Hématopoïèse et sa régulation
Pr. Saliou Diop
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Plan du cours
Introduction
I- Ontogenèse de l’hématopoièse
II- Les étapes de l’hématopoièse
III- Régulation de l’hématopoièse
Microenvironnement médullaire
Facteurs de croissance
Régulation génique
IV-Techniques d’étude
Conclusion
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Introduction
• Définition: ensemble des mécanismes impliqués dans la
production des diverses cellules sanguines à partir de la cellule
souche hématopoïétique
• Cellules sanguines:
– Très différenciées : éléments terminaux et fonctionnels
– Durée de vie courte (sauf lymphocytes mémoires plusieurs années)
• GR env.120 j
• plaquettes env. 7 j
• GB env. 1 j
– peu ou pas de possibilité de division (plaquettes, GR n’ont pas de noyau)
– Nombre très élevé : production très importante 1013 cellules sanguines /
jour 2 Millions de GR / seconde
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I- Ontogenèse de l’hématopoièse
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I- Ontogenèse de l’Hématopoièse
• Hématopoïèse primitive
– Débute à J21 de la vie embryonnaire,
– Dérive du mésoderme du sac vitellin, où se forment
des îlots sanguins,
– Au sein des îlots sanguins,
• les cellules centrales se différencient en cellules
érythroblastiques (nucléées)
• et les cellules de la périphérie forment les premières
cellules endothéliales (= vaisseaux primitifs).
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I- Ontogenèse de l’Hématopoièse
• Hématopoïèse définitive
– J28, des CSH apparaissent dans l’aorte dorsale de la région Aorte-
Gonades-Mesonephros, qui iront ensuite coloniser le foie puis la rate.
– Vers 4 mois: La moelle osseuse (MO) commence à être colonisée et
sera le site exclusif de l'hématopoïèse à la naissance et pour toute la
vie (tous les os jusqu’à 4 ans, puis uniquement les os courts et plats
– La Cellule souche hématopoïétique: encore imparfaitement
caractérisée :
• Soit un progéniteur commun (hémangioblaste), pourrait donner naissance à la fois
aux cellules hématopoïétiques et aux cellules endothéliales,
• Soit les cellules mésodermiques se différencieraient en cellules endothéliales ou en
cellules hématopoïétiques,
• Soit certaines cellules endothéliales donneraient naissance aux cellules
hématopoïétiques.
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Structure de la moelle osseuse (fragment
d’une biopsie de moelle osseuse)
Îlots de cellules
hématopoïétiques
Tissu graisseux
Tissu osseux
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Schéma général de l’hématopoïèse
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II- Etapes de l’hématopoïèse
A- Les cellules souches
• Les hémangioblastes peuvent se différencier :
– D’une part en angioblastes puis en cellules endothéliales,
– d’autre part en cellules souches hématopoïétiques (CSH).
• Les CSH se classent en 2 catégories :
– LT - CSH : CD133+, CD34- CD 38- (« Long Term » ou de longue durée)
– ST- CSH : CD133+, CD34+ CD 38- (« Short Term » ou de courte durée)
• Les ST-CSH se différencient en un progéniteur multipotent (MP), lequel se
différencie
– soit en progéniteur commun myéloïde (CMP)
– soit en progéniteur commun lymphoïde (CLP)
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II- Etapes de l’hématopoïèse
B- Les progéniteurs
• Le progéniteur commun myéloïde ou cellule souche myéloïde ou
CFU-GEMM (Colony Forming Unit - Granulocyte – Erythroblast -
Megakaryocyte – Monocyte) se différencie en :
– progéniteur commun granulocytaire monocytaire (CFU –GM
ou GMP)
– progéniteur commun mégacaryocytaire érythroblastique
(MEP ou Megakaryocyte Erythroid Progenitor).
• Le progéniteur commun lymphoïde ou cellule souche lymphoïde
se différentie en progéniteur B et T
• Les progéniteurs tardifs ou différenciés (CFU-M, CFU-G, BFU-E
ou BFU-Mk) ne donnent naissance qu’à une lignée cellulaire, en
se différenciant en précurseurs.
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II- Etapes de l’hématopoïèse
C- Les précurseurs (compartiment de maturation)
• Reconnaissables par leur morphologie : ce sont les cellules que
l’on observe au microscope sur un étalement de MO.
• Se différencient progressivement : c’est une différenciation /
maturation
• Dans chaque lignée on observe une amplification du nombre de
cellules (= 3 à 5 divisions cellulaires), avec des critères
morphologiques propres à chaque stade de maturation,
• Hématie = hémoglobine pour le transport de l’oxygène
• Neutrophile = granulations (phagocytose)
• Monocyte = phagocytose et intervention dans l’immunité
• Lymphocytes = intervention dans la réponse immune.
• Plaquettes = molécules de membrane et granulations pour
l’hémostase
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III- Régulation de l’hématopoïèse
• Le microenvironnement médullaire
• La Régulation génique
• Les facteurs de croissance hématopoïétiques
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3. Stroma et microenvironnement : notion de
niche hématopoïétique.
– Environnement nécessaire pour la survie, la croissance
et la différenciation des cellules hématopoïétiques
– Les cellules stromales proviennent des cellules souches
mésenchymateuses
– Cellules stromales (adipocytes, fibroblastes, cellules
endothéliales, macrophages) qui sécrètent les facteurs
de croissance et les substances qui composent la
matrice extracellulaire (collagène, fibronectine,
thrombospondine)
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La niche hématopoïétique
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La niche hématopoïétique
• La présence des cellules stromales est nécessaire à
l’hématopoïèse :
– Libération de divers facteurs de croissance hématopoïétiques
(FCH) par les cellules stromales.
– Production de divers composants permettant le maintien de la
croissance des CSH : CXCL12, angiopoïétine-1, VCAM-1, KL [la
protéine KIT est récepteur de surface pour le SF (steel factor, ou
KIT Ligand, ou SCF) produit par les cellules stromales]
– Contacts entre cellules stromales et CSH.
• Ces divers mécanismes régulent la
prolifération/différenciation ou au contraire la quiescence
des CSH.
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La niche hématopoïétique
• Circulation cellulaire au sein du tissu myéloïde:
– Les interactions stroma - cellules hématopoïétiques permettent la
circulation des différentes cellules de l'hématopoïèse (immatures et
matures) dans le tissu myéloïde ;
– Les cellules endothéliales des sinusoïdes jouent un rôle dans la sortie
sélective des cellules matures de la MO vers le torrent circulatoire : les
cellules matures peuvent traverser le cytoplasme des cellules
endothéliales aussi bien que se glisser entre ces cellules ;
• Le « homing » est un mécanisme permettant aux cellules sanguines de
quitter le torrent circulatoire et de retourner dans les organes
hématopoïétiques (important pour la recolonisation de territoires
médullaires irradiés ou aplasiques).
– La sélectine L (CD62-L) exprimée par le microenvironnement médullaire serait le
ligand du CD34, ce qui expliquerait le homing des CSH CD34+ préférentiellement
vers la MO
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Contrôle génique de l’hématopoièse
Facteurs de transcription régulant l’engagement des cellules vers une
lignée
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Facteurs de croissance
hématopoïétiques et leurs récepteurs
• Origine des FCH.
– Fibroblastes, cellules endothéliales et macrophages
produisent GM-CSF, G-CSF, CSF1 et KL. Ces cellules
sont médullaires (= cellules stromales), mais aussi
dispersées dans tout l’organisme.
– Les cellules T et les macrophages produisent diverses
cytokines au niveau du site de l’inflammation.
– L’EPO: produite par les cellules péritubulaires rénales
(et environ 10% par le foie).
– La TPO est produite par le foie (et un peu par le rein)
– Plusieurs FCH sont maintenant disponibles sous forme
recombinante.
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Facteurs de croissance: mode d’action
Facteurs de croissance
hématopoiétiques et leurs recepteurs
• Action des FCH sur les cellules de l’hématopoïèse.
– Action sur les progéniteurs précoces, peu spécifiques de lignées : SCF,
Flt3-L, IL-3, famille de l’IL-6 (IL-6, IL-11)
– Action plus restreinte, plus tardive :
• Pour les granulocytes, les macrophages, ou les mastocytes :
– GM-CSF : permet l’orientation vers la production de progéniteurs
Granulocytaires / Monocytaires
– G-CSF : permet la différenciation vers les neutrophiles
– M-CSF : permet la différenciation vers les monocytes
– IL-5 : permet la différenciation vers les éosinophiles.
– SCF ou KL (Kit ligand) : permet la différenciation mastocytaire.
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• Pour les mégacaryocytes : Thrombopoïétine (TPO) et son récepteur appelé MPL,
présent sur les plaquettes et sur les Mk. La TPO est synthétisée par le foie.
• Pour les érythroblastes :
– Principalement l'érythropoïétine (EPO), synthétisée par les cellules péritubulaires
du cortex rénal, sensible à la pression en oxygène du sang [dans les cellules
rénales un facteur de transcription oxygène dépendant, inductible par l'hypoxie,
contrôle la synthèse de l'EPO].
– Les proérythroblastes et les CFU-E entrent en apoptose en l'absence d'EPO, qui
est donc plutôt un facteur anti-apoptotique.
• Pour les cellules lymphoïdes :
– SCF et IL-7 orientent la différenciation des CS pluripotentes en progéniteur
lymphoïde,
– IL-7 : aide à la différenciation des progéniteurs B (BCP),
– IL-2, IL-4, IL-7 : aide à la différenciation des progéniteurs T (TCP).
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Facteurs de croissance de promotion
Capables d’agir sur les cellules souches totipotentes
Augmentent le nombre de cellules souches en cycle cellulaire
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Facteurs de croissance multipotents
Permettent la survie et la différentiation des cellules après
action des facteurs de promotion (GM CSF et IL3)
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Facteurs de croissance restreints
Agissent sur les cellules souches déjà engagés en favorisant leur
multiplication et leur maturation. Action limitée à une lignée
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Facteurs de croissance non
hématopoiétiques et leurs recepteurs
• Vitamines : notamment B12 et folates
• Oligoéléments et minéraux : fer, cuivre, zinc
• Acides aminés.
• La pression en oxygène est de 4% dans les
vaisseaux sanguins et de 1% dans les niches
hématopoïétiques : les CSH fonctionnent en
hypoxie chronique.
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Inhibiteurs de l’hématopoïèse.
• Pour l’érythropoïèse:
– des lymphocytes T suppresseurs peuvent agir par contact avec les
cellules érythroïdes faisant intervenir des antigènes HLA ou non.
– Par ailleurs le TNF est une cytokine inhibitrice, impliquée dans l’anémie
de l’état inflammatoire.
• Pour la granulopoïèse, divers inhibiteurs produits par les
lymphocytes T suppresseurs peuvent induire une neutropénie :
– IFN (tous types),
– TNFα,
– TGF β,
– MIP 1α (action par l’intermédiaire de récepteurs pro apoptotiques fas-fasL).
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IV- Techniques d’étude
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Techniques d’études
• Les techniques de culture in vitro : usage fréquent, mais
limité aux laboratoires spécialisés.
– Mise en culture de cellules mononucléées de la moelle osseuse
– Milieu artificiel (agarose, méthyl cellulose, collagène),
– Résultats:
• disparition après quelques jours des cellules déposées (= mort de la
plupart des cellules, qui sont des précurseurs et des cellules matures),
• puis apparition après 8-10 j de quelques colonies (= amas de cellules
plus ou moins matures provenant des progéniteurs tardifs),
• puis après 15- 20 j apparition de colonies originaires de progéniteurs
plus précoces.
– Plus une colonie met de temps à apparaître, plus elle correspond
à un progéniteur précoce et donc moins différencié.
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Techniques d’étude
• Les techniques de cytométrie de flux
– CSH les plus primitives (LT-CSH): CD133+ CD34- CD38-
– Les CSH les plus primitives sont THy1(CD90)+ CD38- et sont
dépourvues d’antigènes des lignées lymphoïdes et myéloïdes
(elles sont appelées Lin – : càd négatives pour les Ag de
lignées).
– Les ST-CSH et les progéniteurs de l’hématopoïèse expriment
l’antigène CD34 (sialomucine)
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Conclusion
• L’hématopoïèse est un processus complexe,
encore imparfaitement compris, souvent issu
d’extrapolations de l’animal à l’homme.
• Des altérations de l’hématopoïèse peuvent
conduire à diverses pathologies, réactionnelles
(aplasies) ou malignes (hémopathies).
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