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Cholinesterase FR

Le document présente une méthode pour la détermination quantitative de la cholinestérase dans les fluides biologiques, en détaillant la procédure, les composants fournis et les précautions à prendre. Il inclut également des informations sur la comparaison avec une méthode commerciale, ainsi que des résultats de tests sur 107 échantillons. Des détails sur la stabilité, la sensibilité et les interférences sont également fournis.
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Comparaison entre les méthodes

CHOLINESTÉRASE DGKC FL PROCÉDURE (starter échantillon) une comparaison avec une méthode disponible dans le
Longueur d'onde: 405 nm commerce a donné les résultats suivants sur un test effec-
CH F096 CH 4 x 24 ml Pas optique: 1 cm tué sur 107 échantillons:
Température: 37 °C
CH F245 CH 12 x 24 ml SChE Chema = x
pipeter en cuvette le réactif de travail: 1200 µl SChE concurrent = y
n = 107
UTILISATION
Réactif pour la détermination quantitative in vitro de la préincuber le réactif à 37 °C pendant 5 minutes.
y = 0.985x + 51.7 U/l r2=0.996
cholinestérase dans les fluides biologiques.
ajouter l'échantillon: 20 µl
SOMMAIRE REMARQUES RELATIVES A L'ÉLIMINATION
Il existe deux enzymes corrélés en mesure d'hydrolyser Mélanger, au bout de 90 secondes, mesurer l'absorbance Ce produit est destiné à une utilisation au sein de labora-
l'acétylcholine. L'une est l’acétylcholinestérase, appelée contre l'eau en incubant à 37 °C. Effectuer 3 autres lec- toires d'analyses professionnels.
cholinestérase authentique ou cholinestérase I, présente tures à intervalles de 30 secondes. Calculer le ∆A/min. P501: Éliminer le contenu conformément à la règlementa-
dans les érythrocytes, les poumons, la rate et la matière tion nationale/internationale.
grise cérébrale. Elle effectue rapidement l'hydrolyse de PROCÉDURE (starter réactif)
l'acétycholine délivrée dans les terminaisons neurales BIBLIOGRAPHIE
comme médiateur de l'impulsion nerveuse à travers les Longueur d'onde: 405 nm
[Link]. Vol. 30, 1992, 162-170
synapses. La dégradation de l'acétylcholine est nécessaire Pas optique: 1 cm
Tietz Textbook of Clinical Chemistry, Second Edition, Bur-
pour la dépolarisation des nerfs, permettant la repolarisa- Température: 37 °C
tis-Ashwood (1994).
tion de l'évènement conducteur suivant. L’autre forme est
l’acylcholine acylhydrolase, également dénommée pseudo-
pipeter en cuvette le réactif R1: 1 ml FABRICANT
cholinestérase, benzoyl cholinestérase ou cholinestérase II. ajouter l'échantillon: 20 µl Chema Diagnostica
Également présente dans le foie, le pancréas, le cœur, la Via Campania 2/4
matière blanche cérébrale et le sérum, son rôle biologique incuber à 37 °C pendant 5 minutes.
60030 Monsano (AN)
est inconnu, mais la détermination de cette enzyme sérique tél. 0731 605064
est cliniquement utilisée. pipeter en cuvette le réactif R2: 200 µl
télécopie 0731 605672
PRINCIPE e-mail: mail@[Link]
Mélanger, au bout de 90 secondes, mesurer l'absorbance
Site web: [Link]
La cholinestérase sérique (pseudocholinestérase, EC contre l'eau en incubant à 37 °C. Effectuer 3 autres lec-
[Link]) catalyse l'hydrolyse de la butyrylthiocholine, tures à intervalles de 30 secondes. Calculer le ∆A/min. LÉGENDE DES SYMBOLES
formant butyrate et thiocholine, laquelle réduit les ions
hexacyanoferrate(III) en hexacyanoferrate(II). La réduc- CALCUL DES RÉSULTATS
tion de l'absorbance est monitorée à 405 nm et proportion- Effectuer le calcul en unité/litre et multipliant le ∆A/min par dispositif médical de diagnostic in vitro
nelle à l'activité enzymatique de l'échantillon. le facteur comme indiqué ci-après numéro de lot
La méthode est optimisée en fonction des indications de DGKC.
Activité en U/I: ∆A/min x 65800 référence catalogue
COMPOSANTS FOURNIS
limite de température
Uniquement à usage diagnostique in vitro. Activité en µkat/l: U/I x 0.0167 = µkat/l
Les composants du kit sont stables jusqu'à la date de utiliser avant la date
péremption indiquée sur l'emballage.
INTERVALLES DE RÉFÉRENCE
Conserver à l’abri de la lumière directe. SChE total: attention
Hommes: 5600 - 11200 U/l consulter les instructions d’utilisation
CHE R1 F096: 4 x 20 ml (liquide) capsule bleue Femmes: 4200 - 10800 U/l
F245: 12 x 20 ml (liquide) capsule bleue
Nombre de dibucaine:
CHE R2 F096: 1 x 16 ml (liquide) capsule rouge Homozygotes normaux: > 75%
F245: 3 x 16 ml (liquide) capsule rouge Hétérozygotes: 35 - 75%
Homozygotes atypiques: < 35%
Composition dans le réactif final: sodium pyrophosphate
75 mM pH 7.60, potassium hexacyanoferrate(III) 2 mM, Chaque laboratoire doit établir ses propres intervalles de
butyrylthiocholine 15 mM, stabilisateurs. référence selon sa population.
CONTRÔLE DE QUALITÉ - CALIBRATION
Conserver tous les composants entre 2 et 8 °C. L'exécution d'un contrôle de qualité interne est recom-
MATÉRIEL NÉCESSAIRE NON FOURNI mandée. Dans ce but, les sérums humains de contrôle
Equipement normal de laboratoire. Spectrophotomètre suivants sont disponiblessur demande :
UV/VIS doté de thermostatation. Micropipettes automa- QUANTINORM CHEMA
tiques. Cuvettes en verre optique ou à usage unique en avec si possible des valeurs normales,
polystyrène optique. Solution physiologique. QUANTIPATH CHEMA
avec des valeurs pathologiques.
PRÉPARATION DU RÉACTIF Si le système d'analyse l'exige, un calibrateur humain mul-
Procédure starter échantillon: ti-paramètres est disponible:
Ajouter 4 ml de réactif R2 à un flacon de réactif R1. AUTOCAL H
Stabilité du réactif préparé: 15 jours à 2-8°C, à l'abri de
la lumière. Contacter le Service Clients pour plus d'informations.

Procédure starter réactif:


PERFORMANCES DU TEST
utiliser les réactifs séparés. Linéarité
Stabilité: jusqu'à la date de péremption indiquée sur l'éti- la méthode est linéaire jusqu'à au moins 25000 U/l.
quette à 2-8 °C. Si la valeur de ∆A/min est supérieure à 0.30, il est conseillé
Stabilité après la première ouverture: de préférence dans de diluer l'échantillon 1+9 avec de la solution physiolo-
les 60 jours à 2-8°C. gique et de répéter le test, en multipliant le résultat par 10.

PRÉCAUTIONS Sensibilité/limite de détection


CHE R1: Danger. Provoque des lésions oculaire graves La méthode est en mesure de déceler jusqu'à 432.3 U/l.
(H318). Porter des gants de protection /un équipe-
ment de protection des yeux (P280). EN CAS DE Interférences
CONTACT AVEC LES YEUX: rincer avec précau- aucune interférence n'est décelable en présence de:
tion à l'eau pendant plusieurs minutes. Enlever les lentilles hémoglobine ≤ 500 mg/dl
de contact si la victime en porte et si elles peuvent être faci- bilirubine ≤ 40 mg/dl
lement enlevées. Continuer à rincer (P305+P351+P338). lipides ≤ 800 mg/dl
Appeler immédiatement un médecin (P310).
Précision
CHE R2: Le produit n’est pas classé comme dangereux. dans la série (n=10) moyenne (U/l) SD (U/l) CV%
échantillon 1 5972.9 122.8 2.1
échantillon 2 5743.8 57.5 1.0

ÉCHANTILLON entre les séries (n=20) moyenne (U/l) SD (U/l) CV%


Sérum, plasma (EDTA ou héparine). Éviter l'hémolyse. échantillon 1 5808.4 113.4 2.0
L’activité de la cholinestérase dans l'échantillon est stable échantillon 2 5753.5 99.6 1.7
pendant au moins 14 jours aussi bien à température
ambiante que à 2-8°C.

IUS-7.5 FR rév. 04/09/2020

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