ADN, ARN

Dr OUEDRAOGO R Alexis

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 Objectifs

• Définir : gène, épissage

• Décrire la réplication de l’ADN

• Décrire la transcription de l’ARN

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 Plan

1. ADN nucléaire

2. ARN

3. Applications

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 1. ADN nucléaire

• Contient le patrimoine génétique.

• Macromolécule très longue,
• Polymère de nucléotides,
• Constituée de deux chaînes hélicoïdales antiparallèles,
Indispensable à la vie cellulaire
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 1.1. Structure de l’ADN
• Structure de base
• Structure primaire de la molécule d'ADN
• Structure tridimensionnelle de la molécule d'ADN

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• Structure primaire de la molécule d'ADN
• Chaque brin d'ADN (monocaténaire)
• association de désoxyribonucléotides par des liaisons
entre le phosphate et le désoxyribose de chacun des
deux nucléotides voisins
• liaison phosphate réunit le carbone 3' d'un
désoxyribose au carbone 5' d'un désoxyribose
adjacent
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• Les nucléotides
• monomères de l’ADN
• désoxyribonucléotides.
• Combinaison :
• phosphate,
• Pentose
• base azotée purique (adénine, guanine) ou
pyrimidique (cytosine, thymine)

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• La molécule d'ADN
• molécule bicaténaire
• association de deux brins par l'intermédiaire de
liaisons hydrogène associant les bases puriques et
pyrimidiques de chacune des deux chaînes
• L'appariement entre les bases est exclusif : A = T et
C=G).

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• Le gène
• correspond à une partie de la molécule d'ADN qui est
transcrite en ARN
• sa transcription dépend d'une région de contrôle
génique qui comprend le promoteur et des séquences
régulatrices parfois très éloignées (50 kb)
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• Structure
• Les gènes qui codent les protéines contiennent des
introns qui séparent des exons
• Seuls les exons, raboutés après excision des introns
lors de l'épissage, se retrouvent dans l'ARNm.

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• Structure tridimensionnelle de la molécule d'ADN

• deux brins hélicoïdaux antiparallèles

• double hélice
• Le pas d'une longueur de 3,4 nm, contient dix
paires de désoxyribonucleotides
• Son diamètre extérieur est de 2 nm.
• Sa longueur est fonction de la nature de la cellule
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 1.2. Réplication de l'ADN

• Mécanisme complexe, au cours duquel la quantité de

matériel génétique cellulaire double.
• Elle se déroule pendant la phase S (phase de synthèse du
cycle cellulaire)
• Elle donne naissance à des molécules d'ADN identiques
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 Réplication de l'ADN
• Caractéristiques de la réplication de l'ADN :
• précise
• rapide
• semi-conservative
• orientée
• bidirectionnelle

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Réplication de l'ADN

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Réplication de l'ADN

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 Réplication de l'ADN
• L'origine de réplication

• Origine de réplication chez Escherichia coli : OriC

• OriC :
• séquence de 245 paires de bases
• quatre sites où s’assemble les réplisomes
• réplisome : protéine dnaA toutes les protéines et
enzymes nécessaires pour la réplication
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 Réplication de l'ADN
• L'hélicase
• provoque une déspiralisation localisée de l'ADN
• crée un œil de réplication de quelques centaines de
paires de nucléotides
• œil de réplication stabilisé par les SSB (single strand
binding protein)
• Synthèse d'une amorce d'ARN et initiation de la synthèse
d’ADN grâce au primosome

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 Réplication de l'ADN
• Réplisome :
• lit et réplique une chaîne d'ADN en se déplaçant
dans le sens 3' -> 5’
• Provient d’une association de primosome et d'ADN
polymérase III et les protéines rep (replication;
réplication, synonyme de hélicase II)

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 Réplication de l'ADN
• Brin avancé et brin retardé

• Chaînes d'ADN sont antiparallèles

• La chaîne orientée dans le sens 3' -> 5’
• lue première et de façon continue
• formera le brin avancé

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 Réplication de l'ADN
• Copie du brin orienté dans le sens 5'→ 3’

• Lecture par l'ADN polymérase dans le sens 3→5

• débute plus tard que celle du brin précoce : brin retardé
• L'ADN polymérase III synthétise un segment d'ADN
(environ 2.000 nucléotides) : fragment d'Okazaki
• Segments ensuite associés les uns aux autres par une
ligase

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 Réplication de l'ADN
• Les ADN polymérases dans les cellules eucaryotes

• ADN polymérase I : synthèse du brin précoce,

• ADN polymérase II : enzyme réparatrice
• ADN polymérase III : réplication ADN mitochondrial
• ADN polymérase IV : synthèse du brin tardif

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 2. ARN

• Toujours monocaténaire
• Mêmes constituants que l'ADN, à l'exception :
• du désoxyribose remplacé par le ribose
• de thymine remplacée par l'uracile
• Regroupent : ARNm, ARNt, ARNr
• Proviennent de la transcription de l'ADN
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 2.1. Transcription de l'ARN
• ARN polymérases

• Enzymes capables de lire (la matrice)

• Transcrire une des deux chaînes d’ADN en ARN
• Bactéries : une seule ARN polymérase
• Eucaryotes : trois types d’ARN polymérases (I, II et III)

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 Transcription de l'ARN
• Début de la transcription

• Début par la reconnaissance du promoteur par l'ARN

polymérase
• ARN polymérases recrutées sur les promoteurs par les
complexes TF (transcription factor)
• Différents TF : TFI, TFII er TFIII
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 Transcription de l'ARN
• Élongation

• L'ARN polymérase se déplace le long de l'ADN

• ouvre une partie de la molécule d'ADN
• Un des deux brins sert de matrice: lu dans le sens 3' -> 5'

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 Transcription de l'ARN
• L'élongation de la molécule d'ARN se fait par l'appariement
des bases complémentaires et par l'addition successive de
ribonucléosides 5' triphosphates [adénosine 5' triphosphate
(ATP), cytidine 5' triphosphate (CTP), guanosine 5'
triphosphate (GTP), uridine 5' triphosphate UTP)

• Une chaîne d'ARN se forme et s'allonge dans le sens 5' -> 3'

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 Transcription de l'ARN
• Arrêt de la transcription
• L'ARN polymérase continue au-delà du nucléotide où
aura la polyadénylation
• les polymérases finissent par se décrocher
• Le transcrit primaire est clivé en un point précis
• La poly(A) polymérase ajoute 100 à 250 A à l’extrémité 3'
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 Transcription de l'ARN
• Régulation de la transcription

Facteurs de transcription
• contrôlent la transcription en se fixant sur les
séquences régulatrices de l’ADN :
• répresseurs (silencers)
• amplificateurs (enhancers)
• activés par des signaux extracellulaires
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 Transcription de l'ARN
• Les séquences régulatrices se localisent en amont ou
en aval du gène
• Exemple de répresseur bactérien : Lac (pour lactose)
qui empêche la production de protéines intervenant
dans le métabolisme du lactose dans un milieu ne
contenant pas de lactos

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 2.2. Maturation du transcrit primaire

• Ensemble de mécanisme qui transforme le transcrit

primaire (ou ARN prémessager) en sa forme définitive
(ARN messager)
• Phase de maturation caractérisée par :
• le coiffage
• la polyadénylation de l'extrémité 3'
• l'épissage
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 Maturation du transcrit primaire
• Le coiffage ou capping recouvre l'extrémité 5' du transcrit
d'un acide guanylique méthylé

• La pulyadénylation de l'extrémité 3’: ajout d’environ 200

résidus adényliques

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 Maturation du transcrit primaire
• L'épissage
• Enlèvement précis des introns des transcrits primaires
par excision,
• Met en œuvre un complexe de haut poids moléculaire :
le splicéosome
• Les séquences d'ARNm exoniques, situées de part et
d'autre des introns, sont ressoudées
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2.3. Régulations post-transcriptionnelles
• Épissage
• Édition
• Transport de l’ARN depuis le noyau jusqu'au cytoplasme
• Traduction (par le choix des ARNm qui seront traduits)
• Dégradation de certains ARN
• Activité des protéines synthétisées
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 3. Applications

• Polymerase chain reaction (PCR) : amplification en

chaine par polymérase

• Hybridation in situ en fluorescence

• Biothérapie par ARN

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