La transfusion

l’immunohématologie

Pr REGRAGUI Safae
Hématologie clinique
2024 - 20251
Objectifs

• Décrire l’organisation du système transfusionnel national

• Lister les modalités de sélection des donneurs

• Décrire les différents types des produits sanguins

• Décrire les spécificités des 2 groupes sanguins essentiels

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Organisation de la transfusion au Maroc

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Le don de sang

Avant chaque acte transfusionnel il y’a tout un circuit composé de

plusieurs processus :
1. Don de sang
2. Qualification sérologique et immuno-hématologique
3. Préparation / séparation : Plasma , plaquettes et CGR
4. Livraison

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Le don de sang

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Le don de sang

• Volontaire, non rémunéré et anonyme

• Adultes: 18 – 60 ans (65 ans si accord médical)
• 8ml/Kg sans dépasser 500ml/ don
• Hommes: max 5 dons/an (au mois 8 semaines d’intervalle))
• Femmes: max 3 dons/an
• Consultation médical pré-don obligatoire
• Orientation vers: infections transmissibles: Protection du receveur
• Orientation vers: contre indications au don: Protection du donneur
• Durée: 10 min

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Le sélection du donneur

Interrogatoire médical • Antécédents d’hépatite

• Antécédents de transfusion sanguine
• Maladie chronique
• Prise médicamenteuse
• Comportement à risque (drogues, vagabondage sexuel …)

Examens biologiques • Groupage ABO Rh

• Sérologies: Ag Hbs, HIV, HCV, Syphilis
systématiques
• ALAT

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Le sang total

• Le sang total est recueilli directement dans une poche contenant le CPD (Citrate,
Phosphate, Dextrose)
• 350 - 400 ml
• Il peut être conservé pendant 21 jours
• Ce produit n’est plus livré par les centres de transfusion
• Indication rare = l’exsanguino-transfusion (échange de sang chez un nouveau à
risque d’ictère nucléaire)

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 On sépare le PRP du culot
globulaire à l’aide d’un
séparateur stérile.
Le culot est mis de côté =

La séparation : 2 centrifugations concentré globulaire, utilisé

pour les anémies,
hémorragies, etc.

Culot globulaire
1ère
centrifugation : tres dense
temps cours et vitesse faible
Surnageant : Plasma riche en
Obtenir les 3 composants majeurs du sang :
Concentré globulaire (CG) plaquettes PRP
Concentré plaquettaire (CP)
Plasma frais congelé (PFC) Plasma frais congelé (PFC)

Culot plaquettaire
2ème centrifugation :
Fragiles, recueillies délicatement
vitesse élevée et temps long
Surnageant : Plasma pauvre en
plaquettes => congélation = PFC

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La séparation : 2 centrifugations

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La qualification biologique

• Qualification sérologique:
• Recherche de: AgHBs, HIV et HCV et TPHA

• Qualification immuno-hématologique
• Groupage ABO
• Phénotypage RH-Kell
• Hémolysines
• DSAI (dépistage simplifié des agglutinines irrégulières)

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Un don = 3 Produits sanguins labiles (PSL)
CGR (Concentré de Globules Rouges)
1. CGR: (4°C ; 42 jours)
2. UPS: (22°C ; 5 jours / agitation constante) UPS (Unité de Plaquettes Standard)
= Concentré plaquettaire
3. PFC: (-20°C pendant 1 an) 12
 Les produits sanguins
Ce sont les produits dérivés du sang
total (non stabilisés), très sensibles
aux conditions de température et de
conservation.
Ils doivent être utilisés rapidement Don de sang total
après le don car ils ne se conservent
pas longtemps.

Produis sanguins LABILES (PSL) Produits sanguins STABLES

• Concentré de GR • Albumine
• Concentré de PLQ • Immunoglobulines
• Concentré de GB (non utilisés) • Fractions coagulantes
• Plasma

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Les PSL
Les culots globulaires

• Origine : Centrifugation du sang total

• Volume : 150 ml à 180 ml, Ht: 60 à 80%

• Conservation: 42 jours à 4°C

• Posologie = (Hb idéale – Hb réelle) x Poids x 3

• Avantages: Peu de risque de surcharge sauf transfusion massive

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Les PSL
Le plasma frais congelé (PFC)
• Origine: Double centrifugation de sang total
• Conservation: – 30°C durant 1 an.
• Posologie: 10 à 20 cc /Kg
• Indications:
• Déficit héréditaire en facteur de coagulation
• CIVD avec effondrement des facteurs de coagulation
• Echanges plasmatiques

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Les PSL
Concentré Plaquettaire Standard (CPS)

• Origine : Double centrifugation de sang total

• Conservation : 5 jours, en agitation en (20-24°C)

• Posologie = 1 unité / 5 à 10 Kg

• Indication : Thrombopénie sévère d’origine centrale compliquée de

syndrome hémorragique

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 CGR PFC CPS
• Volume : 150 ml à 180 ml • Origine: Double centrifugation de • Conservation : 5 jours, en
• Ht: 60 à 80% sang total agitation en (20-24°C) ++
• Conservation: 42 jours à 4°C • Conservation: – 30°C durant 1 an • Posologie : 1 unité / 5 à 10 Kg
• Posologie : (Hb idéale – Hb réelle) x Poids x 3 • Posologie: 10 à 20 cc /Kg • Indication : Thrombopénie
• Avantages: Peu de risque de surcharge sauf • Indication : échange plasmatique, sévère d’origine centrale,
transfusion massive coagulopathie de consommation, compliquée de saignement
• Indication différée : anémie d’origine déficit constitutionnel en facteurs
centrale, hémoglobinopathies …
• Indication en urgence : anémie mal tolérée

CGR → Hb ↓ → anémie
PFC → Facteurs ↓ → hémorragies / CIVD
CPS → Plaquettes ↓ → purpura / hémorragies muqueuses
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Le don d’aphérèse

Le principe est de procéder à la séparation des produits sanguins et

extraire uniquement le produits désiré selon les étapes suivantes :

• Prise de 2 voies veineuses: prélèvement et retour

• Collecte de sang total

• Sélection du produits désiré par un équipement d’aphérèse:

Plaquettes

• Retour du sang par la voie de retour

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Les PSL
Concentré Plaquettaire d’Aphérèse (CPA)

• Origine : Donneur unique (Cytaphérèse)

• Conservation : 5 j, en agitation

• Posologie : 1 unité

• Indication : Thrombopénie d’origine centrale chez patients

polytransfusés ou immunisés (oncohématologie en particulier)

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 Ce sont des médicaments dérivés
du plasma, stables à long terme,
Les Produits sanguins Stables obtenus par fractionnement du
plasma puis traités pour éliminer
tout risque infectieux.

Albumine Immunoglobulines
Extraction à partir du plasma à 4% ou 20% Polyvalentes
Indications : Hypo-albuminémies (nutritionnelles, Extraction à partir du plasma
insuffisance hépatique, fuite urinaire (Sd néphrotique) ou Indications : déficit de l’immunité humorale
tissulaire (brûlures) congénial ou acquis, pathologie dys-
immunitaire
Facteurs de coagulation
Extraction plasmatique de facteurs par chromatographie et Immunoglobulines
inactivation virale. Spécifiques
Extraction de plasma de donneur possédant des
Actuellement production par génie génétique (Pas de titres élevés d’anticorps spécifiques : Anti-Rh
risque de transmission virale) D; Antitétanique, Anti-hépatite B…
Indications: Déficit acquis ou constitutionnel en facteur de Indication: Prévention ou traitement de la
coagulation maladie ciblée 20
Le groupage sanguin

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Définition des groupes sanguins
• Plus de 250 Ag classés en 35 groupes, définis par l’International Society Blood
Transfusion (ISBT)
• 2 groupes essentiels : ABO et RH
Groupes sanguins glucidiques Groupes sanguins protidiques
Système ABO Système RH (anciennement appelé Rhésus)
Système Lewis Système Kell
Système I Système MNS
Système GLOB Système Duffy
Système P, P1 et Pk Système Kidd
Système Luthéran
Système Diego, Cartwright, Xg, Scianna, Dombrock,
Colton, Landsteiner-Wiener, Chido-Rodgers, Kx,
Gerbich, Cromer, Knops, Indian
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Définition des groupes sanguins
• Les groupes sanguins érythrocytaires sont définis comme des molécules
antigéniques, reconnues par des anticorps spécifiques
• Ils sont génétiquement induites et s’exprimant à la surface du globule rouge.
• Ces déterminants antigéniques peuvent être de nature glucidique ou protéique au
sein de molécules de types glycolipides ou glycoprotéines.
• Si parfois leur fonction à la surface du globule rouge est bien connue, dans la
majorité des cas elle demeure hypothétique.
• L'association du système ABO et du système Rhésus définit les 8 groupes
sanguins : O+, O-, B+, B-, A+, A-, AB+ et AB-

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Le système ABO
• Le système ABO permet de déterminer quatre groupes sanguins selon la présence
ou non de deux antigènes, A et B, à la surface des globules rouges.

• Les humains, selon qu’ils possèdent l’antigène A, l’antigène B, les deux ou aucun
des deux, sont ainsi classés dans le groupe sanguin respectif A, B, AB ou O

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Le système ABO
• Les anticorps anti-A ou anti-B sont des anticorps naturels de type IgM, acquis dès
les premiers jours de vie, en dehors des épisodes transfusionnels ou de la grossesse

• Lorsque les globules rouges n’expriment pas les antigènes A ou B, des anticorps
contre ces antigènes sont produits par l’individu

Si les globules rouges n’ont pas l’antigène A (par exemple,

groupe B ou O), l’organisme produit naturellement des
anticorps anti-A dans le plasma.

25
Le système ABO

Système = par 2 antigènes (A et B) et 2 anticorps ( anti-A et anti-B)

Antigène Anticorps Groupe

A Anti-B A (45%)

B Anti-A B (09%)

O Anti-A et Anti-B O (43%)

AB Absents AB (03%)
26
Le système ABO

ANTIGÈNES ANTICORPS
Distribution ubiquitaire Naturels
Glycolipides ou glycoprotéines Réguliers
IgM agglutinant +++
IgG hémolysant (transitoire)

27
La génétique du système ABO

PHÉNOTYPE GÉNOTYPE

A AA, AO
B BB, BO
O OO
AB AB

28
 L’hérédité du système ABO

Génotype des parents Génotypes des enfants Génotype des parents Génotypes des enfants
OO OO OO AA AA AA
OO AO OO, AO AA BO AB, AO
OO AA AO AA BB AB
OO AB AO, BO AA AB AA, AB
OO BO OO, BO BO BO BB, BO, OO
OO BB BO BO BB BB, BO
AO AO AA,AO, OO BO AB AB, BB, AO, BO
AO AA AA, AO BB BB BB
AO AB AA, AB, AO, BO BB AB AB, BB
AO BO AB, AO, BO, OO AB AB AA, AB, BB
AO BB AB, BO

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Le système Rhésus

• Le système RH (anciennement Rhésus) est l’un des plus polymorphes parmi tous
les systèmes de groupes sanguins

• Son impact clinique est important du fait du haut degré d’immunogénicité de ses
antigènes (l’antigène RhD est le plus immunogène)

• Il doit son nom à un singe d'Asie du Sud-Est, Macaque rhésus (Macaca mulatta),
qui servit d'animal d'expérience à la fin des années 1930 dans les recherches sur le
sang

30
Le système Rhésus : les antigènes
• Les antigènes du système RH sont localisés sur deux protéines :
• la protéine RhD pour l’antigène D (RH1)
• la protéine RhCE pour les antigènes C (RH2) ou c (RH4) et E (RH3) ou e (RH5)
• Leurs poids moléculaires est de 30 kDa
• Elles sont hautement hydrophobes et non glycosylés, comportent 417 aa et
présentent une structure comportant :
D (RH1) → Le plus
• 06 boucles extracellulaires immunogène, ce qui détermine
• 12 segments transmembranaires si une personne est Rh+ (D
• 05 boucles intracytoplasmiques présent) ou Rh− (D absent)

Ces deux protéines sont codées

par des gènes très proches sur
le chromosome 1
31
Le système Rhésus : les anticorps
• Tout anticorps dirigé contre un antigène du système RH doit être considéré comme
ayant le potentiel de générer un accident immunohémolytique transfusionnel et la
maladie hémolytique du fœtus et du nouveau-né (MHFNN)
• De ce fait, la transfusion d’un patient immunisé nécessite l’utilisation de sang
négatif pour l’antigène Rh ciblé par l’anticorps
• Les anticorps anti-Rhc sont les plus dangereux après les anticorps anti-RhD et
souvent impliqués dans des cas de MHFNN sévères, à l’opposé des anticorps anti-
RhC, -RhE et -Rhe, qui en sont rarement à l’origine, ou seulement de cas modérés
Donneur Rh− peut donner à tout le monde (Rh− ou Rh+)
Mais receveur Rh− ne peut recevoir que Rh−, surtout s’il est immunisé.

les anticorps anti-Rh sont des anticorps immunitaire

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Le système Rhésus : les anticorps
• L’immunoprophylaxie anti-RhD mise en œuvre chez toute femme RhD-négative
non immunisée vis-à-vis de cet antigène et porteuse d’un enfant Rh-positif a
permis de réduire l’incidence des MHFNN liées à cet anticorps

• À côté des allo-anticorps, les antigènes Rh apparaissent comme la cible d’auto-

anticorps chauds de classe IgG, pouvant reconnaître une spécificité courante (anti-
Rhe, anti-Rhce, anti-RhD ...)
• De tels autoanticorps chauds ont été observés dans le sérum de patients atteints
d’AHAI Empêcher la formation d’anticorps anti-RhD chez les femmes RhD-négatives enceintes
d’un bébé RhD-positif

Auto-anticorps chauds = anticorps produits par notre propre système immunitaire, qui
attaquent nos propres globules rouges à 37°C (température du corps).
33
 Le système Rhésus

ANTIGÈNES ANTICORPS

# hématies Toujours immuns

Ig G
Polypeptides
Traversent la barrière placentaire
Plusieurs Ag: D, C, c, E, e

Ag D = le plus immunogène et définit le Rh+

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Les phénotypes du système RH
• plus de 150 variants RhD sont classés en fonction de leur phénotype en relation avec
leurs variations moléculaires, issues du développement des techniques de biologie
moléculaire. Ainsi on distingue :
• les RhD-positifs incluant :
• les RhD partiels : résultent de substitutions d’AA localisées dans les boucles extracellulaires,
affectant les conformations tridimensionnelles de ces dernières → changement qualitatif
• les RhD faibles : pas moins de 76 variants RhD faibles sont répertoriés, avec moins de 5000
sites/ GR → changement quantitatif
• les Del : très faible expression (< 200 sites/GR) de l’antigène RhD, détectable uniquement par
la technique d’adsorption et élution d’un anticorps anti-RhD → changement quantitatif
• les RhD-négatifs, qui sont compilés dans une ressource Web intitulée RhesusBase
(http://www.uni-ulm.de/∼fwagner/RH/RB/)

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L’hérédité du système RH

Le cas du rhésus est simple:

• Lorsque les 2 parents sont Rh– → l'enfant sera Rh–

• Dans tous les autres cas, l’enfant sera Rh+ ou Rh –

+ -
+ + - + -
- + - -
36
Le groupage ABO
L’épreuve globulaire
BETH-VINCENT Sérum anti-A Sérum anti-B Groupe

Mise en évidence d’Ag globulaire

A

B
Agglutination des hématies du patient
dans des sérum tests AB

O
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Le groupage ABO
L’épreuve sérique
Hématies Hématies Groupe
SIMONIN test A test B
Mise en évidence d’Ac sériques
B

A
Agglutination des Hématies test dans le
sérum du patient O

AB
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Le groupage RH
L’épreuve globulaire

Mise en évidence d’Ag globulaire Sérum anti-RH Groupe

RH +
Agglutination des hématies du patient
dans le sérum test anti-RH
RH -

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Le groupage ABO-RH
Les règles d’Or = groupage valide

Précautions systématiques pour éviter les erreurs du groupage:

• 2 épreuves (Beth-Vincent et Simonin)

• 2 réactifs provenant de 2 lots différents

• 2 techniciens

• 2 prélèvements espacés de plus de 24h

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Le groupage ABO-RH
Les applications en transfusion
• En règle générale, le patient est transfusé avec des CGR de groupe sanguin
identique (isogroupe).
• En cas de pénurie de CGR de même groupe ABO ou si le patient présente des allo-
anticorps, il est possible de transfuser des CGR ABO compatibles

41
Le groupage ABO-RH
Les applications en transfusion
Pour la transfusion des CGR et des CPS, il faut éviter le contact des
Ag dans le culot avec les Ac naturels du receveur

• Les individus de groupe O- peuvent faire un don à n’importe quel receveur car ils ne
possèdent aucun des antigènes A, B et D. Ils sont appelés « donneurs universels »
• Les individus de groupe AB+ peuvent recevoir les globules de tous les groupes
sanguins car ils ne produisent aucun des anticorps anti-A, B et D. Ils sont appelés
« receveurs universels »

42
Le groupage ABO-RH
Les applications en transfusion
Pour la transfusion des CGR et des CPS, il faut éviter le contact des
Ag dans le culot avec les Ac naturels du receveur
• Les sujets Rh – ne doivent recevoir que des culots Rh –

• Les sujets Rh+ peuvent recevoir des culots Rh+ ou Rh –

• Chez les sujets polytransfusés, il faut tenir comptes des Ag moins immunogènes
(transfusion de CGRs phénotypés)

43
Le groupage ABO-RH
Les applications en transfusion
Pour la transfusion des PFC, il faut éviter le contact des Ag du
receveur avec les Ac naturels dans le culot

• En règle générale, le patient est transfusé avec des PFC isogroupe ABO
• Il n’est pas nécessaire de respecter la compatibilité RhD
• En cas de pénurie, il est possible de transfuser des PFC ABO compatibles

44
Le groupage ABO-RH
Les applications en transfusion
Pour la transfusion des PFC, il faut éviter le contact des Ag du
receveur avec les Ac naturels dans le culot

• Le plasma de donneurs du groupe AB+ convient à tous les receveurs. Ils sont
appelés « donneurs universels de plasma ». En effet, le plasma de ce groupe
sanguin ne contient ni anticorps anti-A, ni anti-B, ni anti-D, en dehors des sujets
immunisés. Il peut donc être transfusé à un patient de groupe A, B, AB ou O.
• les individus O- sont dits « receveurs universels de plasma » puisqu’ils ne
possèdent aucun antigène. Puisque le plasma du sujet O- contient des anticorps
anti-A et anti-B, il ne peut pas être transfusé aux groupes sanguins A, B, et AB.

45
Les applications du groupage en transfusion

Si pas de respect des règles de transfusion → risque d’accident

hémolytique pouvant être MORTEL

La transfusion engage la responsabilité médico-légale des équipes

soignantes

46
Merci pour votre attention

[email protected]

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