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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION

Exercice N° 1 (40 points)

Enoncé
Dans le but de déterminer la teneur en principes actifs X et Y dans un comprimé, on broie 10 comprimés que
l’on met en solution dans 500 mL d’eau distillée pour obtenir la dissolution complète des principes actifs.
(masse molaire de X = 337,3 g/mol et masse molaire de Y = 205,7 g/mol)
Cette solution est diluée au 1/50 avec une solution de tampon pH = 7,0.
On mesure l’absorbance (A) à deux longueurs d’onde : λ1 = 274 nm et λ2 = 324 nm, dans une cuve de 1 cm
d’épaisseur en réglant le zéro d’absorbance avec la solution tampon.
On supposera que l'absorbance des excipients à ces deux longueurs d'onde est nulle.
On obtient les valeurs suivantes en présence de la solution diluée :
à 274 nm : A1 = 0,375 ; à 324 nm : A2 = 0,350

Questions

QUESTION N° 1 :

Calculer les coefficients d’absorption molaire à λ1 et λ2 de X et Y, sachant que les solutions étalons de X et
Y dans la solution tampon présentent, en cuve de 1 cm d’épaisseur, les absorbances suivantes :

Solution étalon à 10 mg.L-1 λ1 λ2

X 0,240 0,000
Y 0,256 0,426

Proposition de réponse

ε = A / (l x C) avec C en mol.L-1
Coefficient d’absorption molaire de X en L.mol-1.cm-1
ε(X,λ1) = 0,24 x (337,3 / 10.10-3 ) = 8095
ε(X,λ2) = 0
Coefficient d’absorption molaire de Y en L.mol-1.cm-1
ε(Y,λ1) = 0,256 x (205,7 / 10.10-3 ) = 5266
ε(Y,λ2) = 0,426 x (205,7 / 10.10-3 ) = 8763

QUESTION N° 2 :

Calculer la concentration de Y en mol.L-1 dans la solution diluée, à partir de l'aborbance à λ2.

Proposition de réponse

CY = Aλ2 / (εY x l ) = 0,350 / 8763 = 3,99 x 10-5 mol.L-1

QUESTION N° 3 :
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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 1 (40 points)

En déduire la concentration de X en mol.L-1 dans la solution diluée, à partir de l'absorbance à λ1.

Proposition de réponse

En considérant l'additivité des absorbances,

Aλ1 = A(X, λ1) + A(Y, λ1) = ε(X, λ1) x l x CX + ε(Y, λ1) x l x CY
CX = [Aλ1 - ε (Y, λ1) x l x CY] / [ε(X, λ1) x l] = [0,375 - 5266 x 3,99.10-5] / 8095
CX = 2,03 x 10-5 mol.L-1

QUESTION N° 4 :

Calculer les quantités (en mg) en X et Y dans un comprimé.

Proposition de réponse

Soit QX la quantité du principe actif X en g dans 1 comprimé

QX = CX x 337,3 x 50 x (500/1000) /10
QX = 17,1 .10-3 g, soit 17,1 mg

Soit QY la quantité du principe actif Y en g dans 1 comprimé

QY = CY x 205,7 x 50 x (500/1000) /10
QY = 20,5.10-3 g, soit 20,5 mg

QUESTION N° 5 :

La quantité théorique pour un comprimé est de 15 mg de principe actif X et de 20 mg de principe actif Y.

La spécification sur les quantités des principes actifs X et Y est de ± 5,0 %.
Conclure sur la conformité de ce lot de comprimés.

Proposition de réponse

Proposition 1 :
La quantité de X doit être comprise entre ± 5,0 % de la valeur nominale, soit [14,25 mg - 15,75 mg].
La quantité de Y doit être comprise entre ± 5,0 % de la valeur nominale, soit [19,0 mg - 21,0 mg].
La quantité de X est hors spécifications et la quantité de Y est dans les spécifications.
Le lot est donc non-conforme.

Proposition 2 :
Er %(X) = 100 x (17,1-15) /15 = 14,0 %
Er %(Y) = 100 x (20,5-20) /20 = 2,5 %

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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 1 (40 points)

La quantité de X est hors spécifications et la quantité de Y est dans les spécifications.

Le lot est donc non-conforme.

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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 2
1 (40 points)

Les deux parties A et B sont indépendantes

Les 2 parties A et B sont indépendantes

Partie A

Enoncé
Pour doser le pyruvate sérique, on le transforme totalement en lactate par réduction par la lactate
déshydrogénase (LDH) en présence de NADH,H+ à pH 7,0.

On introduit dans la cuve d’un spectrophotomètre :

- sérum dilué au 1/10 : 1,3 mL
- solution de NADH,H+ : 0,1 mL
L’absorbance initiale du mélange à 340 nm est de 0,300 pour un trajet optique de 0,5 cm.

On ajoute 0,1 mL de solution de LDH. Après 5 min d’incubation, l'absorbance mesurée en point final est de
0,225.
NB : L'absorbance de la solution de LDH à 340 nm est de 0,000.

Questions

QUESTION N° 1 :

Ecrire la réaction catalysée par la LDH dans ce dosage.

Proposition de réponse

La LDH catalyse la réaction suivante :

Pyruvate + NADH,H+ → Lactate + NAD+
CH3COCOO- + NADH,H+ → CH3CHOHCOO- + NAD+

QUESTION N° 2 :

Quelles sont les conditions à respecter concernant les concentrations en enzyme et en cofacteur dans ce
dosage ?

Proposition de réponse

La concentration en LDH doit être largement excédentaire.

La concentration en NADH,H+ doit être saturante pour l'enzyme (en pratique supérieure à 10 Km).

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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 2
1 (40 points)

QUESTION N° 3 :

Calculer la concentration en acide pyruvique dans le sérum en µmol.L-1 et en mg.L-1.

Données :
Masse molaire de l’acide pyruvique = 88 g.mol-1
Coefficient d'absorbance molaire du NADH,H+ à 340 nm = 6300 L.mol-1.cm-1

Proposition de réponse

Dans les conditions du dosage (point final), le pyruvate est totalement consommé et ce de façon
équimolaire à celle en NADH,H+.
Selon la loi de Beer-Lambert et en tenant compte de la dilution de l'échantillon dans le milieu réactionnel, de
la dilution initiale et des volumes initiaux et finaux :

Absorbance = ε. l. c
ε = coefficient d'absorbance molaire
l = largeur de la cuve
c = concentration

C = (ΔA / ε . l ) x (volume total / volume échantillon) x 10

Absorbance initiale corrigée de l'ajout de 0,1 mL de LDH = 0,300 x (1,4 / 1,5) = 0,280
Absorbance finale = 0,225
A = 0,280 - 0,225 = 0,055

C = (0,055 / 6300 . 0,5) x (1,5 / 1,3) . 10 = 200 x 10-6 mol/L soit 200 µmol.L-1
soit 200 x 88 x 10-3 = 17,6 mg/L-1

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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 2
1 (40 points)

Les deux parties A et B sont indépendantes

Partie B

Enoncé
Les caractéristiques cinétiques d’une enzyme en présence de son substrat dans des conditions opératoires
définies sont les suivantes :
Km = 2,50 x 10-5 mol.L-1
kcat = 1,50 x 103 min-1

On étudie successivement l’activité de cette enzyme en présence de deux effecteurs A et B et dans les
mêmes conditions opératoires.

Les caractéristiques cinétiques de l’enzyme en présence de l’effecteur A sont les suivantes :

Km = 2,50 x 10-5 mol.L-1
kcat = 0,50 x 103 min-1

Les caractéristiques cinétiques de l’enzyme en présence de l’effecteur B sont les suivantes :

Km = 5,00 x 10-5 mol.L-1
kcat = 1,50 x 103 min-1

Questions

QUESTION N° 1 :

Donner la définition de kcat.

Proposition de réponse

kcat ou constante catalytique (aussi dénommée activité moléculaire spécifique ou nombre de turn over)
correspond au nombre de molécules de substrat transformées par molécule d’enzyme et par unité de temps
(ici la minute).

QUESTION N° 2 :

Interpréter les effets provoqués par les substances A et B sur la cinétique enzymatique. Justifier.

Proposition de réponse

- La substance A agit comme un inhibiteur non compétitif puisque Km est inchangé et la constante
catalytique diminuée (Vm app = Kcat app x Et)
- La substance B agit comme un inhibiteur compétitif puisque Km est augmenté et la constante
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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 21 (40 points)

catalytique inchangée

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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 3
1 (40 points)

Enoncé
Un médicament est administré à un patient par voie intraveineuse en bolus à la dose de 200 mg. Les
concentrations plasmatiques (Conc.) mesurées en fonction du temps sont :

Temps
(h) Conc. (mg.L-1)
0 38,0
2 25,6
4 19,3
16 11,6
24 10,5
48 7,9
72 5,9
96 4,4
(N.B. Papier semi-log inséré dans le cahier)
Papier semi-log à insérer dans le cahier par l'imprimeur

Questions

QUESTION N° 1 :

Quelle est l’équation qui décrit l’évolution des concentrations plasmatiques en fonction du temps ?

Proposition de réponse

L'équation est du type : c = A x e- t + B x e- t

Le graphe (logarithme des concentrations versus temps) met en évidence une pente terminale : B est la
valeur de l'intersection à l’origine = 14 mg.L-1 ; à laquelle correspond la T1/2 β que l'on peut déterminer
graphiquement : B / 2 = 7 mg.L-1 correspond au temps 57 h = T1/2 β
-1
d'où β = Ln2 / T1/2 = 0,012 h

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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 31 (40 points)

En appliquant la méthode des résidus (Concentration mesurée – concentration sur la droite correspondant à
cette pente terminale) appliquée aux 3 premiers prélèvements :

Temps (h) Conc. mesurée – B x e-βt

0 38,0 – 14,0 = 24,0
2 25,6 – 13,7 = 11,9
4 19,3 – 13,3 = 5,90

A étant l'intersection de la droite à l’origine = 24 mg.L-1

A / 2 = 12 mg.L-1 correspond au temps 2 h = T1/2 α soit :
α = Ln2 / T1/2 α = 0,35 h-1

L’équation est donc :

c = A x e- t + B x e- t = 24 x e- 0,35t + 14 x e- 0,012t

QUESTION N° 2 :

Durant quel intervalle de temps le phénomène de distribution peut-il être considéré comme terminé ?

Proposition de réponse

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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 31 (40 points)

Au temps 16 h, la concentration mesurée se trouve sur la pente terminale ; ce n'est pas le cas au temps 4 h.
C’est donc durant l’intervalle 4h – 16h que l’équilibre des concentrations entre compartiment central et
périphérique est atteint.

QUESTION N° 3 :

En intégrant du temps 0 à l’infini l'équation décrivant l'évolution des concentrations en fonction du temps,
calculer l’aire sous la courbe des concentrations et la clairance d’élimination plasmatique.

Proposition de réponse

AUC = A / α + B / β = 24 / 0,35 + 14 / 0,012 = 1235 mg.L-1.h

Clairance = Dose / AUC = 0,162 L.h-1

QUESTION N° 4 :

Calculer le volume de distribution initial Vdi (également appelé le Vdcentral) et le volume de distribution β Vdβ
(également appelé Vdarea).

Proposition de réponse

Volume de distribution initial Vdi = Dose / (A + B) = Dose / C0 = 200 / 38 = 5,26 L

Vdβ = CL / β = 0,162 / 0,012 = 13,5 L

QUESTION N° 5 :

Quelle serait la concentration plasmatique moyenne à l’équilibre si le médicament était injecté à ce patient à
la dose de 200 mg une fois par jour ?

Proposition de réponse

τ = 24 h, intervalle entre les injections

Css,moyenne = D/ τ / CL = 200 mg / 24h / 0,162 L.h-1 = 51,4 mg.L-1

QUESTION N° 6 :

Calculer le facteur d’accumulation (R) correspondant à ce schéma d’administration (injection quotidienne de

200 mg) à partir de l’aire sous la courbe des concentrations du temps 0 au temps 24 h, correspondant à la 1
ère
injection, et de l'aire sous la courbe des concentrations correspondant à une injection à l’état d’équilibre.
Utiliser ce facteur d'accumulation pour calculer la concentration minimale à l’état d’équilibre (immédiatement
avant l’injection).

Proposition de réponse

1ère injection : AUC0-24h = AUCtotale – C24h / β = 1235 – 10,5 / 0,012 = 360 mg.L-1.h

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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 31 (40 points)

A l’état d’équilibre : AUCτ,ss = Css,moyenne x τ = 51,4 x 24 = 1234 mg.L-1.h

Facteur d’accumulation R = AUCτ,ss / AUC0-24h = 1234 / 360 = 3,4
Cmin,ss = R x C24h = 3,4 x 10,5 = 35,7 mg.L-1

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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 4
1 (40 points)

Enoncé
La polykystose rénale autosomique dominante (PKRAD) est une maladie génétique qui se manifeste par
l’apparition lente et progressive de kystes, principalement au niveau des reins. Un médicament, le
Tolvaptan, a été testé contre placebo dans une étude randomisée incluant 300 patients.

N.B. : Les questions peuvent être traitées séparément.

Questions

QUESTION N° 1 :

Le volume rénal total augmente à un rythme constant propre à chaque patient atteint de PKRAD. Une
augmentation plus rapide du volume rénal total est associée à un déclin plus rapide du débit de filtration
glomérulaire. Le taux de variation du volume rénal est utilisé ici comme critère de jugement de l’efficacité
thérapeutique.
Le tableau ci-dessous présente les résultats d’une étude menée avec le Tolvaptan chez des patients atteints
de PKRAD avec une insuffisance rénale modérée.

Groupe Groupe

Tolvaptan Placebo

Nombre de patients (n) 150 150

Moyenne annuelle du taux de variation du volume rénal* 4,3 % 7,3 %

Ecart type du taux de variation du volume rénal 7,5 % 7,0 %

* Le taux de variation (exprimé en %) du volume rénal est égal au rapport :

(différence entre le volume mesuré à t0+1an et le volume mesuré à t0) / (volume mesuré à t0).

Le taux de variation du volume rénal est-il significativement réduit en moyenne par l’administration de
Tolvaptan dans cette étude, au risque de 5 % ?

Proposition de réponse

Test de comparaison de deux moyennes observées, grands échantillons indépendants (n > 30)

Dans cette étude, le taux de variation du volume rénal est significativement réduit par l’administration de
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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 41 (40 points)

Tolvaptan, au risque de 5 %. On observe une diminution plus importante dans le groupe traité par Tolvaptan.

QUESTION N° 2 :

Le Tolvaptan peut provoquer des effets indésirables liés à la perte d'eau. La sensation de soif a été
rapportée comme effet indésirable chez 81 des 150 patients traités par Tolvaptan et chez 30 des 150
patients recevant le placebo.
Comparer les proportions de patients avec sensation de soif dans le groupe traité par Tolvaptan et dans le
groupe témoin (risque de 5 %).

Proposition de réponse

Test de comparaison de deux proportions observées, échantillons indépendants.

Les proportions de patients avec sensation de soif dans le groupe traité par Tolvaptan et dans le groupe
témoin sont significativement différentes, au risque de 5 %.

QUESTION N° 3 :

Dans une autre étude, 50 patients atteints de PKRAD avec insuffisance rénale terminale font l'objet d'un
suivi. Parmi eux, 20 patients avaient eu un diagnostic d'hypertension artérielle avant l'âge de 35 ans. Ces 20
patients ont atteint le stade d’insuffisance rénale terminale à un âge moyen de 49 ans (écart type s = 10
ans), alors que les 30 patients sans diagnostic d’hypertension artérielle avant l'âge de 35 ans ont atteint le
stade d’insuffisance rénale terminale en moyenne à 56 ans (écart type s = 10 ans).
On admet que l’âge d’apparition de l’insuffisance rénale suit dans ces deux populations une distribution
Normale.

a) Parmi les patients atteints de PKRAD avec insuffisance rénale terminale, déterminer l’intervalle de
confiance à 95 % du pourcentage de patients ayant eu un diagnostic d'hypertension artérielle avant l'âge de
35 ans. Vérifier la validité de l'intervalle de confiance estimé.

b) Comparer l’âge moyen de survenue de l’insuffisance rénale terminale dans les deux groupes de patients
(risque de 5 %).

Proposition de réponse

a) Intervalle de confiance

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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 41 (40 points)

Intervalle de confiance valide car la plus petite des 4 expressions à comparer à 5 (0,26 x 50 = 13) est bien
supérieure ou égale à 5.

b) Test de comparaison de deux moyennes observées, petits échantillons indépendants (n < 30)

L’âge moyen de survenue de l’insuffisance rénale terminale dans ces deux groupes de patients diffère
significativement, au risque de 5 %.

QUESTION N° 4 :

Le volume du rein est obtenu par deux méthodes : un volume mesuré et un volume calculé. Un coefficient
de corrélation r = 0,9899 a été déterminé entre les volumes rénaux mesurés et les volumes calculés, chez
24 patients.

a) L'écart type de l'estimateur du coefficient de corrélation est sR = 0,0302.

La valeur de ce coefficient de corrélation diffère-t-elle significativement de la valeur zéro, au risque de 0,001
?

b) Au vu du résultat de cette comparaison, peut-on conclure que les deux méthodes de détermination du
volume rénal conduisent à des résultats similaires ?

Proposition de réponse

a) Test du coefficient de corrélation linéaire de Pearson

Le coefficient de corrélation r obtenu entre le volume mesuré et le volume calculé est significativement
différent de zéro, au risque de 0,001.

b) Non. La corrélation linéaire entre le volume mesuré et le volume calculé est forte mais il n’est pas possible
d’en déduire que les volumes mesurés et calculés sont similaires.

QUESTION N° 5 :

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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 41 (40 points)

Chez les patients atteints de PKRAD, un score prédictif d'apparition d'insuffisance rénale terminale avant
l’âge de 60 ans a été construit, en prenant en compte l’existence de mutations sur les 2 gènes impliqués, le
genre, la survenue d’hypertension artérielle avant 35 ans et la survenue de complications urologiques avant
35 ans.
Ce score varie de 0 à 9. La probabilité d'apparition d'une insuffisance rénale terminale avant 60 ans
augmente avec le score.

a) En considérant qu’un test est positif pour un score ≥ 6, une valeur prédictive positive (VPP) égale à 91 %
a été obtenue. Que signifie ce résultat ?

b) En considérant qu’un test est positif pour un score ≥ 3, une valeur prédictive négative (VPN) égale à 85 %
a été obtenue. Que signifie ce résultat ?

Proposition de réponse

a) La probabilité d’apparition d’une insuffisance rénale terminale avant 60 ans chez un patient avec un score
≥ 6 est de 91 %.
b) La probabilité d’apparition d’une insuffisance rénale terminale avant 60 ans chez un patient avec un score
< 3 est de 15 %.

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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 51 (40 points)

Enoncé
Le 11 mars 2011, un séisme suivi d’un tsunami a dévasté la centrale électrique japonaise de
Fukushima-Daiichi. Ces évènements naturels ont été à l’origine, à partir du 12 mars, de la fusion de 3 des 6
cœurs de réacteurs nucléaires sur le site de la centrale. Cet accident a conduit à d’importants rejets
radioactifs dans l’environnement parmi lesquels on peut noter la présence d’iode-131 (Z = 53) et de
césium-137 (Z = 55) qui présentent une période radioactive de T1/2 = 8,02 jours pour l’iode-131 et de T1/2 =
30,08 ans pour le césium-137.

Questions

QUESTION N° 1 :

Dans une centrale nucléaire, les réactions de fission de l’uranium-236 peuvent être les suivantes :

Calculer le nombre de neutrons x et y émis lors de ces deux réactions de fission.

Proposition de réponse

x=2
y=3

QUESTION N° 2 :

L’iode-131 et le césium-137 sont 2 émetteurs bêta moins formant respectivement du xénon (Z = 54) et du
baryum (Z = 56).
Ecrire les équations de désintégration de ces 2 éléments.

Proposition de réponse

QUESTION N° 3 :

Afin de protéger la population japonnaise des conséquences thyroïdiennes de la libération d'iode-131 dans
l'atmosphère, les autorités nipponnes se sont intéressées particulièrement aux propriétés physiques de
l'iode-131.
Calculer la constante radioactive de l’iode-131 (en s-1). Page 1/3
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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 51 (40 points)

Calculer la constante radioactive de l’iode-131 (en s-1).

Proposition de réponse

Iode-131 : T1/2 = 8,02 jours = 692 928 secondes donc λ = 1,00.10-6 s-1

QUESTION N° 4 :

Les premières données sur la contamination de l’air en date du 22 mars 2011 à 18 h font état de la présence
de 9.1016 Bq d’iode-131. L'iode-131 étant volatil on suppose que la totalité de l'iode-131 libéré lors de
l'explosion se retrouve dans l'atmosphère.
Calculer l'activité en iode-131 produite le 12 mars 2011 à 18 h lors la fusion des cœurs des réacteurs.

Proposition de réponse

t = 10 jours
Activité = 1,44.1017 Bq le 12 mars 2011 à 18 h

QUESTION N° 5 :

Calculer le nombre de noyaux radioactifs d’iode-131 libérés le 12 mars 2011 à 18 h dans l’atmosphère
autour de la centrale (Navogadro = 6,02.1023 mol-1), ainsi que la masse correspondante.

Proposition de réponse

A = λ.N
Niode-131 = 1,44.1023 atomes = 0,239 moles = 31,3 grammes

QUESTION N° 6 :

A partir du 14 mars 2011, des vents de sud ont orienté le panache de rejets radioactifs vers Tokyo. Les
autorités ont mesuré sur une période de 7 jours une contamination atmosphérique moyenne par l’iode-131
de 55 Bq/m3.
Sachant que le débit horaire pulmonaire est de 1,2 m3/h, calculer la contamination (en Bq) par inhalation de
la population de Tokyo sur cette période.

Proposition de réponse

Sur 7 jours = 168 heures soient 201,6 m3 d’air respiré

Iode-131 : 11 088 Bq sur 7 jours

QUESTION N° 7 :

Sachant que la dose efficace engagée par unité d’incorporation est de 2.10-8 Sv/Bq pour l’iode-131,
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calculer
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EPREUVE D'EXERCICE D'APPLICATION
Exercice N° 51 (40 points)

Sachant que la dose efficace engagée par unité d’incorporation est de 2.10-8 Sv/Bq pour l’iode-131, calculer
la dose totale d’exposition des habitants de Tokyo sur 7 jours.

Proposition de réponse

Iode-131 : 11 088 Bq sur 7 jours, soit 0,22 mSv.

QUESTION N° 8 :

Pour prévenir le risque d'irradiation thyroïdienne, la population vivant autour de la centrale a ingéré de l’iode
stable pour diminuer la période biologique de l’iode-131 par saturation de la thyroïde. Sachant qu’après
ingestion de 100 mg d’iode stable, la période biologique de l’iode est de 6 h, calculer le temps nécessaire
pour que la population vivant autour de la centrale élimine la moitié de l’activité de l’iode-131 inhalé.

Proposition de réponse

Tbiol = 6 h
Tphys = 8,02 J
Teff = 5,8 heures

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