Réplication de l’ADN
Tous les organismes doivent dupliquer leur ADN avec une fidélité extraordi-
naire avant chaque division cellulaire
La réplication d'une molécule d'ADN est le processus permettant d'obtenir
deux molécules filles identiques à la molécule mère
Réplication de l’ADN Une "machinerie de réplication" assure cette fidélité alors qu’elle duplique
l’ADN à des taux pouvant atteindre 1.000 nucléotides par seconde
L’ADN est synthétisé à partir d’un ADN simple brin (substrat ou matrice)
Le processus de réplication débute au niveau d’une origine de réplication (où
démarre la synthèse d’ADN) :
- Les procaryotes ont une seule origine de réplication
- Les eucaryotes ont plusieurs origines de réplications
Réplication de l’ADN Cycle cellulaire
En raison de leur croissance rapide, les bactéries répliquent leur ADN conti-
nuellement, et elles peuvent ainsi entamer un nouveau cycle avant que le
précédent ne soit achevé
Pour la plupart des cellules eucaryotes, la réplication d’ADN ne survient que
durant une phase spécifique du cycle de division cellulaire, appelée phase de
synthèse d’ADN ou phase S :
- Pour une cellule de mammifère, la phase S dure généralement à peu près 8
heures; pour les cellules eucaryotes plus simples, telles que les levures, la
phase S peut durer 40 minutes
- A la fin de la phase S, chaque chromosome a été répliqué pour produire deux
copies complètes, qui demeurent jointes ensemble au niveau de leurs centro-
mères jusqu’à la phase M (mitose) qui suit juste après
Mode de réplication de l’ADN Mode de réplication de l’ADN
3 modes de réplication de l’ADN ont été suggérés : Les expériences de Meselson et Stahl (1958) ont démontré que le mode de
réplication de l’ADN était semi-conservatif : Chaque molécule d'ADN fille
contient donc un brin parental et un brin néoformé
Réplication de l’ADN Réplication de l’ADN
La molécule mère d'ADN se déroule et se sépare en deux brins qui vont servir L’appariement des bases est à la base de la réplication (et de la réparation) de
chacun de modèle (matrice) pour la synthèse de nouveaux brins, appelés brins l’ADN
néoformés, et qui leur seront complémentaires
Réplication de l’ADN Réplication de l’ADN
L’ADN polymérase est l’enzyme qui La "machinerie de réplication" polymérise l’ADN à une vitesse de 500-1.000
catalyse la polymérisation de la nou- nucléotides/seconde (chez les procaryotes) ou 50-100 nucléotides/seconde
velle chaîne en introduisant les (chez les eucaryotes), avec une grande fidélité (en moyenne 1 erreur/109
nucléotides dans le sens 5’ > 3’ nucléotides polymérisés) en raison des propriétés des polymérases et des
systèmes de correction/de réparation de l’ADN
Les nucléotides libres, substrats de
cette enzyme, sont des désoxyribo-
nucléosides triphosphates et leur
polymérisation en ADN nécessite
une matrice d’ADN simple brin,
une amorce et une extrémité 3’OH
libre
Brin à synthèse continue / Brin à synthèse discontinue Brin à synthèse continue / Brin à synthèse discontinue
Les analyses réalisées ont montré qu’une région de réplication localisée se Pour le brin à synthèse continue, une amorce est nécessaire, mais seulement
déplaçait progressivement le long de la double hélice d’ADN parentale : en au début de la réplication : une fois qu’une fourche de réplication est établie,
raison de sa structure en Y, cette région active a été appelée "fourche de l’ADN polymérase est continuellement en présence d’une extrémité de chaîne
réplication" appariée sur laquelle elle peut rajouter de nouveaux nucléotides
En raison de l’orientation anti-parallèle des deux brins d’ADN dans la double Par contre, pour le brin à synthèse discontinue, chaque fois que l’ADN
hélice d’ADN et le sens de polymérisation 5'>3‘, la polymérisation se fait de polymérase complète un court fragment d’ADN d’Okazaki (1.000-2.000
manière : nucléotides), elle doit débuter la synthèse d’un fragment entièrement nouveau
en un site suivant le long du brin matrice
- continue sur un brin : Brin "leader" ou brin avancé
- discontinue sur l’autre brin : Brin retardé
Brin à synthèse discontinue Réplication chez les procaryotes
Un mécanisme particulier implique une enzyme appelée ADN primase, qui
utilise des ribonucléosides triphosphate pour synthétiser de
courtes amorces d’ARN sur le brin à synthèse
discontinue
Il y a ensuite élongation d’un fragment d’ADN par
l’ADN polymérase pour continuer le fragment
La synthèse de chaque extrémité du fragment
d’Okazaki se termine lorsque l’ADN polymérase
arrive à l’amorce d’ARN attachée à l’extrémité 5’
du fragment précédent
Pour constituer une chaîne d’ADN continue à partir
de tous les fragments d’ADN synthétisés, un système
de réparation de l’ADN élimine l’ancienne amorce
d’ARN et la remplace par de l’ADN
Une enzyme ADN ligase joint l’extrémité 3’ du nouveau
fragment d’ADN à l’extrémité 5’ du précédent
Réplication chez les procaryotes (ADN circulaire) Réplication chez les eucaryotes
ADN polymérases Réplication des télomères
Il existe plusieurs ADN polymérases : Les télomères marquent l’extrémité des chromosomes et permettent ainsi à la
cellule de distinguer entre la vraie extrémité d’un chromosome et une
- Chez les procaryotes : Pol I (réparation et réplication, activités polymérase extrémité artificielle causée par une cassure (distinction importante car la
5’>3’, exonucléase 3’>5’, exonucléase 5’>3’), Pol II (réplication de l’ADN cassure, elle, doit être réparée)
endommagé, exonucléase 3’>5’), Pol III (principale polymérase bactérienne,
polymérase 5’>3’), ... L’ADN télomérique comporte des centaines de copies d’un même motif
répété, 5’-TTAGGG-3’ chez l’homme, avec une courte extension de l’extrémité
- Chez les eucaryotes : Pol (associée à la primase), Pol (réparation des 3’ de la molécule d’ADN double brin
erreurs), Pol (polymérase principale, activités polymérase 5’>3’,
exonucléase 3’>5’), Pol (réparation de l’ADN), Pol (réplication de l’ADN
mitochondrial), ...
Figure. Séquence à l’extrémité d’un télomère chez l’homme (la
longueur de l’extension 3′ est différente pour chaque espèce)
Réplication des télomères Réplication des télomères
La plus grande partie de l’ADN télomérique est copié normalement lors de la Figure. Extension de l’extrémité d’un chromosome humain par la télomérase
réplication de l’ADN
Les extrémités sont synthétisés suivant un mécanisme indépendant catalysé L’ARN de la télomérase s’ap-
par une autre enzyme, la télomérase, pour compenser certaines limites du parie à l’extrémité de la
processus de réplication molécule d’ADN qui est alors
synthétisée sur une courte
La télomérase est composée de protéines et d’ARN, et chez l’homme cet ARN distance, puis cet ARN de la
a une longueur de 450 nucléotides et est constitué à son extrémité 5’ de la télomérase glisse vers une
séquence 5’-CUAACCCUAAC-3’, dont la région centrale est le complémentaire nouvelle position pour s’y ap-
des séquences répétées télomériques humaines 5’-TTAGGG-3’ parier et la synthèse se pour-
suit par petits morceaux de
> Cet ARN est utilisé comme matrice, et la synthèse d’ADN est assurée par la
nucléotides jusqu’à ce que le
partie protéique de la télomérase qui agit comme une reverse transcriptase
chromosome ait été suffisam-
ment prolongé
