ANALYSE DES

EAUX
ECHANTILLONNAGE
Les échantillons d'eaux usées brutes ou épurées sont
généralement collectés soit par remplissage direct des
flacons, soit en utilisant un échantillonneur
automatique.
Les contenants doivent être propres et à température
ambiante. Ils sont ensuite placés dans un bac ou sac
isotherme. Le transport et la conservation doivent être à
l’abri de la lumière dans une enceinte frigorifique
capable de maintenir une température de 5±3°C.
 PARAMETRES
PHYSICO-CHIMIQUES
La température est mesurée soit à l'aide de thermomètre flacon, soit à l'aide d'une
sonde munie d'un capteur de température ou indicateurs capsules (ISO 5667)
Le pH peut être mesuré séparément ou inclus avec l’enregistreur de température mais
toujours grace à une sonde après stabilisation des valeurs
La conductivité est mesurée par conductimètre à sonde (en combinaison avec les
paramètres précédents)
L’oxygène dissous peut être mesuré également par sonde ou par la methode Winkler
(Voir QR code ci-contre)
La turbidité se mesure grâce à un système optique, en général un spectrophotomètre
classique, qui mesure la diminution, due à l'absorbance, de l'intensité d'un rayon
lumineux de longueur d'onde connue traversant la suspension.
Les matières en suspension sont mesurés par filtration ou centrifugation et séchage à
105°c. Les particules visées sont ensuite séparées et calculées.
 Préparation des échantillons
Le dosage des agents de surface anioniques s’est fait 1. Préparer une solution du bleu de méthylène neutre de 0,35g de bleu de méthylène/ 1
selon la méthode du Bleu de Méthylène certifiée litre d’eau ultra-pure. Conserver. Ensuite, Préparer une solution alcaline de bleu de
méthylène :
NA2423/ISO7875-1 :1984 en suivant les étapes ci- dessous - Mettre dans une ampoule à décanter de 250 ml : 100 ml de solution neutre de bleu de
: méthylène, 200 ml de solution tampon PH10 préparée en mélangeant à volumes égaux :
Etalonnage une solution de tetrabonate de sodium de 19g/l et une solution d’hydroxyde de Sodium de
1. Préparer la solution mère étalon d’ester méthylique de l’acide dodecyl- 4g/l, 200 ml de chloroforme
benzène sulfonique - Agiter pendant 30 secondes
- Peser dans un ballon de 250 ml à fond rond, 400 mg d’ester méthylique de - Se débarrasser de la partie chloroformique après décantation
l’acide dodecyl- benzène sulfonique - Rincer en faisant traverser 60 ml de chloroforme
- Ajouter 50 ml de solution alcoolique d’hydroxyde de sodium 0,1 N (4g de - Rejeter les extraits chloroformiques en bas sans agiter.
pastilles NaOH / 1 litre d’éthanol) et un régulateur d’ébullition et placer le 2. Préparer une solution acide de bleu de méthylène en ajoutant 6.5 ml d’acide sulfurique
ballon sous réfrigérant à reflux pendant une heure à un litre de solution neutre.
- Apres refroidissement, rincer l’intérieur de l’appareil avec 30 ml d’éthanol Introduire dans une ampoule à décanter : 100 ml de l’échantillon (proceder a une dilution
pur. de 1/5 ou 1/10 pour les eaux usées), 15 ml de solution alcaline et 15 ml de chloroforme,
- Joindre le liquide de lavage au contenu du ballon agiter pendant une minute et laisser décanter pendant 2 minutes.
- Ajouter quelques gouttes d’acide sulfurique 1N  Garder la partie chlorophormique basse et jeter la partie organique supérieure
- Verser la solution dans une fiole jaugée de 01 litre  Ajouter à la partie chlorophormique : 100 ml d’eau ultra-pure et 5 ml de solution acide
- Compléter avec de l’eau pure pour atteindre un volume de 01 litre et  Remettre dans l’ampoule à décanter.
mélanger soigneusement (cette solution est conservable pour 06 mois)  Récupérer la partie chlorophormique encore une fois et jeter la partie haute.
2. Préparer la solution-fille étalon d’ester méthylique de l’acide dodecyl-  Faire passer à travers un entonnoir bouche par un peu de coton dans une fiole de 50 ml et
benzène sulfonique à 10 mg/l en prélevant 25 ml de la solution mère et en compléter par le chloroforme.
complétant jusqu'à un litre avec de l’eau ultra-pure.
 Préparer une gamme étalon en prélevant des volumes respectifs de : 0, 1, 2, Lecture des résultats
4, 6 et 8 ml de la solution fille et en complétant a 100 ml de volume avec de -Introduire dans une cuve en verre de l’eau distillée et mettre dans le spectromètre (650
l’eau ultra-pure. nm) pour calibration
 Lire l’OD de chaque concentration dans un spectromètre à une longueur -Introduire les échantillons dans la cuve un par un et procéder à la lecture en veillant au
d’onde de 650nm et effectuer une courbe d’étalonnage exprimant l’OD en bon rinçage avec l’eau distillée à chaque changement
fonction de la concentration. -Se référer à la courbe d’étalonnage ou la formule linéaire déduite pour calculer les
concentrations.
 PARAMETRES ORGANIQUES
Pour mesurer la demande biochimique en Oxygène, l'échantillon est prélevé de manière à
ce qu'aucun air ne pénètre dans l'eau échantillonnée . La concentration initiale en oxygène
dissous est calculée. Après cela, l'échantillon est conservé dans un incubateur pendant 5
jours à 20 ℃ . Pendant cette période, les micro-organismes décomposent la matière
organique de l'eau.
Pour mesurer la demande chimique en Oxygène, le principe consiste à oxyder la matière
organique avec une solution étalon de bichromate de potassium en présence d’acide
sulfurique. Pour accélérer l’oxydation de certains composés organiques, le sulfate d’argent
est utilisé comme catalyseur. Par contre, les halures (chlorure, bromure et iodure) présents
forment un précipité avec le sel d’argent. Cette interférence est contrée en ajoutant du
sulfate de mercure (II) qui complexe ces halures.
Les Matieres volatiles en suspension sont mesurées par calcination des matières
organiques dans un four à moufle à 550 °C.
La différence de masse, exprimée en mg/l, entre les MES et les matières résiduelles
(minérales) représente les MVS.
 AZOTE ET PHOSPHORE
L’azote kjeldahl NTK se mesure par une digestion énergique des matières
organiques, en présence d’acide sulfurique concentré et d’un catalyseur (sulfate de
mercure) à une température de 360 °C. Le processus de digestion convertit l’azote
organique en sulfate d’ammonium. Par passage en milieu alcalin, on libère
l’ammonium que l’on dose après distillation par acidimétrie.
Les Nitrates et les Nitrites dans les eaux naturelles sont déterminés par
spectrophotométrie par passage à travers un réducteur de zinc amalgamé à pH 3,4
dans une solution de fer (III)-Ferrozine. L'interférence due à des niveaux élevés de
nitrite est éliminée par un traitement à l'azoture.
La méthode spectrophotométrique souvent utilisée pour la détermination du
Phosphore est basée sur une réaction au molybdate d'ammonium, suivie d'une
réduction du complexe par le chlorure stanneux en milieu acide, qui est catalysée
par un ion phosphate produisant un complexe appelé bleu de molybdène.
 PARAMETRES MICROBIOLOGIQUES
Pour la quantification microbiologique, La préparation des milieux de culture se fait la
veille en utilisant la gélose adéquate. Les poudres de gélose sont mélangées à de l’eau
distillée selon les instructions industrielles. Les solutions sont chauffées et agitées
jusqu'à homogénéisation puis placées dans un Bain-Marie et stérilisées pendant 15
minutes dans un autoclave à 121 ̊C. L’agar est ensuite versé dans des boîtes de Pétri et
réfrigéré jusqu'à ensemencement. Les échantillons à analyser sont dilués dans de l’eau
physiologique ayant une concentration de 9g NaCl/l, avec un coefficient de 1000 tandis
que l’eau traitée est analysée sans dilution. Une prise de 0.1 millilitres a été appliquée
délicatement sur la surface des boites de Pétri qui seront incubées à 37 ̊C. Le comptage
se fait au microscope selon les formes et couleurs conventionnelles des
microorganismes.