SPECTROPHOTOMÉTRIE

D’ABSORPTION ATOMIQUE

• UNIVERSITÉ D’ALGER 1
• FACULTÉ DE PHARMACIE –DEPARTEMENT DE PHARMACIE
• LABORATOIRE DE BIOPHYSIQUE PHARMACEUTIQUE
• 2 EME ANNÉE PHARMACIE
• ANNÉE UNIVERSITAIRE 2021-2022
PLAN DU COURS

I. Principe de base
II. Raie de résonance
III. Spectre d’absorption atomique et émission
atomique
IV. Répartition d’une population de molécules sur
les divers niveaux d’énergie
V. Principe de fonctionnement
VI. Appareillage
VII. Applications
 I. Principe de base :
Lorsqu’un atome à l’état libre est porté à haute
température (flamme, four, plasma,) et/ou irradié
par une source lumineuse proche du domaine
UV/visible Généralement seuls les
électrons externes de
l'atome sont concernés
Ses électrons périphérique passent de l’état
fondamental

ce transfert il réémet cette énergie sous

électronique s’opère Transition forme d’un rayonnement
avec une absorption électronique possédant une longueur
d’énergie d’onde très précise soit une
raie lumineuse.

vers une orbitale externe d’un

niveau énergétique supérieur=
état excité
 II. Raie de résonance

• Au cours de l’excitation plusieurs électrons des couches périphériques sont

concernés par ce phénomène il en résulte une émission de plusieurs
radiations (faisceau polychromatique) parmi ces radiations il y en a une qui
correspond au passage de l’électron de son état fondamental au niveau
immédiatement supérieur le retour à l’état fondamental va se traduire par
l’émission de la raie de résonance.

• Raie de résonance qui est la raie la plus intense et probable, la moins

énergétique et la plus utilisée pour le dosage quantitatif car c’est la raie la
plus sensible.
III. Spectre d’absorption atomique et émission atomique :
• Règle de Kirchhoff :
« Un corps soumit à certaines conditions d’excitation, ne peut émettre que les radiations
qu’il est susceptible d’absorber dans les mêmes conditions » Expérience de
renversement des raies de Kirchhoff.
Les 3 expériences de Kirchhoff permettent de démontrer les principes de l'absorption et
de l'émission atomique.

•En faisant passer à travers un prisme

une lumière polychromatique on obtient
un spectre continu.
.
•En remplaçant la lumière polychromatique par
un bec Bunsen, dans lequel brûle un sel
métallique, on voit apparaître les raies
brillantes qui caractérise l'élément.
• On obtient donc le spectre d'émission de cet
élément.
III. Spectre d’absorption atomique et émission atomique :
➢ Règle de Kirchhoff :

•En combinant les deux expériences on obtient le spectre d'absorption du

sel métallique. On voit donc apparaître la même chose que dans la première
expérience mis à part qu'aux endroits où on voyait apparaître les raies
d'émissions de la seconde expérience
• On remarque des raies sombres.

.
III. Spectre d’absorption atomique et émission atomique :

Spectre d’absorption Le spectre d'émission

Il en résulte un spectre de raies Il en résulte un spectre de raies claires sur fond noir
noires sur fond clair (Spectre (Spectre d’émission).
d’absorption).
IV. Répartition d’une population de molécules
sur les divers niveaux d’énergie
Loi de distribution de Maxwell-Boltzmann

Ni / N0 = (gi / g0) e-(Ei-E0 / kT)

Ni : nombre de particules sur l'état excité i
N0 : nombre de particules sur l'état fondamental 0
gi et g0 : dégénérescence des états i et 0
respectivement
Ei et E0 : énergie des états i et 0 respectivement
k : constante de Boltzmann (1,38.10-23 J.K-1)
T : température en Kelvin
 IV. Répartition d’une population de molécules
sur les divers niveaux d’énergie
à T ambiante
Selon la relation de Boltzmann
Conséquence
électronique: seul le niveau
fondamental est peuplé

vibrationnel: niveau vibrationnel

fondamental peuplé par plus de 90
% des molécules, quelques % sur le
premier niveau excité

rotationnel: un certain nombre de

niveaux rotationnels largement
peuplés
V. Principe de fonctionnement :

• La spectrométrie d’absorption atomique est une méthode

d'analyse élémentaire qualitative et / ou quantitative basée
sur le phénomène d’absorption du rayonnement
électromagnétique UV visible par les vapeurs atomique dans
un domaine énergétique de l’ordre de transition électronique
• Basée sur l’atomisation de notre échantillon qui une fois les
atomes soumise à une onde électromagnétique absorbe le
rayonnement spécifique cette absorbance est proportielle à
la quantité d’atome de l’ élément à doser .
VI. Principe de fonctionnement :
VI. Appareillage :
1. Une source de rayonnement spécifique de l’élément à doser :
 1. Une source de rayonnement spécifique de l’élément à doser :
Émet la raie de résonance de l’élément à doser cette lampe contient
l’élément à doser.
a) Lampe à cathode creuse :
- Ces derniers vont alors émettent un
Mise sous tension de la lampe
rayonnement intense dirigé vers la
- ionisation des atomes d’argon
flamme qu’il traverse
qui vont venir percuter la
longitudinalement
cathode provoquant l’excitation
- EXCITATION des atomes de
des atomes de celle-ci
l’échantillon

- La cathode est constituée de

l’élément à doser ou d’un alliage - Remplie d’argon sous faible pression et
(utilisable pour pls éléments) comporte 2 électrodes.
 b) Lampes à décharge sans électrode EDL :

- Ampoule en quartz contenant un sel métallique

- Soumise à un champ électromagnétique induit par une
bobine d’induction peuvent emmètre leur radiation
caractéristique
- Permet de diminuer la largeur des raies et augmente
l’intensité
- Surtout utilisée pour les métalloïdes tels que l’As ou le Se
 2. Atomiseur :
b) Atomisation par nébulisation dans une flamme

Spectrométrie d’absorption atomique en flamme (SAAF)

Pulvérise la solution à analyser en un aérosol

constitué de fines gouttelettes

La flamme air acétylène est la plus répandue et permet de réaliser le dosage de

nombreux éléments. Sa température est de 2500°C environ
2. Atomiseur :
b) Atomisation électrothermique (four)

Spectrométrie d’absorption atomique électrothermique

• Le four doit produire une température suffisante pour atomiser l’élément à doser,
actuellement on utilise de plus en plus le four, ce procédé est dit flammless .
 2. Atomiseur :
b) Atomisation électrothermique (four)

-Tous les fours sont revêtus d’une couche de carbone pyrolytique dont la structure
cristalline rend le four moins poreux et plus résistant à l’usure.

-Le four est un cylindre creux en graphite de 2 à 3 cm de long et de 0,5 cm de diamètre,

muni d’un orifice sur le dessus pour l’introduction de l’échantillon.

-Certains fours comportent en plus une plate-forme dans le four, pour recevoir l’échantillon
(sinon l’échantillon est directement déposé sur les paroi du four).
 3. Monochromateur :
Sert à isoler la raie de résonance et à éliminer les autres
raies émises par la lampe et les substances atomisées.
 • Modulateur:
• Un disque divisé en secteur alternativement transparents et opaques et
tournant dans un plan perpendiculaire au faisceau lumineux d’intensité
constante en faisceau alternatif.
• le système de détection n’amplifiera que la lumière présentant ce système
alternatif; les raies émises par la flamme ne seront pas amplifiées.

• La raie de résonance émise par la source est individualisé de celle émise dans
la flamme ou le four par un modulateur il suffit que le système de détection
soit accordé en fréquence avec la modulation pour que seule soit prise en
considération pour la mesure finale l’intensité lumineuse de la radiation
modulé
 4. Modulateur:

2 2

Partie pleine

• Lorsque le faisceau frappe les parties pleines du modulateur seules

l’émission parasité est enregistrée lorsqu'il ne les frappe pas il traverse et
l’absorbance globale (analyse +flamme)est mesurée ; par différence on
obtient l’absorbance propre du métal à doser
5. Détecteur :

-Un photomultiplicateur qui permet de transformer l’énergie lumineuse en

courant électrique
 VII. Applications :

• En toxicologie : Dosage du plomb (Pb) ou du mercure (Hg).

• En Psychiatrie : Dosage du lithium (Li)
• Dans le domaine pharmaceutique on peut citer ;
- Dosage du zinc dans les préparations d`insuline ou d`oxyde de zinc.
- Dosage du cobalt dans la Vit B12.
- Dosage du mercure dans les antiseptiques organomercuriels.
- Dosage de l`Al et de Mg dans les pansements gastriques.
SPECTROPHOTOMÉTRIE D’ÉMISSION
ATOMIQUE

• UNIVERSITÉ D’ALGER 1
• FACULTÉ DE MEDECINE –DEPARTEMENT DE
PHARMACIE
• LABORATOIRE DE BIOPHYSIQUE PHARMACEUTIQUE
• 2 EME ANNÉE PHARMACIE
• ANNÉE UNIVERSITAIRE 2019-2020
PLAN DU COURS

I. Principe de l’appareillage
II. Appareillage
III. Applications
I. Principe de l’appareillage :
Flamme sert à atomiser l’échantillon
Raie de résonance
λ0
N0
N
Nébulisateur
λ0, λ 1 ,λ 2 ,λ 3 … Détecteur

Monochromateur
Echantillon liquide

Nébulisateur : permet d’avoir des gouttelettes de liquide qui seront

facilement transformé à l’état gaz au niveau de la flamme.
I. Principe de l’appareillage :

• Une flamme produit par un bruleur alimenté par un gaz

combustible, un nébuliseur fait passer la solution à doser
dans la flamme sous forme de gouttelettes.

• Les éléments à doser porter à haute température émettent

une lumière qui colore la flamme (en jaune pour le Na, rouge
pour le K ) cette lumière est sélectionnée par un filtre ne
laissant passer que la radiation caractéristique de l’élément à
doser et son intensité est mesurée par une cellule
photoélectrique.

• On mesure l’intensité des radiations émises par la très faible

fraction d’atomes passés à l’état excité.
 II. Appareillage:
A/ Sources d’excitations :

1/ Excitation par la flamme :

 On désigne par spectrométrie de flamme, les techniques utilisant comme source
d’excitation la combustion de gaz telle que Air/Propane ou Air/Acétylène.

 Ces flammesdonnentdes températures comprises entre 1500°C

et 3000 °C leur énergie reste faible; par cette méthode on dose les
métaux alcalins Na, K, Ca, Li

2/ Excitation par l’arc électrique:

L’arc électrique est obtenu par le passage d’un courant de plusieurs ampères
sous un potentiel de plusieurs centaines de volts ; l’arc donne des
températures plus élevées comprises entre 2000°C – 8000°C
 3/ EXCITATION À L’ÉTINCELLE ÉLECTRIQUE :

L’étincelle est une décharge entre 2 électrodes reliées sous haute

tension ( 25 à 45 K volts ) ; l’énergie fourni est beaucoup plus forte .

B/ Monochromateur

Le filtre permet d’isoler la raie de résonance dont l’intensité est

mesurée directement par le détecteur le dosage se fera à l’aide d’une
solution de référence du même élément à doser.
III. Applications :

Les métaux alcalins donnant des flammes colorées, sont facilement

dosés en émission. On peut donc utiliser l'émission de flamme en
analyse minérale et en biologie pour :
- doser le lithium, le sodium et le potassium (ionogramme) et également
certains alcalino-terreux (Ba).