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Phosphore

Ce document décrit un réactif pour mesurer la concentration en phosphore dans des échantillons biologiques, en utilisant une méthode spectrophotométrique. Il fournit des informations sur les valeurs de référence, les précautions de sécurité, la préparation des réactifs, et les caractéristiques métrologiques. Des instructions sur la procédure de mesure et les calculs nécessaires pour déterminer la concentration de phosphore sont également incluses.

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Ce document décrit un réactif pour mesurer la concentration en phosphore dans des échantillons biologiques, en utilisant une méthode spectrophotométrique. Il fournit des informations sur les valeurs de référence, les précautions de sécurité, la préparation des réactifs, et les caractéristiques métrologiques. Des instructions sur la procédure de mesure et les calculs nécessaires pour déterminer la concentration de phosphore sont également incluses.

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PHOSPHORUS

CODE 11508 170 mL

CONSERVER A 2-30ºC
Réactif pour mesurer la concentration en phosphore
A utiliser uniquement in vitro dans les laboratoires cliniques PHOSPHORE
PHOSPHOMOLYBDATE/UV

PRINCIPE DE LA METHODE VALEURS DE REFERENCE


Le phosphate inorganique présent dans l’échantillon réagit avec le molybdate en milieu acide, Sérum3 : Adultes : 2,5-4,5 mg/dL = 0,81-1,45 mmol/L
pour donner un complexe quantifiable par spectrophotométrie1,2. Enfants: 4,0-7,0 mg/dL = 1,29-2,26 mmol/L
CONTENU ET COMPOSITION Urine3: 0,4-1,3 g/24-h = 12,9-42 mmol/24-h

A. Réactif: 3 x 40 mL. Acide Sulfurique 0,36 mol/L, chlorure de sodium 154 mmol/L. Les concentrations dans le plasma sont environ 0,25 mg/dL (0,08 mmol/L) plus faibles que dans
le sérum.
DANGER: H314: Provoque des brûlures de la peau et des lésions oculaires graves. P280:
Porter des gants de protection/des vêtements de protection/un équipement de protection des Ces valeurs ne sont données qu’à titre indicatif. Chaque laboratoire doit établir ses propres
yeux/ du visage. P303+P361+P353: EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU (ou les valeurs de référence.
cheveux): enlever immédiatement les vêtements contaminés. Rincer la peau à l’eau/se
doucher. CONTRÔLE DE QUALITE
B. Réactif: 1 x 50 mL. Acide Sulfurique 0,36 mol/L, chlorure de sodium 154 mmol/L, molybdate Il est recommandé l’utilisation des Sérums de Contrôle de Biochimie niveaux I (code 18005,
d’ammonium 3,5 mmol/L. code 18009 et code 18042) et II (code 18007, code 18010 et code 18043) et l’Urine Contrôle de
Biochimie (code 18054 et code 18066) pour vérifier la fonctionnalité de la procédure de mesure.
DANGER: H314: Provoque des brûlures de la peau et des lésions oculaires graves. P280:
Chaque laboratoire doit établir son propre programme de contrôle de qualité interne et des
Porter des gants de protection/des vêtements de protection/un équipement de protection des
procédures de correction si les contrôles sont hors des tolérances acceptables.
yeux/ du visage. P303+P361+P353: EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU (ou les
cheveux): enlever immédiatement les vêtements contaminés. Rincer la peau à l’eau/se CARACTERISTIQUES METROLOGIQUES
doucher.
 Limite de détection : phosphore 0,13 mg/dL = phosphore 0,042 mmol/L.
S. Etalon phosphate: 1 x 5 mL. Phosphore 5 mg/dL (1,61 mmol/L). Etalon primaire en solution
aqueuse.  Limite de linéarité : phosphore 20 mg/dL = phosphore 6,46 mmol/L. Pour des valeurs
supérieures diluer l’échantillon 1/2 en eau distillée et répéter l’essai.
Pour d’autres mises en garde et précautions, voir la fiche de données de sécurité du produit
(SDS).  Répétabilité (intrasérielle):

CONSERVATION Concentration moyenne CV n

Les réactifs et étalon doivent être conservés à 2-30ºCBien refermer les flacons et éviter toute 4,34 mg/dL = 1,40 mmol/L 1,3 % 20
contamination lors de l'utilisation. Dans ces conditions ils resteront stables jusqu'à la date 8,20 mg/dL = 2,65 mmol/L 0,7 % 20
indiquée sur l'étiquette.
 Reproductibilité (intersérielle):
Indications de dégradation:
Concentration moyenne CV n
 Réactifs: Présence de particules, turbidité, absorbance du blanc supérieure à 0,500 à 340
nm (cuvette de 1 cm). 4,34 mg/dL = 1,40 mmol/L 2,9 % 25
8,20 mg/dL = 2,65 mmol/L 2,5 % 25
 Etalon: Présence de particules, turbidité.

PREPARATION DES REACTIFS  Sensibilité: 48 mAdL/mg = 149 mAL/mmol

Etalon (S) est prêt à l’emploi.  Justesse: Les résultats obtenus avec ce réactif n'ont pas montrés de différences
systématiques significatives par rapport aux réactifs de référence (Note 2). Les détails des
Réactif de travail : bien mélanger dans les proportions: 7 mL de Réactif A + 3 mL de Réactif B. études comparatives sont disponibles sur demande.
Stable 12 mois à 15-30ºC.
 Interférences: hémoglobine (10 g/L), lipémie (triglycérides 10 g/L) et bilirubine (20 mg/dL)
EQUIPEMENT SUPPLEMENTAIRE n’interfère pas. Certains médicaments et substances peuvent interférer 4.
 Analyseur, Spectrophotomètre ou photomètre pour lectures à 340  20 nm Ces données ont été obtenues en utilisant un analyseur. Les résultats peuvent varier d'un
instrument à l'autre ou en utilisant une technique manuelle.
ECHANTILLONS
CARACTERISTIQUES DIAGNOSTIQUES
Sérum, plasma hépariné ou urine recueilli par procédures normalisées. Le Phosphore en sérum
ou plasma est stable 7 jours à 2-8ºC. Environ 80% du phosphore du corp humain se trouve dans les sels de phosphate de calcium,
qui assemblent la substance inorganique des os. Le reste est impliqué dans l’estérification des
Recueillir les urines de 24 heures dans une bouteille contenant 10 mL d’acide chlorydrique à intermédiaires du métabolisme des carbohydrates et est aussi retrouvé comme composant des
10% (v/v). Stable 10 jours à 2-8ºC. Centrifuger ou filtrer l’échantillon et diluer le au 1/10 avec de phospholipides, phosphoprotéines, acides nucléiques et nucléotides.
l’eau distillée avant d’effectuer les mesures.
L’hypophophatémie peut être causée par changement du flux de phosphate qui vient de
PROCEDURE l’espace extracellulaire pour aller vers l’intracellulaire, une hausse des pertes rénales (déficience
du tubule rénal, hyperparathyroïdisme) ou pertes gastro-intestinales (diarrhée, vomissement) et
1. Pipeter dans des tubes à essai : (Note 1)
baisse de l’absorption intestinale3,5.
Réactif Blanc Echantillon Blanc Echantillon Etalon L’hyperphosphatémie est souvent secondaire à l’inaptitude des reins à excréter le phosphate, ce
Eau distillée
dû à un problème rénal ou un hypoparathyroïdisme3,5.
10 µL   
Echantillon  10 µL 10 µL  Le diagnostic clinique ne doit pas être basé sur les conclusions d’un test unique mais il doit
Etalon phosphate (S)    10 µL intégrer l’ensemble des données cliniques et de laboratoire.
Réactif (A)  1,0 mL  
Réactif de travail 1,0 mL  1,0 mL 1,0 mL NOTES
2. Bien agiter et laisser les tubes pendant 5 minutes à température ambiante. 1. Ces réactifs peuvent être utilisés dans la plupart des analyseurs automatiques. Demandez
les informations à votre distributeur.
3. Lire l’absorbance (A) de l’échantillon blanc contre l’eau distillée à 340 nm.
2. L’étalonnage avec l'étalon acqueux fourni, peut entrainer des biais sur certains analyseurs.
4. Lire l’absorbance (A) de l’échantillon et de l’étalon contre le réactif blanc à 340 nm. Dans ce cas il est recommandé d’étalonner l'appareil avec un sérum étalon (Calibrateur
Biochimique, Code. 18011 ou 18044).
CALCULS
La concentration en phosphore de l’échantillon est calculée selon la formule suivante: BIBLIOGRAPHIE
A Echantillon – A Blanc Echantillon 1. Gamst O and Try K. Determination of serum-phosphate without deproteinization by
x C Etalon x Facteur de dilution échantillon = C Echantillon ultraviolet spectrophotometry of the phosphomolybdic acid complex. Scand J Clin Lab Invest
A Etalon 1980; 40: 483-486.
Si l'étalon phosphore du kit est utilisé pour étalonner (Note 2): 2. Muñoz MA, Balón M and Fernández C. Direct determination of inorganic phosphorus in
serum with a single reagent. Clin Chem 1983; 29: 372-374.
Sérum et plasma Urine
3. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 4th ed. Burtis CA, Ashwood
A Echantillon – A Blanc Echantillon x 5 = mg/dL x 50 = mg/dL ER, Bruns DE. WB Saunders Co, 2005.
A Etalon x 1,61 = mmol/L x 16,1 = mmol/L 4. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 5th ed. AACC Press, 2000.
5. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press,
2001.

M11508f-19 04/2018

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