Homocysteine

fr
09P28
Homocysteine Reagent Kit G83149R02
B9P282
Faire attention aux modifications : Révision de juillet 2018.

09P2820

Suivre scrupuleusement les instructions. La fiabilité des résultats Les études effectuées pour analyser la relation existant entre des
du dosage ne peut pas être garantie si ces instructions ne sont pas concentrations élevées d'homocystéine et la survenue d'une maladie
strictement respectées. cardio-vasculaire (MCV) indiquent que l'homocystéine est un
MISE EN GARDE : Les échantillons de patients recevant un marqueur important pour l'évaluation des risques. En présence d'une
traitement comprenant de la S‑adénosyl-méthionine peuvent maladie des artères coronaires (MAC) connue, il a été démontré
présenter des taux d'homocystéine faussement élevés. Les qu'elle est un fort marqueur indépendant du risque de décès dû à
échantillons prélevés sur des patients traités par méthotrexate, une MAC.10 Une étude menée sur 1933 hommes et femmes âgés
carbamazépine, phénytoïne, protoxyde d'azote, anticonvulsivants faisant partie de la cohorte de Framingham ("Framingham Heart
ou triacétate de 6-azauridine peuvent présenter des taux Study") a montré que des taux élevés d'homocystéine sont associés
d'homocystéine élevés en raison de l'effet de ces substances sur les de manière indépendante à une augmentation de la mortalité cardio-
voies métaboliques. Se référer à la partie LIMITES DE LA METHODE vasculaire et globale.11 Chez les patients à risque intermédiaire, des
de cette notice. taux élevés d'homocystéine sont associés au degré de calcification
des artères coronaires. Les taux élevés d'homocystéine chez ces
ll
DENOMINATION patients sont indépendants des facteurs de risque de maladie
Alinity i Homocysteine Reagent Kit coronarienne.12
ll
DOMAINE D'APPLICATION Une méta-analyse de 27 études épidémiologiques, comprenant
Le dosage Alinity i Homocysteine est un dosage immunologique plus de 4000 patients, a estimé qu'une augmentation de 5 μmol/L
microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) utilisé pour la de l'homocystéine totale était associée à un odds ratio pour les
détermination quantitative de la L‑homocystéine totale dans le sérum maladies des artères coronaires (MAC) de 1.6 (1.4 à 1.7 pour un
ou le plasma humains sur l'analyseur Alinity i. intervalle de confiance [IC] à 95 %) pour les hommes et de 1.8 (1.3 à
Les valeurs d'homocystéine peuvent être utilisées comme aide au 1.9 pour un IC à 95 %) pour les femmes ; pour les maladies cérébro-
diagnostic et au traitement des patients chez lesquels on suspecte vasculaires, l'odds ratio était de 1.5 (1.3 à 1.9 pour un IC à 95 %). Le
une hyperhomocystéinémie et une homocystinurie. risque associé à une augmentation de 5 μmol/L de l'homocystéine
totale était le même que pour une augmentation de 0.5 mmol/L
ll
RESUME ET EXPLICATION DU TEST (20 mg/dL) du cholestérol. Une forte association a également été
L'homocystéine (HCY) est un acide aminé porteur d'un groupement montrée avec les maladies artérielles périphériques.13
thiol produit par déméthylation intracellulaire de la méthionine. Les patients souffrant d'une maladie rénale chronique présentent
L'homocystéine est libérée dans le plasma où elle circule une morbidité et une mortalité élevées dues à la maladie
principalement sous sa forme oxydée, liée à des protéines cardiovasculaire artérioscléreuse. On trouve souvent des
plasmatiques pour former un disulfure protéine-HCY mixte avec concentrations élevées d'homocystéine totale dans le sang de ces
l'albumine.1-4 De plus faibles quantités d'homocystéine réduite et patients. Bien qu'ils puissent présenter des carences en certaines
le disulfure homocystine (HCY-SS-HCY) sont également présents. vitamines impliquées dans le métabolisme de l'homocystéine, les
L'homocystéine totale (tHCY) représente la somme de toutes les taux d'homocystéine totale élevés sont principalement dus à une
formes d'homocystéine que l'on trouve dans le sérum ou le plasma mauvaise épuration de l'homocystéine du sang par les reins.14, 15
(libres et liées aux protéines). L'homocystéine est métabolisée Il a été suggéré que les taux élevés d'homocystéine représentent
en cystéine ou en méthionine. Lors de la trans-sulfuration un facteur de risque modifiable indépendant pour les maladies
vitamine B6-dépendante, l'homocystéine est irréversiblement coronariennes, les accidents vasculaires cérébraux et les
catabolisée en cystéine. La majeure partie de l'homocystéine est thromboses veineuses profondes.16 Des études ont également
reméthylée en méthionine, principalement par l'enzyme méthionine identifié les concentrations élevées d'homocystéine en tant que fort
synthétase, enzyme cobalamine et folates dépendante. Si ces facteur de risque indépendant pour le développement de différentes
réactions sont altérées, l'homocystéine s'accumule puis est excrétée formes de démence, y compris la maladie d'Alzheimer. Lors d'une
dans le sang.2, 4 Un métabolisme de l'homocystéine altéré entraîne étude réalisée sur 1092 sujets de la "Framingham Study", les taux
une hyperhomocystéinémie (taux élevés d'homocystéine dans le d'homocystéine plasmatique > 14 μmol/L ont doublé le risque de
plasma ou le sérum) ou une homocystinurie (taux élevés dans maladie d'Alzheimer.17
le plasma entraînant l'excrétion de l'homocystéine dans l'urine). Une étude a indiqué que les taux de tHCY plasmatique sont plus bas
L'hyperhomocystéinémie est provoquée par une carence alimentaire chez les femmes enceintes que chez les femmes non enceintes (la
et une déficience génétique. La majorité des cas d'homocystéine tHCY moyenne est d'environ 5 à 6 μmol/L, des valeurs > 10 μmol/L
élevée (2/3) dans l'ensemble de la population est due à une carence sont rarement observées). Une tHCY élevée est associée à un
en acide folique, en vitamine B6 et en vitamine B12.5 risque accru de complications lors de la grossesse (prééclampsie,
On trouve des concentrations d'homocystéine totale très élevées fausse couche précoce récurrente, naissance prématurée, poids
chez les sujets atteints d'homocystinurie, affection génétique rare faible à la naissance et décollement ou infarctus placentaire).
des enzymes impliquées dans le métabolisme de l'homocystéine. L'hyperhomocystéinémie maternelle est liée à des malformations
Les patients atteints d'homocystinurie présentent un retard mental, congénitales telles que des malformations du tube neural, des fentes
une artériosclérose précoce et des troubles thrombo-emboliques bucco-faciales, un pied bot et la trisomie 21.18
artériels et veineux.1, 6 On a également identifié d'autres affections
génétiques moins graves, conduisant à des taux d'homocystéine
totale modérément élevés.7-9

1
ll
PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE Mesures de sécurité
Ce dosage est un dosage immunologique en une étape pour la ATTENTION : Ce produit nécessite la manipulation d'échantillons
détermination quantitative de la L‑homocystéine totale dans le humains. Il est recommandé de considérer tous les produits d'origine
sérum ou le plasma humains utilisant la technologie de dosage humaine comme potentiellement infectieux et de les manipuler selon
immunologique microparticulaire par chimiluminescence (CMIA). les règles OSHA Standard on Bloodborne Pathogens. Les produits
L'échantillon, les microparticules recouvertes d'anticorps anti-S- contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent
adénosyl-L-homocystéine (souris, monoclonaux), la S-adénosyl-L- être manipulés selon les règles de biosécurité de niveau 2 ou autres
homocystéine hydrolase recombinante (rSAHHase) et du dithiothréitol règles de biosécurité en vigueur.19-22
(DTT) sont mis en présence pour créer un mélange réactionnel et Les mises en garde et précautions suivantes sont applicables pour :
incubés.
L'homocystéine liée ou dimérisée (forme oxydée) est réduite sous
l'action du DTT en homocystéine libre, qui est à son tour convertie
en S-adénosylhomocystéine (SAH) sous l'action de l'enzyme
recombinante rSAHHase en présence d'adénosine en excès. La
SAH entre ensuite en compétition avec le conjugué de S-adénosyl- MISE EN GARDE Contient des méthylisothiazolones.
cystéine marqué à l'acridinium pour se lier aux microparticules H317 Peut provoquer une allergie cutanée.
recouvertes d'anticorps monoclonal. Après un cycle de lavage, les Prévention
solutions de préactivation et d'activation sont ajoutées. P261 Eviter de respirer les brouillards /
Pour effectuer le protocole de dilution, une étape de prétraitement vapeurs / aérosols.
supplémentaire est ajoutée pour diluer l'échantillon. L'échantillon P272 Les vêtements de travail contaminés ne
dilué est utilisé dans la procédure de dosage décrite ci-dessus. devraient pas sortir du lieu de travail.
La réaction chimiluminescente résultante est mesurée en unités P280 Porter des gants de protection / des
relatives de lumière (URL). Il existe une relation indirecte entre la vêtements de protection / un équipement
quantité d'homocystéine présente dans l'échantillon et les URL de protection des yeux.
détectées par le système optique. Réponse
Pour de plus amples informations concernant l'analyseur et P302+P352 EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU :
la technologie de dosage, se référer au Manuel Technique Laver abondamment à l'eau.
Alinity ci-series, Chapitre 3. P333+P313 En cas d'irritation ou d'éruption cutanée :
ll
REACTIFS Consulter un médecin.
P362+P364 Enlever les vêtements contaminés et les
Contenu du kit laver avant réutilisation.
Alinity i Homocysteine Reagent Kit 09P28 Elimination
REMARQUE : Ce produit comprend 4 flacons, conditionnés sous P501 Eliminer le contenu / récipient
forme de jeu de 2 cartouches de réactif. Les deux cartouches sont conformément aux réglementations
requises pour la réalisation du dosage. locales.
Les volumes (mL) dans le tableau ci-dessous indiquent le volume par
jeu de cartouches. Les mises en garde et précautions suivantes sont applicables pour :
/
09P2820 Contient de l'azide de sodium.
Tests par jeu de cartouches 100 EUH032 Au contact d'un acide, dégage un gaz très
Nombre de jeux de cartouches par toxique.
2
kit P501 Eliminer le contenu / récipient
Tests par kit 200 conformément aux réglementations
6.6 mL locales.
8.8 mL Les fiches de données de sécurité sont disponibles sur
9.1 mL www.abbottdiagnostics.com ou auprès du Service Clients Abbott.
21.5 mL Pour de plus amples informations sur les mesures de sécurité lors
du fonctionnement de l'analyseur, se référer au Manuel Technique
Microparticules recouvertes d'anticorps anti-S- Alinity ci-series, Chapitre 8.
adénosyl-L-homocystéine (souris, monoclonaux) dans du tampon Manipulation des réactifs
Bis-Tris avec des surfactants. Concentration minimale : 0.1 % de
• A la réception de la commande, retourner délicatement le kit non
particules solides. Conservateurs : azide de sodium et autres agents
ouvert contenant les cartouches de réactif en effectuant une
antimicrobiens.
rotation de 180 degrés, 5 fois avec l’étiquette verte orientée vers
Conjugué de S-adénosyl-L-cystéine (SAC) marqué le haut, 5 fois avec l’étiquette verte orientée vers le bas. Ceci
à l'acridinium dans du tampon citrate avec des surfactants et un permet de garantir que le liquide recouvre toutes les parois des
stabilisant de protéines (bovines). Concentration minimale : 1 ng/mL. flacons inclus dans les cartouches. Lors du transport des kits,
Conservateur : ProClin 300. les microparticules peuvent se déposer sur le septum du réactif.
S-adénosyl-L-homocystéine hydrolase recombinante –– Cocher la case sur l’emballage pour indiquer que le kit a
(rSAHHase) dans du tampon acide sulfonique pipérazine-1-propane déjà été retourné.
4-(2-hydroxyéthyl) (EPPS). Conservateur : azide de sodium. • Après homogénéisation, placer les cartouches de réactif en
position verticale pendant 1 heure avant emploi pour permettre
Dithiothréitol (DTT) dans du tampon citrate.
aux bulles qui ont pu se former de se dissiper.
Mises en garde et précautions • Si une cartouche de réactif tombe, la placer en position verticale
• pendant 1 heure avant emploi pour permettre aux bulles qui ont
pu se former de se dissiper.
• Pour diagnostic in vitro
•

2
• Les réactifs sont susceptibles de former de la mousse ou Autres unités de résultat
des bulles. La présence de bulles dans les réactifs peut Modifier le paramètre de dosage "Unités de résultat" pour
compromettre la détection correcte du niveau de réactif dans la sélectionner une autre unité.
cartouche, entraînant une aspiration insuffisante de réactif qui Formule de conversion :
peut compromettre les résultats. (Concentration en unité de résultat par défaut) x (Facteur de
Pour de plus amples informations sur les précautions relatives à la conversion) = (Concentration en unité de résultat alternative)
manipulation des réactifs lors du fonctionnement de l'analyseur, se
Unité de résultat
référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 7. par défaut Facteur de conversion Autre unité de résultat
Conservation des réactifs μmol/L 0.1352 μg/mL
Température Durée
de maximale de Conditions de conservation ll
PRELEVEMENT ET PREPARATION DES
conservation conservation supplémentaires ECHANTILLONS POUR L'ANALYSE
Non ouvert 2 à 8 °C Jusqu'à Conserver en position
Types d'échantillons
la date de verticale.
péremption L'utilisation des types d'échantillons indiqués ci-dessous a été
Si la cartouche ne reste
validée pour ce dosage.
pas en position verticale,
retourner délicatement L'utilisation d'autres types d'échantillons et de tubes de prélèvement
la cartouche 10 fois et n'a pas été validée pour ce dosage.
la placer en position Types d'échantillons Tubes de prélèvement
verticale pendant 1 heure Sérum Sérum
avant emploi. Séparateur de sérum
A bord Température 30 jours Plasma Héparinate de lithium
du système EDTA potassique
Ouvert 2 à 8 °C Jusqu'à Conserver en position
la date de verticale. • La performance de ce dosage n'a pas été établie pour les
péremption échantillons prélevés post-mortem, ni pour l'utilisation de fluides
Si la cartouche ne reste
corporels autres que le sérum ou le plasma humains.
pas en position verticale
lors de sa conservation, • Les anticoagulants liquides peuvent avoir un effet diluant
jeter la cartouche. entraînant une baisse des concentrations pour certains
échantillons.
Ne pas réutiliser les
bouchons d'origine des • L'analyseur n'est pas configuré pour détecter le type
réactifs ou les bouchons d'échantillon utilisé. Il est de la responsabilité de l'utilisateur
de remplacement en de vérifier que le type d'échantillon utilisé dans le dosage est
raison du risque de correct.
contamination et pour Etats des échantillons
ne pas compromettre la • Ne pas utiliser :
performance des réactifs. –– d'échantillons inactivés par la chaleur
Les réactifs peuvent être conservés à l'intérieur ou à l'extérieur de –– d'échantillons fortement hémolysés
l'analyseur. Si les réactifs sont retirés de l'analyseur, les conserver –– d'échantillons présentant une contamination microbienne
en position verticale avec des bouchons de remplacement neufs évidente
entre 2 et 8 °C. Pour les réactifs conservés à l'extérieur de • Pour obtenir des résultats exacts, les échantillons de sérum
l'analyseur, il est recommandé de les placer dans leurs portoirs ou et de plasma ne doivent pas contenir de fibrine, de globules
emballages d'origine afin de les maintenir en position verticale. rouges ou d'autres particules en suspension. Les échantillons
Pour de plus amples informations sur le déchargement des réactifs, de sérum provenant de patients sous traitement anticoagulant
se référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 5. ou thrombolytique peuvent contenir de la fibrine en raison d'une
coagulation incomplète.
Indications d'altération des réactifs
• Afin d'éviter toute contamination croisée, il est recommandé
Une erreur de calibration ou un contrôle dont la valeur se situe
d'utiliser des pipettes ou des embouts de pipettes à usage
en dehors des limites spécifiées peut indiquer une altération des
unique.
réactifs. Les résultats des échantillons analysés dans la même série
ne sont pas valides et ces échantillons devront être réanalysés. Une Préparation pour l'analyse
recalibration du dosage peut être nécessaire. • Afin de minimiser l'augmentation de la concentration
Pour de plus amples informations sur le dépannage, se référer au d'homocystéine par la synthèse des érythrocytes, placer tous
Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 10. les échantillons (sérum et plasma) sur de la glace après le
prélèvement et avant le traitement. Le caillot peut se former
ll
FONCTIONNEMENT DE L'APPAREIL plus lentement dans le sérum et le volume de sérum peut être
Les fichiers de dosage Alinity i Homocysteine suivants doivent être réduit en raison de la conservation sur de la glace.23
installés sur l'analyseur Alinity i avant d'effectuer des dosages sans REMARQUE : Les échantillons non placés sur de la glace
dilution et avec dilution : immédiatement peuvent présenter une augmentation de la
• tHCY-UNDIL (protocole sans dilution) concentration de 10 à 20 %.24
• tHCY-DIL (protocole avec dilution) • Suivre les instructions du fabricant de tubes relatives
Pour de plus amples informations concernant l'installation d'un fichier à l'utilisation des tubes de prélèvement. La séparation
de dosage, la visualisation et la modification des paramètres de gravimétrique n'est pas suffisante pour la préparation des
dosage, se référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 2. échantillons.
Pour des informations sur l'impression des paramètres de dosage, se • Les échantillons ne doivent pas contenir de bulles. S'ils
référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 5. contiennent des bulles, les éliminer à l'aide d'un bâtonnet avant
Pour une description détaillée du fonctionnement de l'analyseur, se l'analyse. Utiliser un bâtonnet neuf pour chaque échantillon afin
référer au Manuel Technique Alinity ci-series. d'éviter toute contamination croisée.

3
Afin d'obtenir des résultats cohérents, centrifuger à nouveau les • Alinity Trigger Solution
échantillons avant l'analyse si • Alinity Pre-Trigger Solution
• les échantillons contiennent de la fibrine, des globules rouges ou • Alinity i-series Concentrated Wash Buffer
d'autres particules en suspension ; Pour de plus amples informations sur le matériel requis pour le
• les échantillons doivent être réanalysés. fonctionnement de l'analyseur, se référer au Manuel Technique
REMARQUE : En cas de présence de fibrine, de globules rouges Alinity ci-series, Chapitre 1.
ou d'autres particules en suspension, mélanger à faible vitesse au Pour de plus amples informations sur le matériel requis pour les
Vortex ou retourner les flacons 10 fois avant la recentrifugation. procédures de maintenance, se référer au Manuel Technique
Préparer les échantillons congelés comme suit : Alinity ci-series, Chapitre 9.
• Les échantillons congelés doivent être complètement décongelés Procédure du dosage
avant homogénéisation.
Pour obtenir une description détaillée de la réalisation d'un dosage,
• Homogénéiser soigneusement les échantillons décongelés en se référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 5.
les passant au Vortex à une vitesse faible ou en les retournant
• En cas d'utilisation de tubes primaires ou d'aliquots, se référer
10 fois.
au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 4, afin de
• Inspecter visuellement les échantillons. En cas d'apparition de s'assurer que le volume d'échantillon présent est suffisant.
couches ou de stratifications, continuer à mélanger jusqu'à ce
• Afin de minimiser les pertes par évaporation, vérifier que
que les échantillons soient visiblement homogènes.
le volume d'échantillon adéquat est présent dans le godet-
• Si les échantillons ne sont pas homogénéisés avec soin, des échantillon avant d'effectuer le dosage.
résultats incohérents peuvent être obtenus.
• Nombre maximal de répliques prélevées à partir du même godet-
• Centrifuger à nouveau les échantillons. échantillon : 10
Recentrifugation des échantillons • Pour le protocole sans dilution :
• Transférer les échantillons dans un tube pour centrifugeuse et –– Echantillon prioritaire :
les centrifuger.
◦◦ Volume d'échantillon pour le premier dosage : 78 μL
• Pour l'analyse, transférer l'échantillon clarifié dans un godet-
◦◦ Volume d'échantillon pour chaque dosage supplémentaire
échantillon ou un tube aliquot. Pour les échantillons centrifugés
présentant une couche lipidique, transférer exclusivement effectué sur le même godet-échantillon : 28 µL
l'échantillon clarifié sans substances lipémiques. –– ≤ 3 heures à bord du passeur de réactifs et d'échantillons :
◦◦ Volume d'échantillon pour le premier dosage : 150 µL
Conservation des échantillons
◦◦ Volume d'échantillon pour chaque dosage supplémentaire
Tous les échantillons doivent être placés sur de la glace
immédiatement après le prélèvement. effectué sur le même godet-échantillon : 28 µL
–– > 3 heures à bord du passeur de réactifs et d'échantillons :
Durée
Type maximale de ◦◦ Remplacer par une partie aliquote fraîche de l'échantillon.
d'échantillon Température conservation Instructions spéciales • Pour le protocole de dilution automatique (1/10) :
Sérum/ Sur glace 6 heures Si le dosage est –– Echantillon prioritaire :
Plasma effectué plus de ◦◦ Volume d'échantillon pour le premier dosage : 80 μL
six heures après
◦◦ Volume d'échantillon pour chaque dosage supplémentaire
le prélèvement,23
effectué sur le même godet-échantillon : 30 μL
séparer le sérum ou le
plasma du caillot, des –– ≤ 3 heures à bord du passeur de réactifs et d'échantillons :
globules rouges ou du ◦◦ Volume d'échantillon pour le premier dosage : 150 μL
gel séparateur. ◦◦ Volume d'échantillon pour chaque dosage supplémentaire
2 à 8 °C 14 jours effectué sur le même godet-échantillon : 30 μL
–– > 3 heures à bord du passeur de réactifs et d'échantillons :
Température 1 an Les échantillons ◦◦ Remplacer par une partie aliquote fraîche de l'échantillon
inférieure de sérum ou de
• Se référer aux notices Alinity i Homocysteine Calibrators et/ou
ou égale à plasma conservés
Alinity i Homocysteine Controls pour des instructions sur la
-20 °C congelés pendant
préparation et l'emploi.
un an n'ont présenté
aucune différence de • Pour les procédures de fonctionnement en général, se référer au
performance.18 Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 5.
• Pour obtenir une performance optimale de l'analyseur, il est
Eviter plus de 3 cycles de congélation/décongélation. important d'effectuer les procédures de maintenance de routine
Transport des échantillons décrites dans le Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 9.
Si les procédures du laboratoire requièrent une maintenance plus
Les échantillons doivent être conditionnés et étiquetés conformément
fréquente, se conformer à ces exigences.
à la législation régissant le transport des échantillons cliniques et
des substances infectieuses. Procédures de dilution des échantillons
Les échantillons présentant une valeur d'homocystéine supérieure
ll
PROCEDURE à 50.00 μmol/L (6.76 μg/mL) sont annotés "> 50.00 μmol/L"
Matériel fourni ("> 6.76 μg/mL") et peuvent être dilués à l'aide du protocole de
09P28 Alinity i Homocysteine Reagent Kit dilution automatique ou de la procédure de dilution manuelle.
Matériel requis mais non fourni Protocole de dilution automatique
• Alinity i Homocysteine assay files (fichiers de dosage) Le système effectue une dilution au 1/10 de l'échantillon si le fichier
• 09P2801 Alinity i Homocysteine Calibrators de dosage "tHCY-DIL" est utilisé et calcule automatiquement la
concentration de l'échantillon en multipliant le résultat par le facteur
• 09P2810 Alinity i Homocysteine Controls ou autres contrôles
de dilution.
disponibles dans le commerce
• 09P1540 Alinity i Multi-Assay Manual Diluent

4
Procédure de dilution manuelle • Si des contrôles plus fréquents sont nécessaires, suivre les
L'analyse d'un échantillon dilué manuellement doit être effectuée en procédures de contrôle de qualité en vigueur dans le laboratoire.
utilisant le ficher de dosage "tHCY-UNDIL". • Si les résultats des contrôles de qualité ne répondent pas aux
Dilution recommandée : 1/10 critères de validation définis par le laboratoire, il se peut que les
Ajouter 20 μL d'échantillon à 180 μL d'Alinity i Multi-Assay Manual résultats obtenus pour les échantillons soient erronés. Suivre les
Diluent. procédures du contrôle de qualité en vigueur dans le laboratoire.
Saisir le facteur de dilution dans l'onglet Echantillon ou Contrôle de Une recalibration peut s'avérer nécessaire. Pour obtenir des
l'écran Créer demande. Le système utilisera ce facteur de dilution informations sur le dépannage, se référer au Manuel Technique
afin de calculer automatiquement la concentration de l'échantillon et Alinity ci-series, Chapitre 10.
communiquera le résultat. Le résultat (avant l'application du facteur • Vérifier les résultats des contrôles de qualité et les critères de
de dilution) doit être > 1.00 μmol/L (> 0.14 μg/mL). validation à chaque changement de lot de réactifs ou de lot de
Si le facteur de dilution n'est pas saisi, le résultat doit être multiplié calibrateurs.
manuellement par le facteur de dilution approprié avant d'être Les contrôles disponibles dans le commerce doivent être utilisés
communiqué. Ne pas communiquer le résultat de l'échantillon dilué selon les directives et les recommandations du fabricant des
si celui-ci est inférieur à la valeur basse de l'intervalle de mesure, contrôles. Les limites de concentration fournies dans la notice des
soit 1.00 μmol/L (0.14 μg/mL). Réanalyser l'échantillon en utilisant contrôles doivent être utilisées à titre indicatif uniquement.
une dilution adéquate. Pour tout contrôle utilisé, le laboratoire doit vérifier que la
Pour de plus amples informations sur les demandes de dilutions, se composition des contrôles est compatible avec le dosage selon la
référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 5. notice.
Recommandations en matière de contrôle de qualité
Calibration
Se référer à “Basic QC Practices” de James O Westgard, Ph.D.,
Pour des instructions sur la procédure de calibration d'un dosage, se
pour obtenir des recommandations en matière de pratiques de
référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 5.
contrôle de qualité au sein du laboratoire.26
Chaque contrôle de dosage doit être analysé pour évaluer la
Vérification des performances des dosages
calibration du dosage.
Pour de plus amples informations sur les protocoles de vérification
Lorsque la calibration a été acceptée et mémorisée, tous les
des performances des dosages mentionnés dans la notice, se
échantillons suivants peuvent être analysés sans effectuer de
référer à la partie Vérification des performances des dosages du
nouvelle calibration, sauf si :
Manuel Technique Alinity ci-series.
• Un kit de réactifs portant un nouveau numéro de lot est utilisé.
• Les résultats du contrôle de qualité quotidien se situent en ll
RESULTATS
dehors des valeurs limites CQ sur la base de statistiques Calculs
utilisées pour surveiller et contrôler la performance du système, Le dosage Alinity i Homocysteine utilise une méthode de traitement
comme décrit à la partie Procédures du contrôle de qualité de des données par ajustement de la courbe logistique à 4 paramètres
cette notice. (4PLC, pondération en Y) pour créer une courbe de calibration et
–– Si les valeurs limites CQ sur la base de statistiques ne sont générer les résultats.
pas disponibles, la calibration ne devra alors pas dépasser Pour de plus amples informations concernant les autres
la limite de 30 jours pour la fréquence de recalibration. unités utilisées pour le rendu du résultat, se référer à la partie
Ce dosage peut nécessiter une recalibration après la maintenance FONCTIONNEMENT DE L'APPAREIL, Autres unités de résultat de
de pièces ou sous-systèmes essentiels ou après la réalisation de cette notice.
procédures de dépannage.
Annotations
Procédures du contrôle de qualité La rubrique Annotations peut contenir des informations sur certains
Le contrôle de qualité recommandé pour le dosage Alinity i résultats. Pour une description des annotations qui peuvent
Homocysteine consiste à analyser un échantillon de chaque niveau apparaître dans cette rubrique, se référer au Manuel Technique
de contrôles une fois toutes les 24 heures chaque jour d'utilisation. Alinity ci-series, Chapitre 5.
Des contrôles supplémentaires peuvent être analysés conformément
Intervalle de mesure
à la réglementation en vigueur ou aux exigences relatives à
L'intervalle de mesure est défini comme étant la plage de valeurs
l'accréditation ainsi qu'aux exigences du laboratoire en matière de
en μmol/L (μg/mL) correspondant aux limites de performance
contrôle de qualité.
acceptable pour la linéarité, l'imprécision et le biais.
Pour établir des valeurs limites CQ sur la base de statistiques,
L'intervalle de mesure du dosage Alinity i Homocysteine est compris
chaque laboratoire doit établir ses propres valeurs cibles et limites
entre 1.00 et 50.00 μmol/L (0.14 et 6.76 μg/mL).
de concentration pour les nouveaux lots de contrôles à chaque
niveau de contrôles cliniquement pertinent. Ceci peut être effectué ll
LIMITES DE LA METHODE
en analysant un minimum de 20 répliques sur plusieurs jours (3 à 5) • Si les résultats du dosage Alinity i Homocysteine ne
et en utilisant les résultats communiqués pour établir la moyenne correspondent pas à l'observation clinique, il est recommandé
(cible) et la variabilité attendues de cette moyenne (limites) pour d'effectuer d'autres tests afin de confirmer le résultat.
le laboratoire. Cette étude devra prendre en compte les sources de • Les substances suivantes peuvent provoquer une élévation
variation potentielles afin de rendre compte de la future performance des taux d'homocystéine : méthotrexate, carbamazépine,
du système : phénytoïne, protoxyde d'azote, anticonvulsivants et triacétate de
• Calibrations mémorisées multiples 6-azauridine. Leur mécanisme d'action affecte différentes parties
• Lots de réactifs multiples du métabolisme de l'homocystéine.23, 27
• Lots de calibrateurs multiples • La S-adénosyl-méthionine est un antidépresseur dont la forme
• Modules d'analyse multiples (le cas échéant) moléculaire est similaire à celle de la S-adénosyl-homocystéine.
• Données prélevées à différents moments de la journée Cette substance peut interférer avec le dosage Alinity i
Se référer au document C24-A3 du Clinical and Laboratory Homocysteine.
Standards Institute (CLSI) ou aux autres directives publiées
contenant des recommandations générales en matière de contrôle
de qualité.25

5
• Les échantillons prélevés sur des patients auxquels ont été Intra-série Intra-laboratoire
administrées des préparations d'anticorps monoclonaux de Moyenne (répétabilité) (total)a
souris à des fins diagnostiques ou thérapeutiques peuvent Echantillon n (µg/mL) E.T. CV (%) E.T. CV (%)
contenir des anticorps humains anti-souris (HAMA). De tels Contrôle bas 120 0.97 0.017 1.7 0.054 5.6
échantillons peuvent donner des résultats faussement élevés ou Contrôle moyen 120 1.74 0.031 1.8 0.088 5.0
abaissés lorsqu'ils sont analysés avec des kits de dosage tels Contrôle haut 119 3.42 0.041 1.2 0.148 4.3
qu'Alinity i Homocysteine qui utilisent des anticorps monoclonaux Panel 1 120 0.65 0.016 2.5 0.039 6.1
de souris. Pour établir un diagnostic, de plus amples informations
Panel 2 120 1.44 0.026 1.8 0.062 4.3
peuvent être nécessaires.28, 29
Panel 3 120 2.31 0.034 1.5 0.101 4.4
• Les anticorps hétérophiles présents dans les échantillons
Panel 4 120 4.96 0.067 1.3 0.215 4.3
humains peuvent réagir avec les immunoglobulines des
Panel 5 120 5.68 0.110 1.9 0.256 4.5
réactifs, interférant avec les dosages immunologiques in vitro.30
Les patients régulièrement en contact avec des animaux ou a Inclut la variabilité intra-série, inter‑séries et inter-jours.
des produits contenant du sérum d'origine animale peuvent
Limites de mesure basses
être sujets à cette interférence et fournir de ce fait des
Une étude a été menée sur la base du document EP17-A2
valeurs anormales. De plus amples informations peuvent être
du CLSI.32 L'analyse a été menée à l'aide de 3 lots d'Alinity i
nécessaires pour établir un diagnostic.
Homocysteine Reagent Kit sur 2 analyseurs respectivement, pendant
• Se référer à la partie PRELEVEMENT ET PREPARATION DES
un minimum de 3 jours. Les valeurs maximales observées de la
ECHANTILLONS POUR L'ANALYSE de cette notice pour de
limite du blanc (LoB), de la limite de détection (LD) et de la limite de
plus amples informations sur les restrictions concernant les
quantification (LQ) sont résumées ci-après.
échantillons.
µmol/L μg/mL
ll
VALEURS ATTENDUES LoBa 0.43 0.06
Cette étude a été réalisée sur l'ARCHITECT i System. LDb 0.62 0.08
Cette partie présente des données de performance indicatives. Les LQc 0.79 0.11
résultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire à l'autre. a La limite du blanc (LoB) représente le 95e percentile
Il est recommandé à chaque laboratoire de déterminer ses propres
de n ≥ 60 répliques d'échantillons zéro analyte.
valeurs de référence en fonction des caractéristiques locales et de b La limite de détection (LD) représente la concentration la plus
la population qu'il dessert.
basse à laquelle l'analyte peut être détecté avec une probabilité
Des échantillons de plasma humain prélevés sur EDTA provenant
de 95 %, basée sur n ≥ 60 répliques d'échantillons présentant un
de 300 sujets apparemment sains ont été évalués avec le dosage
faible niveau d'analyte.
ARCHITECT Homocysteine. Le domaine des valeurs attendues est c La limite de quantification (LQ) a été déterminée à partir
défini par l'intervalle de confiance à 95 % des observations. La
distribution des valeurs est représentée dans le tableau suivant. de n ≥ 60 répliques d'échantillons présentant un niveau faible
d'analyte et est définie comme étant la plus petite concentration
Percentile
pouvant être quantifiée avec un coefficient de variation maximal
Médiane 2.5 % 97.5 % acceptable de 20 %.
Sexe n (μmol/L) (μmol/L) (μmol/L)
Homme 150 9.05 5.46 16.20 Linéarité
Femme 150 7.61 4.44 13.56 Une étude a été menée sur la base du document EP06-A du CLSI.33
Total 300 8.14 5.08 15.39 Ce dosage est linéaire tout au long de l'intervalle de mesure de 1.00
à 50.00 µmol/L (0.14 à 6.76 μg/mL).
ll
CARACTERISTIQUES DES PERFORMANCES Substances à réactivité croisée
Cette partie présente des données de performance indicatives. Les Cette étude a été réalisée sur l'ARCHITECT i System.
résultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire à l'autre.
La spécificité du dosage ARCHITECT Homocysteine a été
Les analyseurs Alinity i et ARCHITECT i System utilisent les mêmes déterminée en étudiant la réactivité croisée des composés dont
réactifs et ratios échantillon/réactif. la structure chimique ou l'utilisation simultanée sont susceptibles
Sauf indication contraire, toutes les études ont été réalisées sur d'interférer avec le dosage ARCHITECT Homocysteine. Une étude
l'analyseur Alinity i. a été menée sur la base du document EP07-A2 du CLSI.34 La
Reproductibilité spécificité du dosage a été déterminée en surchargeant des
Reproductibilité intra-laboratoire échantillons de plasma humain prélevés sur EDTA et présentant des
Une étude a été menée sur la base du document EP05-A2 du valeurs d'homocystéine allant de 4.83 μmol/L à 43.70 μmol/L avec
CLSI.31 L'analyse a été menée à l'aide d'1 lot d'Alinity i Homocysteine des solutions de chacun des composés suivants. Le pourcentage de
Reagent Kit, d'1 lot d'Alinity i Homocysteine Calibrators, d'1 lot réactivité croisée moyen aux concentrations indiquées pour chaque
d'Alinity i Homocysteine Controls et d'1 analyseur. Trois contrôles et composé est indiqué dans le tableau suivant.
5 panels de plasma humain ont été analysés au minimum en double, Réactivité croisée moyenne
2 fois par jour, pendant 20 jours. Composé analysé Concentration (mM) (%)a
S-adénosyl-L-méthionine 0.5 11.78b
Intra-série Intra-laboratoire
(répétabilité) (total)a L-cystéine 100 0.01
Moyenne
Echantillon n (µmol/L) E.T. CV (%) E.T. CV (%) L-cystathionine 0.5 0.30
Contrôle bas 120 7.19 0.121 1.7 0.402 5.6 Adénosine 5.0 0.72
Contrôle moyen 120 12.87 0.234 1.8 0.652 5.1 Glutathion 100 0.003
Contrôle haut 119 25.29 0.305 1.2 1.097 4.3 DL-homocystéine thiolactone 0.25 3.22
Panel 1 120 4.78 0.119 2.5 0.286 6.0 Concentration analysée observée (μmol/L) -
Panel 2 120 10.64 0.197 1.9 0.456 4.3 a Réactivité croisée (%) = concentration de contrôle (μmol/L) x 100
Panel 3 120 17.05 0.249 1.5 0.751 4.4 Concentration du composé (μmol/L)
Panel 4 120 36.72 0.494 1.3 1.587 4.3 b Se référer à la partie LIMITES DE LA METHODE de cette notice.
Panel 5 120 42.01 0.815 1.9 1.894 4.5

6
Interférences 16. Wang X, Qin X, Demirtas H, et al. Efficacy of folic acid
Cette étude a été réalisée sur l'ARCHITECT i System. supplementation in stroke prevention: a meta-analysis. The Lancet
2007;369:1876-1882.
Substances endogènes potentiellement interférentes 17. Seshadri S, Beiser A, Selhub J, et al. Plasma homocysteine as a
Une étude a été menée sur la base du document EP07-A2 du risk factor for dementia and Alzheimer’s disease. N Engl J Med
CLSI.34 Les substances potentiellement interférentes suivantes 2002;346(7):476-483.
ont été ajoutées à des échantillons de plasma prélevés sur EDTA 18. Refsum H, Smith AD, Ueland PM, et al. Facts and recommendations
présentant des taux d'homocystéine à l'intérieur du domaine de about total homocysteine determinations: and expert opinion. Clin
mesure du dosage de 1.00 à 50.00 μmol/L. La récupération moyenne Chem 2004;50(1):3-32.
19. US Department of Labor, Occupational Safety and Health
observée pour les échantillons de plasma prélevés sur EDTA lors de
Administration, 29 CFR Part 1910.1030, Bloodborne pathogens.
ces études était comprise entre 94.4 % et 104.5 %. 20. US Department of Health and Human Services. Biosafety in
Substance potentiellement interférente Concentration Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC:
Bilirubine 20 mg/dL US Government Printing Office; December 2009.
Hémoglobine 1000 mg/dL 21. World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed.
Geneva: World Health Organization; 2004.
Protéines (taux bas) 3 g/dL
22. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Protection
Protéines (taux élevé) 12 g/dL of Laboratory Workers From Occupationally Acquired Infections;
Triglycérides 6000 mg/dL Approved Guideline—Fourth Edition. CLSI Document M29-A4. Wayne,
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d'échan- de Ordonnée Limites de 25. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Statistical Quality
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Alinity i Sérum µmol/L 135 1.00 -0.05 0.97 1.50 à 48.52 Definitions; Approved Guideline—Third Edition. CLSI Document
Homocysteine Sérum μg/mL 135 1.00 0.00 0.97 0.20 à 6.56 C24-A3. Wayne, PA: CLSI; 2006.
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7
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