1

INTRODUCTION

L’acte transfusionnel est un acte délicat vu la sensibilité du moment

et du terrain de son application, il impose une efficacité et une innocuité
thérapeutique qui doivent être garanties par la maitrise de la qualité des
produits sanguins labiles.
Ainsi les centres de préparation sont nécessairement munis d’un
système de gestion propre de la qualité.[1] [10]

De nos jours, la majorité de ces établissements font appel à un

système basé sur deux structures, le service d’assurance qualité et le
laboratoire de contrôle qualité.[1] [10]

L’analyse des produits sanguins labiles relève des compétences du

laboratoire de contrôle qualité, c’est le paramètre qui permet la meilleure
appréciation de la stabilité du processus de préparation mis en place (suivi
dans le temps) et aussi sa qualité ponctuelle de production (validation du jour).
Chaque produit est défini par ses propres paramètres à contrôler et
qui concernent en règle générale la quantité en principe actif, la présence de
composés indésirables et l’altération du produit.[3][4]
Etant donné que les résultats de ces contrôles sont à la base de
décisions capitales, les étapes d’analyse doivent suivre les bonnes pratiques
de laboratoire.
Au même titre, notre mémoire traite le contrôle de qualité des produits
sanguins labiles préparés au niveau du Centre de Transfusion Sanguine de
Blida ; nous avons attribué le plus grand intérêt au contrôle de la conservation
des concentrés de globules rouges et celui des plasmas frais congelés
puisque nous avons fixé comme objectifs, l’introduction des deux paramètres
manquants qui sont : l’analyse du taux de lyse et celle du taux de facteur VIII.
Nous nous sommes référés dans la mesure du possible aux normes
Algériennes et Françaises et aux bonnes pratiques de fabrication.
A la fin de notre étude, nous avons pu apprécier la qualité des deux
produits (CGR et PFC) ainsi nous avons entamé une étude sur les facteurs
soupçonnés d’être impliqués dans la non-conformité de certains paramètres.
 2

PARTIE I : PARTIE
THEORIQUE
 3

HISTORIQUE :

A partir de simples connaissances biologiques et afin d’arriver au stade

de maitrise actuelle de la transfusion sanguine, de nombreux progrès ont
marqué l’histoire de l’hémothérapie :[2][26]

 En 1628: William HARVEY décrit le système circulatoire.

 En 1667: Jean Baptiste fut le premier à effectuer une transfusion
sanguine utilisant du sang animal.

 En 1818: James BLUNDELL publie dans la revue « THE LANCET »

les premières transfusions de sang humain.

 En 1900: Karl LANDSTEINER découvre le groupe sanguin ABO, il

donna une base sécuritaire d’utilisation de la transfusion sanguine fondée sur
des connaissances immunologiques, il élimina ainsi le plus grand obstacle
rencontré lors des essais ultérieurs.

 En 1914: le médecin Belge Albert HUSTIN utilise pour la première fois

un anticoagulant (le citrate) pour la conservation du sang.

 En 1935: la première réserve de sang a été mise en place à la Mayo

clinique au USA.

 En 1943:Loutit et Mollison introduisent la solution acide, citrate, dextrose

pour améliorer la conservation du sang total jusqu'à 21 jours.

 En 1952: Walter et Murphy décrivent la première poche en plastique qui

va remplacer les flacons en verre utilisés en hémothérapie ; La même année,
le 21 juillet 1952, la France émit une loi sur l’organisation de la transfusion
sanguine.

 En1963: découverte du plasma riche en plaquettes.

 En 1971: dépistage de l’hépatite b chez le donneur.
 En 1973: mise au point de la technique d’aphérèse.
 En 1978: introduction de la solution Na Cl, dextrose, adénine, mannitol
pour une meilleure conservation des concentrés de globules rouges.
 4

 En 1986: préparation du premier concentré plaquettaire par double

centrifugation.

 En 1985: dépistage du virus de l’immunodéficience humaine.

 En 1990: dépistage du virus de l’hépatite c.
 En 1993 : dans le cadre de la gestion des dysfonctionnements
médicaux-techniques et administratifs, la république française promulgue la loi
sur la sécurité transfusionnelle, abordant 6 thèmes dont les bonnes pratiques
et l’hémovigilance.

 En 1998: émission d’une nouvelle loi renforçant la veille sanitaire et le

contrôle de la sécurité et de la qualité des produits destinés à l’homme dont
l’agence nationale de sécurité des médicaments et des produits de santé qui
est décrite comme le seul établissement responsable de l’hémovigilance, de la
rédaction des bonnes pratiques transfusionnelles et de l’inspection des
établissements français du sang.
Ces 20 dernières années, des efforts ont été fournis afin d’améliorer la
sécurité et la qualité des produits sanguins labiles; même si la transfusion reste
dans le besoin d’une meilleure maitrise scientifique et de pratiques à cause de
la complexité des produits d’origine humaine.
 5

CHAPITRE 1 : GENERALITES
 6

1. Définition
1.1 Définition de la transfusion :
La transfusion sanguine est une discipline aux confins de l’hématologie
et de l’immunologie ; elle implique la médecine, la bio-industrie, la sociologie ;
elle repose sur l’éthique.[1]
La transfusion sanguine consiste à administrer le sang ou l’un de ses
composants (globules rouges, plaquettes, granulocytes, plasma, protéines)
provenant d’un ou de plusieurs sujets sains appelés « donneurs » vers un ou
plusieurs sujets malades appelés « receveurs ».[1]

1.2 Définition des produits sanguins labiles :

Les PSL sont des produits issus du sang total d’un donneur, destinés à
être transfusés à un patient ; il s’agit notamment du sang total, du plasma et
des cellules sanguines d’origine humaine.
Parmi ces produits on distingue les produits autologues destinés au
donneur lui-même et des produits homologues destinés à une autre personne
que le donneur.[27]
Les PSL se distinguent des produits sanguins stables ; la qualification
labile se rapporte essentiellement à la brièveté de la conservation des
principes thérapeutiques ex-vivo, soit parce qu’il s’agit de cellules vivantes
ayants une durée de vie limitée, soit parce qu’il s’agit comme le plasma de
protéines dont l’activité biologique se dégrade en quelques heures.
L’objectif thérapeutique est essentiellement substitutif et vise à
permettre le traitement des patients ayants un déficit plus ou moins profond et
durable d’un ou de plusieurs constituants du sang.
 7

PRODUITS
SANGUINS

PRODUITS PRODUITS
SANGUINS SANGUINS
STABLES LABILES

PRODUITS PRODUITS
SANGUINS SANGUINS
AUTOLOGUES HOMOLOGUES

DERIVES DERIVES
CELLULAIRES PLASMATIQUES

CONCENTRES DE
CONCENTRES DE CONCENTRES DE PLASMA FRAIS
GLOBULES
PLAQUETTES GRANULOCYTES CONGELE
ROUGES

Figure 1: Différant type des PSL

2. Origines des produits sanguins labiles :

Les PSL peuvent être obtenus par :

 Traitement d’un don de sang total : qui est une méthode semi-automatisée
très fréquemment sollicitée dont le principe est de séparer les composants
du sang après centrifugation.

 Aphérèse, la méthode fait appel à une technique spécialisée et

automatisée au moyen d’un séparateur de cellules. En effet, les différents
composants sanguins sont triés par centrifugation ; seul celui ou ceux dont
on a besoin (les globules rouges, les plaquettes ou le plasma) est (sont)
prélevé(s), les autres sont restitués au donneur.
 8

origines des PSL

DON DE SANG TOTAL DON PAR APHERESE

concentré de globules
concentré de plaquettes plasma frais congelé PLASMAPHERESE CYTAPHERESE
rouges

CONCENTRE
THROMBOCYTAPHERESE ERYTHROCYTAPHERESE LEUCOCYTAPHERESE
GRANULOCYTAIRE

Figure 2:Origine des PSL

3. Les différents produits sanguins labiles :

3.1 Le sang total :

3.1.1Définition :
Le sang total est un sang veineux prélevé aseptiquement et additionné
d’un anticoagulant, il est constitué de plasma dans lequel baignent des
globules rouges, des plaquettes et des leucocytes.[1]

3.1.2 Conservation :
La température doit être maintenue entre +2 et +6°c pendant toute la
durée de conservation du produit, cette durée est fonction de la solution
additive :[14]

 Pour la solution CPD une durée de 21 jours.

 Pour la solution CPDA une durée de 35 jours.
 9

3.2 Le concentré de globules rouges:

Figure 3:Concentré de globules rouges

3.2.1 Définition :

Le concentré de globules rouges est un dérivé cellulaire riche, obtenu à

partir du sang total par séparation des globules rouges dont la fonction
principale est le transport d’oxygène.

3.2.2 Préparation :

Le CGR est habituellement obtenu par centrifugation d'une unité de

sang total à 2600 tours/min pendant 4,5 minutes, une solution additive peut
être ajoutée au concentré érythrocytaire pour augmenter la viabilité des
érythrocytes et la durée de leur conservation.[28]

Le CGR est moins fréquemment préparé par érythrocytaphérése.

3.2.3 Conservation :

Le produit est conservé dans un réfrigérateur entre +2 et +6◦C pour des

durées variables selon la solution de conservation utilisée : [14]

 Pour la solution CPDA une durée de 35 jours.

 Pour la solution SAG-MAN une durée de 42 jours.

3.2.4 Indications :

Le CGR est indiqué pour toutes les anémies médicales et chirurgicales

selon des critères de gravité.[16]
 10

3.3 Le concentré de plaquettes:

Figure 4:Concentré de plaquettes

3.3.1 Définition :

Est un produit sanguin labile dérivé du sang total par séparation des
plaquettes qui sont des cellules sanguines responsables du colmatage des
brèches vasculaires.

3.3.2 Préparation :

Le concentré plaquettaire est préparé à partir d’un don de sang total qui
est séparé par une première centrifugation de 2600 tours/min pendant
4,5minutes en CGR et en PRP, ce dernier est centrifugé une deuxième fois à
3850 tours/min pendant 6 minutes afin d’obtenir un concentré plaquettaire
unitaire (CPS) et un plasma pauvre en plaquettes.[28]

Le concentré plaquettaire est préparé aussi par thrombocytaphérése

3.3.3 Conservation :

Le produit est conservé pour une période de 5 jours à une température

entre +20 et +24◦C sous agitation lente et continue. [14]

3.3.4 Indication :

Il est indiqué en cas de saignement avéré et/ou de facteurs de risque

hémorragique. [16]
 11

3.4 Le plasma frais congelé:

Figure 5: Plasma frais congelé

3.4.1 Définition :

Le plasma frais congelé représente 55% du volume du sang total. Il est

formé d'eau à 90%, il contient surtout une grande concentration en protéines,
dont l'albumine, les immunoglobulines ainsi que les protéines de coagulation.

3.4.2 Préparation :

Il est très souvent préparé aseptiquement à partir du sang total par

centrifugation à 3850 tours/min pendant 6 minutes et par sa séparation du
culot globulaire à l’aide d’une presse dans les 6h qui suivent le prélèvement.[28]

Le PFC peut être aussi obtenu par plasmaphérèse.

3.4.3 Conservation:

Le PFC est conservé un an à température inférieure à -25°C, mais

après décongélation le produit doit être transfusé dans les 6h. 14]

3.4.4 Indications :

On compte trois indications réglementées:

 Les coagulopathies de consommation avec effondrement des facteurs de

coagulation.
 Les hémorragies aigues avec déficit global des facteurs de coagulation.
 Les déficits complexes ou rares en facteurs de coagulation quand les
fractions correspondantes ne sont pas disponibles.[16]
 12

4. Hiérarchie des établissements de transfusion sanguine en Algérie : [11]

4.1. Agence nationale du sang :

Est un établissement public à caractère administratif, doté de la

personnalité morale et de l’autonomie financière.

L’agence est placée sous la tutelle du ministre chargé de la santé dont

le siège est fixé à Alger.

Elle est dirigée par un directeur général, administrée par un conseil

d’administration et dotée d’un conseil scientifique.

Cet établissement dispose d’un laboratoire et d’agences régionales

4.2. Agence régionale du sang :

Ce sont des unités dérivantes de l’agence nationale du sang qui assurent

la transfusion sanguine au niveau local ainsi que la coordination des activités
liées aux centres de sang des wilayas ; ces derniers relèvent soit du secteur
sanitaire des centres hospitalo-universitaires ou bien des établissements
hospitaliers spécialisés.

A noter que les centres de sang peuvent être selon un arrêté ministériel,
des centres de transfusion sanguine, des postes de transfusion sanguine ou
des banques de sang.

4.3. Centre de transfusion sanguine :

C’est l’un des centres de sang des wilayas comme précédemment décrit ;
dont les activités principales sont :

 De participer à l’élaboration et à la mise en œuvre des actions nécessaires

pour promouvoir le don du sang.
 De recruter et de gérer les donneurs de sang.
 D’assurer le contrôle médical des donneurs tant lors de leur recrutement
que lors des examens périodiques ultérieurs.
 De procéder au prélèvement du sang.
 De préparer les dérivés sanguins labiles standards et d’assurer leur bonne
conservation.
 De distribuer les dérivés sanguins labiles.
 13

 De réaliser le contrôle de qualité des produits sanguins labiles.

NB : La réalisation des contrôles de laboratoire notamment le contrôle des

produits sanguins labiles doivent répondre aux normes fixées par arrêté
ministériel après décision du conseil scientifique.

5. La gestion de la qualité au niveau d’un centre de transfusion

sanguine:

management
qualité

laboratoire de
assurance
controle de
qualité
qualité

Figure 6:Représente les deux piliers du système de gestion de qualité

au niveau du CTS selon les normes ISO
5.1. Management de la qualité :

Ensemble des activités coordonnées permettant de maitriser la qualité à

tous les niveaux au sein de l’établissement.[10]

Cette démarche repose sur deux structures complémentaires :

5.1.1. Assurance de la qualité :

C’est la Composante du système de management de la qualité visant à

garantir que les composants sanguins ont la qualité requise depuis leur
collecte jusqu’à leur délivrance, et ceci par la maitrise des facteurs de risque
qui peuvent être liés au prélèvement, à la préparation des PSL, ou même à
leur distribution et leur utilisation.[18]

Pour pouvoir contrôler de manière efficace ces différentes sources de

non-conformité le service d’assurance qualité se base sur trois initiatives :[18]
 14

 La description détaillée des processus et la mise en place d’une

atmosphère de bonnes pratiques de fabrication.
 L'établissement de mécanismes de contrôle empirique couvrants l’ensemble
des processus.
 La mise en place de mesures correctives.

5.1.2. Laboratoire de contrôle de la qualité :

Il représente un des deux piliers du management de la qualité dont les

fonctions de contrôle sont assurées par des manipulations techniques ; il
contribue ainsi par l'exploitation des résultats obtenus à la maîtrise des
processus et des produits.

Le laboratoire de contrôle qualité fait parti du centre transfusionnel, il est

organisé de façon à limiter les interactions avec les unités de production, de
qualification et le service d’assurance qualité afin de garantir un contrôle
objectif des paramètres.

Les contrôles qu’assure le laboratoire touchent l’ensemble des produits

sanguins labiles ainsi que les matières premières, les consommables et les
produits intermédiaires.

En vu de la sensibilité de ses services, la réalisation de chaque analyse

est référée d’une part à des caractéristiques réglementaires, à des
spécifications préétablies ou à un cahier des charges et d’autre part au
respect des mesures de bonnes pratiques.

6. L’hémovigilance :

C’est l’ensemble des procédures de surveillance organisées depuis la

collecte du sang et de ses composants jusqu’au suivi du receveur en vue de
recueillir et d’évaluer les informations sur les effets inattendus ou indésirables
résultants de l’utilisation thérapeutique des produits sanguins labiles et d’en
prévenir l’apparition ainsi que les informations sur d’éventuels incidents graves
survenus chez le donneur.[19]
 15

CHAPITRE 2 : CONTROLE DE LA
QUALITE DES PRODUITS
SANGUINS LABILES
 16

Le contrôle de qualité des PSL s’effectue au niveau du laboratoire de

contrôle qualité selon des opérations manuelles et des bonnes pratiques.

Chaque type de PSL est définit par ses propres paramètres

d’appréciation de la qualité à contrôler, il est demandé que ces différents
paramètres correspondent aux normes de référence (exigences) qui eux sont
le fruit de plusieurs études scientifiques assurant une utilisation efficace et
sécurisée sur le plan clinique.

Les principes d’analyse concernant chaque paramètre selon le produit à

inspecter sont comme suit :

7. Contrôle de qualité des concentrés de globules rouges :

Le contrôle de qualité des CGR porte sur la vérification de 4

paramètres :[14][3][15].

controle de
qualité des
CGR

le taux le taux de lyse

le volume l'hématocrite d'hémoglobine des globules
par poche rouges

Figure 7:Les paramètres à contrôler selon les recommandations

législatives françaises en ce qui est des CGR
 17

7.1. Le volume

Figure 8: Représente un appareil de pesée

C’est le paramètre de qualité qui permet l’appréciation de la quantité en

produit fini ; il est calculé par soustraction du poids de la poche vide à partir du
poids de pesée du concentré de globules rouges et par conversion du résultat
en volume en se référant à la densité sanguine.[9][5]

poids de la poche remplie − poids de la poche vide

volume =
densité sanguine

NB : La densité sanguine est de 1,07.[17]

7.2. L’hématocrite :

Il renseigne sur la concentration du produit en principe actif, c’est la

proportion de sang total occupée par les globules rouges, exprimée en rapport
(litre / litre) ou en pourcentage.

La détermination de ce paramètre est généralement automatisée par un

appareil qui fait appel au principe Coulter basé sur la non-conductivité de la
membrane lipidique.

Mais reste que la méthode de référence est celle manuelle (micro-

hématocrite) basée sur la centrifugation d’un tube capillaire et de la
[7]
détermination visuelle de la proportion occupée par le culot globulaire.
 18

Figure 9: Représente un Coulter qui est utilisé pour la détermination de

l’hémoglobine et de l’hématocrite

7.3. Le taux d’hémoglobine par poche :

Exprime la quantité de principe actif dans le produit ; dans la majorité

des laboratoires, la teneur en hémoglobine est estimée par une méthode
colorimétrique automatisée, le principe étant de faire réagir la suspension de
GR avec un réactif qui permet la lyse cellulaire ensuite la complexation de
l’hémoglobine en composé coloré dont l’absorbance à une longueur d’onde
spécifique est fonction de la concentration, cette mesure de la teneur sera
convertie en quantité en la multipliant par le volume de la poche.

A noter que la méthode de référence est une méthode manuelle

« méthode de drabkin » développée dans le titre suivant.[7]

7.4. Le taux de lyse des globules rouges :

Se fait en fin de conservation et nous renseigne sur le niveau

d’altération du produit.

Le principe est simple et fait appel au dosage de la teneur en

hémoglobine libre au niveau du surnageant, laquelle sera rapportée à la
concentration totale tenant compte de l’hématocrite.

La teneur en hémoglobine d’une solution faiblement concentrée

(hémoglobine libre au niveau du surnageant) est analysée de préférence par
la méthode de Drabkin ou toutes les formes d'hémoglobines présentes en
solution sont transformées en cyanmethémoglobine sous l'action de Cyanures,
L'intensité de la coloration apportée par le composé est directement
proportionnelle à sa concentration.
 19

Une courbe d’étalonnage est à la base de la conversion de la densité

optique en teneur.

Le résultat final est calculé à partir du rapport :[21]

( )( )
Tl=
( )

Figure 10: Principe de la méthode drabkin pour le dosage de

l’hémoglobine
8. Contrôle de qualité des plasmas frais congelés :

Le contrôle de qualité des PFC est basé sur 6 paramètres

d’analyse :[14][15][3]

controle qualité
des pfc

taux de taux de
taux de globules
volumes plaquettes leucocytes taux de facteur 8 ph
rouges résiduels
résiduelles résiduels

Figure 11:Les paramètres à contrôler selon les recommandations

législatives françaises en ce qui est desPFC
8.1. Le volume :

Comme pour le CGR, c’est’ un paramètre de qualité utile pour apprécier

la quantité du produit, il suit le même principe de mesure à savoir la
conversion du poids de pesée en volume.[9][5]

poids de la poche remplie de pfc − poids de la poche vide

V=
1,01
 20

NB : La densité du plasma =1,03 ; densité du plasma avec solution

additive = 1,01 [17]

8.2. Taux des composés cellulaires résiduels indésirables :

Les trois paramètres (taux de Gr résiduels, taux de plaquettes

résiduelles, taux de leucocytes résiduels) sont soumis au même principe
d’analyse.

Sous microscope et à l’aide d’un hémocytomètre, les différentes

concentrations de cellules sont déterminées après comptage.

Pour faciliter la manipulation, une dilution est nécessaire puisque la

solution concentrée demande beaucoup plus d’efforts, ce qui pourrait causer
des erreurs et par conséquent le non fiabilité des résultats.

NB : Le comptage des leucocytes est facilité par l’utilisation du violet de cristal.

Figure 12: Représente une cellule de Malassez utilisée pour le comptage

cellulaire

8.3. Taux du facteur VIII :

Le facteur VIII est le facteur de coagulation le plus sensible à la

conservation, il est identifié comme étant thermolabile dans plusieurs études
expérimentales, ce qui explique l’intérêt porté par les différentes références
pour le dosage de sa concentration au niveau des PFC lors du contrôle de leur
qualité.

Le dosage du facteur VIII repose généralement sur le dosage de

l'activité coagulante par méthode chronométrique.
 21

Figure 13: Coagulometre utilisé pour le dosage du facteur VIII

8.4. Le pH :

Il est mesuré à l’aide d’une électrode de verre dont le potentiel varie en

fonction de la concentration des ions hydrogènes suivant l’équation de
Nernst ; ce potentiel est mesuré par rapport à une électrode de référence à
l’aide d’un potentiomètre à haute impédance communément appelé pH-mètre.

9. Contrôle qualité des concentrés plaquettaire :[14] [15] [3]

controle de
qualité des cps

le taux de le taux de
le volume le pH
plaquettes leucocytes

Figure 14: Les paramètres à contrôler selon les recommandations

législatives françaises en ce qui est des CPS
9.1. Le volume :

Le volume est calculé de la même façon que pour les deux produits
développés précédemment, et ceci en divisant le poids net du concentré
plaquettaire par la densité des plaquettes qui est de 1,03[9][5]

poids de la poche de CPS − poids de la poche vide

volume =
1,03
 22

9.2. Taux de plaquettes et des leucocytes :

Ces deux paramètres sont déterminés par comptage sur
hémocytomètre à l’aide d’un microscope optique. (de la même façon que pour
le PFC)
9.3. Le pH :

Le ph est exploré de la même façon que pour le contrôle des PFC.

10. Contrôle de qualité du sang total :[14] [15] [3] [7]

controle de
qualité du
sang total

le volume hémoglobine hémolyse

Figure 15:Les paramètres à contrôler selon les recommandations

législatives françaises en ce qui est du sang total
Ces paramètres de contrôle ont les mêmes principes que décrits
précédemment pour le contrôle de qualité des CGR.

11. Les normes de qualité des produits sanguins labiles:[14] [11]

11.1. Les normes de qualité concernant les concentrés de globules

rouges:

Tableau 1: Normes de qualité des CGR selon la décision du 8 février

2018 (normes françaises) publiée le 13 mars 2018 dans le JORF
n°0060 et selon l’arrêté du 24 Mai 1998 (normes algériennes)

Volume Hémoglobine Hématocrite Hémolyse

(ml) (g) (%)

Normes
françaises ≥ 125 ≥ 40 50-70 < 0,8
solution additive
CGR avec

Normes Il n’existe
algériennes ≥ 175 ≥ 45 50-70 pas de
normes
 23

11.2. Les normes de qualité des plasmas frais congelés :

Tableau 2:Normes de qualité des PFCselon la décision du 8 février 2018
(normes françaises) publiée le 13 mars 2018 dans le JORF n°0060 et
selon l’arrêté du 24 Mai 1998 (normes algériennes)

Volume Taux de Taux de Taux de Taux de pH

(ml) facteur LEC PQT GR
VIII (UI) (cellules /l) (cellules /l) (cellule/l)
Normes
françaises ≥ 200 ≥ 0,7 ≤ 1×106 ≤ 25×109 ≤ 6×109 [7,0 -
7,5]
Normes Il n’existe Il n’existe
algériennes ≥ 200 ≥ 0,7 pas de ≤ 25 x 109 pas de [7,0 -
normes normes 7,5]

11.3. Les normes de qualité des concentrés plaquettaires :

Tableau 3: Norme de qualité des CPS selon la décision du 8 février 2018
(normes françaises) publiée le 13 mars 2018 dans le JORF n°0060 et
selon l’arrêté du 24 Mai 1998 (normes algériennes)
le taux de Le taux de
Le volume Ph leucocytes plaquettes

Normes
françaises ≥100 6,4 1,0 x 106 2,0 x 1011
Normes
algériennes [40- 60] [6,0- 7,4] 2 x 108 0,5x1011
11.4. Les normes de qualité pour les unités de sang total :
Tableau 4: Norme de qualité pour le sang total selon la décision du 8
février 2018 (normes françaises) publiée le 13 mars 2018 dans le JORF
n°0060 et selon l’arrêté du 24 Mai 1998 (normes algériennes)

Le volume Hémoglobine hémolyse

Normes françaises
≥ 350 ≥ 40 <0,8%
Normes Il n’existe pas de
algériennes [400 -500] ≥ 45 norme
NB : les normes correspondantes au volume tiennent compte des solutions
anticoagulantes et de conservation sauf pour les normes concernant le volume du
sang total.
 24

PARTIE II : PARTIE
PRATIQUE
 25

1. Problématique :

Le centre de transfusion sanguine de Blida assure un contrôle incomplet

des deux produits sanguins labiles CGR et PFC.

2. Les Objectifs :

Objectif principal :
 Introduire au niveau du centre de transfusion sanguine de Blida les
différents paramètres de contrôle qualité manquants à savoir le taux
de lyse des globules rouges pour les CGR et le taux de facteur VIII
pour les PFC.
Objectifs secondaires :

 Assurer le contrôle préexistant des CGR et des PFC.

 Vérifier la conformité des deux produits tout au long de leur
conservation.
3. Critères d’inclusion et d’exclusion :
3.1. Pour les concentrés de globules rouges :
3.1.1. Critères d’inclusion :

Sont inclus les CGR finis post étiquetés issus d’un don de sang simple,
conditionnés soit dans des poches doubles ou triples prélevées au niveau du
CTS ou lors d’une collecte et préparés par décantation ou par centrifugation.

3.1.2. Critères d’exclusion :

Les poches non incluses sont celles lipémiques, hémolysées au départ

ainsi que celles ictériques.

3.2. Pour les plasmas frais congelés :

3.2.1. Critères d’inclusion :

Sont inclus les PFC finis post étiquetés issus du sang total ainsi que les
PFC issus de plasmaphérèse.
 26

3.2.2. Critères d’exclusion :

Nous avons évité toutes les poches ictériques et celles contaminées par
du sang.

4. Méthodes :
4.1. Cadre de l’étude :
Notre étude était prospective traitant le contrôle de la qualité des produits
sanguins labiles, elle a été réalisée au niveau du CTS CHU de Blida pendant
une période de 86 jours (du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018).

Elle a été fondée sur des normes françaises du fait que les normes
algériennes présentent des lacunes, à savoir les quelques paramètres
manquants sont :

 le taux d’hémolyse pour les CGR

 le taux de leucocytes et le taux de globules rouges pour les PFC.

Les autres paramètres communs sont identiques et éliminent ainsi toute

nécessité de travailler en distinction des deux normes algériennes et
françaises.

4.2. Population concernée :

L’étude s’est faite sur des poches de CGR et des poches de PFC.
4.3. Échantillonnage :

L’échantillonnage doit être maitrisé pour assurer une fiabilité des

résultats fournis; de ce fait, nous avons travaillé dans la mesure du possible
dans le respect des normes de référence et des bonnes pratiques.

Cependant pour des raisons techniques, nous avons apporté des

changements pour le type de prélèvement à cause de la quantité insuffisante
de plasma récolté par la méthode de référence.[25]

A cet effet, nous avons estimé nécessaire de substituer la procédure

non destructive par celle qui est destructive, et pour ce faire, nous étions
obligés de manipuler sous hôte afin de prévenir une éventuelle contamination.
 27

4. [Link] des échantillons :

A partir de la moyenne de production estimée pour chacun des deux

PSL (CGR et PFC), nous avons calculé en tenant compte de notre durée de
pratique le nombre minimal d’échantillons à contrôler selon les normes
françaises, lesquelles imposent l’analyse d’au moins 1% des productions
respectives.[14]

Ainsi selon une moyenne de préparation de 50 poches de CGR et 15

poches de PFC par jour, le CTS de Blida arrive à produire respectivement
4300 et 1290 poches sur une période de 86 jours,1 % de cette production est
l’équivalent de 43 poches de CGR et 13 poches de PFC qui est le nombre
minimal d’unités à contrôler.

Lors de notre pratique nous avons contrôlé :

 96 concentrés de globules rouges.

 29 plasmas frais congelés.

4.3.2. Procédure d’échantillonnage :

[Link]. Pour les concentrés de globules rouges :

Selon la disponibilité du produit, un choix des unités à contrôler se

faisait soit à leur date de péremption soit à leur début de conservation.
La procédure de prélèvement était la suivante :[22]
 Homogénéisation du contenu de la poche par trois cycles de stripping et
agitation.
 Aspiration douce par le biais d’une seringue d’un volume suffisant du
concentré de globules rouges (pour éviter toute hémolyse pouvant être due
à la manipulation).
 Occlusion de façon temporaire de la tubulure en clampant celle-ci par une
pince (pour éviter toute contamination éventuelle des poches).
 Soudure thermique de la tubulure.
 Élimination de la partie perforée en avale de la soudure.
 28

 Remplissage des tubes à essai sous faible débit et après élimination de

l’aiguille.

Figure 16:Procédures d'échantillonnage des CGR

NB : Le prélèvement est effectué sous hôte à flux d’aire laminaire après
stérilisation des poches et du matériel par UV.

[Link].Pour les plasmas frais congelés :

Le choix des unités à contrôler se faisait au hasard et de façon à

représenter une année de conservation (des poches récemment préparées,
des poches à mi-conservation et des poches à péremption).
La procédure de prélèvement est la suivante :
 Décongélation de la poche dans un bain thermostaté à 37°c
 Homogénéisation du contenu par trois cycles de stripping et agitation.
 Prélèvement à l’aide d’une seringue stérile d’un volume suffisant.
 Soudure thermique de la tubulure.
 Élimination de la partie perforée en avale de la soudure.
 Remplissage des tubes a essai.

Figure17 : Procédure d'échantillonnage des PFC

 29

4.4. Suivi des échantillons :

Seuls les CGR échantillonnés au début de leur conservation ont bénéficié

d’un suivi, soit hebdomadaire si leur taux de lyse était important ou
bihebdomadaire si leur taux de lyse était mineur.
4.5. Méthodes d’analyse :

Après avoir passé l’étape d’échantillonnage, nous remplissions la fiche

technique journalière (par la date d’analyse, le numéro de chaque poche et
les dates respectives de préparation et de péremption) pour arriver enfin au
contrôle proprement dit :
4.5.1. Pour les concentrés de globules rouges :

[Link]. Le volume :

Nous avons procédé comme suit :

 Allumage de la balance.
 Tare de la balance.
 Pesée de la poche de CGR.
 Conversion du résultat tenant compte du poids de la poche vide :

Ppoche − Ppochevide
VCGR =
1.05

NB :

 Le poids d’une poche vide est de 32g (des vérifications planifiées et des
vérifications lors d’un changement de fournisseur sont obligatoires).
 1.05 étant la densité du sang.

[Link]. Hématocrite et hémoglobine :

Comme c’est un control de routine, nous nous sommes référés à la

procédure du laboratoire dont la technique est la suivante :
 Préparation d’une dilution au tiers : un volume de l’échantillon est
additionné de deux volumes de solution isotonique.
 Agitation de la préparation
 30

 Analyse par le sysmex : après avoir introduit l’identifiant , on fait passer la

dilution pour aspiration, le résultat sera affiché au niveau de l’écran de
l’appareil et imprimé.
 Calcul de l’hématocrite : la valeur mesurée par le Coulter est multipliée par
l’inverse de la dilution.
 Calcul de l’hémoglobine : l’appareil mesure une teneur en tenant compte
de la dilution et en multipliant par le volume de la poche, le résultat final est
exprimé en quantité (g/poche).

Figure 18: procédure de détermination de l'Hb et HTQ

[Link]. Taux de lyse des globules rouges :

Pour la détermination de ce paramètre, deux étapes nous étaient

nécessaires :
Confection d’une courbe d’étalonnage :
 Du sang total est mis dans un tube à essai et additionné d’un même
volume d’eau distillée.
 Il est laissé au repos et à température ambiante pour plus de 30 minutes
provoquant ainsi une hémolyse complète.
 Ce tube sera passé dans le Sysmex ou le taux d’hémoglobine sera
mesuré et par conséquent cette solution sera considérée comme étalon.
 A partir de l’hémolysât des dilutions de demis en demis seront réalisées
(jusqu'à la 13éme dilution).
 Chaque dilution sera analysée par le spectrophotomètre à une longueur
d’onde de 450nm.
 Sur une feuille millimétrée les données seront rapportées pour enfin aboutir
à une courbe traduisant une fonction linéaire passant par le zéro
(DO=F(concentration)).
 31

Analyse du taux de lyse des globules rouges :

 Centrifugation de deux tubes à essai de 5ml contenants un volume de
l’échantillon à 4000 tours /min pendant 5min.
 Transfert des deux surnageants dans un seul tube à essai.
 Analyse par le spectrophotomètre : ce dernier est rincé, programmé à une
longueur d’onde de 450 nm avant utilisation.
 La valeur affichée par le spectrophotomètre est projetée au niveau de la
courbe d’étalonnage pour la détermination de la teneur en hémoglobine
libre.
 En se rapportant au résultat d’hémoglobine totale le calcul du taux de lyse
est comme suit :

( )( )
Tl=
( )

Figure 19: Procédure de détermination du taux de lyse

4.5.2. Pour le plasma frais congelé :

[Link]. Le volume :

Nous avons suivi la même procédure que pour la détermination du volume

des CGR à savoir :
 Allumage de la balance, qui sera tarée avant utilisation
 Pesée de la poche de PFC.
 Application de la formule de conversion, tenant compte du poids de la
poche vide :
Ppoche − Ppoche vide
VPFC =
1.02
NB: 1.02 étant la densité du plasma
 32

[Link]. Les taux de plaquettes, GR et GB :

Nous nous sommes référés à la procédure manuelle, dont les étapes

sont :
 Préparation d’une dilution au dixième (1/10) : un volume de l’échantillon est
additionné de 9 volumes d’isotan (solution de dilution utilisée par le
Sysmex).
 Agitation de la préparation.
 Confection d’une lame de malassez : à l’aide d’une pipette, un volume de la
dilution est déposé de telle sorte qu’il se diffuse par capillarité entre lame et
lamelle.
 15 minutes de repos sont nécessaires pour la stabilisation de la
suspension.
 Lecture de la lame sous microscope : chaque type de cellules est analysé à
part par comptage visuel qui se fait cadran par cadran; nous avons estimé
que la moyenne des cellules dans 6 surfaces de mesure est largement
suffisante pour arriver à un résultat correct, ainsi cette valeur sera
multipliée par 100 pour calculer la totalité des cellules au niveau de la lame
et qui est équivaut a 1µl.
 Conversion du résultat en nombre / l
[Link]. Taux de facteur VIII :
Avant d’entamer l’analyse, l’appareil doit être programmé par l’insertion des
coordonnées d’une courbe d’étalonnage, les étapes sont les suivantes :
 Préparation de quatre étalons : des dilutions (1/10éme, 1/20éme, 1/40éme,
1/80éme) sont réalisées à partir de l’unicalibrateur qui sera dilué dans une
solution tampon d’owren.
 Analyse du temps de coagulation des dilutions : cette analyse suit la même
technique que décrite si dessous pour l’exploration des échantillons.
 Configuration de l’appareil : l’option "étalonnage" au niveau du menu
principal permet de réaliser et d’enregistrer la courbe à partir des données
de concentration propres aux étalons et de leur temps de coagulation
respectif.
 33

L’analyse de l’échantillon n’est effectuée qu’après avoir réussi la

programmation de l’appareil; la procédure est comme suite :

préparation d'une ajout de 50 µl du ajout de 50µl de

dilution au 1/10 par déficient en fVIII à 50µl céphaline caolin au
solution d'owren de la dilution mélange

ajout de 50 µl de CaCl2
avec déclanchement du incubation pendant
lecture
chronométre au méme 180 sec
temps

Figure 20:Procédure de détermination du facteur VIII

[Link] des résultats :

Les données ont été enregistrées au niveau du logiciel "SPSS", ce

dernier permet un traitement statistique facile des résultats.
Nous avons procédé à une étude descriptive de chaque variable avec la
détermination de l’effectif, de la moyenne, de l’écart type, du minimum, du
maximum, du mode, du % de la non-conformité ainsi que le pourcentage de
conformité; et selon des niveaux de qualité limites, nous avons décidé
d’accepter ou non les défauts décelés concernant les paramètres de contrôle.
Un niveau de qualité limite est défini comme étant le pourcentage
minimal admissible des PSL conformes pour l'ensemble des unités issues
d'une production donnée.
À noter que chaque paramètre est régit par son propre niveau de
qualité :
Les niveaux de qualité liés aux concentrés de globules rouges :
Tableau 5:Niveau de qualité limite des CGR selon la décision du 8 février
2018 publiée le 13 mars 2018 dans le JORF n°0060

Dénomination abrégée Hgb (g) Hct (%) Hemolyse volume

Niveau de qualité limite (NQL) ≥ 93 % ≥ 95 % ≥ 80 % 100%

à 95 % de confiance
 34

Les niveaux de qualité liés aux plasmas frais congelés :

Tableau 6:Niveau de qualité limite des PFC selon la décision du 8 février

2018 publiée le 13 mars 2018 dans le JORF n°0060

Dénomination Volume FVIII (UI/ml) Leuc Pqt GR

Abrégée (ml)
Basé sur la
Niveau de qualité 100 % conformité ≥ 95 % ≥ 95 % ≥ 95 %
Limiteà 95 % De la moyenne
de confiance

Pour l’étude des facteurs de risque, nous avons comparé les différentes
distributions à l’aide du test de Khi² et le test de Fisher, nous avons utilisé le
rapport de cote qui est à savoir l’odds ratio dans le but déterminer le sens
d’une éventuelle différence.

En plus des statistiques descriptives et des tests de comparaison des

distributions nous avons utilisé le test de Wilcoxon pour l’étude de l’évolution
du taux de lyse.

5. Matériels :
Durant notre étude nous avons utilisé le matériel suivant :
[Link]ériel d’analyse :

 Un Coulter (sysmex) pour FNS : pour détermination de l’hématocrite et

hémoglobine.
 Un spectromètre UV : pour la détermination du taux de lyse.
 Analyseur de coagulation type DIGON et STAGO pour dosage du facteur
VIII.
[Link]ériel de manipulation :

 Une balance de pesée.

 Gants.
 Portoirs.
 Les micropipettes de 50µl , 100 µl ,200 µl , 500 µl , 1000 µl
 Stripeurs.
 Seringues.
 Centrifugeuse.
 Agitateur pour tubes.
 35

 Machine de thermosoudage.
 Ciseau pour clampé les tubulures.
 Une hotte UV-flux laminaire stérilisé avant et après utilisation.
 Congélateur.
 Réfrigérateur.
 Bain thermostaté.
 Tubes secs.
 Solution de dilution de sysmex.
 Les emboues pour micropipettes.
 Microscope.
 Cellule de Malassez.
 36

PARTIE III : PARTIE

RESULTATS
 37

1. caractérisation des populations statistiques :

1.1 Caractérisation de la population des CGR :
Les différentes poches contrôlées sont arrangées selon plusieurs
critères :

Selon le type de poche :

Tableau 7: Répartition de la population de CGR pris du CTS de CHU de

Blida du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018 selon le type de poches

type de poche

Double Triple

84 12

Selon le lieu de prélèvement : Selon le procédé de préparation :

Tableau 8:Répartition de la population Tableau 9:Répartition de la population

de CGR pris du CTS de CHU de Blida de CGR pris du CTS de CHU de Blida du
du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018 18-mars-2018 au 02-Juin-2018 selon le
selon le lieu de prélèvement procédé de préparation

lieu de prélèvement Procédé

CTS Collecte Centrifugation Décantation
15 81 13 83

Selon les délais entre la préparation et le control :

Tableau 10: Répartition de la population de CGR pris du CTS de CHU de

Blida du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018 selon le délai entre la préparation et le
contrôle des poches.
Poche prélevée Poche ayant bénéficiée
à péremption d’un suivi
Double 7 77
Poche

Triple 5 7
 38

1.2. Caractérisation de la population de PFC :

Les 29 poches de PFC contrôlées sont arrangées selon deux critères :

Selon le procédé de préparation :(traitement physique d’un don de sang

total /plasmaphérèse)

Tableau 11 : Répartition de la population de PFC pris du CTS de CHU de

Blida du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018 selon le type de poche
type de poche ou origine

Aphérèse don total

15 14

Selon les délais restants avant leur péremption

Tableau 12: Répartition de la population de PFC pris du CTS de CHU de

Blida du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018 selon les délais restants avant la
péremption des poches
Date avant ⦋0-3⦋ ⦋3-6⦋ ⦋6- 9⦋ ⦋9- 12⦌
Péremption
Nombre de poches 2 2 15 10

2. Etude descriptive des variables :

2.1. Etude macroscopique :

2.1.1. Etude macroscopique des CGR :

Au départ, nous avons récolté 104 poches et selon nos critères

d’inclusion et d’exclusion, nous avons retenu 96 poches et éliminé 5 poches
hémolysées et 3 lipémiques, comme montré ci dessous :
 39

104

poches
poches poches
lipémiques
normales hémolysées

96 3 5

Figure 21: Représente les différents aspects macroscopiques de la

population de CGR au niveau du CTS
2.1.2. Etude macroscopique des PFC :
Selon nos critères d’inclusion et d’exclusion, nous avons gardé toutes
les poches de PFC normales et les résultats sont les suivants :

33

normales lipémiques

29 4

Figure 22: Représente l’aspect macroscopique concernant la population

de PFC trouvés au niveau du CTS

2.2. Analyse des résultats biologiques:

Nous avons procédé à une étude statistique descriptive des différentes

variables, chacune d’elles représente un des paramètres de contrôle qualité
entrepris au cours de notre étude ; les résultats sont les suivants :
 40

2.2.1. Résultats biologiques pour ce qui est des CGR :

[Link]. Récapitulatif des observations :

 Résultats concernant le volume (ml) :

Tableau 13: Résumé statistique des résultats concernant le volume des
CGR échantillonnés au CTS de Blida du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018

Seuil de conformité Moyenne Ecart type Mode Maximum minimum

Norme Fr : ≥125
Norme Dz : ≥175 278.7 44.69 284 387 183

Le volume minimal était supérieur à 175 ml, ce qui argumente le fait

que toutes les poches sont conformes aux deux normes de référence.

 Résultats concernant l’hémoglobine (g/poche) :

tableau14: Résumé statistique des résultats concernant le taux d’HGB
des CGR échantillonnés au CTS de Blida du 18-mars-2018 au 02-Juin-
2018

Seuil de conformité Moyenne Ecart type Mode Maximum Minimum

Norme Fr : ≥40
Norme Dz : ≥45 51.9792 8.61869 47.12 80.48 29.4

En comparant le minimum au seuil de conformité, il existe des poches

ayants un taux d’hémoglobine inférieur aux normes.
 41

 Résultats concernant l’hématocrite (%) :

Tableau 15:Résumé statistique des résultats concernant le taux d’HTQ
pour les CGR échantillonnés au CTS de Blida du 18-mars-2018 au 02-
Juin-2018
Seuil de conformité Moyenne Ecart type Mode Maximum Minimum

50-70 61,82 9,52 55,8 86,1 35,7

En comparant le maximum et le minimum aux seuils de conformité il

existe des poches ayants un taux d’hématocrite insuffisant et d’autres un taux
excédentaire.
 Résultats concernant le taux d’hémolyse (%) :
- Courbe d’étalonnage
Chaque semaine et avant d’entamer l’analyse du taux d’hémolyse, nous
réalisions une courbe d’étalonnage dont ci-joint les résultats obtenus pour
l’une d’elles :
Tableau16 : Tableau représentant les DO en fonction des concentrations
en HGB réalisé au niveau du CTS de Blida 18-mars-2018
Dilution ½ ¼ 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256

HGB 4,6 2,3 1,15 0,575 0,2875 0,143 0,071 0,035

DO ND ND ND ND ND 1,43 0 ,77 0,429

Dilution 1/512 1/1024 1/2048 1/4096 1/8192 1/16384 1/32768

HGB 0,0179 8,9×10-3 4,4×10-3 2,2×10-3 1,1×10-3 5,6×10-4 2,8×10-4

DO 0,229 0,116 0,057 0,035 ND ND ND

La courbe concernant le tableau d’étalonnage prise comme exemple est

affichée au niveau de l’annexe.
- Résultat statistique du taux de lyse:
Tableau 17:Résumé statistique des résultats concernant le taux de lyse
des CGR échantillonnés au CTS de Blida du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018
SC Moyenne Ecart type mode Maximum Minimum
<0,8 0,32 0,26 0,8 1,88 0,06
 42

Selon un seuil de conformité minimal de 0,8% et un taux de lyse

atteignant les 1,88% ; et pour la poche ayant démontrée la plus grande valeur
d’hémolyse, nous avons déduit la présence de non-conformité liée au
paramètre du taux d’hémolyse.

- Evolution globale du taux de lyse au cours du temps :

Tableau 18:Tableau représentant les moyennes du taux de lyse en
fonction de la durée de conservation des CGR échantillonnés au CTS de
Blida du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018

Poches doubles

Délai 0-7 7-14 14-21 21-28 28-35 35

Moyenne 0,09 0,119 0,17 0,183 0,2606 0,294

Ecart-type 0,059 0,067 0,081 0,105 0,1635 0,195

Maximum 0,240 0,37 0,43 0,52 0,73 1,08

Minimum 0,010 0,042 0,060 0,056 0,109 0,058

Poches triples

Délai 0-7 7-14 14-21 21-28 28-35 35 42

Moyenne 0,097 0,124 0,158 0,18 0,19 0,31 0,43

Ecart-type 0,386 0,4 0,046 0,80 0,10 0,27 0,49

Maximum 0,12 0,17 0,22 0,32 0,39 0,62 1,88

Minimum 0,04 0,06 0,08 0,7 0,08 0,11 0,14

Figure23 : Schéma représentatif de l’évolution du taux d’hémolyse

pour les deux types de poches.
 43

A partir des résultats obtenus en utilisant le test de Friedman, nous avons

observé une évolution significative du taux de lyse depuis la troisième semaine de
conservation pour les poches doubles, et depuis le tout début de la conservation
pour les poches triples.
 Résultat concernant le volume du sang total :
Tableau 19: Résumé statistique des résultats concernant les volumes de
sang total a partir des quels sont préparés les CGR échantillonnés au
CTS de Blida du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018.
Seuil de Moyenne Ecart type Mode Maximum Minimum
Conformité
350-450 402,05 58,82 380.3 600 200

Nous remarquons à partir des deux résultats de volume maximal et

minimal une non correspondance aux normes.
[Link]. Etude des conformités :
 Pour l’hémoglobine : Pour l’hématocrite :
Tableau 20: Conformité du taux Tableau 21 : Conformité de l’HQT des
d'Hb totale des CGR échantillonnés CGR échantillonnés au CTS de Blida
au CTS de Blida du 18-mars-2018 au du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018
02-Juin-2018

conformité du taux d’hémoglobine conformité de l’hématocrite

totale
non Conforme NQL Non Conforme NQL
conforme Conforme
Eff % Eff % Eff % Eff %
6 6 90 94 93% 27 28 69 72 95%

 Pour le taux d’hémolyse : pour le volume total du sang total :

Tableau 22 : Conformité du taux Tableau 23 : Conformité du sang
d’hémolyse des CGR échantillonnés total des CGR échantillonnés au
au CTS de Blida durant la période CTS de Blida du 18-mars-2018 au 02-
entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin- Juin-2018
2018

Conformité du taux d’hémolyse Volume du sang total

Conforme Non NQL Non Conforme NQL
Conforme conforme
Eff % Eff % Eff % ff %
88 92 8 8 80% 35 36 61 64 100%
 44

 Pour le volume du CGR :

Tableau 24 : Conformité du volume pour les CGR échantillonnés au CTS
de Blida du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018

Conformité du volume des CGR

non Conforme NQL
conforme
Eff % Eff %
0 00 99 100 100%
Résultats :
Les pourcentages de conformité liés au taux d’hémoglobine et au taux
d’hémolyse répondent aux niveaux de qualité limites ; par contre, celui lié a
l’hématocrite dépasse le niveau de tolérance définit par l’ANSM.
2.2.2. Résultats biologiques pour ce qui est des PFC :

[Link]. Récapitulatif des observations :

 Résultats concernant le volume :

Tableau 25 : Résumé statistique des résultats concernant le volume
pour les PFC échantillonnés au CTS de Blida du 18-mars-2018 au 02-
Juin-2018
SC Moyenne Ecart type Mode maximum minimum
>200 208,57 14,63 200 244 184

Le volume minimal constaté dans cette population souligne la présence

de non-conformité comparé au volume de référence.
 Résultats concernant le taux de plaquettes :
Tableau 26 : Résumé statistique des résultats concernant le taux de
plaquette pour les PFC échantillonnés au CTS de Blida du 18-mars-2018
au 02-Juin-2018
SC Moyenne Ecart type Mode maximum minimum
≤ 25×109 27,43×109 18,07×109 4×109 62×109 4×109

La valeur maximale du taux de plaquettes est supérieure à la norme.

 45

 Résultats concernant le taux de leucocytes :

Tableau 27 : Résumé statistique des résultats concernant le taux de
leucocyte pour les PFC échantillonnés au CTS de Blida du 18-mars-
2018 au 02-Juin-2018
SC Moyenne Ecart type Mode Maximum minimum

≤ 1×106 5,83×106 11,1×106 0 40×106 0

Le taux de leucocytes maximal est anormalement élevé.

 Résultats concernant le taux de globules rouges :
Tableau 28 : Résumé statistique des résultats concernant le taux de GR
pour les PFC échantillonnés au CTS de Blida du18-mars-2018 au 02-
Juin-2018
SC moyenne Ecart type Mode Maximum minimum
≤ 6×109 0,03×109 0,027×109 0,04×109 0,09×109 0

La totalité des poches sont conformes par rapport au taux des globules
rouges.
 Résultats concernant le taux de facteur VIII :
Nous avons travaillé avec un coagulométre de type STAGO que nous
avons programmé par l’enregistrement de la courbe d’étalonnage du facteur
VIII suivante :

Figure 24 : Courbe d’étalonnage pour le facteur VIII réalisée avec un

coagulométre de type STAGO au niveau du laboratoire centrale de

frantz-fanon
 46

Tableau 29 : Résumé des résultats statistiques concernant le taux de

facteur VIII pour les PFC échantillonnés au CTS de Blidadu18-mars-2018
au02-Juin-2018

SC moyenne Ecart type Mode Maximum Minimum

˃70% 123,7% 56,28 200 200% 20 ,2%

En moyenne les poches de PFC sont conformes à la norme.

 Résultats concernant le pH :

Tableau 30 : Résumé statistique des résultats concernant le PH pour les

PFC échantillonnés au CTS de Blida du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018

SC Moyenne Ecart type Mode Maximum minimum

[7,0-7,5] 7,23 0,093 7,14 7,42 7,06

Les deux valeurs de pH maximal et celle du pH minimal font parties de

l’intervalle de référence.

[Link]. Etude des conformités :

 Pour le volume : pour le taux de leucocytes :

Tableau 31 : Conformité du Tableau 32 : Conformité du taux
volume pour les PFC de leucocytes pour les PFC
échantillonnés au CTS de Blida du échantillonnés au CTS de Blida du
18-mars-2018 au 02-Juin-2018 18-mars-2018 au 02-Juin-2018

Conformité du volume Conformité du taux des leucocytes

non Conforme NQL non Conforme NQL
conforme conforme
eff % Eff % Eff % Eff %
3 10,4 26 89,6 100% 28 30,30 19 73 95%
 47

 Pour le taux de plaquettes : pour le taux des globules rouges

Tableau 33 : Conformité des PQT Tableau 34 : Conformité des GR pour
pour les PFC échantillonnés au CTS les PFC échantillonnés au CTS de
de Blida du18-mars-2018 au 02-Juin- Blida du 18-mars-2018 au 02-Juin-
2018 2018

Conformité du taux des plaquettes Conformité du taux des globules

non Conforme NQL rouges
conforme non Conforme NQL
eff % Eff % conforme
95% Eff % Eff %
13 39 16 61 00 00 33 100 95%

 Pour le pH :
Tableau 35 : Conformité du PH pour les PFC échantillonnés au CTS de Blida
du 18-mars-2018 au 02-Juin-2018

Conformité du Ph
non Conforme NQL
conforme
Eff % Eff %
00 00 33 100 I.E

Résultats :

Ainsi selon les normes de tolérance imposées par l’ANSM concernant

chaque paramètre, on remarque un défaut de conformité pour le volume, le
taux de leucocytes et le taux de plaquettes ; ce qui n’est pas le cas pour le
taux des globules rouges, le pH et pour le taux de facteur 8 qui eux
correspondent aux normes.
 48

3. Étude des facteurs qui pourraient influencer la non-conformité des PSL :

3.1. Facteur pouvant influencer la qualité des CGR :

3.1.1. Etude des facteurs de risque pouvant être impliqués dans la non-
conformité de l’hématocrite :

[Link]. Etude de l’implication de la décantation par rapport à la centrifugation :

Tableau 36 : Tableau de contingence pour l’étude de l’implication

du procédé de fabrication dans la conformité ou non de l’HTQ
Non-conformité HTC Conformité HTC Total
Centrifugation 2* 11 13
Décantation 25 58 83
Total 27 69 96

*valeur de l’effectif théorique <5

Le calcul du test de ficher a donné le résultat suivant :

Tableau 37 : Résultat du test de FISHER pour l’implication
du procédé de fabrication dans la conformité ou non de l’HTQ

Test de Fisher exactes

Test valeur-p (bilatérale)
Fisher exacte 0.45

La valeur P est supérieure à 0,05 donc H0 est retenue (il n’y a pas de
différence significative).
[Link]. Etude de l’implication de la non-conformité
du volume sanguin total :
Tableau 38 : Tableau de contingence pour l’étude de l’implication du
volume sanguin total sur la conformité ou non de l’HTQ
Non-conformité HTC Conformité HTC Total
Non-conformité VOL 12 23 35
Conformité VOL 15 46 61
Total 27 69 96

Résultat du test statistique : nous avons fait appel au test de Khi² exact
qui est égal à 1,03 et qui implique l’absence de toute implication de la non-
conformité du volume sanguin total dans le défaut d’hématocrite.
 49

3.1.2. Etude des facteurs pouvant impliquer une non-conformité du taux

d’hémolyse :
[Link]. Etude de l’implication de la manipulation entreprise lors de notre étude :
Nous avons cherché à déterminer s’il y avait une implication de la
manipulation des poches dans l’hémolyse de ces dernières; les résultats sont
les suivants :
Tableau 39 : Tableau de contingence pour l’étude de
L’implication de la manipulation sur l’hémolyse
Non hémolysé Hémolysé Total
Non manipulé 9 3* 12
Manipulé 79 5 84
Total 88 8 96
*valeur de l’effectif théorique < à 5

valeur-P = 0,12 ; cette valeur est supérieure à 0,05 donc H0 est retenue
(il n y’a pas de différence significative entre la manipulation et la non
manipulation dans l’apparition de l’hémolyse).
[Link]. Etude de l’événement d’ascension de la température produite lors
de notre pratique :
Lors de notre étude sur la conservation, nous avons reçu 72 poches de
CGR, toutes sont des poches doubles, ces dernières nous furent données
suite à une panne de réfrigérateur qui est survenue pour une durée
indéterminée, la température du réfrigérateur a atteint les 17 ˚c, nous avons
ainsi décidé de suivre et de contrôler ces poches.
Afin de déterminer si cet incident a contribué à la dégradation des
poches ou non; nous avons procédé à une étude statistique dont les résultats
étaient comme suite :
Tableau 40 : Tableau de contingence pour l’étude de
L’implication de l’élévation de la température sur l’hémolyse

Hémolyse Non hémolysé Total

sans incident 5 19 24
avec incident 3* 69 72
Total 8 88 96
 50

*effectif < à 5

valeur-P=0,044 , elle est inférieure à 0,05 ce qui fait que H0 est rejetée
et donc il y’a une différence significative.
Afin de déterminer le sens de la relation, nous avons calculé l’Odds-
ratio qui a donné le résultat suivant :
Tableau 41 : Rapport de cotes pour l’étude de
L’implication de l’élévation de la température sur l’hémolyse

Estimations basées sur les rapports de cotes et les limites de

confiance
Estimations ponctuelles Limites de confiance
Type Valeur Inférieure- Supérieure
Rapport de cotes 0,024-0,96
0,17
CMLE

De cette valeur on déduit que l’événement d’ascension de la

température n’a pas influencé la lyse des globules rouges.
3.2. Facteurs de risque pouvant influencer la qualité des PFC :
3.2.1. Etude de la différence de conformité entre les PFC issus d’aphérèse
et ceux issus du traitement d’un don de sang total :
[Link]. Pour le taux de leucocytes :

Tableau 42 : Tableau de contingence pour l’étude de l’implication

du procédé de fabrication des PFC sur la conformité ou non des leucocytes

Non conforme LEUCO Conforme LEUCO total

Aphérèse 4 11 15

Don total 6 8 14

Total 10 19 29

Le test de Fisher exact a donné les résultats suivants :

Tableau 43 : Résultats du test de FISHER pour l’étude de l’implication
du procédé de fabrication des PFC sur la conformité ou non des leucocytes

Test de Fisher

Test valeur-p (bilatérale)

Test de Fisher exact 0.6

 51

La valeur p est bien supérieure à 0.05 ce qui veut dire que H0 est
retenue et donc c’est le hasard qui intervient dans la répartition des données
et donc il n’y a pas de différence entre la préparation des PFC à partir du sang
total et par aphérèse en ce qui concerne le taux de leucocytes
[Link]. Pour le taux de plaquettes :

Tableau 44 : Tableau de contingence pour l’étude de l’implication

du procédé de fabrication sur la conformité ou non des PQT

Non-conformité PQT Conformité PQT Total

Aphérèse 8 7 15
Don total 5 9 14
Total 13 16 29

Le Khi²c=0,9, il est inférieur au Khi²t ce qui veut dire que H0 est retenue
de ce fait il n’y a pas de différence entre la préparation des PFC à partir du
sang total et par aphérèse en ce qui concerne le taux de plaquettes.
 52

DISCUSSION
 53

Nous avons effectué notre travail au niveau du centre de transfusion

sanguine de Blida sur un échantillon de 96 CGR et de 29 PFC.

A partir des 96 CGR contrôlés (84 poches doubles et 12 poches triples),

16 ont été prélevées au niveau du CTS, les 83 autres ont été récoltées lors
des différentes collectes organisées à l’extérieur de l’établissement ; en outre,
13 poches ont été préparées par centrifugation, les poches restantes ont été
séparées après décantation.
il est à noter que 72 poches des CGR ont été sujettes à une ascension
temporaire de la température, ces poches n’ont pas été exclues étant donné
qu’il a été démontré scientifiquement à l’aide d’un test statistique de
comparaison que l’événement n’avait en aucun cas affecté la qualité des
CGR, il est de même référencié dans l’étude réalisée par Robert Zimmermann
sur ce même sujet que d’éventuelles élévations de la température ne portent
pas atteinte aux concentrés de globules rouges que sur une longue durée.[21]
Concernant les poches de PFC, sur les 29 unités contrôlées 15 sont
issues d’aphérèse, les 14 restantes proviennent d’un don de sang total.
Relativement au contrôle des CGR, nous avons exploré le volume, le
taux d’hémoglobine, le taux d’hémolyse et l’hématocrite ; mis à part ce dernier
paramètre non conforme dans 28% des poches, ce qui est inacceptable selon
le NQL ; les autres paramètres avaient été estimés conformes selon le même
principe. Et dans le but de situer la qualité des CGR produits par le CTS de
Blida par rapport à ceux produits au niveau des autres établissements ; nous
avons comparé nos résultats à ceux obtenus dans d’autres études dont l’une
d’elles a été réalisée au niveau du CHU MUSTAPHA PACHA ; ces études ont
présenté à l’exception de la notre une conformité totale des paramètres, ce qui
confirme l’existence d’un problème au niveau du CTS de Blida.[9] [23]
En plus, nous avons exploré lors du contrôle des CGR l’évolution de
l’hémolyse selon le type de poches, ainsi en ce qui concerne les poches
doubles, ces dernières ont démontré une augmentation significative du taux
de lyse à partir de la troisième semaine de conservation, contrairement aux
poches triples dont l’évolution considérable du taux d’hémolyse est observée
au début de la conservation, les résultats de cette étude étaient similaires à
 54

ceux obtenus par [Link] concernant l’hémolyse lors de la préparation et

de la conservation des CGR ; en outre et selon l’étude de zimmerman
effectuée en 2003 sur le contrôle de qualité in vitro des CGR périmés dans la
pratique, il a été suggéré que cette lyse précoce des globules rouges affectant
les poches triples, pourrait être due au changement d’osmolarité atteignant
ces cellules lors de l’ajout de la solution conservatrice (SAG-MAN) après leur
séparation du PRP. [23]
Cependant notre contrôle des PFC s’est basé sur un ensemble
d’analyses à savoir : le volume, le pH, le taux de facteur VIII ainsi que les taux
des différentes cellules sanguines résiduelles ; les résultats obtenus étaient
comme suite :

 120,88% de moyenne pour le facteur VIII.

 100% de conformité pour le pH et le taux des globules rouges.
 51,51% de conformité pour le taux des plaquettes.
 69,69% de conformité pour le taux des leucocytes.
 87,87% de conformité pour le volume.

Par conséquent, nous avons pu conclure à partir des niveaux de qualité

limites qu’il existe des défauts touchant le volume ainsi que le taux de
plaquettes et celui des leucocytes.

Apres avoir décelé certaines non-conformités, nous avons procédé à

l’étude des facteurs pouvant être la cause.

Relativement aux PFC, nous avons seulement pu démontrer que les

problèmes de non-conformité touchaient non seulement les poches issues du
traitement d’un prélèvement de sang total mais aussi les poches issues
d’aphérèse.

Quant à l’hématocrite pour les CGR, nous avons exploré l’implication

du procédé de préparation ainsi que le volume sanguin total, et au final, nous
sommes arrivés à conclure de la non influence de ces deux supposés facteurs
dans la non-conformité de l’hématocrite.
 55

CONCLUSION
 56

La transfusion est un acte thérapeutique très fréquent qui doit être

efficace et sans risque, par conséquent, les centres du sang des wilayas
ayants la responsabilité de préparer les produits sanguins labiles doivent
garantir une bonne qualité de production.

Ainsi ces établissements sont préférentiellement dotés d’un système de

gestion de la qualité basé sur les deux structures complémentaires à savoir :
le service d’assurance qualité et le laboratoire de contrôle qualité.

Parmi les différentes activités du laboratoire de contrôle, l’exploration de

la conformité des produits sanguins labiles qui permet la meilleure
appréciation de la stabilité du processus de préparation mis en place ainsi que
la qualité ponctuelle de production.

Sur la totalité des paramètres contrôlés pour les produits sanguins

labiles, le taux de lyse et le facteur VIII sont les deux paramètres liés à la
conservation respective des CGR et des PFC et qui justifie leur importance.
 57

RECOMMENDATIONS
 58

Après le contrôle que nous avons effectué au niveau du CTS de Blida et

après l’interprétation des résultats recueillis ; nous avons détecté quelques
erreurs auxquels nous proposons les mesures correctives suivantes :

Concernant le système de gestion de la qualité :

 Engager la direction.
 mettre en œuvre un service d’assurance de la qualité qui consiste à
vérifier que les conditions de prélèvement, de production,
d’identification, de contrôle et de conservation des produits sanguins qui
garantissent une qualité et une sécurité maximale.
 procéder à une extension des activités du laboratoire au contrôle des
matières premières, des produits intermédiaires, ainsi que les
consommables.
 Préciser les différents processus de l’établissement.
 Préciser noir sur blanc l’ensemble des procédures suivies au niveau du
CTS.
 Mettre en œuvre les bonnes pratiques en ce qui concerne la production
ainsi que le contrôle de laboratoire.
 Planifier des auto-inspections.

Concernant le personnel :

 Assurer la formation continue du personnel.

 Schématiser un organigramme qui met en évidence les postes clés.
 Rédiger des fiches de définition des fonctions.
 Préciser la hiérarchie des postes occupés au niveau de l’établissement.
 Préciser le rôle de chaque employé et l’impliquer dans la qualité en
l’encourageant.

Concernant le matériel :

 Qualifier le matériel avant utilisation.

 Attribuer à chaque appareil un carnet de suivi.
 Concevoir et disposer le matériel de façon à permettre un nettoyage
facile.
 59

 Nettoyer le matériel de façon planifiée et selon des procédures

référenciées
 Etalonner et vérifier le matériel de mesure, de pesée, d’enregistrement
et de contrôle à intervalles réguliers ; les comptes rendus doivent être
archivés.
 Etablir un programme de contrôle systématique et régulier.
 Procéder à une maintenance régulière.

Concernant la production :

 Respecter la norme en relation avec le prélèvement du sang total et en

particulier le volume, la durée et le délai entre le prélèvement et la
préparation.
 Acheminer rapidement les poches de sang collectées vers l’unité de
production
 Fournir les moyens matériels et les ressources humaines nécessaires
au niveau de l’unité de production
 Faire une étude approfondie des facteurs de risque et prendre les
mesures correctives nécessaires.
 Préciser les critères de non-conformité décelables au cours de la
production et ainsi que l’élimination des produits.

Concernant la conservation :

 Définir les vitesses de refroidissement et la température finale.

Concernant le contrôle :

 Définir des procédures spécifiques au contrôle des produits sanguins

labiles à chaque stade de leur production et de leur conservation.
 Procéder au contrôle des bonnes pratiques de préparation
 Mettre en œuvre un contrôle des produits d’approvisionnement en
particulier le contrôle des poches.
 Introduire un contrôle d’entrée des produits issus des prélèvements.
 Introduire un contrôle en cours de production.
 60

 Séparer le contrôle de la production pour assurer l’objectivité des

résultats.
 S’aligner sur les méthodes de référence lors des contrôles que ça soit
un contrôle de laboratoire ou bien administratif.
 Préciser le plan et le type d’échantillonnage pour les contrôles de
laboratoire.
Ne pas se limiter au contrôle mais apporter des mesures correctives en cas
de besoins.
 61

REFERENCES
 62

1) ROUGER, P. La transfusion sanguine.

2) BREWER, H. F., ELLIS, R., GREAVES, R. I. N., KEYNES, G., WILLS,
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3) agence national de la sécurité des médicaments et des produits de
santé. juillet 2012. Avis aux demandeurs ; Evaluation des produits
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4) Comité Européen de la transfusion sanguine. 2015. Guide to the
preparation, use and the quality assurance of blood components.
5) EL HADDAD., S. (2010). Production et contrôle de qualité des produits
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6) IDIDAR., A. (2012). La transfusion sanguine au Maroc. Mémoire de fin
d’étude.
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transfusionnelle : le modèle français. Récupéré sur :
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XbAhXMthQKHTWTAzkQ6AEIJjAA#v=onepage&q=niveau%20de%20q
ualit%C3%A9%20limite&f=false.
9) A, HENTABLI., I, KHALDI. (2013). Contrôle qualité interne des produits
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10) établissement français du sang et l’école supérieure des affaires et le
ministère de la santé publique au Liban. 2012. Les principes de bonnes
pratiques transfusionnelles.
11) OULDKADA., M. (2016) transfusion sanguine.
12) MILAMC., J.D. BUZZURROS. J. AUSTINA., F. TANSBE., S.W. (1980)
Stability of Factors V and VIII in Thawed Fresh Frozen Plasma Units.
 63

13) Woodhams., B. Girardot.,O. Blanco., M.-J. Colesse., G. Gourmelin., Y.

(2001). Stability of coagulation proteins in frozen plasma.
14) Ministère de la santé. 13 mars 2018. décision du 8 février 2018 fixant
la liste et les caractéristiques des produits sanguins labiles.
15) CLEMENT., S.(2011). Technique de préparation des produits sanguins
labiles et leurs principales indications.
16) Etablissement sanguin., Etablissement français du sang., Direction
régionale des affaires sanitaires et sociales. (2008)Les produits
sanguins labiles nature et indication.
17) TAYOU TAGNY, C., MBANYA, D. (2012). Transfusion sanguine dans
les pays en développement.
18) GARNERIN, P., HERGON. E. (1994). Transfusion sanguine et
assurance qualité.
19) CATHERINE., N. AURY.,P. COUTO., L. FOURNIER-ORUDH-
HOMME.,c. LE PLEUX., F. SANDRIN., M. C. TROPHILME.,C. (2016) .
Hémovigilance et sécurité transfusionnelle effets indésirables et
incidents de la chaine transfusionnelle.
20) ACKER, J., P. HANSEN, A., L. KURACH, J., TURNER, T. IOANA, C.
CRAIG, J. (2014) A quality monitoring program for red blood cell
components: in vitro quality indicators before and after implementation
of meùiautomatedprocessing..
21) ZIMMERMAN, R. HEIDENREICH, D. WEISBACH, V. ZINGSEM, J.
NEIDHART, B. REINHOLD, E. (2003). Contrôle de qualité in vitro sur
des concentrés de globules rouges primes dans la pratique Clinique.
22) BCguk’., S. Vidal-Obert., M. Girard.,A. Perrault., M. T. Leroy., M. C.
Masse., M. Royer., D. Peyrard., T. Assens., C. David., C. Day., B.
Arzur., C. Boudib., C. (1999). Le controle de qualité des produits
sanguins labiles. Pourquoi et comment bien prélever un échantillon ?
23) SAWANT, R. B., JATHAR, S. K., RADJADYAKSHA, S. B., KADAM, P.
T. (2007). Red cell hemolysis during processing and storage.
 64

24) MAKROO, R. N., RANIA, V., BHATIA, A., GUPTA, R. (2011).

Evaluation of the red cell hemolysis in packed red cells during
processing and storage.
25) SAWANT, R. B., JATHAR, S. K., RADJADYAKSHA, S. B., KADAM, P.
T. (2007). Red cell hémolysis during processing and storage.
26) [Link]
27) [Link]
28) [Link]
 65

ANNEXE
 66

1. Fiche technique journalière :

FICHE TECHNIQUE

DATE : / /

 CONTROLE DE QUALITE DES CONCENTRES DE GLOBULES

ROUGES :

 CONTROLE DE QUALITE DES DERIVES PLASMATIQUES :

NUMERO DE DATE DE DATE DE TAUX TAUX TAUX TAUX

PREPARATION PEREMPTION DE DE DE DE
LA POCHE ASPECT VOLUME PH
LEUC PLQ F(VIII)
GR
 REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

MINISTRE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

UNIVERSITE SAAD-DAHLAB-BLIDA 1

FACULTE DE MEDECINE

DEPARTEMENT DE PHARMACIE

THEME :

Thèse d’exercice de fin d’étude

CONTRÔLE DE QUALITÉ DES PRODUITS SANGUINS LABILES AU NIVEAU DU CENTRE

TRANSFUSION SANGUINE DE BLIDA

Présenté en vue de l’obtention du diplôme de docteur en pharmacie

Session : 2017/2018

Présenté par :
- BENKACIMI Sami Achour.
- BRAHIMI Samir.

Encadré par :

[Link].H : maitre assistante en hémobiologie et transfusion sanguine au CHU de

Blida.

Soutenu publiquement le 03/06/2018 Devant le jury composé de :

- Présidente du jury : Pr. ALLOUN ; Professeur en épidémiologie au niveau de la faculté

de médecine de Bida.
- Examinatrices :
 [Link]. M ; M.A en hémobiologie au niveau de l’EPH Boulouguine.
(Alger).
 Dr. HADDAD. N ; M.A en hémobiologie au CHU de Blida.
 DEDICACES

Je tiens à remercier particulièrement mes parents pour leur soutien, mes

frères (le petit Danil qui a retenu malgré son âge précoce la notion
d’hémoglobine), ainsi que ma promotrice Dr H Hamel pour toutes les heures et
l’énergie qu’elle nous a consacrée, je tiens également à remercier mes deux
meilleurs amis HASSOUN Rabah et BENKACIMI Sami Achour d’avoir cru en
moi.

De même je dédie ce travail à toute personne m’ayant soutenue et

encouragée durant ces 6 ans d’études interminables.

BRAHIMI
 DEDICACES
Louange à toi notre DIEU pour cette modeste science dont on est fière
d’acquérir, pour mon parcours estudiantin et scolaire, et pour cet humble
travail dont j’ai l’honneur aujourd’hui de dédier comme témoignage d’affection,
de respect et d’admiration :
A mes très chers parents : votre amour, vos sacrifices, votre soutien m’ont
été précieux, j’espère aujourd’hui comme demain vous apporter fierté, que
Dieu le tout puissant vous garde et vous protège, qu’il vous accorde santé,
bonheur et sérénité.
A ma sœur : je jouie de t’avoir ; tes encouragements et cette ambiance
très sympa que tu apportes à la famille me confèrent ce bon état d’esprit qui
m’avait beaucoup aidé tout au long de mes études, je souhaite un jour te voir
diplômée à ton tour.
A la mémoire de mes deux grands pères, deux êtres très chers qui ont fait
le bonheur de mon enfance.
A tous les membres de ma grande famille : mes grands-mères, mes tantes
et leurs maris, mes oncles et leurs femmes, et mes cousins, je suis très
reconnaissant, vos conseils, vos encouragements, vos sacrifices et surtout les
bons moments que vous m’avez offert sont à la base de ma réussite.
A la cousine de mon père , à son mari et à leur brave famille qui m’a
accueilli comme l’un de ses membre et que j’ai aujourd’hui l’honneur de leur
présenter ma gratitude et mes remerciements.
A Mr .BELHABIB et sa sage famille : votre hospitalité, votre bien veillance
et votre gentillesse m’ont marqué, je suis très ravi de partager ma réussite
avec vous.
A mes deux meilleurs amis BENBABAALI Haroun et BRAHIMI Samir à qui
j’ai l’énorme plaisir de manifester ma grande estime.
A tous mes amis, je leur dédie avec une immense joie mes plus agréables
moments de réussite en guise de remerciements pour leur réconfortante
présence.
A mes enseignants : j’ai le plaisir et l’honneur de m’adresser à vous en ce
précieux moment pour exprimer mon entière gratitude.
A Dr HAMMEL et Mlle SAADAOUI, pour leurs honorables efforts, leur
remarquable gentillesse et générosité, je vous remercie.
A tous ceux qui ont contribué de prés ou de loin à ma réussite.
BENKACIMI
 REMERCIEMENTS

Après avoir rendu grâce a DIEU de nous avoir permis la réalisation de ce

travail aussi simple que modeste, nous tenons à remercier vivement tous
ceux qui ont contribué de prés ou de loin à la concrétisation de notre projet, il
s’agit plus particulièrement de :

Dr HAMMEL : nous sommes très honorés de vous adresser nos sincère

remerciements aujourd’hui, après tous les efforts considérables que vous avez
fournit pour notre réussite.

Nous somme très touchés par votre gentillesse et votre modeste

personne qui font de vous un model, acceptez Dr nos plus belles formules
d’admiration.

Sans oublier votre grande qualité d’enseignante, nous sommes

reconnaissants du savoir que vous nous avez transmis, nos respects
distingués.

Mlle SAADOUNI R : nous admettons que votre aide était précieuse, nous
sommes conscients de votre bonne foi et de votre implication dans le bon
déroulement de notre travail ainsi nous tenons énormément à vous exprimer
notre gratitude et nos remerciements.

Dr CHAYEB : permettez nous de vous faire part de notre admiration

concernant vos compétences de chef de service, votre établissement très
professionnel et dans le quel règne une ambiance familiale et une atmosphère
positive encourageant la qualité ;nous vous remercions de nous avoir
accueillis au sein de cette valeureuse équipe.

Membres du centre de transfusion de Blida, membres du laboratoire des

urgences et ceux du laboratoire central de Frantz Fanon : à qui nous
adressons nos plus profonds respects et nos plus chaleureuses pensées,

Nous tenons également à présenter toute notre gratitude et nos

remerciements aux membres du jury qui ont bien voulu consacrer leur
précieux temps pour juger notre travail.
 SOMMAIRE

INTRODUCTION…………………..…………………………………………………1

HISTORIQUE…………………………………………………………………………3

PARTIE I : PARTIE THEORIQUE

CHAPITRE 1 : GENERALITES

1. Définitions…………………………………………………………………………..6
1.1 Définition de la transfusion….…………………………………………………. 6
1.2 Définition des produits sanguins labiles……………………………………….6
2. Origine des produits sanguins labiles …………………………………………..7
3. Les différents produits sanguins labiles ………………………………………..8
3.1 le sang total ………………………………………………………………………8
3.2 le concentré de globules rouges ………………………………………………9
3.3 le concentré de plaquettes ……………………………………………………10
3.4 le plasma frais congelé ………………………………………………………..11
4. Hiérarchie des établissements de transfusion sanguine ……………………12
4.1 Agence nationale du sang …………………………………………………... 12
4.2 Agence régionale du sang ……………………………………………………12
4.3 Centre de transfusion sanguine ……………………………………………...12
5. La gestion de la qualité au niveau d’un centre de transfusion sanguine…..13
5.1 Management de la qualité……………………………………………………..13
5.1.1 Assurance de la qualité …………………………………………………….13
5.1.2 Laboratoire de contrôle de la qualité ……………………………………..14
6. L’hémovigilance ………………….…………………………………………….14

CHAPITRE 2 : CONTRÔLE DE LA QUALITE DES PSL

7. Contrôle de qualité des concentrés de globules rouges ……………………16

7.1. Le volume ……………………………...………………………………………17
7.2. L’hématocrite ……………………………………………………………….....17
7.3. Le taux d’hémoglobine par poche …………………………………………..18
7.4. Le taux de lyse des globules rouges ………………………………………..18
8. Contrôle de qualité des plasmas frais congelés ……………………………..19
8.1. Le volume………………………………………………………………………19
8.2. Taux des composés cellulaires résiduels indésirables …………………...20
8.3. Taux du facteur VIII …………………………………………………………..20
8.4. Le pH …………………………………………………………………………...21
9. contrôles qualité des concentrés plaquettaire ……………………………….21
9.1. Le volume ……………………………………………………………………...21
9.2. Taux de plaquettes et des leucocytes……………………………………….22
9.3 Le pH…………………………………………………………………………….22
10. Contrôle de qualité du sang total …………………………………………….22
11. Les normes de qualité des produits sanguins labiles ……………………. 22

PARTIE II : PRATIQUE

1. problématique……………………………………………………………………25
2. Les objectifs ……………………………………………………………………...25
3. Critères d’inclusion et d’exclusion ……………………………………….…….25
4. Méthodes ……………………………………………………………………..….26
4.1. Cadre de l’étude……..…………………………….…………………………26
4.2. Population concérnée ……………………………………………………….26
4.3. Échantillonnage ………………………………….………………………….. 26
4.3.1. Nombre d’échantillons ………………………………………………….... 26
4.3.2. Procédure d’échantillonnage……………………………………………....27
[Link]. Pour les globules rouges ………………………………………………..27
[Link]. Pour les plasmas frais congelés …………….………………………....28
4.4 Suivi des échantillons …………………………….……….…………………. 29
4.5 Méthodes d’analyses …………………………….…………….…………….29
4.5.1 Pour les concentrés de globule rouges………………………………..….29
[Link] Le volume…………………………………….……………………………29
[Link] L’hématocrite et hémoglobine …………….…………………………….29
[Link] Taux de lyse des globules rouges …….……………………………..30
4.5.2 pour les plasmas frais congelés ………………………………………….31
[Link] Le volume………………………………….……………………………...31
[Link] Les taux de plaquettes, GR et GB ……….…………………………... 32
[Link] Taux de facteur VIII……………………….……………………………..32
4.6 traitement des résultats ………..……………………………………………33
5 Matériels ……….………………………………………………………………...34
5.1 Matériel d’analyse ………………………..…………………………………..34
5.2 Matériel de manipulation……..………………………………………………34

PARTIE III : RÉSULTATS

1. Caractérisation des populations statistiques …………………………………37

1.1 Caractérisation de la population des CGR …………………………………37
1.2 Caractérisation de la population des PFC …………………………………..38
2. Étude descriptive des variables ………………………………………………..38
2.1 Etude macroscopique ………………………………………………………. 38
2.1.1 Étude macroscopique des CGR …………………………………………..38
2.1.2 Étude macroscopique des PFC …………………………………………...39
 2.2 Analyse des résultats biologiques…………………………………………….39
2.2.1 Résultat biologique pour ce qui est des CGR………………………….. 40
[Link] Récapitulatif des observations ………………………………………… 40
[Link] Étude des conformités ……………...…………………………………….43
2.2.2 Résultat biologique pour ce qui est des PFC ……………………………44
[Link] Récapitulatif des observations ………………………………………… 44
[Link] Étude des conformités ...………………………………………………….46
3. Étude des facteurs qui pourraient influencer la non-conformité des PSL…47
3.1 Facteur pouvant influencer la qualité des CGR…………………………….47
3.1.1 Étude des facteurs pouvant être impliqués dans la non-conformité de
l’hématocrite ……………………………………………………………….….48
[Link] Étude de l’implication de la décantation par-rapport à la
centrifugation……………………………………………………………….48
[Link] Étude de l’implication de la non-conformité du volume sanguin total .48
3.1.2 Étude des facteurs pouvant être impliqués dans la non-conformité du
taux d’hémolyse…………………………………………………………….…49
[Link] Étude de l’implication de la manipulation entreprise lors de notre
étude ………………………………………………………………………..…49
[Link] Etude de l’implication d’un événement d’ascension de la température
produite lors de notre pratique……………………………………………49
3.2 Facteur de risque pouvant influencer la qualité des PFC………………….50
3.2.1 Etude de la différence de conformité entre les PFC issus d’aphérèse et
ceux issus du traitement d’un don de sang total …………………………50
[Link] Pour le taux de leucocyte ……………………………………………… 51
[Link] pour le taux de plaquettes……………………………………………... 51

DISCUSSION……………………………………………………………………….52

CONCLUSION…………………………………………………………………… 55

RECOMMENDATIONS……………………………………………………………57

RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES………………………………………... 61

ANNEXE…………………………………………………………………………….65
 ABREVIATION

Etats Uni d’Amérique : USA

Produits Sanguins Labiles : PSL

Citrate, Phosphate, Dextrose : CPD

Citrate, Phosphate, Dextrose, Adénine : CPDA

Na Cl, Dextrose, Adénine, Mannitol : SAG-MAN

Concentré de Globules Rouges : CGR

Potentiel d’Hydrogène :pH

Plasma Riche en Plaquettes : PRP

Concentré Plaquettaire Standard :CPS

Plasma Frais Congelé :PFC

Globules Rouges : GR

Centre de Transfusion Sanguine :CTS

Centre Hospitalo-universitaire : CHU

Taux de Lyse :Tl

Ultra Violet : UV

Note a Bennée :NB

Hémovigilance :Hv

Hématocrite : Hct

Hémoglobine : Hgb

Effectif : Eff

Plaquettes : PQT

Facteur VIII : FVIII

Normes Algériennes :NDZ

Normes Française :NFR

Formule de Numération Sanguine :FNS

Hypothèse nulle :H0

Effectif Théorique :Ti

Effectif Observé :Oi

Degré De Liberté : Ddl

Nombre des Lignes :L

Nombre de Colonne :C

Somme :Ʃ

Globules Blanc :GB

Densité optique :DO

Volume du Concentré de Globules Rouges :VCGR

Agence National de Sécurité des Médicaments et des Produits de
Santé :ANSM
 Liste des tableaux

Tableau Titre page

Tableau 1 normes de qualité des CGR selon la décision du 8 22

février 2018 (normes françaises) publiée le 13 mars
2018 dans le JORF n°0060 et selon l’arrêté du 24
Mai 1998 (normes algériennes)

Tableau 2 normes de qualité des PFCselon la décision du 8 23

février 2018 (normes françaises) publiée le 13 mars
2018 dans le JORF n°0060 et selon l’arrêté du 24
Mai 1998 (normes algériennes)

Tableau 3 norme de qualité des CPS selon la décision du 8 23

février 2018 (normes françaises) publiée le 13 mars
2018 dans le JORF n°0060 et selon l’arrêté du 24
Mai 1998 (normes algériennes)

Tableau 4 norme de qualité pour le sang totalselon la décision 23

du 8 février 2018 (normes françaises) publiée le 13
mars 2018 dans le JORF n°0060 et selon l’arrêté du
24 Mai 1998 (normes algériennes)

Tableau 5 niveau de qualité limite des CGRselon la décision du 8 33

février 2018 publiée le 13 mars 2018 dans le JORF
n°0060

Tableau 6 niveau de qualité limite des PFC selon la décision du 8 33

février 2018 publiée le 13 mars 2018 dans le JORF
n°0060

Tableau 7 répartition de la population de CGR pris du CTS de 38

CHU de Blida durant la période entre le 18-mars-2018
et le 02-Juin-2018 selon le type de poche

Tableau 8 répartition de la population de CGR pris du CTS de 38

CHU de Blida durant la période entre le 18-mars-2018
et le 02-Juin-2018 selon le lieu de prélèvement

Tableau 9 répartition de la population de CGR pris du CTS de 38

CHU de Blida durant la période entre le 18-mars-2018
et le 02-Juin-2018 selon le procédé de préparation

Tableau 10 répartition de la population de CGR pris du CTS de 39

CHU de Blida durant la période entre le 18-mars-2018
et le 02-Juin-2018 selon le délai entre la préparation
et le contrôle des poches
 répartition de la population de PFC pris du CTS de
Tableau 11 CHU de Blida durant la période entre le 18-mars- 39
2018 et le 02-Juin-2018 selon le type de poche

Tableau 12 répartition de la population de PFC pris du CTS de 39

CHU de Blida durant la période entre le 18-mars-2018
et le 02-Juin-2018 selon les délais restants avant la
péremption des poches

Tableau 13 résumé statistique des résultats concernant le volume 41

des CGR échantillonnés au CTS de Blida durant la
période entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin-2018

Tableau 14 résumé statistique des résultats concernant le taux 41

d’HGB des CGR échantillonnés au CTS de Blida
durant la période entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin-
2018

Tableau 15 résumé statistique des résultats concernant le taux 41

d’HTQ pour les CGR échantillonnés au CTS de Blida
durant la période entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin-
2018

Tableau 16 tableau représentant les DO en fonction des 42

concentrations en HGB réalisé au niveau du CTS de
Blida 18-mars-2018

Tableau 17 résumé statistique des résultats concernant le taux de 42

lyse des CGR échantillonnés au CTS de Blida durant
la période entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin-2018

Tableau 18 tableau représentant les moyennes du taux de lyse en 43

fonction de la durée de conservation des CGR
échantillonnés au CTS de Blida durant la période
entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin-2018

Tableau 19 résumé statistique des résultats concernant les 44

volumes de sang total a partir des quels sont préparés
les CGR échantillonnés au CTS de Blida durant la
période entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin-2018.

Tableau 20 Conformité du taux d'Hb totale des CGR 44

échantillonnés au CTS de Blida durant la période
entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin-2018

Tableau 21 conformité de l’HQT des CGR échantillonnés au CTS 44

de Blida durant la période entre le 18-mars-2018 et le
02-Juin-2018
Tableau 22 conformité du taux d’hémolyse des CGR 44
échantillonnés au CTS de Blida durant la période
entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin-2018

Tableau 23 conformité du sang total des CGR échantillonnés au 44

CTS de Blida durant la période entre le 18-mars-2018
et le 02-Juin-2018

Tableau 24 conformité du volume pour les CGR échantillonnés au 44

CTS de Blida durant la période entre le 18-mars-2018
et le 02-Juin-2018

Tableau 25 résumé statistique des résultats concernant le volume 45

pour les PFC échantillonnés au CTS de Blida durant la
période entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin-2018

Tableau 26 résumé statistique des résultats concernant le taux de 45

plaquette pour les PFC échantillonnés au CTS de
Blida durant la période entre le 18-mars-2018 et le 02-
Juin-2018

Tableau 27 résumé statistique des résultats concernant le taux de 45

leucocyte pour les PFC échantillonnés au CTS de
Blida durant la période entre le 18-mars-2018 et le 02-
Juin-2018

Tableau 28 résumé statistique des résultats concernant le taux de 46

GR pour les PFC échantillonnés au CTS de Blida
durant la période entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin-
2018

Tableau 29 résumé des résultats statistiques concernant le taux 46

de facteur VIII pour les PFC échantillonnés au CTS de
Blida durant la période entre le 18-mars-2018 et le 02-
Juin-2018

Tableau 30 résumé statistique des résultats concernant le PH 47

pour les PFC échantillonnés au CTS de Blida durant la
période entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin-2018

Tableau 31 conformité du volume pour les PFC échantillonnés au 47

CTS de Blida durant la période entre le 18-mars-2018
et le 02-Juin-2018

Tableau 32 conformité du taux de leucocytes pour les PFC 47

échantillonnés au CTS de Blida durant la période
entre le 18-mars-2018 et le 02-Juin-2018
Tableau 33 conformité des PQT pour les PFC échantillonnés au 47
CTS de Blida durant la période entre le 18-mars-2018
et le 02-Juin-2018

Tableau 34 conformité des GR pour les PFC échantillonnés au 47

CTS de Blida durant la période entre le 18-mars-2018
et le 02-Juin-2018

Tableau 35 conformité du PH pour les PFC échantillonnés au CTS 48

de Blida durant la période entre le 18-mars-2018 et le
02-Juin-2018

Tableau 36 tableau de contingence pour l’étude de l’implicationdu 48

procédé de fabrication dans la conformité ou non de
l’HTQ

Tableau 37 résultat du test de FISHER pour l’implicationdu 49

procédé de fabrication dans la conformité ou non de
l’HTQ

Tableau 38 tableau de contingence pour l’étude de l’implication 49

du volume sanguin total sur la conformité ou non de
l’HTQ

Tableau 39 tableau de contingence pour l’étude de L’implication 49

de la manipulation sur l’hémolyse
tableau de contingence pour l’étude de L’implication de
Tableau 40 l’élévation de la température sur l’hémolyse 50

Tableau 41 rapport de cotes pour l’étude de l’implication de 50

l’élévation de la température sur l’hémolyse

Tableau 42 tableau de contingence pour l’étude de l’implication du 51

procédé de fabrication des PFC sur la conformité ou
non des leucocytes

Tableau 43 résultats du test de FISHER pour l’étude de 51

l’implication du procédé de fabrication des PFC sur la
conformité ou non des leucocytes

Tableau 44 tableau de contingence pour l’étude de l’implicationdu 51

procédé de fabrication sur la conformité ou non des
PQT
 Liste des figures

Figure Titre Page

Figure 1 Différents types des PSL 7

Figure 2 Origine des PSL 8

Figure 3 Concentré de globules rouges 9

Figure 4 Concentré de plaquettes 10

Figure 5 Plasma frais congelé 11

Figure 6 représente les deux piliers du système de gestion de 13

qualité au niveau du CTS selon les normes ISO

Figure 7 les paramètres à contrôler selon les recommandations 16

législatives françaises en ce qui est des CGR

Figure 8 représente un appareil de pesée 17

Figure 9 représente un Coulter qui est utilisé pour la 18

détermination de l’hémoglobine et de l’hématocrite

Figure 10 principe de la méthode drabkin pour le dosage 19

de l’hémoglobine

Figure 11 les paramètres à contrôler selon les recommandations 19

législatives françaises en ce qui est des PFC

Figure 12 représente une cellule de Malassez utilisée pour le 20

comptage cellulaire

Figure 13 coagulometre utilisé pour le dosage du facteur 21

VIII

Figure 14 les paramètres à contrôler selon les recommandations 21

législatives françaises en ce qui est des CPS

Figure 15 les paramètres à contrôler selon les recommandations 22

législatives françaises en ce qui est du sang total

Figure 16 Procédure d’échantillonnage des CGR 27

Figure 17 Procédure d’échantillonnage des PFC 28

Figure 18 Procédure de détermination de l’HGB et de l’hct 29

Figure 19 Procédure de détermination du Taux de Lyse 30

Figure 20 Procédure de détermination du FVIII 32

Figure 21 représente les différents aspects macroscopiques de 40

la population de CGR au niveau du CTS

Figure 22 représente l’aspect macroscopique concernant la 40

population de PFC retrouvée au niveau du CTS

Figure 23 schéma représentatif de l’évolution du taux 43

d’hémolyse pour les deux types de poches.

Figure 24 courbe d’étalonnage pour le facteur VIII réalisée avec 46

un coagulométre de type STAGO au niveau du
laboratoire centrale de frantz fanon
 Résumé :

La transfusion sanguine est un acte délicat qui nécessite une

réglementation rigoureuse et des contrôles au préalable des produits à
transfuser, notre travail consistait à réaliser ces contrôles et d’introduire de
nouveaux paramètres au niveau du CTS de Blida, nous sommes parvenus à
notre but par le contrôle d’un grand nombre de poches de CGR et PFC ainsi
que l’introduction des paramètres de contrôle liés à la conservation de ces
derniers à savoir le taux de lyse et le dosage du facteur VIII
A la fin de ce mémoire, nous avons conclus que la conservation de nos
pochesétait acceptable hormis quelques non-conformité de la qualité de ces
derniers mais qui peuvent être facilement réglés.

Abstract :
The blood transfusion is a delicate act which requires a rigorous
regulation and the preliminary controls of the products transfused, our work
consisted in releasing these controls and to introduce new ones at the level of
the CTS of Blida, we reached our objectifs by the control of a large number of
CGR and PFC bags as well as the introduction of the control parameters
related to their preservation, namely the lysis rate and factor VIII assay
At the end of this thesis we have concluded that the preservation of our
pocket is acceptable except some non-conformity of the quality but which can
be easily solved.