Nouvelles approches dans la valorisation de la plante Cistus monspeliensis, originaire du Maroc

EL YAZYD SOUMIA1, HAIDA SARA1, OUBIHI ASMAA2, KRIBII ABDERAHIM1

1Laboratoire des Matériaux avancés et génie des procédés, Département de Chimie, Faculté des Sciences, Université Ibn Tofail, Kenitra, Maroc.
2Laboratoire de Ressources Naturelles et Développement Durables, Département de biologie, Faculté des Sciences, Université Ibn Tofail, Kenitra, Maroc.

Introduction
La nécessité de trouver de nouveaux agents anti maladies plus efficaces et moins toxiques que les médicaments synthétiques rend l’étude des plantes un axe de recherche
très intéressant. Ce travail a pour but d’isoler des fractions de plantes actives à valeur ajoutée, capable de rivaliser les produits synthétiques dans le marché.

Matériels et Méthodes Résultats

Extraction des extraits EHX Fractions
F1 F2 F3 F4 FN FI FA FP
Résidu 13% obtenues
Les extraits EHX et EEA sont obtenus à partir de la plante Cistus RENDEMENT 60% Rendement
EEA 47 12 21 20 12 9 75 4
monspeliensis, respectivement par extraction au Soxhlet avec de (%)
27%
l’hexane, et par macération à froid du résidu dans un mélange
eau/acétone.
Séparation de l’extrait EEA ACTIVITÉ ANTIOXYDANTE
F1 Figure 1 : Droites représentant la variation du pourcentage d’inhibition (DPPH) et
Tableau 1 : Résultats du test DPPH et FRAP sur l’extrait EEA et les différentes
fractions obtenues, comparés à l’acide ascorbique (AA). de l’absorbance (FRAP) en fonction des concentrations de l’extrait
F2 EEA et de la fraction F4 en comparaison avec l’acide ascorbique (AA).
Chromatographie d’Exclusion Stérique DPPH FRAP
Extrait et ses fractions 80 F4 5
sur gel de Séphadex LH-20 F3 IC50 (mg/mL) IC0,5 (mg/mL)
EEA
4.5
70

Absorbance à 700 nm
Pourcentage d’inhibition
F4

du radical libre DPPH

4
AA 0,08 ± 0,018 0,093 ± 0,105 60
3.5
50 AA AA
3

FRAP
F4 EEA 0,0655 ± 0,0017 0,1090 ± 0,0069 40 2.5
F4 0,0346 ± 0,0065 0,0586 ± 0,0074 30 2
EEA
Test du pouvoir Antioxydant F3 0,1247 ± 0,0129 0,133 ± 0,0053
20 1.5
1
10
0.5
F2 0,2979 ± 0,0021 0,2488 ± 0,005 0
Test d’inhibition du radical libre DPPH et de réduction du fer 0 0.05 0.1 0.15
0
-0.5 0 0.2 0.4 0.6 0.8
F1 0,580 ± 0,044 0,3185 ± 0,0036 Concentration (mg/mL) Concentration (mg/mL)
ferrique FRAP de l’extrait EEA et ses fractions comparés à l’Acide
ascorbique (AA) pris comme référence. TESTS PHYTOCHIMIQUES
Tableau 2: Screening phytochimiques des métabolites secondaires dans les échantillons EEA , EHX, F4 et FA du Cistus monspeliansis.
Détermination de la concentration inhibitrice réduisant de 50 % le
Métabolites secondaires
Echantillons
radical DPPH (IC50) et de la concentration correspondante à une Polyphénols Flavonoïdes Tannins hydrolysables Tannins condensés Sucres réducteurs Terpènes Stéroïdes
EEA + + + + + - -
absorbance de 0,5 pour le test FRAP (IC0,5).
F4 + + + + + - -

Identification des molécules bioactives à l’aide: EHX - - - - - + +

FA - - - - - + +
 Tests phytochimiques
 Dosage des composés phénoliques DOSAGE DES COMPOSÉS PHÉNOLIQUES
Tableau 3: Teneurs en composés phénoliques et en sucres de l’extrait EEA et de la fraction F4 de la plante Cistus monspeliansis . Les résultats sont exprimés en
 Analyse par chromatographie liquide à haute performance (mg d’équivalent de standard par gramme de matière sèche).

couplée à la spectrométrie de masse avec ionisation par électrospray Teneur en tannins Teneur en sucres
Teneur en polyphénols Teneur en Flavonoïdes Teneur en tannins hydrolysables
condensés totaux
Echantillons
(HPLC-UV-ESI-MS), réalisée à l’aide de composés standards. (mg E AG/g MS) (mg E Q/g MS) (mg E AT/g MS)
(mg E C/g MS) (mg E G/g MS)
Analyse par chromatographie en phase gazeuse couplée à la EEA 140,40 ± 9,0905 383,893 ± 8,1242 140,063 ± 2,1584 46,207 ± 1,708 1829,107 ± 8,5730

spectrométrie de masse (GC-MS). F4 34,116 ± 0,722 121,414 ± 4,749 68,383 ± 3,797 5,604 ± 0,210 36,405 ± 0,855

Résultats de GC/MS ET d’HPLC-UV-MS-ESI

Séparation de l’extrait EHX
FN Fraction neutre Tableau 4: Résultats des composés flavonoïdes identifiés par HPLC-UV–ESI-MS dans l’extrait EEA et la fraction F4 de la plante Cistus monspeliensis, originaire
du Maroc.
Fraction
Méthode de McCarthy et Duthie FI intermédiaire Acide Quercetin-3,4- Apigenin Quercétine Isoquercétine Acide
Acide
Myricétine Rosmarinique diglucoside diglucoside Quinique
Fraction acide gallique
FA OH
OH
OH
HO
OH

OH

OH OH OH
O OH
OH O O
HO OH
O HO OH

FP Fraction polaire Composés HO O O

HO O
HO O OH HO O
identifiés HO

Test de l’activité Antibactérienne

O OH
OH O
O O O
HO OH O O HO O
O O HO OH
H
HO O
HO OH
OH
 Choix des souches bactériennes appartenant aux familles: Enterobacteriaceae,
OH H OH
HO OH
HO OH O
OH O O O OH O HO OH
HO
OH OH
Moraxellaeae et Micrococcaceae . HO
HO
HO OH
OH

OH OH

Détermination de la Zone d’Inhibition (ZI)

OH

Famille Acide
Flavonoïde Polyphénol Flavonoïde Flavonoïde Flavonoïde Flavonoïde Cyclitol
 Détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI) et bactéricide (CMB). chimique phénolique
a
Cyclitols (55 %):
La composition chimique de la fraction acide FA a été déterminée par: Glucides

 Tests phytochimiques (a) Ononitol et (b) Myo-inositol dérivés

Monosaccharides: 1, 2 et 3 acétylés
Figure 2: Résultats de l’analyse de l’extrait
 Chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (GC-
EEA (acétylé) par GC/MS. 2
1
MS).
3
Conclusion b
Polyols

L’extrait EEA a enregistré un effet antioxydant très important. Après

fractionnement de cet extrait, une nette amélioration de l’activité ACTIVITE ANTIBACTERIENNE
Tableau 5: Résultats de l’activité antibactérienne de l’extrait EHX et de la fraction acide FA obtenues selon la méthode de MacCharty et Duthie. (CMI et
antioxydante a été observée dans la fraction F4, attribuée à la CMB : représentent les concentrations minimales inhibitrice et bactéricide).
richesse en polyphénols, en particulier les flavonoïdes. Extraits et ZI (mm) CMI (v/v) CMB (v/v)
Fractions S.A S.E E.C Kleb Acineto Entero S.A S.E S.A S.E
L’analyse par HPLC-UV-ESI-MS et GC/MS a révélé que l’extrait EHX 17 12 - - - - 2 µL/mL 10 µL/mL >10 µL/mL >10µL/mL
FN - 07 - - - - - - - -
EEA et la fraction F4 sont très riches en flavonoïdes, tandis que la
FI 07 07 - - - - - - - -
fraction acide FA est formée de composés appartenant à la famille FA 12 10 - - - - 2 µL/mL 4 µL/mL >10 µL/mL >10 µL/mL
FP 08 - - - - - - - - -
des acides.
Résultats de GC/MS de la fraction FA
GC4 29/03/2024 [Link]
Les extraits de la plante Cistus monspeliensis, originaire du Maroc GC2 Figure 3: Résultats de l’analyse de la fraction29/03/2024
acide [Link]
(méhylée) de la plante Cistus monspeliensis par GC/MS.
RT: 7,10 - 46,56 RT: 6,56 - 82,95
NL: 80,40 NL:
présentent un potentiel pour remplacer les médicaments synthétiques 100
90
8,84
2,5-hexadione, 3,4- 1,3-Dioxolane, 4,5-
dimethyl-2-pentadecyl- N, N’- Diethyl-(2-13C)-
90
100
Benzyl alcohol Tributyl
2,44E8 acetylcitrate
TIC MS
5,59E8
TIC MS
9,22
dihydroxy-3,4-dimethyl malonic acid diamide GC4
80 GC2
80
Benzene, 1-bromo-2- 1-Hexacosanol
contre le cancer et les maladies cardiovasculaires. Ils peuvent
Relative Abundance
Relative Abundance

70 70
3-( 1-ethoxy-ethoxy)- methyl-
60 1,3-Dioxolane, 2-(2- 60
butan-1-ol Hexadecanoic acid,
50 adamantanyl)-2,4,5- 50
également constituer une source précieuse de composés bioactifs en 40 trimethyl-, trans 17,55 40
1,2,3-Propanetriol ethyl ester

30 30 12,74
23,02 31,30
15,46 27,60 28,77

tant qu’alternative pour traiter les infections causées par S.A et S.E. 20 10,57
20 19,97 32,79 76,21
18,28 26,98 29,07 36,25 40,68
20,22 39,17 33,11 41,27 43,54 44,25
10 7,73 10,64 13,32 14,19 18,80 29,84 10 7,61 13,26 36,54 23,22 43,16 47,36 47,79 58,22 68,20
11,33 15,86 20,42 22,37 23,37 25,38 31,57 33,67 34,83 8,96 14,11 17,52 19,83 23,70 29,24 30,36 35,40 36,77 38,80 43,22 44,15
39,76 44,5849,89 53,30
46,42
56,07 58,58 61,94 64,92 68,42 74,27 77,21
0 0
8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 10 36 15 20 38 25 30
40 35 42 40 45 44 50 55
46 60 65 70 75 80
Time (min) Time (min)

GC2 #791-12133 RT: 7,65-45,69 AV: 11343 NL: 6,65E5 GC4 #1-23213 RT: 5,61-82,84 AV: 23030 NL: 4,62E5