CAHIER PASS

Biologie cellulaire approfondie

Cycle cellulaire – Cours 1

Cours Galien Lille – 2023/2024

PASS – Biologie Cellulaire Approfondie
 Table des matières
I. Généralités 3
A. Définition 3
B. Étapes du cycle cellulaire 5
C. Le cycle cellulaire et les chromosomes 6
D. La phase G0 = Quiescence 8
E. Les points de contrôle du cycle cellulaire 9
II. Méthodes d’études du cycle cellulaire 10
A. Déterminer la durée de la phase M 10
1. La microscopie optique 10
2. La vidéomicroscopie 11
B. Déterminer la durée de la phase S 11
1. Par autoradiographie (ancienne technique) 11
2. Par immunofluorescence 12

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 I. Généralités

A. Définition

Une cellule au sein d’un tissu aura 3 devenirs qui dépendront des signaux de l’environnement détectés par des
récepteurs spécifiques :

Au cours du développement embryonnaire constituant ainsi les tissus et les

Croissance et prolifération
organes
Spécialisation de la fonction adaptée à l’organe par des mécanismes de

Différenciation cellulaire différenciation cellulaire (ex : spécialisation des cellules immunitaires : réponse
inflammatoire, …) (Cf. cours Pr Marchetti)
Lorsque les cellules doivent être éliminées car elles sont inutiles, anormales,

Apoptose vieillissantes … afin de maintenir un état d’équilibre de l’organisme (Cf. cours Pr

Marchetti)

Pour cela, les cellules possèdent des récepteurs qui vont reconnaitre les signaux et engager une réponse
(prolifération, différentiation ou apoptose).

Lors de l’embryogenèse, les cellules vont énormément proliférer et effectuer de nombreux cycles cellulaires afin
de former les tissus et organes.

A l’âge adulte, la plupart des cellules arrêtent de se diviser, ne cyclent plus, car nos organes et tissus sont formés,
on dit que les cellules sont donc différenciées. Or, c’est une nécessité pour renouveler/entretenir certains tissus
grâce aux cellules souches jusqu’à la mort de l’individu.

Exemples de cellules renouvelables:

1) Les cellules immunitaires (et sanguines en général) ont une durée de vie limitée et doivent être remplacées
: les cellules souches hématopoïétiques, spécialisées, se trouvent au niveau de la moelle osseuse et
produisent toute notre vie de nouvelles cellules qui vont ensuite se différencier en globules blancs, globules
rouges et plaquettes.

2) Les cellules épidermiques (cellules de la peau), dont les cellules souches se trouvent dans la couche basale
de l’épiderme vont permettre de renouveler constamment la couche superficielle de la peau, qui permet de
nous défendre contre les agressions extérieures (blessures)

3) Les cellules hépatiques (foie): cellules quiescentes au départ mais qui doivent se diviser suite à un
traumatisme. Elles re-rentrent dans leur cycle cellulaire afin de réparer les lésions. Ce n’est pas le cas pour
tous les organes.

L’étude du cycle cellulaire permet une meilleure compréhension :

- Du développement de l’organisme
- Des maladies causées par une division cellulaire incontrôlée (cancer)
- Le vieillissement causé par un cycle cellulaire défectueux (diminution du renouvellement des cellules
(cellules peau, cellules immunitaires, …)).

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Il est bien important de comprendre la régulation du cycle cellulaire avec un contrôle fin et un équilibre entre
prolifération, différenciation et mort par apoptose.

Cas des cellules cancéreuses :

On estime que le cancer est associé à, au moins, un défaut dans l’un des 3 mécanismes : prolifération,
différenciation et/ou apoptose associé à une perturbation du contrôle du cycle cellulaire.

Une cellule qui prolifère de manière incontrôlée va potentiellement accumuler des mutations pouvant devenir
dangereuse et, in fine, cancéreuse.
La cellule cancéreuse arrête généralement de se différencier.
Dans les cancers, on observe un défaut de l’élimination par apoptose des cellules anormales.

De nombreux gènes impliquées dans les cancers sont des gènes intervenant dans le cycle cellulaire.

Cycle cellulaire :
Mécanisme de reproduction cellulaire ordonnés au cours duquel la cellule duplique son contenu et se
divise en deux cellules filles identiques à la cellule mère.
Toutes les cellules (procaryotes et eucaryotes) sont produites par des cycles réguliers de croissance et de division
cellulaire qui sont finement contrôlés (embryogenèse, formation des tissus, …).

Caractéristiques universelles du cycle cellulaire

- Réplication (= duplication) de l’ADN : L’information génétique doit être dupliquée pour le transmettre à sa
descendance, durant la phase S pour les cellules eucaryotes

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 - Ségrégation (= séparation) des chromosomes : Les originaux et les copies de l’information génétique
doivent être séparés de manière homogène durant la mitose.
- Cytodiérèse (ou cytokinèse): Division de la cellule mère en 2 cellules filles avec une distribution identique
des organites durant la mitose = Séparation cytoplasmique

B. Étapes du cycle cellulaire

Cycle cellulaire est composé de 4 différentes phases :

- Début : phase G1
- Fin : phase M.

INTERPHASE G1 Phase de croissance, la cellule va grossir

Phase de S Synthèse ADN pour répliquer l’ADN
duplication G2
La réplication est terminé (chromosomes dupliqués), l’objectif est de
Phase M
Mitose séparer les chromatides sœurs
Phase de
séparation
Cytodiérèse Division cytoplasmique

La cellule ne peut pas sauter une phase car il existe des mécanismes de contrôle régulant ce cycle cellulaire et
toujours dans le même sens.

Durée moyenne du cycle cellulaire = 20 à 24h

Phase M = Mitose (5 phases) + Cytodiérèse

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C. Le cycle cellulaire et les chromosomes

1 Chromatide :
une seule copie de la
double hélice d’ADN

1) En phase G1 : la cellule a 2N chromosomes (2 x N chromosome) à 1 chromatide, elle est diploïde (c’est-à-

dire une copie provenant du père et une copie provenant de la mère) donc 2 x 23 chromosomes = 46
chromosomes à 1 chromatide dans les cellules somatiques (ou 23 paires de chromosomes).

2) En phase S : la cellule duplique son ADN par le mécanisme de réplication de l’ADN

3) En fin de phase G2 : la cellule a 2N chromosomes à 2 chromatides = 46 chromosomes à 2 chromatides (2

copies de chaque chromosome du père et de la mère) (ou 23 paires de chromosomes à 2 chromatides)

4) En phase M, il y aura séparation de l’ensemble des chromatides sœurs pour une répartition dans les 2
futures cellules filles (qui contiendront 2N chromosomes à 1 chromatide)

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 On distingue 3 cycles différents indépendants les uns des autres :

Phase S = Duplication des chromosomes

Cycle En phase S et M
chromosomique Phase M (mitose) = séparation (ségrégation) pour distribuer
équitablement et précisément les chromosomes

Duplication du cytoplasme cellulaire = croissance cellulaire

(grossissement de la cellule)
En phase G1 & G2
(G pour « Gap »
La croissance cellulaire permet aux cellules filles d’avoir à peu
Cycle cytoplasmique ou phase
près la même composition en cytoplasme : en organites, en
intermédiaire)
membranes, et en macromolécules (protéines).
+ Cytodiérèse
Division du cytoplasme en phase M durant la cytodiérèse.

Duplication du centrosome (= centre organisateur des

microtubules).
- Joue un rôle essentiel dans la formation du fuseau mitotique
qui permettra la ségrégation des chromosomes. Il faut 2
Cycle du En interphase
centrosomes pour le fuseau mitotique.
centrosome (G1, S, G2)
- Chaque cellule fille doit avoir un centrosome pour à nouveau
polymériser des microtubules qui vont jouer de divers rôles.

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D. La phase G0 = Quiescence

Phase de quiescence ou phase G0 : la cellule est toujours bien vivante mais ne s’engage pas dans la réplication et
ne va pas se diviser, elle est sortie du cycle cellulaire.

Cette décision d’entrer en quiescence se décide durant la phase G1.

Permet à la cellule d’analyser son environnement et en fonction des facteurs existants, la cellule :

- Entre dans son cycle (en phase G1) ou attend les facteurs nécessaires à son entrée en cycle cellulaire
- Entre en différenciation : sort de la phase G1 afin de se spécialiser
- Entre en apoptose si endommagée, trop vieille ou inutile  mort cellulaire.

A l’âge adulte, cela permet à l’organisme de contrôler le nombre de cellules dans les organes et les tissus. En règle
générale, une cellule fortement différenciée ne va plus se diviser.

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E. Les points de contrôle du cycle cellulaire

Les points de contrôle sont des pauses dans le cycle pour vérifier plusieurs éléments nécessaires à une progression
correcte dans le cycle cellulaire :

- Un environnement (facteurs de croissance, …) adapté ;

- Une bonne intégrité de l’ADN.

A chaque point de contrôle, la cellule peut prendre la décision d’arrêter la progression du cycle cellulaire en cas
d’anomalies.

L’objectif est d’avoir des cellules filles parfaitement identiques aux cellules mères.

Il y a 3 points de contrôle dans le cycle cellulaire :

Vérifie l’environnement et l’intégrité de la cellule et bloque le cycle si elle n’a pas

tous les éléments nécessaires pour effectuer un cycle cellulaire complet :
En phase G1 :
- Assez de nutriments ? AA, glucose, vitamines
point de restriction (R)
- ADN intègre ?
- Facteurs mitogènes ? = signaux
En phase G2 Vérifie que les chromosomes se sont répliqués entièrement et correctement (pas
(avant de s’engager en M) d’erreurs ?).
Vérifie que tous les chromosomes sont bien alignés sur la plaque métaphasique et
En phase M associés au fuseau mitotique. Sinon, mauvaise séparation des chromosomes et donc
mauvaise répartition dans les cellules filles.

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 II. Méthodes d’études du cycle cellulaire

Notamment utilisé dans l’étude des cellules cancéreuses et également l’action des anticancéreux sur ces cellules et
sur leur cycle cellulaire puisqu’une cellule cancéreuse prolifère énormément.

A. Déterminer la durée de la phase M

1. La microscopie optique

On utilise une propriété qu’a la cellule en culture : l’adhérence. En effet, une cellule en culture établit des contacts
avec la matrice extracellulaire.

Quand on observe une culture cellulaire durant 24h, on remarque donc deux types de morphologie (arrondie ou
étalée/adhérente au support).

On parle de culture asynchrone. C’est-à-dire que toutes les cellules ne sont pas au même moment dans la même
phase du cycle cellulaire.

En mitose En interphase
Cellules qui forment des lamellipodes et
Cellules arrondies
s’étalent sur la matrice

Index mitotique :
Si on connaît le nombre total de cellules dans la boite, on détermine facilement l’index mitotique (%).

𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍 𝐝𝐝𝐝𝐝 𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜 𝐞𝐞𝐞𝐞 𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦𝐦 (𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜 𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚𝐚)

Index mitotique =
𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍𝐍 𝐝𝐝𝐝𝐝 𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜𝐜 𝐭𝐭𝐭𝐭𝐭𝐭𝐭𝐭𝐭𝐭𝐭𝐭𝐭𝐭 𝐨𝐨𝐨𝐨𝐨𝐨𝐨𝐨𝐨𝐨𝐨𝐨é𝐞𝐞𝐞𝐞 𝐞𝐞𝐞𝐞 𝐌𝐌𝐌𝐌

Cela permet de savoir si les cellules prolifèrent fortement, faiblement ou pas du tout.

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 Déterminer la durée de la mitose :
Durée du cycle cellulaire : Entre 20 et 24h.

Le nombre de cellules observées à un instant t donné dans une phase du cycle est proportionnel à la
durée de cette même phase du cycle car les cellules évoluent toujours à la même vitesse.
𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏 𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄 𝒆𝒆𝒆𝒆 𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎 (𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂)
Durée de la mitose (h) = × 𝟐𝟐𝟐𝟐𝟐𝟐
𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏 𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄 𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕 (𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂𝒂+é𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕é𝒆𝒆𝒆𝒆)

Plus la phase du cycle est longue, plus on aura de chance d’observer des cellules dans cette phase. Ce calcul peut
être remplacé par une observation en vidéomicroscopie des cellules.

2. La vidéomicroscopie

On observe les cellules en continu pour en déduire la durée de la mitose.

𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀 𝐷𝐷𝐷𝐷𝐷𝐷é𝑒𝑒 𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀𝑀

𝐼𝐼𝐼𝐼𝐼𝐼𝐼𝐼𝐼𝐼 𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 (𝐼𝐼𝐼𝐼) = =
𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁 𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 𝐷𝐷𝐷𝐷𝐷𝐷é𝑒𝑒 𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐

 On en conclut que la phase M (mitose + cytodiérèse) est la phase la plus courte du cycle cellulaire, elle dure
1h.

Pour les autres phases du cycle, il n’est pas possible d’utiliser la morphologie, car elle est identique en phase G1, G2
et S donc autre technique.

B. Déterminer la durée de la phase S

On utilise la réplication pour mettre en évidence la phase S. La réplication de l’ADN

Thymine :
nécessite l’incorporation de nucléotide, et notamment la thymine. Base spécifique de l’ADN

1. Par autoradiographie (ancienne technique)

- Incubation des cellules en culture avec un désoxyribonucléoside la 3H-Thymidine* (thymidine tritiée (H3))
= molécule radioactive qui s’intègre à l’ADN lors de la réplication

- Les cellules en réplication deviennent visibles sous forme de

grains d’argent (bromure d’argent) en MO car elles ont
incorporé l’élément radioactif (une cellule fléchée sur la
photo ci-contre).

- On peut alors compter le nombre de cellules en phase S,

avec révélation par autoradiographie

- Contre-coloration des noyaux avec un colorant bleu pour

pouvoir comparer les différents noyaux (en phase S ou non)

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2. Par immunofluorescence

- Incorporation de BrdU (bromodésoxyuridine) : c’est un

analogue de la thymidine, qui va donc s’incorporer dans
l’ADN en réplication.

- On révèle ensuite le BrdU par des anticorps fluorescents

anti-BrdU marqués par la rhodamine (fluorescence rouge
sur l’image ci-contre).

L’image ci-dessus a été obtenue sur des cellules en culture incubées avec le BrdU, fixées puis perméabilisées et
incubées avec un anticorps anti-BrdU qui pourra rentrer dans le noyau. Sur cette image en immunofluorescence, il
y a une contre coloration des noyaux cellulaires avec le DAPI (coloration bleu des noyaux).

 On en conclut que la phase S dure 8h environ (après avoir fait le calcul du rapport entre le nombre de cellules
en phase S marquées au BrdU et le nombre de cellules totales)
𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑝𝑝ℎ𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 𝑆𝑆 (𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵) 𝐷𝐷𝐷𝐷𝐷𝐷é𝑒𝑒 𝑃𝑃ℎ𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 𝑆𝑆
𝐼𝐼𝐼𝐼𝐼𝐼𝐼𝐼𝐼𝐼 𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 (𝐼𝐼𝐼𝐼) = =
𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁𝑁 𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 𝐷𝐷𝐷𝐷𝐷𝐷é𝑒𝑒 𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡𝑡 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐

Comme vous a indiqué l’enseignante, je vous conseille également de participer aux ED de Biologie cellulaire pour
bien comprendre les calculs de la durée des phases et du pourcentage de cellules dans une phase spécifique du
cycle cellulaire.

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