Activité expérimentale (TP) : L’action de l’amylase sur l’amidon, rôle dans le métabolisme des cellules
Situation problème
Les graines (de haricot ou de maïs par exemple) contiennent des réserves sous forme d’amidon que la plantule utilise pour produire son énergie lors de la
germination. Pour cela l’amidon est hydrolysé afin de libérer du glucose utilisable par les cellules de la plantule.
En présence d’amidon (ou empois d’amidon) le lugol donne une coloration bleu nuit.
En présence de glucose ou d’un sucre réducteur, le liquide de Fehling donne une coloration rouge brique à chaud (à 80 °C).
On teste l’action d’une protéine à action enzymatique (enzyme) présente dans les cellules de l’embryon végétal et dans certaines cellules animales,
l’amylase, sur l’empois d’amidon pendant 10 minutes. Les tests sont effectués à intervalles réguliers de 5 minutes.
Matériel disponible
- Plaquettes de réaction (ou à alvéoles) - Tubes à essai - Amylase - Empois d’amidon - Liquide de Fehling - Lugol (eau iodée) - Pipettes
- Bain-Marie - Béchers - Eprouvettes graduées de 10 ml.
Etape 1 : Concevoir une stratégie pour résoudre une situation-problème (Durée maximale : 5 minutes)
Proposez une démarche d’investigation permettant de montrer l’action de l’amylase sur l’empois d’amidon. Penser au témoin, à distinguer les objets.
Etape 2 : Mettre en œuvre un protocole expérimental pour obtenir des résultats exploitables
Réalisez le protocole fourni pour déterminer l’action de l’amylase sur l’empois d’amidon.
Appelez le professeur pour vérifier à chaque étape rappelée dans le protocole.
Etape 3 : Présenter les résultats pour les communiquer
Etape 4 : Exploiter les résultats obtenus pour répondre au problème
Exploitez les résultats pour montrer l’action de l’amylase mise en évidence dans cette manipulation.
Fiche protocole
1. Mettre 10 ml d’empois d’amidon dans 2 tubes à essai numérotés (à 37°C). 4. Après 5 minutes, prélever dans un tube propre 2 ml du mélange « amylase
2. Mettre quelques gouttes (2 à 3 gouttes) de chaque tube dans une alvéole + empois » dans le tube numéroté et faire le test à la liqueur de Fehling.
et tester au lugol. (1er temps) Appeler le professeur pour vérifier. Prendre également quelques gouttes de ce mélange et faire le test au lugol
3. Verser 2 ml d’amylase dans un tube numéroté contenant l’empois. Noter dans une alvéole. Appeler le professeur pour vérifier.
l’heure (temps t0) et faire tout de suite un test au lugol (dans une alvéole). 5. Après 5 minutes encore refaire les tests du point 4 précédent pour le « tube
L’autre tube contenant de l’empois sert de témoin. (2e temps) mélange » mais aussi pour le témoin. Appeler le professeur.
Remarque : Bien différencier les tubes et plaquettes, bien noter les résultats.