En effet, les enzymes et substances libérés par les érythro- Comparaison entre les méthodes

CK-NAC FL IFCC/DGKC cytes peuvent influencer la phase latente et des réactions une comparaison avec une méthode disponible dans le
indésirables pourraient survenir. commerce a donné les résultats suivants sur un test effec-
CK F060 CH 6 x 10 ml tué sur 100 échantillons:
PROCÉDURE (starter échantillon)
CK F120 CH 12 x 10 ml CK NAC Chema = x
Longueur d'onde: 340 nm
CK F245 CH 12 x 20 ml CK-NAC concurrent = y
Pas optique: 1 cm
n = 100
Température: 37 °C
UTILISATION y = 1.04x - 3.10 U/l r2 = 0.9985
Réactif pour la détermination quantitative in vitro de la pipeter en cuvette le réactif de travail: 1 ml
créatine kinase dans les fluides biologiques. REMARQUES RELATIVES A L'ÉLIMINATION
préincuber le réactif à 37 °C pendant 5 minutes.
SOMMAIRE Ce produit est destiné à une utilisation au sein de labora-
toires d'analyses professionnels.
L’enzyme créatine kinase (ou CK) est présente dans le ajouter l'échantillon: 40 µl P501: Éliminer le contenu conformément à la règlementa-
tissu cardiaque, cérébral et dans le muscle squelettique. tion nationale/internationale.
En conséquence, une hausse du niveau hématique de Mélanger, au bout d'une minute, mesurer l'absorbance
la CK peut être associée à l'infarctus du myocarde, des contre l'eau en incubant à 37 °C. Effectuer 3 autres lec- BIBLIOGRAPHIE
formes cérébro-vasculaires aigues, traumas ou maladies tures à intervalles de 60 secondes. Calculer le ∆A/min.
HU Bergmeyer - Methods of enzymatic analysis, Vol. III
affectant le système musculaire. (1987).
PRINCIPE PROCÉDURE (starter réactif) DGKC - [Link]., 31 (1993).
La créatine kinase (EC [Link]; adénosine triphos- Tietz Textbook of Clinical Chemistry, Second Edition, Bur-
Longueur d'onde: 340 nm tis-Ashwood (1994).
phate:créatine N- phosphotransférase ; CK) catalyse la
Pas optique: 1 cm
conversion de phosphocréatine et ADP en créatine et ATP.
L’ATP et le glucose sont convertis en ADP et glucose-6-
Température: 37 °C FABRICANT
phosphate par l'hexokinase. La glucose-6-phosphate Chema Diagnostica
pipeter en cuvette le réactif R1: 1 ml
déshydrogénase oxyde le glucose-6-phosphate en Via Campania 2/4
6-phosphogluconate, réduisant le NADP en NADPH. ajouter l'échantillon: 50 µl 60030 Monsano (AN)
Le taux de formation du NADPH, mesuré à 340 nm, est tél. 0731 605064
incuber à 37 °C pendant 5 minutes.
directement proportionnel à l'activité sérique de la CK. La télécopie 0731 605672
N-acétylcystéine (NAC ) joue la fonction d'activateur de la e-mail: mail@[Link]
pipeter en cuvette le réactif R2: 250 µl
CK. Site web: [Link]
COMPOSANTS FOURNIS Mélanger, au bout d'une minute, mesurer l'absorbance
LÉGENDE DES SYMBOLES
Uniquement à usage diagnostique in vitro. contre l'eau en incubant à 37 °C. Effectuer 3 autres lec-
Les composants du kit sont stables jusqu'à la date de tures à intervalles de 60 secondes. Calculer le ∆A/min.
péremption indiquée sur l'emballage. dispositif médical de diagnostic in vitro
Conserver à l’abri de la lumière directe. CALCUL DES RÉSULTATS
numéro de lot
Effectuer le calcul en unité/litre et multipliant le ∆A/min par
CK-NAC R1 F060: 6 x 8 ml (liquide) capsule bleue référence catalogue
le facteur comme indiqué ci-après
F120: 12 x 8 ml (liquide) capsule bleue
F245: 12 x 16 ml (liquide) capsule bleue limite de température
Activité en U/I: ∆A/min x 4127
utiliser avant la date
CK-NAC R2 F060: 1 x 12 ml (liquide) capsule rouge
Activité en µkat/l: U/I x 0.0167 = µkat/l
F120: 2 x 12 ml (liquide) capsule rouge attention
F245: 3 x 16 ml (liquide) capsule rouge INTERVALLES DE RÉFÉRENCE consulter les instructions d’utilisation
Hommes 24 - 204 U/l (0.39 - 3.40 µkat/l)
Composition du réactif final: Tampon imidazole 29 mM pH Femmes 24 - 173 U/l (0.39 - 2.90 µkat/l)
6.50, phosphocréatine 30 mM, glucose 20 mM, N-acétyl-
cystéine 20 mM, acétate de magnésium 10 mM, EDTA Chaque laboratoire doit établir ses propres intervalles de
disodique 2 mM, ADP 2 mM, NADP 2 mM, AMP 5 mM, référence selon sa population.
diadénosine pentaphosphate 12 µM, glucose-6-phosphate
déshydrogénase ≥ 3 kU/l, hexokinase ≥ 3 kU/l. CONTRÔLE DE QUALITÉ - CALIBRATION
Conserver tous les composants entre 2 et 8 °C. L'exécution d'un contrôle de qualité interne est recom-
mandée. Dans ce but, les sérums humains de contrôle
MATÉRIEL NÉCESSAIRE NON FOURNI
suivants sont disponiblessur demande:
Equipement normal de laboratoire. Spectrophotomètre
QUANTINORM CHEMA
UV/VIS doté de thermostatation. Micropipettes automa-
avec si possible des valeurs normales,
tiques. Cuvettes en verre optique ou à usage unique en
QUANTIPATH CHEMA
polystyrène optique. Solution physiologique.
avec des valeurs pathologiques.
PRÉPARATION DU RÉACTIF Si le système d'analyse l'exige, un calibrateur humain mul-
Procédure starter échantillon: ti-paramètres est disponible:
Codes F060/F120:ajouter 2 ml de réactif R2 à un flacon AUTOCAL H
de réactif R1.
Code F245: ajouter 4 ml de réactif R2 à un flacon de réactif Contacter le Service Clients pour plus d'informations.
R1. PERFORMANCES DU TEST
Stabilité du réactif préparé: 30 jours à 2-8 °C, à l'abri de
Linéarité
la lumière.
la méthode est linéaire jusqu'à au moins 2000 U/l.
Procédure starter réactif:
Si la valeur de ∆A/min est supérieure à 0.250, il est
Utiliser les réactifs séparés.
conseillé de diluer l'échantillon 1+9 avec de la solution
Stabilité: jusqu'à la date de péremption indiquée sur l'éti-
physiologique et de répéter le test, en multipliant le résul-
quette;
tat par 10.
Stabilité après la première ouverture: de préférence dans
les 60 jours.
Sensibilité/limite décelable
PRÉCAUTIONS La méthode est en mesure de déceler jusqu'à 1.6 U/l.
Le réactif peut contenir des composants non réactifs et
conservateurs de différentes natures. Par mesure de pré- Interférences
caution, il convient quoi qu'il en soit d'éviter tout contact aucune interférence n'est décelable en présence de:
avec la peau ou l'ingestion. Respecter les mesures de pré- hémoglobine ≤ 400 mg/dl
cautions habituelles prévues en milieu laborantin. bilirubine ≤ 40 mg/dl
lipides ≤ 660 mg/dl
ÉCHANTILLON
Sérum. Le plasma contenant héparine, EDTA, citrate ou fluo- Précision
rure, peut générer des cinétiques de réaction imprévisibles. dans la série (n=10) moyenne (U/l) SD (U/l) CV%
L’activité de la CK dans le sérum est instable et diminue échantillon 1 148.21 0.94 0.64
rapidement pendant la conservation. La CK est désactivée échantillon 2 464.75 3.98 0,86
aussi bien par la lumière ambiante que par l'augmentation
du pH dans l'échantillon dû à la perte d'anhydride carbo- entre les séries (n=20) moyenne (U/l) SD (U/l) CV%
nique. En conséquence, conserver les échantillons dans échantillon 1 148.35 1.33 0.90
le noir et bien fermés. La CK est sujette à dénaturation échantillon 2 461.34 4.62 1.00
thermique; par conséquent, refroidir rapidement l'échantillon
à 4°C après le prélèvement. Compte tenu de l'absence de
CK dans les érythrocytes, un léger degré d'hémolyse est
tolérable, néanmoins, les échantillons moyennement ou

©
fortement hémolysés ne peuvent être considérés comme
des échantillons satisfaisants. IUS-7.5 FR rév. 01/06/2015