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Annales de Phytomédecine 7(2): 13­24, 2018 DOI: 10.21276/ Ann. Phytomed., 13

ap.2018.7.2.3; ISSN imprimé : 2278­9839 et ISSN en ligne : 2393­9885 7(2):13­24 (2018)

Article de synthèse

Métabolites secondaires des plantes, leur séparation et leur identification, et leur

rôle dans la prévention des maladies humaines
Kuntal Das et Sevgi Gezici*
Département de pharmacognosie et de phytochimie, Collège de pharmacie Krupanidhi, n° 12/1,
Chikkabellandur, Carmelaram Post, Varthur Hobli, Bengaluru­560035, Karnataka, Inde
*Département de biologie moléculaire et de génétique, Université de Kilis 7Aralik, 79000, Kilis, Turquie

Reçu le 10 septembre 2018 : Révisé le 30 octobre 2018 : Accepté le 7 novembre 2018 : Publié en ligne le 30 décembre 2018

Abstrait

Les phytoconstituants sont les composants non nutritifs les plus essentiels sécrétés par les plantes. Ils sont
également connus sous le nom de métabolites secondaires qui ne sont pas utilisés par les plantes, mais utilisés
pour leurs propriétés protectrices ou préventives contre les maladies chez l'homme. Il existe de nombreux
phytoconstituants isolés et utilisés comme médicaments. Peut­être que certains sont également utilisés comme
composés marqueurs qui sont isolés par des techniques d'empreintes digitales et agissent comme des normes
phytochimiques. Des études scientifiques ont révélé que les phytoconstituants isolés sont plus efficaces que
les extraits bruts pour l'activité thérapeutique. Par conséquent, la demande porte sur l'identification primaire
ainsi que sur la séparation des constituants par le biais de divers systèmes de solvants, en utilisant la technique
de chromatographie en couche mince (TLC) . Divers tests chimiques pour l'identification du groupe fonctionnel
des composés, suivis du système de solvant TLC ainsi que des réactifs de pulvérisation sépareront et
détecteront clairement les constituants. Ces études montreront l'étape suivante vers la découverte de nouvelles
molécules médicamenteuses pour une efficacité thérapeutique efficace.

Mots clés : Biomarqueur, techniques chromatographiques, empreintes digitales, isolement, identification,

phytoconstituants

1. Introduction Les médicaments traditionnels sont souvent utilisés pour traiter des maladies telles que l'asthme, l'asthme,

l'asthme, l'asthme, l'asthme, l'asthme induit par des produits chimiques inconnus ou des effets toxiques tels
Dieu a créé un règne végétal naturel doté de super pouvoirs naturels pour guérir et traiter
que des nausées, des vomissements, des diarrhées ou d'autres réactions toxiques, voire la mort (Fabricant
de nombreuses maladies humaines. Il est bien connu que les plantes sont également
et Farnsworth, 2001). Puis, progressivement, la médecine traditionnelle est arrivée dans le domaine des
disponibles pour les maladies humaines et pour cela, nous devons reconnaître ou identifier
plantes médicinales et, sur la base des applications des médecines traditionnelles, de nombreuses branches
le bon remède. Les plantes fournissent presque tout ce dont l'homme a besoin et la nature
ont été créées, telles que l'Ayurveda, le Siddha, l'Unani, l'homéopathie et également les médecines chinoises.
a influencé l'utilisation des ressources disponibles depuis l'Antiquité (Payum, 2017). Selon
Ces systèmes utilisent des plantes naturelles dans la guérison et le diagnostic des
l'Organisation mondiale de la santé (OMS), plus de 80 % de la population mondiale croit
maladies physiques et mentales des humains, conformément au concept de base des
aux plantes médicinales car elles jouent un rôle important dans le développement de la
différents systèmes susmentionnés.
santé de l'humanité (Alves et Rosa, 2005). Il est désormais établi et pleinement admis que
les phytoconstituants obtenus à partir des plantes médicinales servent de molécules Les concepts les plus intéressants et les plus stimulants de ces systèmes sont la guérison
primaires et importantes dans les médicaments modernes (Neube et al., 2008 ; Rajeshwari des maladies à l'aide de plantes sans transformation industrielle ou peut­être très
et al. 2013 ; Manoharachary et Nagaraju, 2016 ; Majeed, 2017 ; Dang, 2018) et de négligeable et, par conséquent, jusqu'à présent, ils continuent de jouer un rôle important
nombreuses personnes dépendent encore de la médecine traditionnelle pour leurs soins dans le domaine des plantes médicinales pour traiter les maladies chroniques au niveau
de santé et leurs traitements préliminaires (Bannerman et al., 1986). Tous ces traitements de la racine. Dans ce système de médecine traditionnelle, les plantes sont utilisées en
dépendent principalement des phytoconstituants présents dans les plantes. combinaison ou seules pour leur efficacité thérapeutique, mais il n'y a pas beaucoup de
preuves scientifiques quant aux substances chimiques végétales responsables de la
guérison de ces maladies particulières. Ces concepts ont forcé la découverte de
médicaments modernes au début du 19e siècle, où les plantes ont scientifiquement prouvé
leur efficacité en raison de la substance chimique particulière présente. Par conséquent,

Dans les premiers temps, il y a environ 60 000 ans, les gens utilisaient directement des la découverte de médicaments à partir de sources végétales prend un élan et une

plantes brutes pour soigner les maladies, mais dans de nombreux cas, ces plantes importance maximum avec l'ère du système de médecine moderne grâce au concept

présentaient des effets indésirables dus à une mauvaise interprétation ou à des réactions dues àd'expérience
des éthanobotanique des médecines traditionnelles.

Les plantes naturelles présentent une grande diversité biologique et, de ce fait, une plante

Auteur pour la correspondance : Dr Kuntal Das Professor, contient plus d'un composant chimique. Ce concept a posé de nouveaux défis aux
Krupanidhi College of Pharmacy, #12/1, Chikkabellandur, Carmelaram Post, Varthur Hobli, phytochimistes pour isoler, identifier et caractériser les constituants des plantes, puis établir
Bengaluru­560035, Karnataka, Inde E­mail : drkkdsd@[Link] Tél. : +91­9632542846 leur efficacité pharmacologique et thérapeutique. La première morphine phytochimique
issue de l'opium (1804) (Serturner, 1806),

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Courriel : ukaaz@[Link] ; Site Web : [Link]
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suivi par l'émétine de l'ipéca (1817) (Grollman et Jarkovsky, 1975), la strychnine glycosides, alcaloïdes, glucides, protéines, lipides, tannins, flavonoïdes,
de Nux vomica (1818), la quinine de l'écorce de quinquina (1820) (Pelletier et terpénoïdes, stéroïdes, polyphénols, phytostérols, résines, glycoalcaloïdes, etc.
Caventou, 1818) et par la suite, la nicotine (alcaloïde) a été isolée de la plante de Par conséquent, diverses méthodes d'extraction suivies de méthodes de criblage
tabac en 1828 (Posselt et Reimann, 1828). Depuis lors, les scientifiques ont mené phytochimique détaillées sont développées pour connaître l'histoire complète des
des recherches approfondies sur la découverte de médicaments à l'aide de la constituants de la plante, en particulier l'identification préliminaire des phytogroupes.
chimie analytique moderne, de la chimie combinatoire avec l'aide des industries
pharmaceutiques pour établir la caractérisation des médicaments. Les articles
Pour l'extraction des constituants végétaux, des solvants particuliers sont utilisés
scientifiques montrent que toute efficacité thérapeutique démontrée par les
en fonction de la solubilité des constituants végétaux. En outre, divers tests
plantes est basée sur les groupes de composés présents dans le corps de la
chimiques sont effectués pour identifier le groupe des constituants. Des tests
plante. Ils sont connus sous le nom de métabolites secondaires des plantes qui
chimiques généraux sont effectués pour détecter le
sont stockés dans diverses parties de la plante qui ne sont pas utilisés par les
métabolites secondaires tandis que des tests chimiques individuels sont effectués
plantes, mais qui sont essentiels pour que les humains obtiennent des effets
pour identifier des constituants particuliers.
thérapeutiques. Ces métabolites secondaires sont

Après dérivatisation

Sous la lumière UV
Figure 1 : Empreinte digitale HPTLC pour un extrait végétal.

En outre, la méthode de chromatographie sur couche mince (TLC) est utilisée La lumière ultraviolette (254 et 366 nm) et occasionnellement la lumière visible
pour séparer et identifier les constituants présents dans les extraits de plantes après dérivatisation (Figure 1). L'empreinte HPTLC est obtenue à faible coût et à
particuliers. Les constituants identifiés sont ensuite isolés à l'aide de la grande vitesse, répondant au besoin d'une méthode moderne de contrôle de la
chromatographie sur colonne ou par des méthodes HPLC ou HPTLC préparatives . qualité. Par conséquent, la HPTLC est l'outil le plus puissant reliant l'identité
Cette méthode est également connue sous le nom d'empreinte digitale, utilisée botanique au profil des constituants chimiques de la plante ainsi que utilisé pour
pour le contrôle de la qualité des plantes médicinales, par laquelle des marqueurs la détermination quantitative de ces composés marqueurs. Sur la base de ces
à base de plantes sont isolés. C'est ce qu'on appelle des biomarqueurs. Ce sont études, de nouveaux revenus ont été ouverts à l'ère moderne, tels que les
les composés présents de préférence en « quantités détectables » dans les nutraceutiques, la nanotechnologie des plantes médicinales, la phytopharmacologie
plantes. Il s'agit de constituants chimiquement définis d'un médicament à base de moléculaire, la robotique végétale, etc.
plantes qui sont utilisés à des fins de contrôle, indépendamment du fait qu'ils
Il est donc nécessaire de connaître en détail l'étude préliminaire de la technologie
aient ou non une activité thérapeutique. Une empreinte digitale comprend la
de phytoscreening par rapport à divers tests chimiques ainsi que l'étude TLC sur
numérisation, dans les UV, la fluorescence, les spectres ultraviolets et les images photographiques dans
la relation entre les produits naturels,
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médecines traditionnelles et médecine moderne pour explorer les concepts et Les métabolites secondaires sont produits en quantités relativement faibles dans les
méthodologies possibles depuis les produits végétaux jusqu'à la découverte de plantes, mais ils ont une valeur économique et médicinale importante pour l'homme.
nouvelles molécules médicamenteuses. Une concentration élevée de métabolites secondaires présents dans les plantes
indique des plantes plus résistantes. Diverses recherches scientifiques ont prouvé
2. Métabolites secondaires des plantes
que l'efficacité thérapeutique et les actions pharmacologiques sont principalement
Les plantes produisent un grand nombre de composés chimiques différents, dues à l'action des métabolites secondaires et, par conséquent, les métabolites
généralement classés en métabolites primaires et métabolites secondaires. Les secondaires végétaux gagnent en importance pour les chimistes spécialisés dans les produits naturels.
métabolites primaires sont essentiels à la survie des plantes : sucre, protéines, acides Ils sont classés en fonction de leur structure chimique (par exemple, ils ont des
aminés, etc. cycles, ils contiennent un sucre), de leur composition (ils contiennent ou non de
Par la suite, les métabolites secondaires sont les produits considérés comme des l'azote), de leur solubilité dans divers solvants, ainsi que de la voie par laquelle ils
déchets des plantes. Ces métabolites secondaires ne sont pas essentiels, mais sont synthétisés (par exemple, le phénylpropanoïde, qui produit des tannins).
stockés dans diverses parties du corps des plantes et fournissent des protections aux Fondamentalement, ils sont classés en quatre grands groupes comme les composés
plantes contre les attaques des micro­organismes, des attracteurs pour les contenant de l'azote, les glycosides, les composés phénoliques et les terpènes. La
pollinisateurs, etc. Ces métabolites secondaires liste détaillée de la classification est présentée dans le tableau de la figure 2.

Métabolites secondaires

Composés Phénolique Glycosides Tannins Composés

azotés composés terpéniques

Alcaloïdes Flavonoïdes

Sans protéines
Acides aminés Anthocyanes Flavones Flavanols

Cyanogène
Glycosides

Figure 2 : Classification générale des métabolites secondaires des plantes.

Outre les applications thérapeutiques, ces métabolites secondaires sont également Les alcaloïdes sont incolores, mais certains sont colorés comme la nicotine (marron),
utiles dans la préparation de divers colorants, dans la préparation d'insecticides la berbérine (jaune), la canadine (orange). Ils réagissent avec l'iodure de métal lourd
agrochimiques, dans la disponibilité des matières premières dans les industries, dans et forment un précipité. Ce sont des substances réservées qui fournissent de l'azote.
les parfums et les cosmétiques, dans les colorants et les agents aromatisants. Selon la position de l'azote dans la structure cyclique, les alcaloïdes sont classés en
Certains des caractères importants des métabolites secondaires sont décrits ci­ trois groupes, à savoir les vrais alcaloïdes, les proto­alcaloïdes et les pseudo­
dessous : alcaloïdes.

Alcaloïdes Les vrais alcaloïdes contiennent de l'azote dans leur cycle hétérocyclique et sont
synthétisés à partir d'acides aminés. Ces alcaloïdes donnent des résultats chimiques
Le nom alcaloïde indique des « alcaloïdes de type alcalin » qui sont d’importants
généraux pour les alcaloïdes (exemples : morphine, nicotine, atropine). Les proto­
métabolites secondaires végétaux, principalement composés d’azote. Ils sont
alcaloïdes sont également connus sous le nom d'amino­alcaloïdes car ils contiennent
également très toxiques, mais présentent une activité médicinale à faible dose.
de l'azote à l'extérieur du cycle hétérocyclique mais ils dérivent d'acides aminés. Ils
Environ 5000 types d’alcaloïdes sont présents dans 15 % des plantes du pays,
donnent des réactions positives à tous les tests généraux pour les alcaloïdes
répartis dans plus de 150 familles. Ces familles importantes sont les Apocyanaceae,
(exemple : éphédrine, colchicines, taxol). Enfin, les pseudo­alcaloïdes sont le groupe
Papaveraceae, Ranunculaceae, Rubiaceae, Solanaceae, Rutaceae, Loganiaceae,
d'alcaloïdes qui ne dérivent pas d'acides aminés et qui ont de l'azote dans un cycle
etc. Dans toutes ces plantes, les alcaloïdes sont présents sous forme de lamelles
hétérocyclique mais ne donnent pas de réponse positive aux tests généraux pour les
d’acide organique. Ils sont peu solubles dans l’eau et extraits avec de l’alcool. Ils sont
alcaloïdes. Les exemples sont la caféine, la conessine (Evans, 2009 ; Kokate et al.,
généralement des solides cristallins blancs, mais certains alcaloïdes sont volatils
2009).
comme la nicotine. Alcaloïdes
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Les alcaloïdes sont ensuite classés en fonction de leur origine biosynthétique 2010). Certains des glycosides cyanogènes comestibles importants sont, à
(exemples : alcaloïdes indoliques issus du tryptophane, alcaloïdes tropaniques savoir, l'amygdaline (Prunus amygdalus), la dhurrine (Sorghum album), la
issus de l'ornithine, etc.), en fonction de leur nature taxonomique et en fonction prunasine (Prunus avium), etc.
de leur action pharmacologique (exemples : poisons, stimulants, astringents, anti­
Composés phénoliques
inflammatoires, antihypertenseurs, analgésiques, expectorants, etc.).
Il s'agit du métabolite secondaire le plus important, devenu très populaire en
Acides aminés non protéiques
raison de ses bienfaits pour la santé. Ils sont constitués d'un groupe hydroxyle (–
Les acides aminés non protéiques ne font partie d'aucune molécule protéique et OH) attaché à un cycle aromatique et se trouvent en abondance dans toutes les
ne participent pas au métabolisme des protéines. Ils ne sont pas codés par l' parties des espèces végétales largement distribuées. Le premier groupe de
ADN. Ils sont généralement formés par des intermédiaires métaboliques, des phénols est celui des flavonoïdes. Les flavonoïdes sont des pigments
agents pharmacologiques, des modifications post­traductionnelles, etc. hydrosolubles que l'on trouve dans les vacuoles des cellules végétales. Ils ont

(Ambrogelly et al., 2007). On les trouve principalement dans les plantes une unité structurelle de base C6 ­C3 ­C6 , contiennent deux cycles phényles
alimentaires et fourragères. Ils protègent les plantes contre les agents pathogènes ainsi qu'un cycle hétérocyclique fusionné. Ils sont largement distribués dans les

et les prédateurs, mais sont toxiques pour les humains. Ils sont chimiquement plantes en tant que métabolites secondaires importants que l'on trouve

incorporés dans les peptides pour protéger les groupes fonctionnels. Les principalement dans les membres de la famille des Rutacées. Les flavonoïdes

exemples sont les résidus de tryptophane et de tyrosine dans certaines protéines, sont en outre divisés en de nombreux sous­groupes qui sont représentés dans la figure 3.

qui sont substitués respectivement par le 4­fluorotyrptophane et le m­ Français Tous les flavonoïdes sont impliqués dans de nombreuses activités
fluorotyrosine, le 19 Fnuceli est utilisé comme résonance magnétique sans thérapeutiques importantes comme antiallergique, anti­inflammatoire, antioxydant,
aucun effet sur les fonctions protéiques. Tous les acides aminés non protéiques antimicrobien, antiviral, anticancéreux, etc. (Choi et al., 2007 ; Ravishankar et
sont largement classés en acides aminés alpha et non alpha. Les acides aminés al., 2013 ; Gomes et al., 2012 ;). Les anthocyanes existent dans divers composés
alpha sont comme l'ornithine, la thyroxine, l'homocystéine, l'ovathiol, etc., et les colorés tels que le rouge, le bleu et le violet et se trouvent principalement dans
acides aminés non alpha sont comme la bêta­alanine, l'acide gamma­ les raisins et les baies. Ce sont des glycosides hydrosolubles de dérivés
aminobutyrique, l'acide bêta­aminoisobutyrique. Certaines fonctions générales polyhydroxyles et polyméthoxyles du 2­phényl benzopyrylium. Ils agissent pour
des acides aminés non protéiques sont les suivantes : le tryptophane est utilisé protéger contre les maladies cardiaques, le diabète, le cancer et même réduire
comme précurseur du neurotransmetteur sérotonine, la tyrosine est le précurseur le vieillissement en tant que produits de soin de la peau (Hollman et Katan,
du neurotransmetteur dopamine, l'arginine est un précurseur de l'oxyde nitrique. 1999 ; Ghosh et Konishi, 2007). Par la suite, les flavones sont de couleur rouge
ou violette et les flavanols sont des composés blancs à incolores, tandis que les
Glycosides cyanogènes
flavonols sont des composés de couleur jaune.
Les glycosides cyanogènes sont des toxines végétales naturelles, largement De plus, les lignines végétales sont également des composés structuraux de
répandues dans les plantes comestibles appartenant à la famille des type phénolique qui renforcent les parois cellulaires. Ce métabolite secondaire
Leguminosae, Fabaceae, Rosaceae, Linaceae, Rubiaceae et Compositae. Il est largement distribué dans les plantes. Ils sont classés en six sous­groupes
s'agit du groupe de composés végétaux secondaires contenant du nitrile qui produisent du cyanure.
principaux, à savoir les chalcones, les flavones, les flavonols, les flavandiols, les
Lors de l'hydrolyse du glycoside cyanogène par l'enzyme bêta­glucosidase, du anthocyanes et les proanthocyanidines ou tannins condensés. Tous ces groupes
cyanure se forme et se produit lors de la consommation ou du broyage et de la de constituants végétaux sont bénéfiques pour la protection contre les rayons
transformation des matières végétales comestibles (Harborne, 1993 ; Vetter, ultraviolets (UV) et les phytopathogènes, la signalisation pendant la nodulation,
2000). La réaction est connue sous le nom de cyanogénèse. la fertilité mâle, le transport de l'auxine, ainsi que la coloration des fleurs comme
signal visuel qui attire les pollinisateurs (Winkel­Shirley, 2002 ; Bradshaw et
Français Certaines des plantes importantes qui contiennent des niveaux élevés
Schemske, 2003). Dans l'ensemble, les fonctions biologiques des flavonoïdes
de HCN sont le trèfle blanc, le lin, l'amande, le sorgho, l'hévéa, la prune, la noix
sont liées à leur cytotoxicité potentielle et à leur capacité à interagir avec les
de cajou, l'amande amère, le manioc, etc. L'exposition ou la consommation
enzymes par complexation des protéines.
intentionnelle ou non intentionnelle de cyanure provenant de glycosides
cyanogènes conduit à des intoxications aiguës. La toxicité du cyanure dépend
de la libération de cyanure d'hydrogène et se produit chez l'homme à des doses Glycosides

comprises entre 0,5 et 3,5 mg de HCN par kilogramme de poids corporel qui se
Les glycosides sont des métabolites secondaires végétaux importants, contenant
caractérisent par des symptômes neurologiques, résultant de lésions tissulaires
chimiquement un composant glucidique lié par une liaison éther à un noyau non
du système nerveux central et incluent également d'autres symptômes tels que
glucidique. La partie glucidique est connue sous le nom de glycone ou partie
des vomissements, des maux d'estomac, de la diarrhée, des convulsions et
sucre qui est soluble dans l'eau tandis que la partie non glucidique est connue
même la mort (OMS, 1993). La détoxification des glycosides cyanogènes se fait sous le nom de partie aglycone ou partie génine. En raison de la présence de la
sur la base de méthodes de traitement qui réduisent le risque d'intoxication au partie génine, les glycosides présentent une efficacité thérapeutique comme
cyanure. Dans le corps humain ; Le cyanure est détoxifié par l'enzyme rhodanase laxatif, purgatif, antirhumatismal, émollient, cardiotonique, etc. On les trouve en
à l'aide d'acides aminés contenant du soufre et converti en thiocyanate, qui est abondance dans les plantes supérieures contenant les familles Fabaceae,
non toxique et excrété dans l'urine (Banea et al., 2012). Ils jouent un rôle Scrophulariaceae, Liliaceae, Rhamnaceae, Polygonaceae, Rosaceae,
essentiel dans la défense chimique des plantes et dans les interactions entre les Apocynaceae, Apiaceae. Ce sont généralement des substances cristallines ou
plantes et les insectes (Ganjewala et al., amorphes. Elles sont solubles dans l'eau mais insolubles dans
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solvants organiques comme le chloroforme, l'éther, etc. Ils sont hydrolysés Les terpènes sont chimiquement modifiés par oxydation ou réarrangement
par des acides ou des enzymes et séparent les parties sucrées et non sucrées. du squelette carboné et forment des terpénoïdes, c'est­à­dire qu'ils sont des
Ils sont optiquement actifs mais ne réduisent pas la liqueur de Fehling tant hydrocarbures combinés et leurs dérivés oxygénés. Ils sont également
qu'ils n'ont pas subi d'hydrolyse. connus sous le nom d'isoprénoïdes car ils sont les principaux constituants
des huiles essentielles. Les hydrocarbures terpénoïdes ont la formule
Terpènes
(C5H8 )n générale qui est connue sous le nom d'unité isoprène. Ils sont classés selon la formu
Les terpènes constituent un large groupe d'hydrocarbures présents dans de base de la valeur du nombre d'atomes de carbone présents dans la structure
nombreuses plantes. Ce sont des hydrocarbures et des composants de de base de l'isoprène. Ce sont des liquides fondamentalement incolores,
résines. Ils sont dérivés de la térébenthine. Les terpènes sont le résultat de
parfumés et plus légers que l'eau, ils sont donc insolubles dans l'eau mais
la combinaison de deux molécules d'acide acétique pour donner de l'acide
solubles dans les solvants organiques. Ils sont également optiquement actifs.
mévalonique (C6H12O4 ) puis converti en isopentényl pyrophosphate, qui
On les trouve principalement dans les familles des Apiacées, Fabacées,
contient le squelette isoprène à cinq carbones. Le terme « terpène » a été
Lamiacées, Zingibéracées, Solanacées, Pinacées et sont utilisés comme
donné aux composés isolés de la térébenthine des pins.
agents carminatifs, stimulants, contre­irritants, antirhumatismaux, parfumants
Ce sont des ingrédients actifs utiles des pesticides naturels, non seulement
et aromatisants.
ils sont également utilisés dans les industries alimentaires, cosmétiques,
pharmaceutiques et biotechnologiques (Thimmappa et al., 2014).

Flavones Anthocyanidines Flavonols

 
O O O

OH OH
O O

Exemple : la lutéoline Exemple : Cyanidine Exemple : la quercétine

Flavonoïdes

Flavanones Isoflavones Flavonols

O O O

OH
O O

Exemple : Naringénine Exemple : la génistéine Exemple : la catéchine

Figure 3 : Sous­classification des flavonoïdes.

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Tannins Préparation : 1,36 g de chlorure mercurique et 5 g d'iodure de potassium

sont dissous séparément dans 60 ml et 10 ml d'eau distillée respectivement.
Les tannins sont un autre métabolite secondaire végétal important, présent dans
Ensuite, les deux solutions sont mélangées et le volume est complété à 100
une large gamme de plantes supérieures contenant les familles Combretaceae,
ml avec de l'eau distillée.
Fagaceae, Fabaceae, Rubiaceae. Ce sont également des composés phénoliques
sans azote dans leur structure cyclique. Ce sont des composés de poids Réaction : solution de Mayer + solution d'extrait contenant un alcaloïde.
moléculaire plus élevé et sont principalement utilisés comme mécanismes de
défense des plantes contre les mammifères herbivores et les insectes. Ils sont Observation : Formation d'un précipité amorphe blanc ou jaune crème.
également utilisés comme astringents, contre la diarrhée, comme diurétiques,
contre les tumeurs duodénales, anti­inflammatoires, antiseptiques et hémostatiques.
Réaction de Wagner (iodure de potassium et d'iode)
Ils peuvent précipiter les métaux lourds et les alcaloïdes (à l'exception de la
morphine) et sont également utilisés dans les intoxications par ces substances. Ils Principe : Les alcaloïdes sont précipités par ce réactif pour donner une
sont essentiellement de deux types : les tannins hydrolysables et condensés. Ils couleur brun rougeâtre.
forment une solution colloïdale avec l'eau mais sont solubles dans les alcools, les
Préparation : 1,30 g d'iode et 2,0 g d'iodure de potassium sont dissous dans
alcalis dilués, etc. (Kokate et al., 2007). 100 ml d'eau distillée.
Tous ces métabolites secondaires importants sont présents dans les extraits bruts
Réaction : solution de Wagner + solution d'extrait contenant un alcaloïde.
qui sont séparés et identifiés par des réactions de couleur à l'aide de tests
chimiques. Les tests chimiques sont une procédure qualitative ou quantitative
utilisée pour identifier, quantifier ou caractériser un composé chimique ou un Observation : Formation de taches brunes ou brun rougeâtre

groupe chimique. En phytologie naturelle, les tests chimiques sont une identification précipitation.
qualitative où un groupe de produits chimiques ainsi que la séparation de
Réaction de Hager (solution saturée d'acide picrique)
phytoconstituants individuels sont effectués en vue d'un traitement ultérieur, c'est­
à­dire pour l'isolement des constituants de la plante. Dans cette section, certains Principe : Les alcaloïdes sont précipités par ce réactif pour donner une

tests chimiques généraux sont abordés pour faciliter l'identification des constituants. couleur jaune.

Préparation : 1,0 g d'acide picrique est dissous dans 100 ml d'eau.

3. Séparation et identification des métabolites secondaires Réaction : solution de Hager + solution d'extrait contenant des alcaloïdes.

3.1 Test chimique (Edeoga et al., 2005 ; Trease et Evans, 1989)

3.1.1 Test pour les alcaloïdes généraux Observation : Formation de précipitations jaunes.

[Link] Réactions de précipitation Réaction de Marme (iodure de cadmium et de potassium)

Réaction de Dragendorff, réaction de Mayer, réaction de Wagner, réaction de Principe : Les alcaloïdes sont précipités par ce réactif pour donner une
couleur blanche ou jaune qui se dissout ensuite par l'ajout d'acide dilué.
Hager, réaction de Marme, réaction de Kraut, réaction de Scheibler, réaction de
l'acide tannique, réaction du sel de Reineckate, réaction de Sonnenschein.
Préparation : 2,0 g d'iodure de cadmium sont mélangés à une solution
bouillante de 4,0 g d'iodure de potassium dans 12 ml d'eau, puis mélangés à
Réaction de Dragendorff (iodure de potassium + nitrate de bismuth)
12 ml de solution saturée d'iodure de potassium.
Principe : Le nitrate de bismuth réagit avec l'iodure de potassium dans une
Réaction : solution de Marme + solution d'extrait contenant des alcaloïdes +
solution acide et forme une solution d'iodure de potassium et de bismuth
H2 SO4 dilué .
(K[BiI4 ]) qui réagit avec les alcaloïdes et forme un précipité orange foncé.
Observation : Formation d'un précipité blanc ou jaune qui se dissout dans du
H2 SO4 dilué.
Préparation : 0,5 g de nitrate de bismuth sont versés dans un bécher et
Réaction de Kraut (réactif de Dragendorff modifié)
environ 10 ml d'eau distillée sont ajoutés. Le mélange doit ressembler à une
Principe : Les alcaloïdes sont précipités par ce réactif pour donner une
suspension. Ensuite, la solution est acidifiée en ajoutant 10 ml d'acide
couleur rouge orangé.
chlorhydrique concentré. La solution est agitée et mise de côté. Ensuite,
dans un autre bécher, 4 g d'iodure de potassium sont dissous dans une Préparation : 8,0 g de nitrate de bismuth sont dissous dans 20 ml d'acide

petite quantité d'eau. Ensuite, les deux solutions sont mélangées pour obtenir nitrique, puis 27,2 g d'iodure de potassium sont ajoutés à cette solution et
bien mélangés. Enfin, le volume est complété à 100 ml avec de l'eau distillée.
une solution orange foncé.

Réaction : solution de Dragendorff + solution d'extrait contenant un alcaloïde.

Réaction : solution de Kraut + solution d'extrait contenant un alcaloïde.

Observation : Formation d'un précipité amorphe de couleur rouge orangé.

Observation : Formation de précipitations rouge orangé.

Réaction de Scheibler (réactif acide phosphotungstique)

Réaction de Mayer (iodure de potassium mercurique)

Principe : La plupart des alcaloïdes sont précipités à partir d'une solution neutre Principe : Les alcaloïdes sont précipités par ce réactif ce qui s'observe par

ou légèrement acide par ce réactif pour donner une couleur crémeuse à l'apparition d'une couleur jaune jaunâtre ou jaune brunâtre.
l'exception des bases puriques, de l'éphédrine, de la colchicine, de la ricinine.
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Préparation : 20,0 g de tungstate de sodium et 70,0 g de phosphate disodique sont Test chimique pour les alcaloïdes d'ipéca
dissous dans 100 ml d'eau distillée contenant peu d'acide nitrique.
i. Solution d'alcaloïdes dans HCl dilué + hypochlorite de calcium Orange
couleur.
Réaction : Solution de Scheibler + Solution d'extrait contenant un alcaloïde.
ii. Solution alcaloïde + acide sulfurique + molybdate de sodium
Couleur vert vif (Présence d'Emétine) couleur vert pâle (Présence de
Observation : Formation de précipités jaunâtres ou jaune brunâtre.
Psychotrine).

Réaction de l'acide tannique iii. Solution alcaloïdique + acide sulfurique concentré + acide nitrique Couleur
rouge cerise (présence de psychotrine).
Principe : Une solution d'alcaloïde réagit avec une solution d'acide tannique à 5 % et
forme un précipité de couleur chamois. iv. Test Liebermann : Solution alcaloïde + Nitrite de potassium + Conc.

Procédure : 5,0 g d'acide tannique sont dissous dans 100 ml d'eau distillée Acide sulfurique Couleur noire (Emétine).
eau.
v. Solution d'échantillon d'alcaloïde + HCl dilué + chlorate de potassium
Réaction : solution d'acide tannique + solution d'extrait contenant un alcaloïde + NH3 Le jaune vire au rouge (Présence d'Emétine).

Test chimique pour les alcaloïdes de l'opium

Observation : Formation d'un précipité chamois soluble dans l'ammonium dilué
i. Solution de chlorure Tremper dans l'eau Filtrat + Ferrique
d'échantillon de graines de plantes Couleur pourpre rouge foncé (Présence de
Réaction du sel de Reineckate
Opium).
Principe : La solution d'alcaloïde réagit avec la solution de reineckate d'ammonium
et forme un précipité de couleur rouge. ii. Échantillon de semences + présence Couleur rouge orangé (Morphine
d’acide nitrique).
Procédure : 1,0 g de reineckate d'ammonium et 0,3 g de chlorhydrate d'hydroxylamine
mélangés dans 100 ml d'éthanol. iii. Solution d'échantillon + Ferricyanure de potassium + Chlorure ferrique Couleur vert
bleuté (morphine présente).
Réaction : solution de reineckate + solution d'extrait contenant des alcaloïdes Citron
iv. Solution d'échantillon + ferricyanure de potassium + HCl couleur
jaune (papavérine présente).
Observation : Formation d'un précipité de couleur rouge
Test chimique pour l'éphédrine
Réaction de Sonnenschein (Acide phosphomolybdique)
i. Solution d'échantillon + HCl dilué + hydroxyde de sodium + colorant violet de cuivre +
Principe : La solution d'alcaloïde réagit avec la solution de Sonnenschein et forme
couche de éther solvant organique
un précipité solide jaunâtre ou jaune brunâtre.
sulfate de couleur violette Couche aqueuse de couleur bleue.
Procédure : 1,0 g d’acide phosphomolybdique dans 100 ml d’éthanol.

Réaction : solution de Sonnenschein + solution d'extrait contenant des alcaloïdes Test chimique pour les alcaloïdes tropaniques

i. Test Vitali Morin : solution échantillon + acide nitrique fumant

Observation : Formation d'un précipité solide jaunâtre ou jaune brunâtre. Evaporer à sec + Hydroxyde de potassium méthanolique + Solution acétonique de
résidu nitré Forme violette.

[Link] Réactions colorées Test chimique pour la caféine

Ces réactions de coloration sont spécifiques à chaque alcaloïde végétal contenant des
i. Test Murexide : Échantillon + HCl concentré + Chlorate de potassium évaporé jusqu'à
métabolites secondaires. Certains phytoconstituants importants identifiés à l'aide de
siccité + Exposition à la vapeur d'ammoniac Forme de couleur rouge
réactions de coloration sont abordés dans cette section :
pourpre.

Test chimique pour la colchicine

Test chimique pour la quinine et la quinidine i. Test à la

thalléoquine : solution aqueuse d'alcaloïde + eau bromée + hydroxyde d'ammonium i. Échantillon + 70 % d'acide sulfurique Couleur jaune.

Couleur vert émeraude.

ii. Échantillon + solution alcoolique + chlorure ferrique Couleur rouge
ii. Test de Rosequin : solution aqueuse d'alcaloïde + HCl dilué + eau bromée + chloroforme formulaire.

+ ferrocyanure de potassium + hydroxyde d'ammonium La couche de chloroforme

devient rouge. Test chimique pour la strychnine et la brucine

i. Échantillon + acide sulfurique + colorant dichromate de potassium Violet

Test chimique pour les alcaloïdes de l'ergot i. (strychnine).

Test de Keller : solution aqueuse d'alcaloïde + acide acétique glacial + chlorure ferrique + ii. Tests microchimiques
acide sulfurique concentré ajouté lentement. Forme de couleur bleue dans la jonction.
(a) Coupe transversale de l'échantillon + acide sulfurique + endosperme d'ammonium
vanadate deviennent violets (présence de strychnine).
ii. Test de Van Urk : solution aqueuse d'alcaloïde + réactif de Van Urk (0,12 g de para­
diméthylaminobenzaldéhyde + 0,1 ml de chlorure ferrique + 15 % d'acide sulfurique
pour obtenir un volume de 100 ml) (b) TS de l'échantillon + Conc Acide nitrique L'endosperme devient
Couleur bleu profond. jaune (Brucine).
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20

Test chimique pour la fraction stéroïdienne 3.1.8 Test général pour les tanins

i. Réaction de Salkowski : Solution d’extrait + Chloroforme + conc. i. Extrait + eau chauffée au bain­marie, du chlorure ferrique a été filtré +

Acide sulfurique + bien agiter La couche de chloroforme présente une couleur rouge ajouté à la forme colorée du filtrat. Un vert foncé
et la couche acide est jaune verdâtre.

ii. Réaction de Libermann­Burchard : solution d'extrait + chloroforme ii. Test au bleu de Prusse modifié : solution d'extrait + potassium
Du rouge au bleu forme de couleur bleue.
+ conc. Acide sulfurique + Anhydride acétique finalement ferricyanure + chlorure ferrique + HCl
couleur verte.
3.1.9 Détection des diterpènes
iii. Réaction de Libermann : solution d'extraction + anhydride acétique + chauffage puis
i. Test à l'acétate de cuivre : solution d'extrait + quelques gouttes de cuivre
refroidissement + conc. acide sulfurique Forme de couleur bleue. acétate Forme de couleur vert émeraude.

Après ces tests chimiques, l'étape suivante est la séparation des phytoconstituants qui
Test chimique pour la réserpine
se fait généralement par méthode chromatographique notamment par chromatographie

i. Solution échantillon + Vanilline – Acide sulfurique Forme de Rouge violet sur couche mince.
couleur + conc. acide nitrique couleur rouge.
3.2 Chromatographie sur couche mince (CCM)
3.1.2 Test général pour l'anthraquinone
La chromatographie est la technique de séparation où deux ou plusieurs composés ou
i. Test de Borntrager : échantillon de poudre + benzène trempé pendant 10 ions sont répartis entre deux phases, l'une en mouvement et l'autre stationnaire. Ces
minutes puis filtré + solution d'ammoniaque à 10 % deux phases sont principalement solide­liquide, liquide­liquide ou gaz­liquide. Parmi
secouer vigoureusement la Forme de couleur rose, violette ou rouge celles­ci, la CCM est une technique de séparation chromatographique où la phase solide­
couche d'ammoniaque. liquide est utilisée. Dans cette méthode, les composants d'un mélange sont séparés à
l'aide d'une fine phase stationnaire supportée par un support inerte (absorbant polaire).
3.1.3 Test général pour les glycosides
Elle agit sur le principe d'adsorption où un composé a des affinités différentes pour les
i. Test de Keller­Kiliani : échantillon d'extrait aqueux + une solution d'acide acétique phases mobile et stationnaire, ce qui affecte la vitesse à laquelle il migre et se sépare

glacial + 2,0 % de FeCl3 + H2 SO4 concentré. Un anneau brun s'est formé entre finalement en différents points. Enfin, la distance parcourue par le point est déterminée
les couches (glycosides stéroïdiens cardiaques). par le facteur de rétention (Rf ) (Hassan et al., 2015). Cette méthode est efficace, simple,
fiable et reproductible (Moffat, 2001).
ii. Réaction de Kedde : échantillon d'extrait aqueux + chloroforme + 1 goutte d'alcool à
90 % et 2 gouttes d'acide 3, 5 dinitrobenzoïque à 2 % dans de l'alcool à 90 % + 20
% d'hydroxyde de sodium Forme de couleur violette.
3.2.1 Facteur de rétention

3.1.4 Tests généraux pour les flavonoïdes

Une fois la séparation terminée, les composés individuels apparaissent sous forme de
taches séparées verticalement et calculées en fonction de la distance migrée sur la
i. Test Shinoda : Extrait brut aqueux + Morceaux de magnésium
Forme de couleur rose. distance totale parcourue par le solvant. Elle est calculée comme suit :
ruban + HCl concentré

ii. Test du réactif alcalin : Extrait brut aqueux + 2,0 % de NaOH Une couleur jaune Distance parcourue par le spot
concentrée a été produite + Acide dilué incolore. Rf =
Distance parcourue par le solvant

iii. Test à l'acétate de plomb : Extraits + quelques gouttes de solution d'acétate de plomb Rf est une fraction et n'a donc pas d'unité. La valeur de Rf est toujours <1.
de couleur jaune.
3.2.2 Adsorbant utilisé en CCM
iv. Test H2 SO4 : Extraits + quelques gouttes de H2 SO4 Couleur orange
formulaire. Le gel de silice est l'adsorbant le plus important en CCM. Le gel de silice est disponible
en différentes qualités, parmi lesquelles le gel de silice G est un gel de silice de qualité
3.1.5 Test général pour les terpénoïdes
standard 60, où « G » désigne le gypse qui agit comme liant pour le gel de silice dans la
plaque. Le gel de silice N est également un gel de silice de qualité standard 60 mais sans
i. Test de Salkowski : Extrait échantillon + Chloroforme + conc. H2 SO4 Couleur brun
rougeâtre sur la face interne. liant, le gel de silice G­HR qui est un gel de silice de qualité haute pureté avec liant gypse,
le gel de silice N­HR qui est un gel de silice de qualité haute pureté sans liant, la silice P
3.1.6 Test général pour les phénols qui est un gel de silice de qualité préparative avec liant organique et le gel de silice PG
qui est un gel de silice de qualité préparative avec liant gypse. En dehors de cela, l'oxyde
i. Test au chlorure ferrique : extraire l'échantillon + quelques gouttes de solution de
chlorure ferrique Forme de couleur noir bleuté. d'aluminium (qualité G et N), la cellulose, le kieselguhr, etc., sont utilisés comme
adsorbants pour la CCM. Mais, en fonction des conditions, les adsorbants sont utilisés
ii. Test à l'acétate de plomb : Extraire l'échantillon + quelques gouttes d'acétate de plomb comme suit :
Couleur jaune sous forme ppt.
Pour les substances lipophiles : oxyde d'aluminium, silice acétylée
3.1.7 Test général pour les saponines cellulose, polyamide,

i. Test de mousse : Extrait de l'échantillon + Formation de secoué

Pour les substances hydrophiles : cellulose, échangeurs d'ions cellulosiques,
mousse. kieselguhr, polyamide et silice en phase inverse modifiée.
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21

3.2.3 Déterminer le système de solvants vi. Identification et séparation : Strychnine, Brucine, Émétine, Morphine,
Codéine, Aconit, Solanacées.
Il s'agit de l'un des paramètres les plus importants, basé sur cette séparation
claire des phytoconstituants. De plus, il est également utilisé pour la purification Réactif de pulvérisation : réactif de Dragendorff.
et l'isolement des composés et, en fonction des polarités des composés à isoler,
Système solvant : Chloroforme : Diéthylamine (90:10).
les systèmes de solvants sont sélectionnés. Dans les solvants non polaires
comme le pentane et l'hexane, la plupart des composés polaires ne se vii. Identification et séparation : Quinine.
déplaceront pas, mais les composés non polaires le feront et de la même
Réactif de pulvérisation : acide sulfurique à 10% suivi de réactif
manière, les solvants polaires déplaceront généralement les composés non
polaires vers le front du solvant et repousseront les composés polaires hors de la ligne de [Link].
Certains solvants standards et leur polarité sont répertoriés ci­dessous : Système solvant : Acétate d'éthyle : Méthanol : Eau (100:13,5:10).

Solvants très polaires : Méthanol > Éthanol > Isopropanol.

Solvants modérément polaires : Acétonitrile > Acétate d'éthyle > Chloroforme viii. Identification et séparation : Caféine.
> Dichlorométhane > Éther diéthylique > Toluène.
Réactif de pulvérisation : Réactif Iode­Iodure de Potassium­HCl.
Solvants non polaires : Cyclohexane > Éther de pétrole > Hexane
3. Séparation générale des glycosides
> Pentane.
Système solvant : Acétate d'éthyle : Méthanol : Eau (100 : 13,5 : 10) n­
Certains des systèmes de solvants importants pour la séparation des
propanol : Acétate d'éthyle : Eau : Acide acétique glacial (40 : 40 : 29 : 1)
phytoconstituants sont décrits ci­dessous (Wagner et Bladt, 2001) :

1. Séparation générale des alcaloïdes

i. Identification et séparation : Aloès, Cascara.
Système solvant : Toluène : Acétate d'éthyle : Diéthylamine ([Link])
Réactifs de pulvérisation : KOH éthanolique .

Système solvant : n­propanol : Acétate d'éthyle : Eau : Acide acétique

Réactifs de pulvérisation : i. Pulvériser avec une solution de formaldéhyde
glacial ([Link]).
à 37 % dans de l'acide sulfurique concentré (1:10), ii. Solution de
Dragendorff, iii. Pulvériser avec un mélange fraîchement préparé de 3 ml ii. Identification et séparation : Séné
d'hexachloroplatine et iv. d'une solution d'acide (10 %) dans 97 ml/min d'eau
et 100 ml de solution aqueuse d'iodure de potassium. Réactifs de pulvérisation : HNO3 ­ KOH

4. Meilleure séparation générale des glycosides

2. Séparations individuelles ou groupées d'alcaloïdes

Système de solvants : Acétate d'éthyle : Méthanol : Eau (100 : 13,5 : 10) Système solvant : Acétate d'éthyle : Méthanol : Eau ([Link]).

i. Identification et séparation : Dérivés de xanthine, Colchicum, Rauwolfia, i. Identification et séparation : Glycoside amer.
etc.
Réactifs de pulvérisation : Réactif Vanilline­H2 SO4 .
Système solvant : Toluène : Chloroforme : Éthanol (28,5 : 57 : 14,5).
5. Séparation générale des glycosides cardiaques

Système solvant : Acétate d'éthyle : Méthanol : Eau (100 : 13,5 : 10).

ii. Identification et séparation : Éphédrine, ergotamine.

Réactif de pulvérisation : Réactif Ninhydrine ou Van Urk.

i. Identification et séparation : Digitalis, Strophanthus.
Système solvant : n­butanol : Acide acétique glacial : Eau (40 : 40 : 10)
et Acétate d'éthyle : Méthanol (90 : 10). Réactifs de pulvérisation : Réactif de Kedde.

iii. Identification et séparation : alcaloïdes de la pervenche. 6. Séparation générale des flavonoïdes

Réactif de pulvérisation : solution de Dragendorff. Système solvant : Acétate d'éthyle : Acide formique : Acide acétique glacial :
Eau (100 : 11 : 11 : 26)
Système solvant : Butanol : acide acétique glacial : Eau (14 : 3 : 4) et
Acétate d'éthyle : Butanol : Acide formique : Eau (50 : 30 : 12 : 10). i. Identification et séparation : Rutine, Quercétrine.

Réactifs de pulvérisation : Polyéthylène glycol.

iv. Identification et séparation : Berbérine.
7. Séparation générale des terpénoïdes
Réactif de pulvérisation : solution de Dragendorff.
Système solvant : Toluène : Acétate d'éthyle (93:7).
Système solvant : n­butanol : Acide acétique glacial : Eau ([Link]).
i. Identification et séparation : Huiles essentielles, terpènes, coumarines.

v. Identification et séparation : Réserpine, papavérine.

Réactifs de pulvérisation : Réactif vanilline­acide sulfurique, certains
Réactif de pulvérisation : réactif de Dragendorff.
des réactifs de pulvérisation généraux couramment utilisés pour la
Système solvant : Toluène : Acétate d'éthyle : Diéthylamine ([Link]). détection des métabolites secondaires des plantes sont donnés dans le
tableau 1.
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22

Tableau 1 : Réactifs de pulvérisation courants pour la chromatographie en phase liquide (CCM)

Réactif de pulvérisation Composition Constituants détectés

Chlorure d'aluminium Solution éthanolique à 1 % de chlorure d'aluminium Flavonoïdes

Éthanolamine diphénylborate Solution à 1% de diphénylborate d'éthanolamine dans les flavonoïdes

méthanol

Trichlorure d'antimoine Solution àà 10

solution 10 %
% de
de trichlorure
trichlorure d'antimoine
d'antimoine dans
dans du
une Flavonoïdes, stéroïdes et terpènes
chloroforme terpènes

4­Aminoantipyrine/potassium
4­Aminoantipyrine/hexacyanferrate de ISolution
: 1 g d'aminoantipyrine
I : 1 g d'aminoantipyrine
(4­ aminophénazone)
(4­ Solution Phénols

hexacyanferrate
potassium (III) (III) dansml
100 100
d'éthanol
ml d'éthanol
à 80 %à 80
solution
% aminophénazone)
II : 4 g dans
solution II : 4 g d'hexacyanoferrate
d'hexacyanoferrate de potassium de potassium
(III) dans 20 ml d'eau, compléter à 100 ml avec
de l'éthanol.
éthanol.

p­Anisaldéhyde–acide sulfurique 0,5d'acide

ml ml de p­anisaldéhyde
acétique glacialfraîchement
et 1 ml d'acide
préparé
sulfurique
dans 50
à 97 Phénols, stéroïdes et terpènes
50 ml
%. 0,5d'acide
ml de p­anisaldéhyde
acétique glacialfraîchement
et 1 ml d'acide
préparé
sulfurique
dans
à 97 %.
acide.

Réactif chloranile 1%tétrachloro­p­benzoquinone

de de tétrachloro­p­benzoquinone
dansdans
le toluène
le toluène 1% Phénols

Réactif de Gibb Solution de 3% de 2,6­dibromo­N­chloro­p­ Phénols

benzoquinone imine dans le toluène ou le méthanol

Dichlorodicyanobenzoquinone 2% de 2,3­dichloro­5,6­dicyano­1,4­
2,3­dichloro­5,6­dicyano­1,4­ benzoquinone
2% de Phénols

réactif dans le toluènedans le toluène

benzoquinone

p­Diméthylaminobenzaldéhyde 1%p­diméthylaminobenzaldéhyde
de de p­diméthylaminobenzaldéhyde
en concentré
en concentré
acide
1% Amines, dérivés d'indole
/ réactif
acide chlorhydrique
acide chlorhydrique / réactif chlorhydrique/méthanol
acide chlorhydrique/méthanol
(2:2) (2:2)
(Réactif d'Ehrlich)

Diphénylamine 10 de
ml ml diphénylamine
de diphénylamine
à 10
à%10 dans
% dans
l'éthanol,
l'éthanol,
100100
ml ml 10 Glycoside
HCl et 80 ml d'acide acétique glacial

Réactif de Dragendorff Solution (1) 1,7 g de nitrate de bismuth basique et 20 alcaloïdes

g d'acide tartrique dans une solution aqueuse de 80 ml, (2) 16
iodure
g d'iodure
de potassium
de potassium
dans
dans
40 ml
40 d'eau
ml d'eau

Formaldéhyde / acide phosphorique 0,03 g de formaldéhyde

phosphorique à 85 % 0,03
dans
g de
100
formaldéhyde
ml d'acide dans 100 Alcaloïdes stéroïdes, sapogénines
stéroïdes
acide
ml phosphorique
d'acide phosphorique à 85 % sapogénines
stéroïdes

Réactif à l'iodoplatinate 3 mlsolution

de de solution
d'acide
d'acide
hexachloroplatinique
hexachloroplatinique
(IV) (10
(IV)%)
3 ml Alcaloïdes

dans 97 ml/min d'eau et 100 ml de solution aqueuse d'iodure

(10 %)
solution
de potassium
d'iodure de potassium

Tétraacétate de plomb / 2,7­ Solution I : 2 % (p/v) de tétraacétate de plomb dans Glycosides, Phénols
dichlorofluorescéine de l'acide
acide acétique
acétique
glacial
glacial
Solution
Solution
II : 1II%: 1(p/v)
% (p/v)
2,7­ de 2,7­
dichlorofluorescéine dans l'éthanol

Orcinol (réactif de Bials) 0,1de

ml g d'orcinol
chlorure dans
ferrique
40,7
(111)
ml de
à 1HCl
% et
concentré,
diluer à 10
ajouter
ml 1 Glycosides
1 % de chlorure ferrique (111) et diluer à 10 ml

Acide phosphorique­brome Solution de pulvérisation I : acide phosphorique aqueux à 10 % Digitalis

solution

SolutionSolution
saturée de pulvérisation
de pulvérisation
II : 2 ml de
II : solution
2 ml de solution
aqueuse
aqueusesaturée
solution saturéede
debromure
bromurede
depotassium,
potassium,22ml
mlde
de
solution
2 ml de bromate
aqueusede
saturée
potassium
de bromate
aqueuxde
à 25
potassium
% et 2 ml
et
d'acidechlorhydrique.
acide chlorhydrique à 25 %.
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23

4. Rôle des métabolites secondaires dans les maladies réduire l'inflammation. Les polyphénols agissent comme antioxydants, désactivant
les substances qui favorisent la croissance des tumeurs (Sharma et al., 2011).
Les plantes médicinales sont une ressource économique vitale de composés
naturellement actifs, largement utilisés depuis l'Antiquité dans le monde entier pour
de nombreuses maladies et depuis lors, les gens ont identifié et utilisé des Ces activités indiquent la nécessité des phytoconstituants et, par conséquent, les
composants positifs sûrs de la médecine traditionnelle dans leurs systèmes de santé constituants individuels des plantes doivent être séparés et isolés pour la découverte
(Shahriar et al., 2012). Les composants positifs sûrs ne sont autres que des de nouvelles molécules médicamenteuses. Cela est possible principalement grâce
métabolites secondaires qui ont retenu notre attention grâce à de vastes activités de à l'analyse des empreintes digitales chromatographiques où chaque composant
recherche scientifique. Les métabolites secondaires des plantes jouent un rôle vital individuel est identifié, séparé et isolé par une phase stationnaire et mobile. Cette
dans la société économique. Ils ont une large gamme de structures chimiques ainsi technique joue un rôle important dans le contrôle de la qualité des médicaments à
que d'activités thérapeutiques et biologiques. Ils sont dérivés par des voies de base de plantes (Gong et al., 2005) car le scénario actuel semble exiger des
biosynthèse uniques à partir de métabolites primaires et d'intermédiaires dans les médicaments à base de plantes uniquement en fonction de leur sécurité et de leur
corps végétaux. Ils sont produits dans le corps végétal en faibles quantités et ne efficacité (Ahmed et Rao, 2013). La CCM est l'étape préliminaire pour identifier les
sont pas non plus essentiels à la survie de la plante mais bénéfiques pour les constituants phytochimiques dans un échantillon. Elle présente certains avantages
humains. Par conséquent, il est nécessaire de disposer de méthodes de normalisation particuliers comme le fait que cette méthode est polyvalente, facile à réaliser, plus
appropriées pour établir des produits efficaces et sûrs. Dans cette section, un rapide, la sensibilité est bonne et n'importe quel nombre d'échantillons et de solvants
criblage préliminaire a été effectué au moyen de divers tests chimiques pour sont appliqués pour l'analyse. Par conséquent, c'est une méthode bien connue pour
l'identification du groupe de phytoconstituants, suivi d' une chromatographie en l'identification et la séparation préliminaires des phytoconstituants.
phase liquide (CCM) générale pour l'identification ainsi que la séparation des
constituants.
5. Conclusion
La détermination qualitative des métabolites secondaires des plantes par des tests
chimiques est une procédure bien connue et simple pour établir les connaissances Les plantes médicinales et aromatiques sont riches en métabolites secondaires et
primaires sur la présence de phytoconstituants importants. sont largement utilisées en phytothérapie pour combattre et guérir divers problèmes
Certains des métabolites secondaires importants sont identifiés comme étant des de santé. De nombreux constituants chimiques bioactifs, notamment les alcaloïdes,
alcaloïdes, des glycosides, des flavonoïdes, des stéroïdes, des terpénoïdes, des les glycosides, les stéroïdes, les terpénoïdes, les saponines, les tanins et les
saponines, des tanins et des phénols. Tous ces constituants ont leur propre efficacité polyphénols, sont d'importants métabolites secondaires végétaux qui présentent des
thérapeutique. Une étude de la littérature a révélé que les alcaloïdes ont des activités effets remarquables sur la santé, tels que des effets anti­inflammatoires,
antitumorales, antituberculeuses, antimicrobiennes, antidiarrhéiques et sont antispasmodiques, antianalgésiques, antioxydants, antimicrobiens, antituberculeux,
également utilisés pour traiter les crampes nocturnes des jambes causées par des anticancéreux et diurétiques. En outre, le criblage des phytoconstituants, la
spasmes vasculaires, des effets calmants sur les patients psychotiques ou chromatographie en phase liquide (CCM) et la chromatographie en phase liquide
hypertendus, et pour traiter les troubles psychiatriques et les palpitations (Onike, 2010). (CCM) HPTLC des constituants végétaux sont les principales étapes du
développement de nouveaux médicaments, de biomarqueurs et de leur commercialisation.
Les glycosides sont de petites molécules organiques utilisées pour supprimer et
apaiser les toux sèches irritantes. Ils sont des agents sédatifs et relaxants efficaces
Abréviations
sur le cœur et les muscles à faible dose. Ils agissent également comme agent laxatif,
purgatif et diurétique (Sharma et al., 2011). Les flavonoïdes sont un grand groupe CCM = Chromatographie sur couche mince ; HPCM = Chromatographie sur couche
de composés phénoliques naturels présents dans une large gamme d'espèces mince à haute performance ; HPLC = Chromatographie liquide à haute performance ;
végétales naturelles aux multiples propriétés thérapeutiques. Ils possèdent Rf = Facteur de rétention ; HCN = Acide cyanhydrique
principalement une activité antioxydante, anticancéreuse, réduisent le risque de
Conflit d'intérêt
maladies coronariennes et agissent comme phytoestrogènes (Samanta et al., 2011).
Les stéroïdes sont des composés organiques utilisés comme anti­stress, réduisent
Nous déclarons que nous n’avons aucun conflit d’intérêt.
le taux de cholestérol, activent le système immunitaire, améliorent la mémoire et
l'apprentissage et traitent les cellules tumorales (Panda et Kar, 1997). Français Les Références
terpénoïdes sont de petits produits moléculaires synthétisés par les plantes, qui
Ahmed, MF et Rao, AS (2013). Activités hépatoprotectrices comparatives de certaines plantes
présentent des activités pharmacologiques importantes, telles que des activités
médicinales indiennes. Global J. Med. Res., 13:15­21.
antivirales, antibactériennes, antipaludiques, anti­inflammatoires, d'inhibition de la
Alves, RRN et Rosa, IL (2005). Pourquoi étudier l'utilisation des produits animaux dans les
synthèse du cholestérol et anticancéreuses (Mahato et Sen, 1997). Les saponines
médecines traditionnelles ? J. Ethnobio. Ethnomed., 1:1­5.
sont un groupe hétérogène de produits naturels, présents dans de nombreux
Ambrogelly, A.; Palioura, S. et Soll, D. (2007). Expansion naturelle de la
aliments d'origine végétale et plantes médicinales. Il existe deux types de
code génétique. Nat. Chem. Bio., 3(1):29­35.
saponines : les triterpénoïdes et les saponines stéroïdiennes. Elles présentent des
Banea, MJP; Nahimana, G.; Mandombi, C.; Bradbury, JH; Denton, IC et Kuwa, N. (2012).
activités biologiques et pharmacologiques telles qu'anti­inflammatoire, anti­
Contrôle du Konzo en RDC par la méthode de mouillage sur la farine de manioc. Food
hépatotonique, cicatrisante, veinotonique, expectorante, spasmolytique, Chem Toxicol., 50:1517­1523.
hypoglycémique, antimicrobienne et antivirale (Onike, 2010). Les tanins sont des
Bannerman, PGC; Mirsky, R.; Jessen, KR; Timpl, R. et Duance, VC (1986).
membres de la famille chimique des polyphénols, ils sont produits pour des activités Immunolocalisation au microscope optique de la laminine, du collagène de type IV, du
analgésiques et anti­inflammatoires. En dehors de cela, les tanins favorisent la nidogène, du protéoglycane héparane sulfate et de la fibronectine dans le système
cicatrisation des plaies et des muqueuses enflammées grâce à la propriété nerveux entérique du rat et du cobaye. J. Neurocytol., 15:432­443.
d'astringence (Okwu et Josiah, 2006). Les composés phénoliques sont des
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