dispersif. (Annexes 5 et 6). On remarque dans un 1er temps en comparant les 2 graphes que la mesure par IRTF semble plus prcise que celle par dispersion. En effet, pour une bande une mme longueur donde donne, celle-ci est dfinie par plus de pics par lIRTF que par la mthode dispersive. Exemple : 1600 cm-1, le spectre en IR dispersif est donn par 1 pic tandis que pour lIRTF on a une multitude de pics. Dans un 2me temps, on remarque quune bande 2300 cm-1 est prsente et bien prononce sur la courbe de lIRTF mais est dfinie sur la courbe de lanalyse dispersive par un artefact. Cest la bande caractristique du CO2. Lappareil IRTF est donc plus prcis puisquil est capable de dtecter le CO2 en faible quantit dans lair (0,05%) et pas lappareil IR dispersif.
III.5 Domaines dutilisation de diffrents matriaux ou solvants.
On enregistre les spectres dans les conditions suivantes en IRTF: - 4 scans - forte apodisation - rsolution = 4 cm-1 des matriaux et solvants suivants : - filtre de verre interne lappareil - fentre de NaCl - fentre de KBr - fentre de CaF2 - film de polythylne - huile de Nujol entre 2 pastilles de NaCl - Chloroforme dans une cellule de 0,2mm dpaisseur.
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On observe sur les courbes traces en annexes 8 et 9 pour : Matriau ou solvant filtre de verre interne fentre de NaCl Caractristiques du spectre Large bande dabsorption de 3700 2000 cm-1 puis saturation continue de lappareil. Lligne de base stable, pas de pics dabsorptions significatifs sur tout le spectre IR. Ligne de base moins stable et bruit de fond plus important que pour NaCl, pas de pics dabsorptions significatifs sur tout le spectre IR et dbut de saturation du signal partir de 700 cm-1. Ligne de base stable, pas de pics dabsorptions significatifs sur tout le spectre IR mais dbut de saturation du signal partir de 1500 cm-1. Ligne de base en pente au dbut, pics dabsorption 2950, 1450 et 600 cm-1, donc absorption dans lIR. Ligne de base instable, forte absorption aux alentours de 3000 cm-1 puis de 1500 750 cm-1 avec des variations dintensit. Ligne de base stable mais quelques pics dabsorption sont prsents 3000 cm-1 de faibles intensits donc non significatifs, 1200 et 650 cm-1 on trouve des pics dabsorption importantes. Conclusion sur lutilisation en IFTR Inutilisable car absorbe trop dans lIR Type de cellule adquat
fentre de KBr
Type de cellule adquat jusqu 700 cm-1
Fentre de CaF2
Saturation trop rapide donc inutilisable. Absorption dans lIR donc cellules inutilisables. Solvant inutilisable car trop dabsorption Solvant adquat mais il faut tenir compte de ses pics caractristiques.
Fim de polythylne
Huile de Nujol
Chloroforme
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