TD électrophysiologie (1)

Exercice n° 1 : calcul du potentiel d’équilibre d’u n ion

On considère deux compartiments A et B séparés par une membrane perméable au K+. Les
concentrations de K+ dans les compartiments A et B sont respectivement 0,1 M et 0,01 M.

a) Calculer la différence de potentiel EA – EB pour laquelle l’ion K+ est à l’équilibre.

b) Pour cette différence de potentiel, quelle est la valeur du flux net de K+ ?

Exercice n° 2 : flux d'ion à travers une membrane

On considère 2 compartiments A et B séparés par une membrane perméable contenant HCO3- aux
concentrations de 1 M et 0,1 M, respectivement. La différence de potentiel entre A et B est EA – EB =
+ 100 mV.

EA – EB = + 100 mV

a) L’ion HCO3- est-il à l’équilibre ? Satisfait-il à l’équation de Nernst ?

b) Si l’ion n’est pas à l’équilibre, dans quel sens la force électrochimique va-t-elle le faire migrer ?

Exercice n° 3 : équilibre de Donnan

On considère 2 compartiments A et B, de volume constant, séparés par une membrane perméables aux
ions K+ et Cl-, mais imperméable aux ions Y-. Les concentrations ioniques sont les suivantes :
compartiment A : [K+]A = [Y-]A = 0,1 M
compartiment B : [K+]B = [Cl-]B = 0,1 M

a) En quoi la membrane séparant A et B est-elle une membrane de Donnan ? Que décrit l’équation de
Gibbs-Donnan ?

b) Les ions sont-ils à l’équilibre ?

c) À l’équilibre, quelles seront les concentrations des différents ions dans chaque compartiments ?
Quelle sera la différence de potentiel entre A et B ?

Exercice n° 4 : différence de concentration ionique et potentiel

On considère 2 compartiments A et B séparés par une membrane et contenant du potassium, du

sodium et du chlore aux concentrations indiquées.

a) premier cas : la membrane n’est perméable qu’à l’ion potassium. Le potassium est-il à l’équilibre ?
Sinon, dans quel sens se fera le flux de K+ ? Quel effet ce flux aura-t-il sur le potentiel de part et
d’autre de la membrane ? À quelle valeur le potentiel se stabilisera-t-il ?

b) deuxième cas : la membrane n’est perméable qu’à l’ion sodium. Le sodium est-il à l’équilibre ?
Sinon, dans quel sens se fera le flux de Na+ ? Quel effet ce flux aura-t-il sur le potentiel de part et
d’autre de la membrane ? À quelle valeur le potentiel se stabilisera-t-il ?

c) troisième cas : la membrane est également perméable à K+ et à Na+. À quelle valeur le potentiel se
stabilisera-t-il ? Pour cette valeur de potentiel, et ces concentrations, K+ et Na+ seront-ils à l’équilibre
?

d) que peut-on en conclure sur la participation des ions à l’établissement d’un potentiel
transmembraire ?

Exercice n° 5 : potentiel de membrane – équation de Goldman-Hodgkin-Katz (GHK)

Les concentrations ioniques intracellulaire et extracellulaire d’un axone de calmar sont les suivantes
(en mM) :

Na+ K+ Cl-
extracellulaire 460 10 540
intracellulaire 50 400 40
Eeq (mV) +58 -96 -68
perméabilité P 0,05 1 0,45

a) Qu’est-ce l’équation de GHK ? Que permet-elle de calculer ? Si l’ion Cl- est à l’équilibre
électrochimique, quelle est sa participation au potentiel de membrane ? Comment peut-on alors
simplifier l’équation de GHK ?

b) Calculez le potentiel de membrane de l’axone de calmar (on rappelle que, par convention, le
potentiel de membrane Em est le potentiel intracellulaire moins le potentiel extracellulaire (Em = Ei –
Ee)).
c) L’ouverture de canaux sodiques augmente la perméabilité au sodium ; PNa = 20. Quelle est alors la
valeur du potentiel de membrane ?

d) L’ouverture de canaux potassiques augmente considérablement la perméabilité au potassium. La

perméabilité au sodium et au chlore devient négligeable par rapport à la perméabilité au potassium.
Vers quelle valeur va alors tendre le potentiel de membrane ?

Exercice n° 6 : potentiel de membrane – équation de conductance

Les concentrations ioniques intracellulaire et extracellulaire du muscle sartorius de la grenouille sont

les suivantes :

Na+ K+ Cl-
extracellulaire 120 4 120
intracellulaire 12 120 4
Eeq (mV) +60 -89 -89
conductance relative 0,05 0,5 0,45

a) Donner, pour chaque ion, la formule donnant l’intensité du courant dû à cet ion en fonction de la
conductance membranaire pour cet ion, de son potentiel d’équilibre et du potentiel membranaire Em.

b) Sachant qu’au repos le courant global – somme de l’ensemble des courants portés par chaque ion –
est nul, déterminer la potentiel membranaire de repos Em du muscle étudié.

c) Quelle va être la conséquence de l’activation de canaux Na2+ sur les conductances relatives ?
Comment va varier le potentiel de membrane ?

Exercice n° 7 : conductance d’un canal unitaire

En utilisant la technique du patch-clamp (configuration patch excisé), on étudie une portion de
membrane plasmique ne contenant qu’un seul canal sodique. Les concentrations en sodium
intrapipette et extrapipette sont respectivement de 120 mM et 10 mM.

Le courant mesuré lorsque le potentiel est maintenu à –40 mV est, en valeur absolue, de 2. 10-12 A.

a) Calculez de potentiel d’équilibre pour l’ion Na+.

b) Quelle est la conductance unitaire du canal ?

c) quel est le signe du courant observé ? (par convention, un courant entrant est négatif, un courant
sortant est positif)

question subsidiaire:

d) quel est le nombre d’ions qui traversent le canal en 1 msec ?

1 A = 1C. sec-1
charge élémentaire de l’électron e = 1,6 10-19 C

Exercice n° 8 : détermination du potentiel d’invers ion d’un courant membranaire

En utilisant la technique du patch-clamp (configuration cellule entière), on impose à la membrane

plasmique un potentiel de –80 mV. On effectue alors des sauts de potentiel de 5 ms de 20 mV jusqu’à
+ 80 mV. On enregistre la valeur maximale du courant membranaire observé pour chaque saut de
potentiel.

Les valeurs obtenues sont les suivantes :

Em (mV) -80 -60 -40 -20 0 +20 +40 +60 +80

I (µA) 0 -10 -45 -60 -70 -56 -35 -5 +25

a) Tracez la courbe I-V. Déterminer le potentiel d’inversion du courant.

b) Les concentrations intracellulaire et extracellulaire en sodium de la cellule sont les suivantes : [Na+]i
= 10 mM [Na+]e = 130 mM.

Calculez le potentiel d’équilibre du sodium. Que peut-on dire de la nature du courant étudié?
TD électrophysiologie (1) - réponses

Corrigé de l'exercice n° 1

a) Calculer la différence de potentiel EA – EB pour laquelle l’ion K+ est à l’équilibre.

Le mouvement d’un ion à travers une membrane perméable est dû :

Au potentiel chimique (force due à la différence de concentration de part et d’autre de la

membrane) ;

Au potentiel électrique (force due à la différence de potentiel de part et d’autre de la

membrane).

Le potentiel électrochimique d’un ion X de valence z est donné par la formule :

Dµ (Xz) = µ B(Xz) - µ A(Xz) = RTln ([Xz]B/[Xz]A) + zF(EB – EA)

À l’équilibre électrochimique, la différence de potentiel électrochimique est nulle. La force due à la

différence de potentiel s’oppose exactement à la force due à la différence de concentration entre les
deux compartiments A et B séparés par la membrane.

La valeur de la différence de potentiel à l’équilibre est donnée par l’équation suivante, appelée
équation de Nernst

EB – EA = - (RT/zF)ln ([Xz]B/[Xz]A)

Pour une température de 29°C,

EB – EA = - (60/z)log ([Xz]B/[Xz]A) (mV).

(Pour calculer la valeur de RT/F, voir Constantes)

L’ion K+ à l’équilibre satisfait à l’équation de Nernst :

EA – EB = - (60/z)log ([K+]A/[ K+]B) (mV)

EA – EB = - (60/)log (0,1/0,01) = -60 log10

EA – EB = - 60 mV

b) Pour cette différence de potentiel, quelle est la valeur du flux net de K+ ?

À l’équilibre, le flux net d’ion est nul.

Corrigé de l'exercice n° 2
a) L’ion HCO3- est-il à l’équilibre ? Satisfait-il à l’équation de Nernst ?
Calculons le potentiel d’équilibre pour l’ion, en utilisant l’équation de Nernst.

(EA – EB)eq = - (60/z)log ([Xz]A/[Xz]B) (mV)

(EA – EB)eq = + (60/)log (1/0,1) = +60 log10

(EA – EB)eq = + 60 mV

(EA – EB)eq est différent de EA – EB. L’ion n’est pas à l’équilibre électrochimique. Il ne satisfait pas à
l’équation de Nersnt.

b) Si l’ion n’est pas à l’équilibre, dans quel sens la force électrochimique va-t-elle le faire migrer ?

Le mouvement de l’ion dépend de la force électrochimique à laquelle il est soumis. La diffusion se

fera dans le sens pour lequel la différence de potentiel électrochimique sera négative (transformation
spontanée).

Le potentiel électrochimique d’un ion X de valence z est donné par la formule :

∆µ (Xz) = µ A(Xz) - µ B(Xz) = RTln ([Xz]A/[Xz]B) + zF(EA – EB)

À l’équilibre, le potentiel électrochimique est nul.

0 = ∆µ (Xz) = µ A(Xz) - µ B(Xz) = RTln ([Xz]A/[Xz]B) + zF(EA – EB)eq

Si ∆µ (Xz) est négatif, alors :

RTln ([Xz]A/[Xz]B) + zF(EA – EB) < RTln ([Xz]A/[Xz]B) + zF(EA – EB)eq

Donc : z(EA – EB) < z(EA – EB)eq

Si z(EA – EB) < z(EA – EB)eq, l’ion diffusera de B vers A

Si z(EA – EB) > z(EA – EB)eq, l’ion diffusera de A vers B

(EA – EB)eq = + 60 mV z(EA – EB)eq = - 60 mV

(EA – EB) = + 100 mV z(EA – EB) = - 100 mV

z(EA – EB) < z(EA – EB)eq ; l’ion diffusera de B vers A

Corrigé de l'exercice n° 3
a) En quoi la membrane séparant A et B est-elle une membrane de Donnan ?

On appelle " membrane de Donnan " une membrane perméable à certaines particules chargées et pas à
d’autres. C’est le cas ici, puisque la membrane est perméable à K+ et à Cl-, mais pas à Y-.

Que décrit l’équation de Gibbs-Donnan ?

L’équation de Gibbs-Donnan décrit l’état d’équilibre de chaque paire d’ions monovalents de part et
d’autre d’une membrane de Donnan.
b) Les ions sont-ils à l’équilibre ?

Au départ, l’ion Cl- n’est pas à l’équilibre, étant en excès dans le compartiment B. Le flux de Cl- va
aller de B vers A. Ce flux de charges négatives va créer une différence de potentiel négative ((EA –
EB)<0), ce qui va provoquer un flux de K+ également de B vers A.

c) À l’équilibre, quelles seront les concentrations des différents ions dans chaque compartiment ?

À l’équilibre, K+ et Cl- satisfont à l’équation de Gibbs-Donnan :

[K+]A [Cl-]A = [K+]B [Cl-]B (1)

L’électroneutralité de chaque compartiment induit par ailleurs que :
[K+]A = [Cl-]A + [Y-]A (2) et [K+]B = [Cl-]B (3)
La conservation de la matière induit que :
[K+]A + [K+]B = 0,2 M (4) [Cl-]A + [Cl-]B = 0,1 M (5) [Y-]A = 0,1 M (6)
(1) et (3) donnent : [K ]A[Cl-]A = ([K+]B)2
+

En remplaçant [K+]A et [Cl-]A par leurs équivalents calculés à partir de (4) et (5), on obtient :

(0,2 - [K+]B)(0,1 - [Cl-]B) = ([K+]B)2 d’où :

(0,2 x 0,1) - [K+]B(0,1 +0,2) + ([K+]B)2 = ([K+]B)2

(0,2 x 0,1) = [K+]B)(0,1 +0,2)

[K+]B = (0,2 x 0,1) /(0,1 +0,2) = 0,2/3 = 0,066 M

[K+]B = 0,066 M ; [Cl-]B = 0,066 M ; [K+]A = 0,133 M ; [Cl-]A = 0,033 M ; [Y-]A = 0,1 M

Quelle sera la différence de potentiel entre A et B ?

K+ et Cl- étant à l’équilibre, ils satisfont à l’équation de Nernst. La différence de potentiel peut donc
être calculée à l’aide de cette équation, à partir de l’un ou l’autre de ces deux ions.

EA – EB = - 60log ([K+]A/[ K+]B) = + 60log ([Cl-]A/[Cl-]B) (mV)

EA – EB = - 60log2

EA – EB = - 18 mV

Corrigé de l'exercice n° 4
a) premier cas : la membrane n’est perméable qu’à l’ion potassium.

Le potassium est-il à l’équilibre ?

Non, car les concentrations en K+ sont différentes dans les 2 compartiments et la différence de
potentiel est nulle.

Sinon, dans quel sens se fera le flux de K+ ?

Dans le sens du gradient de concentration, c’est-à-dire de A vers B.

Quel effet ce flux aura-t-il sur le potentiel de part et d’autre de la membrane ?

Le flux va accumuler des charges positives sur la face B de la membrane, créant ainsi une différence
de potentiel (EA – EB)<0)

À quelle valeur le potentiel se stabilisera-t-il ?

À la valeur du potentiel d’équilibre pour K+, soit EA – EB = – 60 mV.

b) deuxième cas : la membrane n’est perméable qu’à l’ion sodium.

Le sodium est-il à l’équilibre ?

Non, pour les mêmes raisons que K+.

Sinon, dans quel sens se fera le flux de Na+ ?

De B vers A.

Quel effet ce flux aura-t-il sur le potentiel de part et d’autre de la membrane ?

Le flux va accumuler des charges positives sur la face A de la membrane, créant ainsi une différence
de potentiel (EA – EB)>0)

À quelle valeur le potentiel se stabilisera-t-il ?

À la valeur du potentiel d’équilibre pour Na+, soit EA – EB = + 60 mV.

c) troisième cas : la membrane est également perméable à K+ et à Na+.

À quelle valeur le potentiel se stabilisera-t-il ?

À la valeur intermédiaire entre le potentiel d’équilibre pour K+et pour Na+, soit 0 mV.

Pour cette valeur de potentiel, et ces concentrations, K+ et Na+ seront-ils à l’équilibre ?

Non, car le potentiel de membrane est différent des potentiels d’équilibre de chaque ion.

d) que peut-on en conclure sur la participation des ions à l’établissement d’un potentiel
transmembraire ?

Le potentiel de membrane est la moyenne pondérée des potentiels d’équilibre de chaque ion auquel la membrane est
perméable. Plus la membrane est perméable à un ion, plus le poids de cet ion dans l’établissement du potentiel de membrane
sera important.
NB : D’un point de vue électrique, pour chaque ion, le facteur de pondération est la conductance membranaire relative pour
cet ion (le calcul de la valeur du potentiel de membrane à partir des conductances relatives se fait à partir de l’équation de
conductance, traitée dans l’exercice n°6).

Corrigé de l'exercice n° 5
Qu’est-ce l’équation de GHK ? Que permet-elle de calculer ?
L’équation de GHK permet de calculer la valeur du potentiel de membrane en fonction des
concentrations intracellulaires et extracellulaires des ions K+, Na+ et Cl-, et de leur perméabilité, selon
la formule :

Si l’ion Cl- est à l’équilibre électrochimique, quelle est sa participation au potentiel de membrane ?
Comment peut-on alors simplifier l’équation de GHK ?

Si l’ion Cl- est à l’équilibre, distribué passivement de part et d’autre de la membrane, il ne participe
pas au potentiel de membrane (rôle du chlore dans le potentiel de membrane). L’équation de GHK
peut se simplifier ainsi :

Les ions K+ et Na+ ne sont pas à l'équilibre électrochimique ; le maintien du gradient de concentration
de K+ et Na+se fait pas un mécanisme actif.

b) Calculez le potentiel de membrane de l’axone de calmar (on rappelle que, par convention, le
potentiel de membrane Em est le potentiel intracellulaire moins le potentiel extracellulaire (Em = Ei –
Ee)).

Em = -65 mM (Em = -66 mM si on utilise l’équation simplifiée)

c) L’ouverture de canaux sodiques augmente la perméabilité au sodium ; PNa = 20. Quelle est alors la
valeur du potentiel de membrane ?

Em = +45 mM
d) L’ouverture de canaux potassiques augmente considérablement la perméabilité au potassium. La
perméabilité au sodium et au chlore devient négligeable par rapport à la perméabilité au potassium.
Vers quelle valeur va alors tendre le potentiel de membrane ?

Le potentiel de membrane va tendre vers le potentiel d’équilibre pour le potassium, soit – 96 mV.

corrigé de l’exercice n° 6
sommaire
a) Donner, pour chaque ion, la formule donnant l’intensité du courant dû à cet ion en fonction de la
conductance membranaire pour cet ion, de son potentiel d’équilibre et du potentiel membranaire Em.

Pour un ion donné X, l’intensité du courant en fonction de Em est donnée par la loi d’Ohm :

Rx.Ix = (Em – Ex)

où Rx est la résistance à l’ion, Ix le courant porté par cet ion, Ex son potentiel d’équilibre. Si on
exprime l’équation en fonction de la conductance à l’ion gx, on obtient :

Ix = (Em – Ex) gx

b) Sachant qu’au repos le courant global – somme de l’ensemble des courants portés par chaque ion –
est nul, déterminer la potentiel membranaire de repos Em du muscle étudié.

Les courants ioniques à travers la membrane plasmique étant des courants en parallèle, le
courant global I est la somme des courants ioniques.

I = Σ Ix = Σ (Em – Ex) gx

I = Σ E m gx – Σ E x gx

I = E m Σ gx – Σ E x gx

Puisqu’au repos, I = o, on obtient :

0 = Em Σ gx – Σ Ex gx

Σ Ex gx = EmΣ gx

Σ Ex gx )/Σ
Em = (Σ Σ gx Em = Σ Ex (gx /Σ
Σ gx) équation de conductance de corde

où Σ gx est la somme des conductances, et gx /Σ gx la conductance relative de chaque ion.

Le potentiel membranaire est donc égal à la somme des potentiels d’équilibre de chaque ion
multipliés par la conductance relative de cet ion.

Pour le muscle étudié, on obtient donc :

Em = ENa(gNa /Σ gx) + EK(gK /Σ gx) + ECl(gCl /Σ gx)

Em = 60(0,05) - 89(0,5) -89(0,45) mV

 Em = -81,6 mV

c) Quelle va être la conséquence de l’activation de canaux Na2+ sur les conductances relatives ?
Comment va varier le potentiel de membrane ?

L’ouverture de canaux sodium augmente considérablement la conductance relative au sodium. Le

potentiel membranaire va donc se rapprocher du potentiel d’équilibre de l’ion Na+.

Corrigé de l'exercice n° 7
sommaire
a) Calculez de potentiel d’équilibre pour l’ion Na+.

ENa = -60log([Na+]i/[Na+]e) = -60log(10/120) mV

ENa = + 65 mV

b) Quelle est la conductance unitaire du canal ?

L’intensité du courant dépend de la conductance du canal et de la force électrochimique appliquée

selon la loi d’Ohm U = R x I

(la conductance g, exprimée en Siemens (S) étant égale à l’inverse de la résistance R).

La force électromotrice correspond à la différence entre le potentiel membranaire Em et le potentiel

d’équilibre ENa.

(Em - ENa) = I / g g = I /(Em - ENa)

g = 2.10-12 / 105.10-3 g = 19.10-12 S

c) quel est le signe du courant observé ? (par convention, un courant entrant est négatif, un courant
sortant est positif)

On a Em < ENa, donc zEm < zENa Le flux de Na+ va du milieu extracellulaire vers le milieu
intracellulaire. Le flux est entrant (cf. exercice n° 2 b)).

Na+ étant un cation, le flux d’ion et le courant associé sont de même signe. Le courant est un courant
entrant, donc négatif.

Si (Em - ENa) est négatif, le courant est négatif aussi. Si le courant est porté par un cation, le flux d’ion
est entrant. S’il est porté par un anion, le flux d’ion est sortant.

Question subsidiaire:
d) quel est le nombre d’ions qui traversent le canal en 1 msec ?
1 A = 1C. sec-1
charge élémentaire de l’électron e = 1,6 10-19 C
1 A = 1C. sec-1
La charge élémentaire de l’électron étant 1,6 10-19 C, un C correspond à 1/(1,6.10-19) charges
élémentaires. 1 A est donc égal à 0,625.1019 charges élémentaires par seconde, 0,625.1016 charges
élémentaires par milliseconde.

Le courant étant de 2.10-12 A, il correspond à 2 x 0,625.104 charges élémentaires par msec.

Na+ étant monovalent, le passage d’une charge élémentaire à travers le canal correspond au passage
d’un ion.

En une milliseconde, il passe donc 12500 ions à travers un canal.

Corrigé de l'exercice n° 8
a) tracez la courbe I-V. Déterminer le potentiel d’inversion du courant.

Le potentiel d’inversion du courant est de + 65 mV.

b) Les concentrations intracellulaire et extracellulaire en sodium de la cellule sont les suivantes :

[Na+]i = 10 mM [Na+]e = 130 mM.

Calculez le potentiel d’équilibre du sodium. Que peut-on dire de la nature du courant étudié?

Eeq = -60 log(10/130) = + 67 mV.

Le potentiel d’équilibre de l’ion sodium est très proche du potentiel d’inversion du courant étudié. Il
est probable que le courant en question soit un courant sodique.