Les colorations

∆ La coloration de gram

Poser la lame qui doit être colorer sur le support de coloration

Commencer par recouvrir la lame par le violet de gensiane attendre 1 à 2 minutes, rincer et égoutter la
lame .

Colorer par le lugol et laisser agir 1 à 2 minutes rincer et égoutter la lame.

Décoloration (rapide) à l'alcool. Verser gouttes à gouttes l'alcool sur la lame incliné pendant 10 secondes
, rincer et égoutter la lame.

Coloration par la fuchine, laisser agir 1 à 2 minutes rincer et égoutter la lame.

Laisser sécher la lame à l'air et passer à la lecture microscopique à l'objectif x100.

∆ Coloration des lames

Diluer le Giemsa à ⅒ avec l'eau du robinet dans un Laveran

Placer les lames sur un support de coloration

Recouvrir entièrement les de la solution de Giemsa dilué au ⅒ laisser agir 15 à 20 minutes

Rejeter délicatement la coloration et rincer doucement les lames avec de l'eau du robinet.

Égoutter les lames et laisser sécher à l'air avant de passer à lecture microscopique à l'objectif x100.

∆ Coloration au MGG

Fixer les cellules sanguines présentes sur le frottis. Pour cela placer le frottis horizontalement dans une
boîte de coloration et verser 15 à 20 gouttes de colorant May-grünwald de façon à recouvrir totalement
la lame et attendre 3 minutes.

Ajouter autant d'eau distillée que de colorant déposé sur la lame au départ, laisser agir pendant 2
minutes et rincer la lame à l'eau distillée puis égoutter la lame et la poser sur le support de coloration.

Diluer le Giemsa immédiatement avant utilisation, ceci se fait en mettant 9ml d'eau distillée avec 1ml de
Giemsa dans une éprouvette

Verser le contenu dans une boîte de Laveran et mélanger en agitant doucement.Recouvrir le frottis de la
solution de Giemsa fraîchement préparé et laisser agir 15 à 20 minutes. Rincer à l'eau distillée et
égoutter.Laisser la lame sécher à l'air avant l'observation au microscope

Accueil et renseignements

Le patient est correctement reçu et identifié

Le patient est préparé de manière en vue de la collecte des échantillons

La personne qui collecte les échantillons est identifié

L'échantillon est clairement identifié

Le formulaire de demande comporte les informations correctes et claire de la personne ayant demandé
les examens, et le formulaire de demande correspond à l'échantillon.La date et l'heure de la collecte
sont indiqués sur le formulaire de demande

L'échantillon est transporté de manière approprié jusqu'en sale d'analyse et est reçu dans un état
acceptable.

Les données sont dans le registre et ces données correspondent à l'étiquette de l'échantillon.

GS/Rh

Principe Le groupe sanguin ABO est déterminé en fonction de l'absence des antigène Aet B sur les
globules rouges. Le test consiste à déterminer ces antigènes en utilisant les anticorps spécifique.

Matériel

Échantillons : sang prélevé dans le tube EDTA, plaque de verre, micro pipettes et embouts pour la
manipulation des réactifs et l'échantillon

Réactifs : Antigène Anti-A, Anti-B, Anti-AB, Anti-D

Technique

Sur une plaque de verre, nettoyer et déposer côte à côte le sang à tester puis les réactifs Anti-A, Anti-B,
Anti-AB , et Anti-D à l'aide d'une micro pipette

Homogénéiser et animer la plaque d'un mouvement de rotation pour faciliter l'agglutination. Noter
l'apparition d'agglunations dans un délai d'une minute passer à la lecture et l'interprétation .

Interprétation :

Groupe sanguin A : s'interprète à l'apparition d'agglunations en A et en AB et non en B

Groupe sanguin B : s'interprète à l'apparition d'agglunations en B et en AB et non en A

Groupe sanguin AB: s'interprète à l'apparition d'agglunations en A, B et en AB

Groupe sanguin O: s'interprète à l'absence d'agglunations en A, B et AB

La détermination du système rhésus positif s'interprète en présence d'agglunations dans l'Anti-D et le

système rhésus négatif en absence d'agglunations.
Importance : La détermination du groupe sanguin ABO est essentiel pour les transmissions et les
réactions hémolytique.

EXAMENS SÉROLOGIQUE SUR BANDELETTES, CASSETTES ET SUR PLAQUE

∆ Sur bandelettes

Les examens sur bandelettes sont des tests rapides et simples pour détecter diverses substances dans
les échantillons biologiques. Voici une technique générale pour lancer les examens sur bandelettes :

Étapes :

1. Préparation de l'échantillon : Préparez l'échantillon biologique (urine, sang, etc.) selon les instructions
du fabricant.

2. Préparation de la bandelette : Sortez la bandelette de son emballage et assurez-vous qu'elle est

intacte.

3. Application de l'échantillon : Appliquez l'échantillon sur la zone de test de la bandelette, en suivant les
instructions du fabricant à l'aide d'une micro pipette

4. Temps d'incubation: Laissez la bandelette reposer pendant le temps recommandé par le fabricant
pour permettre la réaction chimique.

5. Lecture : Après un temps d'incubation (10 à 15 minutes), lisez les résultats en comparant les couleurs
ou les symboles sur la bandelette avec les instructions du fabricant.

Exemples de tests sur bandelettes :

G-test, HIV, AgHbs,AgHbe,AcHbs,AcHbe,AcHbc, AcHCV, les tests d'Herpes 1 et 2

∆ Sur cassette

Les examens sur cassette sont des tests rapides et simples pour détecter diverses substances dans les
échantillons biologiques. Voici une technique générale pour réaliser les examens sur cassette :

Étapes :

1. Préparation de l'échantillon: Préparez l'échantillon biologique (urine, sang, etc.) selon les instructions
du fabricant.

2. Préparation de la cassette : Sortez la cassette de son emballage et assurez-vous qu'elle est intacte.

3. Application de l'échantillon: Appliquez l'échantillon sur la zone de test de la cassette, en suivant les
instructions du fabricant.

4. Temps d'incubation: Laissez la cassette reposer pendant le temps recommandé par le fabricant pour
permettre la réaction chimique.
5. Lecture: Après le temps d'incubation, lisez les résultats en regardant les lignes ou les symboles qui
apparaissent sur la cassette.

Interprétation des résultats :

1. Résultat positif: Une ligne ou un symbole apparaît dans la zone de test, indiquant la présence de la
substance recherchée.

2. Résultat négatif : Aucune ligne ou symbole n'apparaît dans la zone de test, indiquant l'absence de la
substance recherchée.

Exemples de tests sur cassette :

TDR paludisme

TDR AgHbs, AcHbs, AgHbe, AcHbe, AcHbc, AcHCV

HIV

Sero widal

∆ Sur plaque

Les tests d'agglutination sur plaque sont des tests immunologiques qui permettent de détecter des
substances spécifiques dans un échantillon biologique. Voici une technique générale pour réaliser les
tests d'agglutination sur plaque :

Étapes

1. Préparation de l'échantillon : Préparez l'échantillon biologique (sang, sérum, etc.) selon les
instructions du fabricant.

2. Préparation de la plaque: Sortez la plaque de son emballage et assurez-vous qu'elle est intacte.

3. Application de l'échantillon : Appliquez l'échantillon sur les puits de la plaque, en suivant les
instructions du fabricant.permettre la réaction d'agglutination.

Interprétation des résultats :

Activités menées

Service d'hématologie

GE: La goutte épaisse est une technique de laboratoire utilisée pour détecter les parasites dans le sang,
notamment les plasmodiums responsables du paludisme. Voici une procédure générale pour réaliser
une goutte épaisse :
*Étapes :*

1. *Préparation du matériel* : Préparez les lames de verre, les pipettes et les colorants nécessaires.

2. *Prélèvement de sang* : Prélevez une goutte de sang du patient, généralement au bout du doigt ou
au pli du coude.

3. *Dépôt de la goutte de sang* : Déposez la goutte de sang sur une lame de verre propre et sèche.

4. *Étalement de la goutte de sang* : Étalez la goutte de sang en cercle pour former une couche épaisse.

5. *Séchage* : Laissez la lame sécher à l'air libre ou en utilisant un sèche-cheveux à basse température.

6. *Coloration* : Colorez la lame avec un colorant approprié, tel que le Giemsa ou le Wright.

7. *Examen microscopique* : Examinez la lame au microscope pour détecter les parasites.

TDR paludisme

Le TDR (Test de Diagnostic Rapide) pour le paludisme est une technique de laboratoire utilisée pour
détecter les antigènes du parasite du paludisme dans le sang. Voici une procédure générale pour réaliser
un TDR pour le paludisme :

*Étapes :*

1. *Préparation du matériel* : Préparez le TDR, les lancettes, les pipettes et les échantillons de sang.

2. *Prélèvement de sang* : Prélevez une goutte de sang du patient, généralement au bout du doigt.

3. *Application de la goutte de sang* : Appliquez la goutte de sang sur la zone de test du TDR.

4. *Ajout du tampon* : Ajoutez le tampon fourni avec le TDR pour permettre la réaction.

5. *Attente* : Attendez le temps recommandé par le fabricant pour permettre la réaction.

6. *Lecture* : Lisez les résultats en fonction des lignes ou des symboles qui apparaissent sur le TDR.

*Interprétation des résultats :*

1. *Résultat positif* : La présence de deux lignes ou plus sur le TDR indique la présence d'antigènes du
parasite du paludisme.

2. *Résultat négatif* : La présence d'une seule ligne sur le TDR indique l'absence d'antigènes du parasite
du paludisme.

Frottis sanguin

La réalisation d'un frottis sanguin est une technique de laboratoire utilisée pour examiner les cellules
sanguines et détecter les anomalies. Voici les étapes pour réaliser un frottis sanguin :

*Étapes :*

1. *Préparation du matériel* : Préparez les lames de verre, les pipettes et les colorants nécessaires.

2. *Prélèvement de sang* : Prélevez une petite quantité de sang veineux ou capillaire.

3. *Dépôt du sang* : Déposez une petite goutte de sang sur une lame de verre propre et sèche.

4. *Étalement du sang* : Étalez le sang en une couche fine et uniforme sur la lame en utilisant une autre
lame de verre.

5. *Séchage* : Laissez la lame sécher à l'air libre ou en utilisant un sèche-cheveux à basse température.

6. *Fixation* : Fixez les cellules sur la lame en utilisant un fixateur approprié (par exemple, le méthanol).

7. *Coloration* : Colorez la lame avec un colorant approprié (par exemple, le May-Grünwald-Giemsa)

pour visualiser les cellules sanguines.

8. *Examen microscopique* : Examinez la lame au microscope pour détecter les anomalies cellulaires.

La vitesse de sédimentation

La vitesse de sédimentation (VS) est une technique de laboratoire utilisée pour mesurer la vitesse à
laquelle les globules rouges se déposent dans un tube contenant du sang. Voici les étapes pour réaliser
une vitesse de sédimentation :

*Étapes :*

1. *Préparation du matériel* : Préparez les tubes de sédimentation, les pipettes et les échantillons de
sang.
2. *Prélèvement de sang* : Prélevez un échantillon de sang veineux dans un tube contenant un
anticoagulant.

3. *Préparation du tube de sédimentation* : Remplissez le tube de sédimentation avec le sang

anticoagulé jusqu'à la marque indiquée.

4. *Incubation* : Placez le tube de sédimentation dans un support vertical et laissez-le reposer à

température ambiante pendant une heure.

5. *Lecture* : Après une heure, lisez la hauteur de la colonne de plasma au-dessus des globules rouges.

6. *Calcul* : Calculez la vitesse de sédimentation en fonction de la hauteur de la colonne de plasma.

*Interprétation des résultats :*

1. *Résultat normal* : Une vitesse de sédimentation normale indique l'absence d'inflammation ou

d'infection.

2. *Résultat élevé* : Une vitesse de sédimentation élevée peut indiquer la présence d'une inflammation.

*Importance de la vitesse de sédimentation :*

1. *Diagnostic des maladies inflammatoires* : La vitesse de sédimentation est utilisée pour

diagnostiquer les maladies inflammatoires, telles que l'arthrite rhumatoïde.

2. *Suivi des infections* : La vitesse de sédimentation peut être utilisée pour suivre l'évolution des
infections et l'efficacité des traitements.

Service de immuno-serologie

Le G-test sur bandelettes est une technique de lab oratoire utilisée pour détecter la présence de glucose
dans les échantillons biologiques. Voici les étapes pour réaliser un G-test sur bandelettes :

*Étapes :*
1. *Préparation du matériel* : Préparez les bandelettes de test, les pipettes et les échantillons
biologiques.

2. *Prélèvement de l'échantillon* : Prélevez une petite quantité d'échantillon biologique (sang, urine,
etc.).

3. *Application de l'échantillon* : Appliquez une petite quantité de l'échantillon sur la zone de test de la
bandelette.

4. *Attente* : Attendez le temps recommandé par le fabricant pour permettre la réaction.

5. *Lecture* : Lisez les résultats en fonction de la couleur qui apparaît sur la bandelette.

*Interprétation des résultats :*

1. *Résultat positif* : La présence d'une couleur spécifique sur la bandelette indique la présence de
glucose dans l'échantillon.

2. *Résultat négatif* : L'absence de couleur ou une couleur différente indique l'absence de glucose dans
l'échantillon.

Service de bactériologie

Bandelette urinaire

La bandelette urinaire est une technique de laboratoire utilisée pour détecter les anomalies dans les
urines. Voici les étapes pour réaliser une bandelette urinaire :

*Étapes :*
1. *Préparation du matériel* : Préparez les bandelettes urinaires, les échantillons d'urine et les
instructions du fabricant.

2. *Prélèvement d'urine* : Prélevez un échantillon d'urine frais et propre.

3. *Application de l'urine* : Trempez la bandelette urinaire dans l'échantillon d'urine pendant le temps
recommandé par le fabricant.

4. *Attente* : Attendez le temps recommandé par le fabricant pour permettre la réaction.

5. *Lecture* : Lisez les résultats en fonction des couleurs qui apparaissent sur la bandelette.

*Paramètres mesurés :*

1. *pH* : La bandelette urinaire peut mesurer le pH de l'urine.

2. *Protéines* : La bandelette urinaire peut détecter la présence de protéines dans l'urine.

3. *Glucose* : La bandelette urinaire peut détecter la présence de glucose dans l'urine.

4. *Cétone* : La bandelette urinaire peut détecter la présence de cétone dans l'urine.

5. *Sang* : La bandelette urinaire peut détecter la présence de sang dans l'urine.

*Interprétation des résultats :*

1. *Résultat normal* : Les résultats normaux indiquent l'absence d'anomalies dans l'urine.

2. *Résultat anormal* : Les résultats anormaux peuvent indiquer la présence d'une maladie ou d'une
condition médicale.

Le mycoplasme

*Principe :*
La détection des mycoplasmes est importante pour diagnostiquer les infections causées par ces
bactéries. Les mycoplasmes sont des bactéries qui peuvent causer des infections respiratoires, génitales
et articulaires.

*Matériel :*

1. *Échantillons* : Les échantillons peuvent être du sang, des sécrétions respiratoires, des urines ou des
tissus.

2. *Milieux de culture* : Les milieux de culture spécifiques pour les mycoplasmes sont utilisés pour
cultiver ces bactéries.

3. *Réactifs* : Les réactifs spécifiques pour la détection des mycoplasmes, tels que les anticorps ou les
sondes moléculaires.

1. *Anticorps* : Les anticorps spécifiques contre les mycoplasmes peuvent être utilisés pour détecter ces
bactéries.

3. *Milieux de culture enrichis* : Les milieux de culture enrichis avec des nutriments spécifiques pour les
mycoplasmes.

Prélèvement

*Principe :*

Le prélèvement de sang est une technique médicale utilisée pour collecter des échantillons de sang pour
des analyses de laboratoire. Le sang est prélevé à partir d'une veine, généralement dans le pli du coude,
à l'aide d'une aiguille et d'un tube de prélèvement.

*Matériel technique :*

1. *Aiguille stérile* : Une aiguille stérile est utilisée pour percer la peau et accéder à la veine.
2. *Tube de prélèvement* : Un tube de prélèvement est utilisé pour collecter le sang. Les tubes peuvent
contenir des anticoagulants ou des additifs spécifiques pour les analyses requises.

3. *Seringue* : Une seringue peut être utilisée pour aspirer le sang dans le tube de prélèvement.

4. *Gants stériles* : Les gants stériles sont utilisés pour protéger le personnel de santé contre les risques
de contamination.

5. *Compresse stérile* : Une compresse stérile est utilisée pour nettoyer la peau avant le prélèvement.

6. *Antiseptique* : Un antiseptique est utilisé pour désinfecter la peau avant le prélèvement.

7. *Pansement* : Un pansement est appliqué sur le site de prélèvement après la procédure pour
protéger la plaie.

*Technique de prélèvement :*

1. *Préparation du patient* : Le patient est préparé pour le prélèvement en lui expliquant la procédure
et en lui demandant de s'asseoir ou de s'allonger confortablement.

2. *Nettoyage de la peau* : La peau est nettoyée avec un antiseptique et une compresse stérile.

3. *Ponction veineuse* : L'aiguille est insérée dans la veine et le sang est collecté dans le tube de
prélèvement.

4. *Retrait de l'aiguille* : L'aiguille est retirée et un pansement est appliqué sur le site de prélèvement.

Glycémie à jeun

*Principe :*

La glycémie à jeun est une mesure de la concentration de glucose dans le sang après une période de
jeûne. Elle est utilisée pour diagnostiquer et surveiller le diabète.

*Interprétation des résultats :*

1. *Glycémie normale* : Une glycémie à jeun normale est généralement inférieure à 1,10 g/L (6,1
mmol/L).

2. *Glycémie élevée* : Une glycémie à jeun élevée peut indiquer un diabète ou une intolérance au
glucose.
CRP

*Principe :*

La CRP (Protéine C-réactive) est une protéine qui est produite par le foie en réponse à l'inflammation. Le
test de CRP est utilisé pour détecter les niveaux de CRP dans le sang, ce qui peut aider à diagnostiquer et
à suivre les maladies inflammatoires.

*Matériel :*

1. *Échantillon de sang* : Un échantillon de sang est nécessaire pour réaliser le test de CRP.

2. *Plaque de microtitration* : Une plaque de microtitration est utilisée pour réaliser le test de CRP.

3. *Réactifs* : Les réactifs spécifiques pour la CRP sont nécessaires pour réaliser le test.

*Réactifs :*

1. *Anticorps anti-CRP* : Les anticorps anti-CRP sont utilisés pour détecter la CRP dans l'échantillon de
sang.

2. *Particules de latex recouvertes d'anticorps anti-CRP* : Les particules de latex recouvertes d'anticorps
anti-CRP sont utilisées pour détecter la CRP dans l'échantillon de sang.

*Technique :*

1. *Ajouter l'échantillon de sang* : L'échantillon de sang est ajouté à la plaque de microtitration.

2. *Ajouter les particules de latex* : Les particules de latex recouvertes d'anticorps anti-CRP sont
ajoutées à la plaque de microtitration.

3.

4. *Lire les résultats* : Les résultats sont lus en fonction de l'agglutination des particules de latex.
*Interprétation des résultats :*

1. *Résultat positif* : L'agglutination des particules de latex indique une concentration élevée de CRP
dans l'échantillon de sang.

2. *Résultat négatif* : L'absence d'agglutination indique une concentration normale de CRP dans
l'échantillon de sang.

ASLO

*Principe :*

L'ASLO (Antistreptolysine O) est un test utilisé pour détecter les anticorps contre la streptolysine O, une
enzyme produite par les streptocoques du groupe A. Le test est utilisé pour diagnostiquer les infections
streptococciques et suivre l'efficacité du traitement.

*Matériel :*

1. *Plaques de microtitration* : Les plaques de microtitration sont utilisées pour réaliser le test d'ASLO.

2. *Échantillons de sang* : Les échantillons de sang sont nécessaires pour réaliser le test.

3. *Réactifs* : Les réactifs spécifiques pour l'ASLO sont nécessaires pour réaliser le test.

*Réactifs :*

1. *Antigène streptolysine O* : L'antigène streptolysine O est utilisé pour détecter les anticorps contre la
streptolysine O.

2. *Particules de latex recouvertes d'antigène* : Les particules de latex recouvertes d'antigène

streptolysine O sont utilisées pour détecter les anticorps.

*Technique :*

1. *Préparation de l'échantillon* : L'échantillon de sang est préparé pour le test.

2. *Ajout de l'antigène* : L'antigène streptolysine O est ajouté à la plaque de microtitration.

3. *Ajout de l'échantillon* : L'échantillon de sang est ajouté à la plaque de microtitration.

4.

5. *Lecture* : Les résultats sont lus en fonction de l'agglutination des particules de latex.

*Interprétation des résultats :*

1. *Résultat positif* : Agglutination des particules de latex, indiquant une concentration élevée
d'anticorps contre la streptolysine O.

2. *Résultat négatif* : Absence d'agglutination, indiquant une concentration normale d'anticorps contre
la streptolysine O.

Vitesse de sédimentation

*Principe :*

La vitesse de sédimentation (VS) est un test de laboratoire qui mesure la vitesse à laquelle les globules
rouges se déposent dans un tube contenant du sang. Ce test est utilisé pour détecter les inflammations
et les infections dans l'organisme.

1. *Sang anticoagulé* : Un échantillon de sang anticoagulé est utilisé pour le test.

2. *Tube de sédimentation* : Le sang est placé dans un tube de sédimentation gradué.

3. *Sédimentation* : Les globules rouges se déposent au fond du tube sous l'effet de la gravité.

4. *Mesure de la vitesse* : La vitesse de sédimentation est mesurée en mm/h en lisant la hauteur de la

colonne de plasma au-dessus des globules rouges après une heure.

*Interprétation des résultats :*

1. *Résultat normal* : Une vitesse de sédimentation normale indique l'absence d'inflammation ou

d'infection.
2. *Résultat élevé* : Une vitesse de sédimentation élevée peut indiquer la présence d'une inflammation
ou d'une infection.