BIOLABO
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FABRICANT :
ANTIGENES FEBRILES
BIOLABO SAS,
Les Hautes Rives
pour tests de Widal Felix
par méthode d’agglutination sur lame ou en tube.
02160, Maizy, France
Disponibles en flacons individuels:
REF 9905TH 1 x 5 mL REF 9905TO 1 x 5 mL REF 9905AH 1 x 5 mL REF 9905AO 1 x 5 mL
REF 9905BH 1 x 5 mL REF 9905BO 1 x 5 mL REF 9905CH 1 x 5 mL REF 9905CO 1 x 5 mL
REF 9905BA 1 x 5 mL REF 9905BM 1 x 5 mL
REF 9901NC 1 x 1 mL REF 9901PC 1 X 1 mL
Kits complets:
REF 99058 1 x 5 mL de chaque : 9905TH, 9905TO, 9905AH, 9905AO, 9905BH, 9905BO, 9905CH, 9905CO
REF 9901NC 1 x 1 mL REF 9901PC 1 x 1 mL (Contrôles inclus dans chaque coffret)
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SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES IVD
Tel : (33) 03 23 25 15 50 Made In France
[email protected]
Dernière révision : www.biolabo.fr I : correspond aux modifications significatives
USAGE PREVU PRECAUTIONS
Ces réactifs sont réservés pour un usage professionnel en laboratoire · Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur
(méthode manuelle). www.biolabo.fr
Suspensions d’antigènes pour l’identification et la détermination · Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation.
quantitative des anticorps spécifiques dans le sérum humain · Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
apparaissant suite à une infection par certains agents pathogènes de · Traiter tout spécimen ou réactif d’origine biologique comme
potentiellement infectieux. Respecter la législation en vigueur.
type Salmonelles ou Brucellas.
Tout incident grave survenu en lien avec le dispositif fait l'objet d'une
GENERALITES notification au fabricant et à l'autorité compétente de l'État membre
dans lequel l'utilisateur et/ou le patient est établi.
De nombreux sérotypes de Salmonelles possèdent des structures
antigéniques somatiques communes. C’est pourquoi, l’agglutination
STABILITE ET CONSERVATION
provoquée par la réaction de l’un des antigènes de Salmonelles avec
Stocker à 2-8°C, dans le flacon d’origine et à l’abri de la lumière
un sérum humain ne constitue pas la preuve d’une infection par un Stocker les flacons debout et ne pas congeler.
organisme particulier, mais plutôt d’une infection par un organisme de · Rejeter tout réactif contaminé, présentant des particules en
structure antigénique semblable. suspension ou ne donnant pas des résultats corrects vis-à-vis des
De nombreuses populations ou communautés peuvent présenter un contrôles.
taux élevé d’anticorps résiduels souvent supérieur à 1/160-1/80. Le · Stockés et utilisés comme indiqué, en l’absence de contamination, les
taux d’anticorps peut aussi rester élevé chez certains patients suite à réactifs sont stables jusqu'à la date de péremption indiquée sur
une infection antérieure. Le test n’a donc de signification clinique que l’étiquette.
dans la mesure où non seulement un titre élevé est constaté
ponctuellement, mais encore s’il y a augmentation du titre entre deux
PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN
prélèvements sanguins successifs. Sérum frais. Rejeter les spécimens hémolysés ou lipémiques.
Les anticorps sont stables dans le sérum au moins 48 h à 2-8°C
PRINCIPE PREPARATION DES REACTIFS
La réaction d’agglutination entre les anticorps (agglutinines) du sérum
et leurs antigènes homologues est réalisée par tests rapides sur lame Les réactifs sont prêts à l’emploi.
ou en tube. Les suspensions d’antigènes sont des bactéries mortes et
colorées pour permettre une lecture plus facile. Les suspensions REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRE
colorées en bleu sont spécifiques des antigènes somatiques O, celles 1. Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales.
colorées en rouge sont spécifiques des antigènes flagellaires H. 2. Petits tube à réaction et/ou lames à fond blanc.
3. Bain Marie
REACTIFS
REF 9905TH S. Typhi H (d.H) CONTROLE DE QUALITE
REF 9905TO S. Typhi O (9,12-O) · REF 9901PC, REF 9901NC : Contrôle négatif et positif.
REF 9905AH S. Paratyphi AH (a-H) · Programme externe de contrôle de la qualité.
REF 9905AO S. Paratyphi AO (1,2,12-O) Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants :
REF 9905BH S. Paratyphi BH (b-H) · Au moins un contrôle par série.
· Au moins un contrôle par 24 heures.
REF 9905BO S. Paratyphi BO (1,4,5-O)
· Changement de flacon de réactif.
REF 9905CH S. Paratyphi CH (c-H)
Lorsqu’une valeur de contrôle est incorrecte, appliquer les actions
REF 9905CO S. Paratyphi CO (6,7-O) suivantes :
REF 9905BA Brucella Abortus 1. Répéter le test en utilisant le même contrôle.
REF 9905BM Brucella Melitensis 2. Répéter le test en utilisant un nouveau flacon de contrôle.
3. Utiliser d’autres flacons de réactifs et répéter le test.
REF 9901PC Contrôle Positif Polyvalent
Si la valeur obtenue reste incorrecte, contacter le service technique
REF 9901NC Contrôle Négatif Polyvalent BIOLABO ou le revendeur local
FA_DT_220_IFU_99058-Details_FR_V02_20220509
MODE OPERATOIRE RESULTATS
Laisser les réactifs, spécimens et contrôles revenir à température 1- Titration rapide sur lame :
ambiante avant utilisation. Lecture après 1 minute
Suivre les instructions du mode opératoire et ne pas diluer ou modifier en
quoi que ce soit les réactifs. Volume 80 µL 40 µL 20 µL 10 µL 5 µL 50 µL 50 µL 50 µL
Les tests doivent être lus après les temps d’incubation recommandés spécimen CONT - CONT+ CONT+
1/2
pour éviter les faux-positifs.
Le dernier test montrant une agglutination positive correspond au titre. Titre 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 - + +/-
Pour qu’un résultat soit déclaré négatif, il doit rester exempt de toute
agglutination. 2- Test quantitatif en tubes :
1) Titration rapide sur lame : Tube 1 2 3 4 5 6 7 8
1. Distribuer 80 µL, 40 µL, 20 µL, 10 µL et 5 µL de sérum non dilué dans
une rangée de cercles d’environ 3 cm de diamètre. Titre 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1280 Négatif
2. Homogénéiser la suspension d'antigènes en agitant modérément et
Le dernier tube présentant une agglutination positive correspond au
déposer 1 goutte (50 µL) de réactif non dilué sur chaque distribution de
sérum. titre. Des titres > 1/80 sont significatifs.
3. Mélanger à l’aide d’un bâtonnet à usage unique.
Notes
4. Appliquer un mouvement de rotation à la lame et lire après 1 min
5. Tout résultat positif obtenu par test sur lame doit être confirmé par test - Le contrôle négatif ne doit pas agglutiner .
en tubes - Le contrôle Positif doit agglutiner au 1/2 (à une dilution près).
- L’agglutination de l’antigène indique la présence d’anticorps Une
2) Test quantitatif en tubes : comparaison des résultats obtenus à 10-14 jours d’intervalle permet de
1. Identifier 8 petits tubes en plastique et les placer sur un portoir. suivre l’évolution de la maladie en phase aigüe.
2. Distribuer 1,9 mL d’une solution NaCl 0.85 % dans le 1er tube et 1 mL
dans les 7 suivants. LIMITES
3. A l’aide d’une pipette, distribuer 0,1 mL de sérum de patient non dilué
L’utilisation d’échantillons autres que des sérums n’a pas été validée
dans le 1er tube et bien mélanger.
pour cette méthode. Un résultat positif faible ou suspect doit être
4. Prélever 1 mL du contenu du 1er tube, transférer dans le 2éme tube et
réessayé.
bien mélanger.
Le diagnostique ne doit pas être basé sur le seul résultat d’un test, il est
5. Procéder de même jusqu’au 7ème tube. Le 8ème tube ne contient que de
fortement recommandé de tenir compte des données cliniques.
la solution NaCl 0,85 % et sert de témoin négatif.
Des réactions croisées entre les antigènes de Brucella et d’autres
6. Homogénéiser la suspension d’antigènes, ajouter une goutte (50 µL) de
organismes tels que Yersinia enterolitica, Escherichia coli et Francisella
l’antigène approprié dans chaque tube, bien mélanger.
tularensis ont été rapportées.
7. Boucher les tubes et Incuber au Bain Marie comme suit :
Si une réaction de type prozone est suspectée, diluer le sérum au 1/20
· Salmonelles O : 4 h à 50°C
puis tester à nouveau.
· Salmonelles H : 2 h à 50°C Brucella abortus et melitensis partagent un antigène brucellique
· Brucella : 24 h à 37°C commun. Un sérum donnant une réaction positive au test de Rose
8. Examiner les tubes après le temps d’incubation approprié et vérifier Bengale doit être testé avec les antigènes REF 9905BA et
l’agglutination. Pour mieux visualiser l’agglutination, laisser une nuit au REF 9905BM sur lame puis confirmé par un titrage en tube pour
réfrigérateur et laisser revenir à température ambiante avant de lire. déterminer le type d’anticorps détecté. Le titre le plus élevé indiquera la
nature de l’anticorps présent.
PERFORMANCES
REFERENCES
Les caractéristiques de performances généralement acceptées pour ce
type de tests sont de 70% en sensibilité et spécificité. (1) Huddleson. I.F. and Bell (1928), J Infect. Dis. 42 242.
(2) Freter, R. (1980) Man of Cli. Imm. 2nd Ed. A.S.M. Washington
Du fait des faibles performances diagnostiques du test sérologique, la DC,p.450-460.
culture de spécimens appropriés est généralement préférée pour le (3) Weil E. and Felix A. Wein Klin., 29 974 (1916).
diagnostic des infections par Salmonella. (4) Cruikshank, R (1965) Med Mic 11th Ed. 907
IVD H2O
Fabricant Stocker debout Date de péremption In vitro diagnostic Température de conservation Eau déminéralisée Risque biologique
REF LOT ®
Référence Produit Consulter la notice Numéro de lot Stocker à l’abri de la lumière Suffisant pour Diluer avec
FA_DT_220_IFU_99058-Details_FR_V02_20220509
