République Tunisienne Direction Générale des Etudes

 Technologiques
Ministère de l’Enseignement 
Supérieur de la Recherche Institut Supérieur des Etudes
Scientifique Technologiques de Gabés
Département
génie des procédées

STAGE DE FIN D'ETUDES

Présenté en vue de l’obtention de

LICENCE EN génie des procédées

chimiques
Sujet

Etude et optimisation de l’extraction des huil

Réalisé par : - Hadj Mabrouk Ranim.

 Romdhane Chaima.

Encadré par : JURY :

 Mme Nasfi Nadia (Présidente)
 Mme Nasfi Nadia.  Mme Ben Yahia Sonia (membre)
 M. Talmoudi Sami (membre)
Etude et optimisation de l’extraction des huiles essentielles de Laurus nobilis L. Romdhane.C/ Hadj Mabrouk.R

Soutenu le : 13/06/2024
 Dédicaces

Je dédie ce modeste travail à:

Mes chers parents Abdelmoumen et Ahlem pour leur amour, leurs sacrifices et leur
soutien tout au long de mes études.

Mes chers frères El Mabrouk et Nizar, ma sœur zina et son Mari Montassar qui
sont toujours à côté de moi dans les moments difficiles.

Toute ma famille et tous mes ami (e) s qui m’ont toujours encouragé.

Mon Cher oncle Hbib qui n’a pas pu voir mon travail.

Toi Raouf

A mon binôme Ranim et toute sa famille pour leur amour et patience.

A tous ceux que j'aime et qui m'aime et qui ont contribué à la réalisation de ce projet
que ce soit par leur soutien, leur expertise ou leur encouragement.

« A cœur vaillant rien d’impossible! »

Chaima
 Dédicaces
Je dédie ce projet :

A ma chère mère Nova et mon cher père Tarek, qui n’ont jamais cessé de formuler
des prières à mon égard, de me soutenir et de m’épauler pour que je puise atteindre mes
objectifs .

A mon frère Rachid et mes sœurs Zina ,Nour ,Zouhour et Samia ,pour leurs soutiens
moral et leurs conseils précieux tout au long de mes études .

A toute ma famille et mes proches qu’ils me donne de l’amour.

A Mortadha et mes intimes Ayat , Nada et Chayma pour qui m’ont toujours
encouragé , et à qui je souhaite plus de succès .

A mon binôme Chaima et toute sa famille pour leur amour et patience.

A tous ceux que j’aime.

Ranim
 Remerciements

Nous remercions au premier lieu Dieu Tout-Puissant de nous avoir donné

l'opportunité de terminer cet humble travail.

Nous adressons également nos sincères remerciements à notre chère encadrante

madame Nasfi Nadia maitre technologue à ISET Gabes, pour ses conseils, ses orientations et
ses grands efforts tout au long de la période d'accomplissement de ce projet.

Merci aux membres de jury qui ont bien voulu juger notre travail.

Nous ne pouvons pas non plus manquer de remercier nos enseignants et tous les
employés de l’Institut Supérieur des Etudes Technologiques De Gabes, en particulier
Mr Omar Sami, le technicien de laboratoire au Département de génie des procédés.

Nos sincères remerciements s’adressent à Madame Bouhali Batita Nahla la gérante

de BCM Lab.

Enfin, nous tenons à remercier tous ceux qui nous ont aidés de près ou de loin à faire
ce travail.
 Résumé

Les feuilles de laurier noble du deuxième lot ont montré des rendements d'extraction des HEs
supérieurs à celles du premier lot dans les mêmes conditions opératoires. Cela a orienté vers
l'optimisation du rendement pour le deuxième lot, appartenant à la famille de Goldstein.
Un plan d'expérience "Box-Behnken" à trois facteurs (temps d'extraction, niveau de chauffe et
rapport eau/matière végétale (L/V)) a été utilisé pour étudier le rendement d'extraction.
Les rendements expérimentaux les plus élevés (1,236 %) ont été obtenus avec un rapport L/V
de 10, un niveau de chauffe de 2, et un temps d'extraction de 180 minutes.
La modélisation quadratique, validée par l'ANOVA, a montré une forte corrélation entre les
résultats expérimentaux et théoriques (R² = 0,9820). Les termes A, B, C, AC, BC, A², et C²
étaient significatifs, tandis que AB et B² étaient négligeables.
Les conditions optimales pour un rendement maximal de 1,284 % sont un temps de 173 min,
un rapport L/V de 11,5, et un niveau de chauffe de 2. L'extraction dans ces conditions a donné
un rendement expérimental de 1,279 %.
Les valeurs de pH étaient conformes à la norme (5-6,8), avec 5,21 pour le premier lot et 5,30
pour le deuxième lot.
La densité et l'indice de réfraction des HEs étaient comparables aux valeurs trouvées dans la
littérature, indiquant une bonne qualité des huiles.
La composition par GC-MS indique que le premier lot contenait 22 composés majoritaires
dont l'eucalyptol (41,26 %), tandis que le deuxième lot contenait 18 composés majoritaires
avec une teneur en eucalyptol (23,92 %).
L'huile essentielle du deuxième lot a montré une efficacité antibactérienne contre
Staphylococcus aureus et E. coli, avec des zones d'inhibition significatives, surtout à une
concentration diluée (1/8).
Le shampooing préparé avait une odeur de laurier, une couleur blanc cassé, et une texture
homogène.
L’analyse Physico-chimique montrent que le pH du shampooing égal à 6,90 ,la densité du
shampooing égal à 0,91 et le pouvoir moussant du shampooing égal à 210 ml sont comparables
à celui du shampooing commercial
Abstract
 Liste des abréviations
AFNOR : Association Française de Normalisation

GC-MS : Chromatographie gazeuse assistée à la spectrométrie de masse

HE : Huiles Essentielles

L/V : Rapport eau /matière végétale

PE : Plan d’expérience

pH : Potentielle d’hydrogène

RSM : Méthode de surface de réponse

Y : Réponse du modèle
 Nomenclature
Désignations Significations Unités
A Facteur temps min
B Facteur rapport L/V g/gvext
C Facteur niveau de chauffe -
d Densité relative -
ms Masse végétale sèche g
mfr Masse végétale fraîche g
m HE Masse d’huile essentielle récupérée g
mv ext Masse de la matière végétale extraite g
m0 Masse de pycnomètre vide g
Masse de pycnomètre remplit d’eau
m1 g
distillée
Masse de pycnomètre remplit
m2 g
d’échantillon
nD Indice de réfraction -

R Rendement d’extraction g/gms (%)

T’ température au moment de la mesure. °C

V Volume de la mousse ml
 Liste des figures
Figure 1: Entrainement à la vapeur...........................................................................................5
Figure 2:Plan de Box-Behnken pour trois facteurs..................................................................13
Figure 3:Montage d’hydro-distillation par Clevenger.............................................................18
Figure 4:Micro- pycnomètre................................................................................................... 22
Figure 5:Représentation de rendement théorique en fonction de celui expérimental..............31
Figure 6:Variation du rendement d’extraction en fonction des interactions du modèle...........35
Figure 7: Sensibilité antibactérienne de la souche E.coli........................................................39
Figure 8:Test de stabilité rhéologique.....................................................................................41
Figure 9:Avant application de shampooing (avec huile).........................................................42
Figure 12:Après l'application..................................................................................................42
 Liste des tableaux
Tableau 1 : Classification botanique de Laurus nobilis L.......................................................................9
Tableau 2:Caractéristiques des differents feuilles de Laurier noble......................................................10
Tableau 3:Formule générale d’un shampooing liquide.........................................................................15
Tableau 4:Caractéristiques morphologiques des feuilles de Laurus nobilis L......................................17
Tableau 5:Domaines expérimentaux des facteurs étudiés.....................................................................20
Tableau 6: Matrice d’expérience..........................................................................................................21
Tableau 7:Produits utilisés pour la formulation du shampooing...........................................................25
Tableau 8 : Rendements expérimentaux en huile essentielle...............................................................29
Tableau 9:Analyse de variance (ANOVA) pour le modèle quadratique...............................................30
Tableau 10: Coefficients du polynome.................................................................................................32
Tableau 11: Comparaison entre le rendement théorique et expérimental.............................................33
Tableau 12:Caractéres organoleptiques................................................................................................37
Tableau 13:Caractérisation physico-chimique des HEs........................................................................37
Tableau 14:Compositions chimiques du 1er lot....................................................................................38
Tableau 15:Compositions chimiques du 2eme lot..................................................................................38
Tableau 16:Diamètres (mm) des zones d’inhibition du Laurus nobilis L.............................................39
Tableau 17:Caractéristique organoleptique du shampooing préparé....................................................40
Tableau 18:Tests de stabilité préliminaires...........................................................................................43
 Sommaire
Introduction générale.......................................................................................................1
Chapitre I : Etude bibliographique..............................................................................................2
I.1. Généralités sur les Huiles Essentielles.........................................................................3
I.1.1. Définition, localisation et utilisation............................................................................3
I.1.2. Méthodes d’extractions................................................................................................4
I.1.3. Propriétés des Huiles Essentielles................................................................................6
I.2. Généralités sur les lauriers...........................................................................................8
I.2.1. Présentation du Laurus nobilis L..................................................................................8
I.2.2. Les Huiles Essentielles du Laurier noble...................................................................10
I.3. Modélisation des plans d’expériences........................................................................12
I.3.1. Terminologie..............................................................................................................12
I.3.2. Plans de surfaces de réponse (RSM)..........................................................................13
I.4. Généralités sur les shampoings..................................................................................14
I.4.1. Différentes catégories de shampooing.......................................................................14
I.4.2. Composition d’un shampoing....................................................................................14
Chapitre II : Matériels et méthodes...........................................................................................16
II.1. Démarche suivie.........................................................................................................17
II.2. Matériel végétal..........................................................................................................17
II.3. Etude de l’extraction des huiles essentielles du Laurus nobilis L..............................18
II.3.1. Protocole expérimental...............................................................................................18
II.3.2. Détermination des rendements d’extraction en HEs..................................................19
II.4. Modélisation et optimisation......................................................................................19
II.4.1. Choix du plan et matrice d’expériences.....................................................................19
II.4.2. Modèle mathématique................................................................................................22
II.5. Caractérisation des Huiles Essentielles......................................................................22
II.5.1. Propriétés physico-chimique des huiles essentielles..................................................22
II.5.2. Détermination de la composition par GC-MS............................................................23
II.5.3. Activité antibactérienne..............................................................................................24
II.6. Formulation et préparation d’un shampoing..............................................................24
II.6.1. Formulation du shampooing.......................................................................................24
Etude et optimisation de l’extraction des huiles essentielles de Laurus nobilis L. Romdhane.C/ Hadj Mabrouk.R

II.6.2. Préparation du shampooing........................................................................................25

Chapitre III : Résultats et discussion........................................................................................27
III.1. Modélisation du rendement d’extraction...............................................................28
III.1.1. Effet de la morphologie sur le rendement d’extraction..........................................28
III.1.2. Rendement expérimentale......................................................................................28
III.1.3. Validation statistique du modèle............................................................................30
III.1.4. Modèle mathématique retenu.................................................................................32
III.1.5. Optimisation des paramètres..................................................................................33
III.1.6. Surface de réponse..................................................................................................33
III.2. Caractérisation des HEs..........................................................................................36
III.2.1. Caractères Organoleptiques...................................................................................36
III.2.2. Caractérisation physico-chimique..........................................................................37
III.2.3. Détermination de la composition par GC-MS........................................................38
III.2.4. Activité antibactérienne..........................................................................................39
III.3. Caractérisation du shampooing..............................................................................40
Conclusion et perspectives.............................................................................................44
Référence bibliographiques...........................................................................................47
Annexe...........................................................................................................................49
Etude et optimisation de l’extraction des huiles essentielles de Laurus nobilis L. Romdhane.C/ Hadj Mabrouk.R

Introduction générale
Le monde végétal, fournit à l'homme les éléments nécessaires à sa survie depuis l'Antiquité. Il
fournit de la nourriture, un abri et, surtout, des propriétés médicinales. L'homme a découvert
que certaines plantes, qui attiraient son attention par leur couleur, leur odeur ou leur forme,
avaient le pouvoir de soulager la douleur et même de guérir certaines maladies.
Ces dernières années, les plantes aromatiques ont suscité beaucoup d'intérêt. En effet, les
substances naturelles extraites de ces plantes ont permis des avancées significatives dans
diverses industries, notamment dans les domaines de la pharmacie, de la cosmétique et de la
parfumerie.
L'objectif de ce travail est d'étudier l’extraction et caractériser de l'huile essentielle de Laurus
nobilis L. Pour ce faire, une modélisation paramétrique est réalisée à l'aide de la méthode du
plan d'expérience, à fin d'optimiser les paramètres opérationnels du processus expérimental
d’extraction par hydro-distillation pour d'obtenir le rendement le plus élevé possible en huile
essentielle.
Après l’étude de l’opération d’extraction, nous somme proposés d’exploiter l’hydrolat et
l’huile essentielle de Laurus nobilis L. pour la formulation d’un shampoing liquide.
Ce travail est structuré comme suite :
Le premier chapitre est une synthèse bibliographique concernant les huiles essentielles et
leurs méthodes d’extraction, le Laurus nobilis L., et les techniques d’optimisations ainsi
généralités sur le shampooing.
Le deuxième chapitre est réservé à la présentation du matériel et méthodes utilisés au cours de
ce travail.
Le troisième chapitre présente les résultats obtenus ainsi que leur discussion.

Introduction générale
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Chapitre I : Etude bibliographique

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I.1. Généralités sur les Huiles Essentielles

I.1.1. Définition, localisation et utilisation
I.1.1.1. Définition
Les huiles essentielles ou HEs, sont des huiles volatiles. Ce sont des substances odorantes
huileuses, volatiles, peu solubles dans l’eau, plus ou moins solubles dans l’alcool et dans
l’éther, incolores ou jaunâtres et inflammables. Leur odeur est plus ou moins forte, piquante
ou désagréable1.

I.1.1.2. Localisation
Les huiles essentielles se trouvent principalement dans les plantes supérieures. Elles sont
produites dans le cytoplasme des cellules sécrétoires et s'accumulent généralement dans des
cellules glandulaires spécialisées. Elles sont ensuite stockées dans des cellules appelées
cellules à huile essentielle (Lauraceae), poils sécréteurs (Lamiaceae), poches sécrétrices
(Myrtacée) ou canaux sécréteurs (Astraceae). Elles peuvent être stockées dans différents
organes végétaux tels que les fleurs (bergamote, rose,...), les feuilles (laurier ,citronnelle,
eucalyptus,...), les racines (vétiver),les fruits (anis, anis étoilé,...), le bois (bois de rose,
santal,...), ou les graines (noix de muscade,...). Si tous les organes d'une même espèce peuvent
contenir de l'huile essentielle, la composition de l'huile peut varier en fonction de sa
localisation2.

I.1.1.3. Utilisation
L’huile essentielle peut être utilisée dans divers domaines. A savoir :

- Dans les produits cosmétiques : Les huiles essentielles sont largement utilisées en
parfumerie : En effet les parfums sont synthétisés à partir de matière première naturelle
d’origine animale ou végétale qui est généralement obtenue par enfleurage ,(produits
décoratifs : rouge à lèvre, fards ou produits de soins : crèmes, lotions, huiles de bain…), la
plupart des huiles essentielles doit être utilisée en mélange avec des huiles végétales dans
lesquelles elles se dispersent facilement.
- En agroalimentaire : Les huiles essentielles sont utilisées en tant qu’arôme naturel
dans les produits alimentaires, un produit alimentaire contient de nombreux composés
odorants que l’on peut percevoir soit par voie nasale directe, ce qui caractérise l’odeur, soit
par voie rétro nasale lorsque l’aliment est placé dans la bouche.
- En thérapie : Les huiles essentielles ont une activité très variée et ce n’est pas dans le
constituant principal seul que réside l’activité du produit, mais dans l’ensemble des

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composants, même les plus faibles proportions, et dans ce cas, les huiles essentielles sont
utilisés selon plusieurs modes soit en usage interne (par voie orale, ou par inhalation) soit en
usage externe (en pulvérisation, en massage, en bain, en masque ou en shampoing) 3.

I.1.2. Méthodes d’extractions

Le choix de la méthode d’extraction dépend essentiellement de la drogue végétale, de son
état et de ses caractéristiques. Ce choix conditionne un grand nombre de caractéristiques de
l’huile essentielle: sa viscosité, sa couleur, sa solubilité, sa volatilité mais aussi son
enrichissement ou son appauvrissement en certains constituants.
Il existe plusieurs modes d’extraction des huiles essentielles. Ces méthodes peuvent être dites
conventionnelles et non conventionnelles.

I.1.2.1. Méthodes conventionnelles

Parmi les méthodes conventionnelles les plus connues, on trouve :
a. Hydro-distillation type CLENVENGER :
Elle consiste à immerger la matière première dans un bain d’eau et l’ensemble est porté à
ébullition. Elle est généralement conduite à pression atmosphérique. La distillation peut
s’effectuer avec ou sans cohobage des eaux aromatiques obtenues lors de la décantation. Ce
procédé présente des inconvénients dus principalement à l’action de la vapeur d’eau ou de
l’eau à l’ébullition ; Certains organes végétaux, en particulier les fleurs, sont trop fragiles et
ne supportent pas les traitements par entraînement à la vapeur d’eau et par hydro-distillation
4.
b. Entrainement à la vapeur d’eau :
Dans ce système d’extraction, le matériel végétal est soumis à l’action d’un courant de vapeur
sans macération préalable. Les vapeurs saturées en composés volatils sont condensées puis
décantées dans l’essencier, avant d’être séparées en une phase aqueuse et une phase
organique. L’absence de contact direct entre l’eau et la matière végétale 4.

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Figure 1: Entrainement à la vapeur

c. Extraction par solvant sur appareillage Soxhlet.

Les solvants les plus utilisés à l’heure actuelle sont l’hexane, le cyclohexane, l’éthanol, moins
fréquemment le dichlorométhane et l’acétone. Le solvant choisi, en plus d’être autorisé, devra
posséder une certaine stabilité face à la chaleur, la lumière ou l’oxygène. Sa température
d’ébullition sera de préférence basse afin de faciliter son élimination, et il ne devra pas réagir
chimiquement avec l’extrait. L’extraction est réalisée avec un appareil de Soxhlet[4].
d. Hydro diffusion
L'hydro-diffusion consiste à libérer de la vapeur d'eau à travers le matériel végétal, du haut
vers le bas. Cela signifie que le flux de vapeur qui traverse la biomasse végétale est
descendant, contrairement aux techniques de distillation traditionnelles où le flux de vapeur
est ascendant. L'avantage de cette technique réside dans l'amélioration de la qualité et de la
quantité de l'huile récoltée, ainsi que dans le gain de temps et d'énergie5.
e. Enfleurage
C'est une technique qui extrait les parfums et les huiles des plantes. Les plantes les plus
fragiles peuvent être utilisées.
Selon les plantes choisies, l'huile ou la graisse avec laquelle les plantes sont mélangées peu
être chauffé. C’est cette huile ou cette graisse qui emprisonne le parfum des plantes [6].

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f. Extraction à froid
Cette technique est utilisée pour certains types de fruits ou de plantes, comme les agrumes
(oranges, citrons, mandarines...). Les huiles essentielles de ces fruits se trouvent dans les
petites glandes de leur peau (zestes). Ce procédé se fait sans chauffage : il s'agit de soumettre
le matériel végétal à une forte pression à l'aide d'une presse hydraulique7.

I.1.2.2. Méthodes non conventionnelles

Parmi les méthodes non conventionnelles on trouve :
a. Extraction assistée par micro-onde
La distillation assistée par micro-ondes présente l'avantage de réduire le temps de distillation
et d'augmenter le rendement. Malgré ses avantages, il n'y a pas eu de développement
industriel dans ce domaine. La distillation assistée par micro-ondes fait l'objet de recherches
approfondies en raison, des économies d'énergie et de temps qu'elle permet, de la réduction de
l'investissement initial et de la minimisation de la dégradation thermique et hydrolytique 4.
b. Extraction par fluide à l’état supercritique
Cette technique utilise des solvants dans un état intermédiaire entre le liquide et le gaz, avec
des propriétés différentes. Le CO2 est couramment utilisé en raison de sa disponibilité, de sa
faible toxicité et de sa facilité à être éliminé de l'extrait 4.
c. Extraction par ultrasons
L'extraction des huiles essentielles par ultrasons est une nouvelle technologie qui permet de
gagner du temps. Le principe de cette technique est le suivant : la matière première est
immergée dans l'eau ou dans un solvant, tout en étant soumise à l'action des ultrasons. Les
ondes ultrasoniques facilitent la diffusion de l'eau dans les tissus cellulaires de la matière
première 1.

I.1.3. Propriétés des Huiles Essentielles

Les huiles essentielles sont des mélanges complexes pouvant contenir plus de 300 composés
différents. Ces composés sont des molécules volatiles appartenant pour la grande majorité à la
famille des terpènes (mono et sesquiterpènes) 6.

I.1.3.1. Critères de qualité

La qualité d’huile correspond à :
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 L’espèce botanique : La certification botanique doit apparaître selon la nomenclature

internationale sous son nom latin précisant le genre, l’espèce et la sous-espèce.
 L’organe producteur : Selon la partie de la plante (feuilles, fleurs…) distillée (ou
expressée pour les zestes des agrumes), il peut exister plusieurs huiles essentielles
pour la même plante avec des compositions chimiques et des activités différentes
 L’origine géographique : Cela permet de connaître l’environnement dans lequel
grandit la plante et de caractériser ainsi l’huile essentielle obtenue. Il y a des
différences de composition chimique selon le pays d’origine.
 Le mode de culture : Il définit si la plante est cultivée ou sauvage.
 Le chémotype : Il définit la molécule aromatique révélatrice des principales propriétés
thérapeutiques de l’huile essentielle8.

I.1.3.2. Propriétés physico-chimique

Les propriétés physicochimiques des huiles essentielles sont déterminées selon les normes
de l’Association Française de Normalisation (AFNOR) et l’Organisation Internationale de
Standarisation (ISO) [9].

Ces propriétés sont :

 Densité relative à 20°C.

 Indice de réfraction 20°C.
 Potentiel d’hydrogène pH.

I.1.3.3. Activité antibactérienne

L’activité antibactérienne d’une huile essentielle est à mettre en relation avec sa composition
chimique, les groupes fonctionnels des composés majoritaires (alcools, phénols, composés
terpéniques et cétoniques) ou ceux susceptible d’être actif. Mais il est probable que cette
activité dépend aussi de composés minoritaires qui agissent d’une manière synergique 9.
Cette activité peut être déterminée par :
- Méthode de diffusion des disques.
- Méthode de diffusion sur gélose (méthode de puits).

I.1.3.4. Caractéristiques organoleptiques

Chaque huile est caractérisée par ses propriétés organoleptiques telles que l’odeur, l’aspect et
la couleur.

Etude bibliographique Page 7

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Odeur : L’odorat est un sens chimique très sensible et l’habilité des parfumeurs à classer et
caractériser des substances chimiques parviennent à doser les produits naturels.
Couleur : La coloration d’une HE dépend des produits qui la constituent. Certains solvants
ont le pouvoir d’extraire beaucoup de pigments, ce qui intensifie la couleur d’une huile
donnée.
Aspect : A température ambiante, les HE sont liquides et ils sont volatiles. La volatilité étant
liée à la composition chimique [9].

I.2. Généralités sur les lauriers

I.2.1. Présentation du Laurus nobilis L.
Le Laurier noble est l’une des espèces végétales médicinales et aromatiques, qui connait
actuellement un regain d’intérêt pour son utilisation dans la médecine traditionnelle, les
industries pharmaceutiques, agroalimentaires et cosmétiques. La valorisation de cette plante
s’est portée essentiellement sur l’étude des huiles essentielles qui sont des métabolites
secondaires synthétisés au niveau des feuilles [10].
Le laurier est depuis longtemps un symbole de gloire et de succès, souvent utilisé pour créer
des couronnes pour les généraux et les athlètes victorieux dans la Rome antique .Aujourd'hui,
il est principalement connu pour ses feuilles aromatiques utilisées en cuisine11.

I.2.1.1. Famille des lauracées et classification botanique

Le Laurier (Laurus nobilis L.) fait partie de la famille botanique des Lauracées, qui est une
famille importante connue pour ses plantes souvent aromatiques. Les espèces de cette famille
se distinguent généralement par leur odeur aromatique. Il existe environ 32 genres et entre
2000 et 2500 espèces différentes de Lauracées 12.

La classification de laurier noble est donnée dans le tableau (1) [13]

Tableau 1 : Classification botanique de Laurus nobilis L.

Règne Plante

Etude bibliographique Page 8

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Sous règne Vasculaire

Embranchement Spermaphytes.

Sous Embranchement Angiospermes.

Classe Dicotylédones.

Sous Classe Dialypétales.

Ordre Laurales.

Famille Lauracées.

Genre Laurus.

Espèce Laurus nobilis L.

I.2.1.2. Distribution géographique de laurier

Le laurier sauce (Laurus nobilis L., Lauracées) est largement cultivée en Europe, en Asie, en
Afrique du Nord et aux États-Unis en tant que plante. Dans plusieurs pays tels que la Turquie,
l'Algérie, le Maroc, le Portugal, l'Espagne, l'Italie, la France et le Mexique, la plante est
cultivée à des fins commerciales en raison de ses feuilles aromatiques. En Algérie, elle est
également cultivée. Les principaux producteurs mondiaux de cette plante sont la Turquie, qui
représente les deux tiers du commerce mondial, ainsi que l'Albanie, le Maroc, la Grèce et
l'Italie 14.

En Tunisie, il se trouve en abondance dans les régions du Nord Ouest: Aïn Drahem, Tabarka,
Kef Madi..

I.2.1.3. Description Morphologique

Le laurier est un arbuste ou un petit arbre (2 à 20 m) avec des rameaux minces et glabres et
des feuilles étroitement oblongues-lancéolées et coriaces. C'est une plante dioïque, avec des
fleurs mâles et femelles sur des plantes séparées. Chaque fleur est jaune-vert pâle, mesure
environ 1 cm de diamètre et est portée par paires à côté d'une feuille.

Les fruits des spécimens femelles mûrissent à l'automne sous forme de drupes ovoïdes
(10-15 mm) brillantes ressemblant à une mûre avec une seule graine. Le sexe du laurier se
distingue facilement au printemps par la morphologie de la fleur. La floraison commence en
mois d’avril et les fruits deviennent mûrs en septembre 15.

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On trouve des différentes morphologies de Laurus nobilis L. comme indiqué dans le

tableau (2) [16] :

Tableau 2:Caractéristiques des differents feuilles de Laurier noble

Brilliant
Nom de cultivar Sunspot Moonspot Chichester Hex brilliant Goldstein
times
Les
La feuille de
feuilles Feuilles Le
Feuilles laurier
Caractéristique sont de Feuilles irrégulièremen feuillage
marbrées classique est
s des feuilles petits elliptique t tordues et très est d'un
légèrement
fruits asymétriques jaune vif.
ondulée.
sphériques

I.2.2. Les Huiles Essentielles du Laurier noble

I.2.2.1. Composition chimique

Pour être de qualité pharmaceutique et utilisée en aromathérapie, l'huile essentielle de Laurier

noble doit contenir les composés suivants : 1,8-cinéole, α-pinène, β-pinène, sabinène, β-
élémène, β-caryophyllène, α-humulène, linalol, α-terpinéol, terpinène-1-ol-4, acétate de
terpényle, eugénol, méthyleugénol, costunolide et artémorine [17].

I.2.2.2. Domaines d’utilisation

La plante connue sous le nom de Laurus nobilis L. revêt une grande importance pour
l'industrie. Elle est couramment utilisée dans les secteurs alimentaires, de la médecine
traditionnelle et cosmétique.

a. Alimentaire
Les feuilles de laurier sont couramment employées pour parfumer divers plats,
particulièrement dans les cuisines de la Méditerranée. En outre, elles sont distillées pour en
extraire une huile essentielle qui est fréquemment utilisée dans l'industrie alimentaire,
notamment pour relever la saveur de la viande, des soupes et du poisson [18.

b. Médicine
Les feuilles et les fruits de Laurus nobilis L. sont utilisés en médecine traditionnelle depuis
l'antiquité contre rhumatismes, toux, maladies cardiaques, infections virales, diarrhées, etc, et
comme stimulant général de la sécrétion gastrique, carminatif, diaphorétique et
antiseptique15.

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c. Cosmétique
Comme il s’agit d’un antibactérien et d’un antiseptique puissant, l’huile essentielle de laurier
noble bio peut aussi être utilisée en cosmétique pour purifier la peau, aider à réguler la
production de sébum et prévenir l’apparition des imperfections. Pour lutter contre les boutons
d’acné ou les points noirs, on la conseille diluée dans une huile végétale, avant d’appliquer sur
les zones concernées. Elle peut aussi s’incorporer comme actif dans les recettes de soins
cosmétiques maison comme les masques ou les gommages visage, en association avec
d’autres ingrédients naturels aux propriétés complémentaires ou similaires19.

I.2.2.3. Bienfaits d’huile essentielle et de l’hydrolat de Laurier

L’huile essentielle de laurier noble aide à :
- Prévenir les signes de vieillissement cutané
Si l’huile essentielle de laurier noble sera une alliée intéressante pour prendre soin des peaux
mixtes à grasses, elle sera aussi recommandée pour les peaux matures. Elle contient en effet
une large proportion d’antioxydants, qui aident à limiter la formation des radicaux
libres responsables du vieillissement cutané et des signes de l’âge. En tant qu’actif
cosmétique, elle aide donc à maintenir la souplesse et l’élasticité de la peau pour une
diminution des rides tout en apportant de l’éclat grâce à ses vertus tonifiantes 19.

- Eliminer les pellicules et à assainir le cuir chevelu

L’huile essentielle de laurier sera aussi recommandée en soin capillaire, sous forme de bain
d’huile ou ajoutée dans les shampoings ou masques maison. En effet, elle aide à tonifier la
fibre capillaire, à stimuler la pousse des cheveux et à prévenir le
ur chute. Grâce à son action antifongique, elle contribue aussi à éliminer naturellement les
pellicules 20.
Les bienfaits de l'hydrolat de laurier :
Sont dus à ses propriétés équilibrantes et astringentes :
- Il est particulièrement utile pour les peaux grasses et mixtes, car il permet de lutter
contre l'acné et d'éliminer les impuretés.
- Il peut également être utilisé de manière préventive pour resserrer les pores.
Même si vous avez un autre type de peau, mais des pores dilatés, l'hydrolat de laurier peut
être utilisé. Il procure une sensation de fraîcheur et peut aider à nettoyer les peaux grasses. Il
peut également être utilisé pour tonifier les peaux matures 20.
Il peut même avoir des effets intéressants sur la chevelure, utilisé en lotion de rinçage 20 :
- Il rend les cheveux plus forts et brillants ;

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- Son côté astringent débarrasse le cuir chevelu des pellicules ;

- Il calme les démangeaisons ;
- Il accélère la pousse.

I.3. Modélisation des plans d’expériences

La méthode de plan d’expérience PE permet d'améliorer la qualité des produits et des
processus tout en réduisant le temps de développement [21].

I.3.1. Terminologie
La mesure d'intérêt, généralement désignée par Y, est connue sous le nom de réponse. Les
variables qui peuvent affecter la réponse sont appelées facteurs. Par conséquent, nous
discutons des facteurs qui influencent une réponse. Les termes facteur et réponse sont
largement utilisés dans le domaine de la conception expérimentale [21].

I.3.1.1. Facteur
Les variables que nous voulons étudier sont appelées facteurs, qui sont censés affecter le
système. Ils peuvent être quantitatifs ou qualitatifs, continus ou discrets, contrôlables ou
incontrôlables. En général, nous considérons les facteurs caractérisés par une seule variable
qualitative ou quantitative naturelle que nous contrôlons. Un facteur varie habituellement
entre deux limites : la limite inférieure et la limite supérieure. En langage plan, on dit que le
facteur varie entre le niveau bas (limite inférieure, souvent notée -1) et le niveau haut (limite
supérieure, souvent notée +1) [21].

I.3.1.2. Réponse
Une réponse expérimentale est une manifestation mesurable que l’on observe lorsque l’on fait
varier les paramètres étudiés durant l’expérience. Le choix de la réponse ne relève pas de la
théorie des plans d’expériences. Ce n’est qu’après une analyse minutieuse des phénomènes,
objectifs et des contraintes de l’étude que l’on peut définir la ou les bonnes réponses [21].

I.3.2. Plans de surfaces de réponse (RSM)

Les plans de surface de réponse, ou plans de second degré est une méthode d’optimisation
qui a pour principal but l’évaluation des relations pouvant exister entre les différentes
réponses, ainsi que les facteurs appelés (A, B, C … etc).
Elle est couramment utilisée pour les plans expérimentaux et pour l'amélioration des
processus longs et pertinents.

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Il existe de nombreux types de plans expérimentaux, tels que le plan composite centré et Box
Behnken [22].

I.3.2.1. Plans composites centrés

Un plan composite est constitué de trois parties :
- Un plan factoriel dont les facteurs prennent deux niveaux.
- Au moins un point expérimental situé au centre du domaine d’étude.
- Des points axiaux, ces points expérimentaux sont situés sur les axes de chacun des facteurs.

I.3.2.2.Plans de Box-Behnken
Les points expérimentaux du plan Box-Behnken sont représentés au milieu des arêtes de
chacun des côtés d’un cube.
Comme les plans de Box-Behnken comportent moins de points, leur coût est moindre que
celui des plans composites centrés pour le même nombre de facteurs. C’est un plan qui peut
comporter jusqu’à douze essais, auxquels on peut ajouter des points au centre.
Le plan Box-Behnken à trois facteurs nécessite seulement 6 points factoriels et 6 points axiaux
plus la réplique au point central. Ils nécessitent 3 niveaux pour chacun ces facteurs : −1, 0 et
+1.

Figure 2:Plan de Box-Behnken pour trois facteurs

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I.4. Généralités sur les shampoings

Le shampooing est un produit de soins capillaire destiné à éliminer les huiles, la saleté, les
particules de peau, les pellicules, les polluants environnementaux et autres contaminants qui
se rassemblent progressivement dans les cheveux. De manière traditionnelle, cette catégorie
de produits se présente sous forme liquide, gel, crème ou poudre, fabriquée à partir d'agents
de surface. Ils possèdent des propriétés détergentes, mouillantes, émulsionnantes et
moussantes qui garantissent un nettoyage impeccable des cheveux, leur apportant douceur,
souplesse, brillance et facilité à coiffer [23].

I.4.1. Différentes catégories de shampooing

Les shampooings peuvent se présenter sous forme de liquide transparent ou opaque, crème
liquide, gel, mousse ou poudre (shampooings secs). Nous distinguons ici les principales
catégories de shampooings en fonction des objectifs visés [24].
- Shampooings spécifiques à l’état du cuir chevelu
 Shampooings pour cheveux secs.
 Shampooings pour cheveux gras.
 Shampooings antipelliculaires.
 Shampooings et lotions anti-chutes.
 Shampooings secs.
- Shampooings traitants spécifiques
Ce sont des shampooings qui renferment des actifs permettant de corriger un état anormal du
cheveu ou du cuir chevelu (exemple : pellicules, sébum, chute de cheveux mais aussi les
cheveux très secs ou anémiés.). Leur formulation est très élaborée et exige une subtile
modulation entre l’action détergente et l’action de soin.

I.4.2. Composition d’un shampoing

En général, les shampoings sont un mélange complexe de bases lavantES, d'additifs
cosmétiques, et éventuellement d'actifs spécifiques (comme les antipelliculaires et les
activateurs) [24].

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Tableau 3:Formule générale d’un shampooing liquide

Composition Rôle Pourcentage

- Mouillage : Augmente
l'interface liquide/solide.
-Moussage : La formation
Les agents lavant : tensioactifs TA d'une mousse stable. 15 à 25 %
-Emulsifiant : Stabilise la
formation d'émulsions.
-Nettoyant : Enlève la saleté.
Augmentent la viscosité et
Les agents de viscosité ou
évitent que le shampoing ne 2à5%
épaississants
devienne trop fluide.
Donnent aux cheveux douceur
Les agents conditionneurs et brillance réduit l'électricité
statique et facilite le démêlage
Stabilisation donnent une consistance
1à4%
de la mousse mousseuse
Contribuent à la stabilité du
Les
produit en se liant à des ions 0,5 à 2 %
séquestrants
métalliques
Permettent de dissoudre les
Les additifs
Solubilisant huiles parfumées, les essences -
divers
ou les conservateurs
Régulateur
Régulation de pH Quantité suffisante
de pH
Conservateu Prévenir la contamination
0,1 à 0,5 %
r bactérienne et microbienne
Parfums Odeur du shampoing Quantité suffisante
Colorants Coloration du shampoing Quantité suffisante

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Chapitre II : Matériels et méthodes

Matériels
Matériels etet méthodes
méthodes Page 16
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II.1. Démarche suivie

Pour mener à bien ce travail, nous avons suivi la démarche suivante :

- Etude de l’effet de la morphologie sur le rendement d’extraction.

- Optimisation de l’opération d’extraction par hydrodistillation.
- Caractérisation des huiles extraites.
- Valorisation de l’HE et l’hydrolat de laurier dans la formulation du shampooing
liquide.
- Caractérisation du shampooing préparé.

II.2. Matériel végétal

Notre étude à été réalisée sur deux lots de feuilles de Laurus nobilis L. que nous avons récolté
de jardins domestiques à la région de Chenini en février 2024.
Selon la classification morphologique donnée dans le premier chapitre, le premier lot (1 er lot)
appartient à la famille Chichester alors que le deuxième lot (2 eme) appartient à la famille
Goldstein. Le tableau 4 donne les caractéristiques morphologiques des feuilles de Laurier qui
ont fait l’objet de notre étude.
Tableau 4:Caractéristiques morphologiques des feuilles de Laurus nobilis L.

Nom du
Chichester Goldstein
cultivar

Longue : de 8 à 11 cm Longue : de 8 à 9 cm
Caractéristique Large : de 2 à 3 cm Large : de 4 à 5 cm
s

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II.3. Etude de l’extraction des huiles essentielles du

Laurus nobilis L.
II.3.1. Protocole expérimental
Les feuilles fraiches du Laurier noble sont nettoyées de la poussière et séchées à l’air libre et
à l’ombre. Elles sont ensuite coupées en petites morceaux de diamètre moyen de 11 à 13 mm
puis conservées au frais dans des boites hermétiques.
Pour extraire l’huile essentielle des feuilles de Laurier noble, on a opté pour l’hydro
distillation à l’aide d’un appareil du type Clevenger (figure 3).

Figure 3:Montage d’hydro-distillation par Clevenger

Dans un ballon de 1000 ml à fond rond, on introduit 500ml d’eau distillée avec une quantité
des feuilles de Laurier noble séchées et découpées en petits morceaux.
Le ballon est chauffé à l'aide d'un chauffe-ballon, ce qui permet de libérer les molécules
volatiles des cellules végétales. Ces molécules sont entraînées par la vapeur d'eau vers un
réfrigérant, où elles se condensent en gouttelettes d’huile essentielle et puis sont récupérées
dans un tube qui sert de réservoir de récupération de l'huile.

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L’HE se sépare de l’hydrolat par une simple différence de densité.

On récupère l’huile essentielle de laurier noble dans des flacons en verre ambrés
hermétiquement fermés pour éviter la perte des molécules volatiles ainsi que les actions
d’oxydation. On utilise le sulfate de sodium anhydre (Na 2SO4) pour éliminer les traces
d’eau restant dans l’huile obtenue.
L’Huile Essentielle extraite est conservée au réfrigérateur à 4˚C [25].

II.3.2. Détermination des rendements d’extraction en

HEs
Le rendement en huile essentielle (R) est défini comme étant le rapport entre la masse de
l’huile extraite et la masse sèche de la matière végétale 9.
Il est exprimé en pourcentage et est calculé par l’équation (1).

m HE
R= ×100 (1)
mvs
Avec :
R: Rendement d’extraction d’huile essentielle % ;
m HE: Masse d’huile essentielle récupérée en g.
mvs : Masse sèche de la matière végétale en g.
La masse sèche de la matière végétale est calculée selon l’équation (2).

ms × mvext
mvs = (2)
mfr

Avec :
mfr : Masse végétale fraîche(g).
mvext : Masse de la matière végétale extraite(g).

ms Masse végétale sèche(g).

La détermination de ms se fait par le séchage à l’étuve (de la marque MOD.2100) à 105°C

pendant 24h et après refroidissement dans un dessiccateur.

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II.4. Modélisation et optimisation

II.4.1. Choix du plan et matrice d’expériences
Nous avons choisi de travailler avec le plan de Box-Behnken à trois facteurs. Pour choisir les
facteurs et leurs niveaux nous avons effectué une recherche bibliographique suivie des essais
préliminaires à l’échelle de laboratoire .

Les trois facteurs retenus sont :

- Le temps d’extraction (min).

- Le rapport eau / matière végétale (L/V) (g/gvext ) .
- Le niveau de chauffe.

Le tableau (5) regroupe les niveaux bas et haut pour chaque facteur.

Tableau 5:Domaines expérimentaux des facteurs étudiés

Facteurs Unités Niveau -1 Niveau 0 Niveau +1

Niveau de
- 2 2,5 3
chauffe
Temps Min 60 120 180
Rapport L/V g/gvext 8 10 12

La modélisation a été effectuée en utilisant le logiciel Design Expert 13.

Le tableau (6) donne la matrice d’expérience qui correspond au plan de Box-Benhken à trois
facteurs et à trois niveaux en considérant les quatre points centraux.
Ceci donne un total de 16 essais.

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Variables réelles Variables codées

B:
B : Rapport C : Niveau C : Niveau
N°essai A : Temps A : Temps Rapport
L/V de chauffe de chauffe
L/V

1 120 10 3 +1 0 +1

2 60 8 2,5 0 -1 +1

3 60 12 2,5 0 -1 -1

4 120 12 2 -1 0 -1

5 120 12 3 +1 0 -1

6 180 8 3 +1 +1 0

7 120 10 2,5 0 0 0

8 120 10 2,5 0 0 0

9 180 10 2,5 0 +1 -1

10 180 8 2 -1 +1 0

11 60 10 2 -1 -1 0

12 180 10 2,5 0 +1 +1

13 60 12 3 +1 -1 0

14 120 10 2,5 0 0 0

15 120 8 2 -1 0 +1

16 120 10 2,5 0 0 0
Tableau 6: Matrice d’expérience

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II.4.2. Modèle mathématique

L’expression du modèle mathématique correspondant au plan de Box-Behnken est un
polynôme de degré 2, tel que l'équation (3)
2 2 2 2 2 2
Y = β A A + β B B + β C C + β AB AB+ β AC AC + β BC BC + β A A + β B B+ βC C+ β0 (3)
Avec :
Y : Rendement d’extraction (réponse).
β 0 : Constante de modèle.
β A, β B et β C: Coefficients des termes linéaires.
2 2 2
β A, β B et β C : Coefficients des termes quadratiques.
β AB, β AC et β BC : Coefficients des termes d'interaction.

II.5. Caractérisation des Huiles Essentielles

II.5.1. Propriétés physico-chimique des huiles essentielles

II.5.1.1. Densité relative
On pèse à l’aide d’un pycnomètre, des volumes égaux d’HE et d’eau distillée.
On pèse successivement le flacon vide, puis le flacon remplie d’eau distillée. Après essuyage,
on remplit avec l’HE et on note leur poids exacts.

Figure 4:Micro- pycnomètre

La densité de l’huile essentielle est calculée par la formule (4) [9] :

m2−m0
d= (4)
m1−m0

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Avec :
m0: Masse de pycnomètre vide (g)
m1: Masse de pycnomètre remplit d’eau distillée (g)
m2: Masse de pycnomètre remplit d’HE (g)

II.5.1.2. Indice de réfraction 20°C

A l’aide d’un refractomètre, on mesure l’indice de réfraction de l’HE à une température de T’
(indiquée par le thermomètre intégré de l’appareil). Pour cela, on place une goutte d’HE sur
le prisme du refractomètre, puis on effectue le réglage à l’aide de la micro visse et on lit la
valeur [26].

L’indice de réfraction à 20°C de l’huile essentielle est donné par l’équation (5):

[ n D ] °=n d T ' +0,00045 ( T ' −T ) (5)

Avec :
'
n d T : Indice de réfraction mesuré.
T : température de référence (20°C).
T’ : température au moment de la mesure.
II.5.1.3.Détermination de pH
Cette mesure a été effectuée à l’aide d’un pH-métre.

II.5.2. Détermination de la composition par GC-MS

L'analyse GC-MS des huiles essentielles obtenues a été réalisée à l'aide du chromatographe en
phase gazeuse HP 6890 au centre de biotechnologie de Sfax. Le GC était équipé d'une
colonne capillaire HP-5MS (film de 30 m × 0,25 mm). De l'hélium a été utilisé comme gaz
porteur à un débit constant de 1 ml/min. La température du four GC a été programmée comme
suit : température initiale de 45 °C pendant 3 min, puis chauffée jusqu'à 250 °C à 5 °C.min -1 et
maintenue pendant 6 min.

Les températures de l'injecteur et du détecteur (ligne de transfert et source d'ionisation) ont été
fixées à 230 °C. 1 μL d’huile essentielle diluée (5 fois, n-hexane) a été injecté avec un rapport
de division de 1:50. La spectrométrie de masse a été exécutée en mode d'ionisation
électronique (EI) à 70 eV lorsque des ions de m/z compris entre 50 et 550 ont été balayés

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II.5.3. Activité antibactérienne

L’activité antibactérienne a été déterminée par la méthode de diffusion sur gélose selon le
protocole suivant :

 Des boites de pétri contenant du milieu Mueller Hinton agar sont ensemencées
aseptiquement par une suspension qui provient d’une culture jeune de bactéries par
écouvillonnage.
 Après le séchage des boites, la gélose est perforée avec une pipette pasteur par des
puits de 6 mm de diamètres.
 Les cavités ainsi formées sont remplies de l’échantillon pur ou dissous dans le DMSO
(diméthylsulfoxyde).
 Les boites sont mises à incubées dans une étuve à 37°C pendant 24 h.
 Observez les résultats et mesurez les zones d’inhibitions.
L’action inhibitrice se manifeste par la formation d’une auréole autour des puits. La lecture
des résultats s’effectue par mesure des diamètres des zones d’inhibitions.
Le résultat peut être symbolisé par des signes d’après la sensibilité des souches vis-à-vis
d’huile essentielle [27] :
Non sensible (-) ou résistante : diamètre < 8mm.
Sensible (+): diamètre entre 9 à 14mm.
Très sensible (++): diamètre compris entre 15 à 19 mm.
Extrêmement sensible (+++): diamètre >20mm.

II.6. Formulation et préparation d’un shampoing

II.6.1. Formulation du shampooing
Pour bénéficier des bienfaits de l’hydrolat et de l’huile de Laurus nobilis L. on s’est proposé
de formuler un shampooing naturel (sans sulfate et sans parabène). Ce shampooing
permettra de purifier le cuir chevelu, d’éliminer les huiles et de combattre la prolifération des
bactéries.

Les produits utilisés dans la formule du shampooing que nous avons préparé sont donnés
dans le tableau (7):

Matériels et méthodes Page 24

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Tableau 7:Produits utilisés pour la formulation du shampooing

Matière première Rôle

L’hydrolat de Effet antiseptique et antipelliculaire

Laurier
Phase aqueuse

L’hydrolat de Effet lissant

géranium
Gomme xanthane Gélifiant

Lauroyl Sarcosinate Agent moussant

Viscosant
Coco Betaine
Agent nettoyant

acni bio Conservateur

HE de Laurus nobilis Actif

L’extrait huileux de Laurier Actif

II.6.2. Préparation du shampooing

Avant de commencer, désinfecter tous les matériels avec de l'alcool pour assurer une
préparation hygiénique. Dans un bécher, on mélange les constituants de la phase aqueuse, on
ajoute ensuite le gomme xanthane puis on fait une agitation parfaite jusqu’à
l’homogénéisation. Par la suite on ajoute successivement le coco bétaine et le lauroyl
sarcosinate en agitation doucement pour éviter la formation de la mousse au cours de la
fabrication du shampooing, le sarcosinate. On ajoute par la suite les actifs (HEs et le macérât
de Laurus nobilis L.) et finalement on ajoute le conservateur.

II.6.2.1. Caractéristiques organoleptiques

Chaque shampooing est caractérisé par ses propriétés organoleptiques telles que l’odeur,
l’aspect et la couleur [28].

Matériels et méthodes Page 25

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II.6.2.2. Analyse physicochimique

a. Potentiel d’hydrogène
Une solution de shampooing à 10% v/v a été préparée dans de l'eau distillée et le pH de la
solution a été mesuré à l'aide d'un pH-mètre calibré [28]..
b. Densité à 25°C
Le pycnomètre, soigneusement nettoyé et rincé, est séché sous un courant d’air sec. Après
l’avoir pesé, il est ensuite rempli avec de l’eau distillée, le pycnomètre est mis dans un bac de
température 25 °C, on laisse pendant 30 minutes, puis repesé avec son contenu. La même
opération est répétée avec l’échantillon dont on veut déterminer la densité [28].
La densité relative est calculée par l’équation (4).
c. Pouvoir moussant
Pour déterminer le pouvoir moussant. 50 ml de la solution de shampooing à 1% ont été placés
dans une éprouvette graduée de 250 ml, l’éprouvette a été couvert avec un bouchon et agité
pendant 1 min. Le volume total de la mousse contenue après 10 minutes d'agitation a été
enregistré [29].
d. Stabilité rhéologique
Afin de tester la stabilité rhéologique du shampooing on place un échantillon dans une
centrifugeuse pendant 15 min 2fois à 3000tr/min [29].
e. Capacité de nettoyage
La propriété nettoyante du shampooing préparé a été évaluée par l'application de ce
shampooing sur des cheveux qui n'ont pas été lavés pendant sept jours.
La performance du shampooing a été évaluée en fonction de sa capacité à éliminer la saleté
huileuse du cuir chevelu.

f. Test d'irritation cutanée

Le shampooing préparé a été appliqué sur la peau pendant 5 minutes pour tester l'irritation
ou l'inflammation de la peau [29].

g. Tests de stabilité préliminaires

La stabilité thermique du shampooing a été étudiée en les plaçant dans des tubes de verre à
45°C, ainsi que dans un réfrigérateur à 4°C, et en les comparants au shampooing conservé à
température ambiante (25°C). Les caractéristiques organoleptiques, l’homogénéité et le pH
ont été évalués avant et après les tests de stabilité préliminaires qui durent 24h [29].

Matériels et méthodes Page 26

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Chapitre III : Résultats et discussion

Résultats et discussion Page 27

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III.1. Modélisation du rendement d’extraction

III.1.1. Effet de la morphologie sur le rendement d’extraction
Afin d’étudier l’effet de la morphologie des feuilles de laurier noble sur le rendement
d’extraction des HEs, on a déterminé ces rendements dans plusieurs conditions
expérimentales pour les deux lots .On remarque que les feuilles de deuxième donne des
rendement d’extraction supérieurs à ceux données par les feuilles du 1 er lot en considérant les
même conditions opératoires.

Ceci nous a guidé vers l’étude de l’optimisation du rendement d’extraction des HEs des
feuilles de Laurus Nobilis appartient à la famille de Goldstein (2eme lot).

III.1.2. Rendement expérimentale

Les valeurs expérimentales trouvées pour les rendements d’extraction en appliquant la matrice
d’expérience correspondant à l’application de la méthode des surfaces de réponse, notamment
l’utilisation du plan d'expérience "Box-Behnken" à trois facteurs (temps d'extraction, niveau
de chauffe et rapport eau/matière végétale (L/V) sont rassemblées dans le tableau (8) :

Résultats et discussion Page 28

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Tableau 8 : Rendements expérimentaux en huile essentielle

Exp Rand A : Temps (min) B : Rapport L/V (g/gmv) C : Niveau de chauffe R(%)
15 1 120 10 2,5 1,153
7 2 60 10 3 1,133
16 3 120 10 2,5 1,1538
5 4 60 10 2 1,071
13 5 120 10 2,5 1,131
1 6 60 8 2,5 1,12
9 7 120 8 2 0,988
8 8 180 10 3 1,03
11 9 120 8 3 1,153
3 10 60 12 2,5 1,187
2 11 180 8 2,5 1,17
14 12 120 10 2,5 1,1534
12 13 120 12 3 0,989
6 14 180 10 2 1,236
10 15 120 12 2 1,211
4 16 180 12 2,5 1,199

Les résultats expérimentaux montrent que le rendement le plus élevé (1,236 %) a été obtenu
pour :
 Un rapport de 10.
 Un niveau de chauffe 2.
 Un temps d’extraction de 180 min.
On remarque que lorsqu’on fixe le niveau de chauffe à 2,5 et le temps d’extraction à 60 min
et on varie le rapport de 8 à12, on obtient respectivement une valeur de rendement 1,12 % et
1,187 % donc le rapport L/V n’a pas d’effet important sur le rendement.
.De la même façon on fixe le rapport à 10 et le niveau de chauffe à 2 et on varie le temps de
60 min à180 min, le rendement en huile essentielle augmente de 1,071 % à 1,236%. Donc le
temps d’extraction influe positivement sur le rendement d’extraction.

Résultats et discussion Page 29

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En changeant le niveau de chauffe de 2 à 3 et en fixant les autres paramètres (rapport 10,

temps d’extraction 180 min) on remarque que e rendement en huile essentielle diminue de
1,236 % à 1,03%donc le niveau de chauffe influe négativement sur le rendement d’extraction.

III.1.3. Validation statistique du modèle

L’analyse de la variance (ANOVA) est un outil statistique très utilisé aussi bien en validation
et comparaison de modèle qu’en analyse de données. Cette méthode utilise des mesures de
variance afin de juger la significativité des facteurs et du modèle. L’intérêt de cette analyse est
de pouvoir tester l’influence des facteurs sur les variations d’une réponse donnée. Les
résultats de l’analyse sont donnés dans le tableau (9) :

Tableau 9:Analyse de variance (ANOVA) pour le modèle quadratique

Sommes des Carrées F-

Source df p-value
carrées moyen value
Modèle 0,0817 9 0,0091 36,47 0,0001 Significatif
A-temps 0,0019 1 0,0019 7,72 0,0321
B-Rapport L/V 0,0030 1 0,0030 12,06 0,0133
C-Niveau de 0,0051 1 0,0051 20,28 0,0041
chauffe
AB 0,0004 1 0,0004 1,45 0,2739
AC 0,0180 1 0,0180 72,12 0,0001
BC 0,0374 1 0,0374 150,38 <
0.0001
A² 0,0029 1 0,0029 11,47 0,0147
B² 0,0001 1 0,0001 0,4904 0,5100
C² 0,0130 1 0,0130 52,24 0,0004
Résidus 0,0015 6 0,0002
Défaut 0,0011 3 0,0004 2,97 0,1978 Non
d’ajustement significatif
Erreur pure 0,0004 3 0,0001
Total 0,0832 15
R2 0,9820

CV 1,40

p-value<0,05

Le tableau(10) montre que le modèle quadratique a une valeur de F-value de 36,47 et un p-

value de 0,0001 ce qui indique que le modèle est statiquement significative (p-value<0,05).

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Le défaut d’ajustement présente une valeur de p-value de 0,1978 qui est supérieure à 0,05 ce
qui montre que le modèle n’est pas significativement différent des données expérimentaux
[30].
La valeur R2 indique la proportion de la variabilité des données expliquée par l'analyse
ANOVA et est d'autant plus grande que les valeurs sont élevées (0 ≤ R2 ≤ 1) [30].
Dans cette étude on a obtenu une valeur R 2 de 0,9820, indiquant que 98,20 % des variables
peuvent être expliquées par le modèle quadratique, et affirmant ainsi que les données sont
représentées de manière satisfaisante par le modèle.
Un coefficient de variation (CV) de 1,75 % qui est inférieur à 10% témoigne d'une grande
précision entre les résultats expérimentaux et les prédictions.
Selon l'analyse de la variance, il est également constaté que les termes du modèle A, B, C,
AC, BC, A², C² sont des termes significatifs (p-value sous 0,05). Cependant, les autres termes
sont statistiquement négligeables : AB et B2.
La figure (5) présente la courbe représentant les valeurs des rendements prévus en fonction
des rendements expérimentaux. Le
graphe montre que le nuage des
points est proche de la droite
d'équation (y = x), ce qui suggère
que le modèle possède une qualité
descriptive satisfaisante.
Rendement théorique
(%)

Rendement expérimental (%)

Résultats et discussion Page 31

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Figure 5:Représentation de rendement théorique en fonction de celui

expérimental

III.1.4. Modèle mathématique retenu

La modélisation donne une formule polynomiale qui permet de prédire la réponse.
Le modèle mathématique du rendement est donné par l’équation suivante :
2 2 2
Y =0,0267 A −0,0055 B −0,0570 C −0,0095 AB−0,0670 AC−0,0968 BC + 0,0155 A +0,0194 B−0,0251C +
Le tableau (10) regroupe les coefficients du modèle

Tableau 10: Coefficients du polynome

Coefficient ß0 ßA ßB ßC ßAB ßAC ßBC ßA2 ßB2 ßC2

Valeur 1,15 0,0155 0,0194 -0,0251 -0,0095 -0,0670 -0,0968 0,0267 -0,0055 -0,0570

Le modèle mathématique retenu :

2 2
Y =0,0267 A −0,0570 C −0,067 AC−0,0968 BC + 0,0155 A +0,0194 B−0,0251C +1 ,1 5
Les termes A, B, A2 influent positivement sur le rendement par contre C, AC, BC 2, C2 influent
négativement sur le rendement d’extraction.
Le tableau(11) résume les résultats de la comparaison entre les rendements obtenus
expérimentalement et ceux calculés par le logiciel.
La différence peut être évaluée en utilisant la valeur de l'erreur calculée pour chaque
expérience.

Résultats et discussion Page 32

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Tableau 11: Comparaison entre le rendement théorique et expérimental

Rand Les valeurs expérimentales(%) Les valeurs théoriques(%) Erreur(%)

1 1,15 1,15 0,0052

2 1,13 1,14 -0,0109

3 1,15 1,15 0,0060

4 1,07 1,06 0,0109

5 1,13 1,15 -0,0168

6 1,12 1,12 -0,0046

7 0,9880 0,9942 -0,0062

8 1,03 1,04 -0,0109

9 1,15 1,14 0,0155

10 1,19 1,18 0,0046

11 1,17 1,17 -0,0046

12 1,15 1,15 0,0056

13 0,9890 0,9827 0,0063

14 1,24 1,23 0,0109

15 1,21 1,23 -0,0155

16 1,20 1,19 0,0046

III.1.5. Optimisation des paramètres

Le but de cette étude est d'optimiser les paramètres opératoires qui influencent le processus
d'extraction du Laurus nobilis L par l'hydro-distillation Clevenger. Lors de l'exécution du

Résultats et discussion Page 33

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plan d'expérience concernant cette plante, un rendement maximal a été enregistré

expérimentalement à 1,236%.Le rendement énoncé par la littérature pour Laurus nobilis L
varie de 0,95 à 1,7% 11 [32].

L'objectif sera donc de trouver les paramètres opératoires optimaux qui permettent d'atteindre
un rendement optimal. En d'autres termes, notre objectif est de trouver les conditions
opératoires optimales qui conduisent à la valeur maximale accessible .

III.1.6. Surface de réponse

On peut représenter graphiquement l'impact des paramètres étudiés sur le rendement
d'extraction en représentant les surfaces de réponse dans un espace à trois dimensions (3D).
Ces surfaces offrent l'opportunité de représenter la fluctuation du rendement d'extraction en
fonction de deux paramètres tout en maintenant le troisième paramètre constant. La nature de
la courbure des surfaces de réponse permet d'observer l'impact des interactions mutuelles des
paramètres sur le rendement d'extraction. Par conséquent, dans notre étude, trois facteurs et
trois niveaux permettent de définir trois zones de réponse.

Résultats et discussion Page 34

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D’après la figure 6, on constate que :

-
P
o u
r

Figure 6:Variation du rendement d’extraction en fonction des interactions du modèle

l’interaction A et B quelque soit la variation du rapport et du temps, le rendement n’admet
pas un effet important.
- Pour l’interaction A et C l’augmentation du temps et la diminution du niveau
ont un effet positif sur le rendement.

Résultats et discussion Page 35

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- Pour l’interaction B et C on remarque que l'augmentation du rapport et la

diminution de niveau de chauffe ont un effet positif sur le rendement.
Enfin, après avoir analysé toutes les surfaces, il est observé que la combinaison des conditions
suivantes permet d'obtenir la meilleure valeur du rendement trouvées par le logiciel Design
Expert est 1,284% :
 Temps : 173 min.
 Rapport : 11,5.
 Niveau de chauffe : 2.

Donc, en utilisant les surfaces de réponse, nous avons pu obtenir une grande quantité
d'informations sur l'impact des paramètres opératoires sans pour autant effectuer de
nombreuses expériences. De plus, nous avons constaté une très bonne concordance entre les
résultats expérimentaux et ceux obtenus par le plan d'expérience.
Dans le but de valider expérimentalement l’optimisation de l’opération d’extraction des HEs
du Laurus Nobilis par hydro-distillation, nous avons effectué l’extraction dans les conditions
optimales données par l’ANOVA. Le rendement expérimental trouvé est 1,279%.

III.2. Caractérisation des HEs

Cette étude a été réalisée par les HEs extraites des deux lots.

III.2.1. Caractères Organoleptiques

Les caractères organoleptiques des HEs sont rapportés dans le tableau (12).

Tableau 12:Caractéres organoleptiques

Caractères HE de 1er lot HE de 2eme lot

Résultats et discussion Page 36

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Odeur Aromatique épicée Légèrement épicée

Couleur Jaune clair Jaune clair

Peu limpide mobile

Aspect limpide mobile

III.2.2. Caractérisation physico-chimique

Le tableau (13) regroupe les grandeurs physico-chimiques mesurées des HEs.

Tableau 13:Caractérisation physico-chimique des HEs

1er lot 2eme lot

pH 5,21 5,30
D 0,9 0,9033

[ nD] ° 1,479 1,4717

D’après le tableau 13, on remarque que :

- Les valeurs de pH des HE de Laurus nobilis L. se trouvent dans l’intervalle 5-6,8 [2].
Les valeurs obtenue est conforme à ces exigences semblables au [31] (5,65).
- L'évaluation de la qualité de l’HE dépend de manière significative de la densité, les
résultats montrent que la valeur de ce paramètre est conforme à la norme AFNOR
(2000) et qui est inférieure à « 1 », donc l’HE n’est pas soluble dans l’eau, les valeurs
obtenues de la densité des H.E sont comparables à celles trouvées par TAARABT et
al (0,9043) [32].

Résultats et discussion Page 37

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- La pureté des HEs est déterminée par leur indice de réfraction. Une forte teneur en
Monoterpènes donnera un indice élevé. Le faible indice de réfraction de l'HE ce qui
pourrait favoriser son utilisation dans les produits cosmétiques. Les indices de
réfraction des HEs trouvés sont bien comparable avec ceux trouvées dans la littérature
[31].

III.2.3. Détermination de la composition par GC-MS

L’analyse de la composition par GC-MS a montré la présence de 22 composés pour les HEs
du 1er lot ( Annexe Figure A1 et Tableau A1) et de 18 composées pour celles du 2 eme lot
( Annexe Figure A2 et Tableau A2) Řebíčková et al [33] ont trouvés une composition de
45,36% en 1,8 cinéole et Pirasb et al [34] ont trouvés une composition 30,1 % en ce même
composé.

Les composés majoritaires présents dans les HEs selon l’analyse par GC-MS sont donnés
dans les tableaux (14) et (15) respectivement pour le 1er et le 2eme lot.

Tableau 14:Compositions chimiques du 1er lot

Composé Pourcentage(%)
Eucalyptol 41,26
Linalol L 9,38
-terpinenyl 16,52
Benzene, 1,2-dimethoxy-4-(2-propyl) 12,73

Tableau 15:Compositions chimiques du 2eme lot

Composé Pourcentage(%)
Eucalyptol 23.92
Linalol L 22,76
-terpinenyl acetate 11,11
Benzene, dimethoxy4-- (2-(1-
25,2
propeny)

III.2.4. Activité antibactérienne

La méthode de diffusion sur gélose nous a permis de mettre en évidence le pouvoir
antibactérien d’huile essentielle du Laurus nobilis L. du 2 eme lot vis-à-vis de deux souches
bactériennes de gram positif et négatif.

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Pour chaque bactérie, nous avons testés la résistance l’huile pure et de l’huile diluée au
DMSO à la concentration 1/8.
Nous avons observe que les différentes souches bactériennes étudiées réagissent différemment
à l’huile essentielle testée. Les résultats sont regroupés dans le tableau (16).
A titre illustratif, la figure (7) montre les résultats du test de l’activité antibactérienne de
l’huile essentielle par la souche E.coli.

Figure 7: Sensibilité antibactérienne de la souche E.coli

Tableau 16:Diamètres (mm) des zones d’inhibition du Laurus nobilis L

Diamètres de la zone d’inhibition Diamètres de la zone d’inhibition et

Les souches
et Sensibilité : huile pure Sensibilité : dilution1/8
testées

D (mm) S D (mm) S
Staph.aureus 15 ++ 40 +++
E.Coli 30 +++ 32 +++
(+) sensible, (-) résistant

Après mesure des diamètres des différentes souches vis-à-vis de l’huile testée, nous
constatons que l’efficacité de cette huile diffère d’une bactérie à une autre.
Selon Belgin et al [35] la sensibilité de l’E.coli à l’huile essentielle de Laurus Nobilis est due
en grande partie à la présence du 1,8cinéole.

III.3. Caractérisation du shampooing

III.3.1. Propriétés organoleptique

Résultats et discussion Page 39

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Nous avons déterminées les propriétés organoleptiques du shampooing préparé en utilisant

l’odorat, l’aspect et la couleur
Ses propriétés sont ressemblée dans le tableau (17).
Tableau 17:Caractéristique organoleptique du shampooing préparé

Propriétés organoleptique

Odeur : Odeur de laurier

Aspect : Homogène

Couleur : Blanc cassé

III.3.2. Analyse physicochimique

Nous avons effectué l’analyse physicochimique du shampooing préparé et celle d’un
shampooing sans sulfate sans parabène qui se trouve sur le marché que nous avons pris
comme shampooing de référence.
III.3.2.1. Mesure du pH
Cette valeur du pH du shampooing élaboré est de 6,90 ce qui se situe dans la plage de pH
idéale pour un shampooing qui est comprise entre 5 et 7,8, proche de pH de la peau [36].
III.3.2.2. Mesure de la densité à 25°C
La densité du shampooing est égale à 0,91. Cette valeur est proche de celle du shampooing
commercialisée qui est égal à 0,86.

III.3.2.3. Pouvoir moussant

Le pouvoir moussant mesuré conformément au protocole donné dans le chapitre précédent
donne un volume de mousse V=210 ml semblable à celle du shampooing commercialisée qui

Résultats et discussion Page 40

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est égal à V=206 ml.

III.3.2.4. Stabilité rhéologique
Suite au test de stabilité rhéologique, nous avons remarqué qu’après centrifugation
successives dans les conditions décrites au deuxième chapitre, il n’y a pas eu de déphasage.
Le shampooing reste bien homogène comme le montre la figure (8), on peut conclure alors
que le shampooing préparé est rhéologiquement stable.

III.3.2.5. Capacité de
Figure 8:Test de stabilité rhéologique nettoyage
L'action nettoyante a été
testée sur des cheveux humains qui ont été préalablement huilés. Les résultats des études de
détergence ont montré que la formulation a une capacité de nettoyage significative car elle a
été capable d'éliminer à la fois la saleté et l'huile des cheveux.

Résultats et discussion Page 41

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Figure 9:Avant application de Figure 10:Après application de

shampooing (avec huile) shampooing

III.3.2.6. Test d'irritation cutanée

Les tests d'irritation cutanée ont révélé que le shampooing ne présente aucun effet nocif sur la
peau, cela est dû à l'absence d'ingrédients synthétiques nocifs.

Figure 11:Application du
Figure 10:Après l'application
shampooing

III.3.2.7. Tests de stabilité préliminaires

Résultats et discussion Page 42

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Les résultats obtenus des tests de stabilité et analyse organoleptique de la formulation du

shampooing représentant dans le tableau ci-dessous :

Tableau 18:Tests de stabilité préliminaires

Durée 1er jour 2eme Jour 4eme Jour

Tempér
Températ
ature Congélatio Stress Température Congélatio Stress
Paramètres ure
ambiant n thermique ambiante n thermique
ambiante
e
pH 6,9 6,9 6,9 6,9 6,91 6,89 6,80
Densité 0,91 - - 0,96 - - -
Pouvoir
210 - - 141 - - -
moussant (ml)
Centrifugation Stable - - Stable Stable Stable Stable
Caractéristique
s
Caractéristiques Organoleptiques Caractéristiques Organoleptiques
Organoleptiqu
es
Températu
Températur Stress Température Congélatio Stress
Paramètres Congélation re
e ambiante thermique ambiante n thermique
ambiante
Odeur de Odeur de Odeur de Odeur de Odeur de Odeur de Odeur de
Odeur
laurier laurier laurier laurier laurier laurier laurier
Blanc Blanc Blanc
Blanc cassé Blanc cassé Blanc cassé Blanc cassé
Couleur cassé cassé cassé
Homogèn
Texture Homogène Homogène Homogène Homogène Homogène Homogène
e

Le tableau (18) montre que le shampooing testé était stable au stress thermique et à la
congélation. Par conséquent, nous pouvons conclure que, quelle que soit la température, les
caractéristiques du shampoing restent constantes. Cela indique une excellente stabilité
thermique du produit, assurant ainsi sa qualité et son efficacité.

Résultats et discussion Page 43

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Conclusion et perspectives
En conclusion, cette étude a été consacrée à l'extraction de l'huile essentielle de Laurus nobilis
L par la méthode d'hydro-distillation Clevenger, pour l’objectif d'optimiser le rendement
d'extraction. Grâce à l'utilisation du logiciel Design-Expert 13 selon le plan Box-Benhken,
nous avons déterminé les conditions optimales pour atteindre un rendement optimal de
1,236%.
Ces conditions comprennent :
- Un rapport de 10
- Un temps d'extraction de 180 min
- Un niveau de chauffe de 2.
L'analyse des résultats à l'aide de l'ANOVA a confirmé la significativité du modèle
quadratique, avec une valeur de F-value de 36,47 et un p-value de 0,0001, soulignant ainsi sa
fiabilité.
De plus, une concordance élevée entre le modèle et les résultats expérimentaux a été
observée, avec un coefficient de corrélation R² de 0,9820et le coefficient de variance
supérieure à 10%., renforçant ainsi la validité de nos conclusions.
Selon l'analyse de la variance, les termes A, B, C, AC, BC, A² et C² sont significatifs (p-value
< 0,05), indiquant qu'ils ont un impact notable sur le modèle. En revanche, les termes AB et
B² sont statistiquement négligeables et n'influencent pas significativement le modèle.
L'analyse des caractéristiques physicochimiques des huiles essentielles extraites de deux lots
a confirmé leur conformité aux normes établies, notamment en ce qui concerne le pH, la
densité relative et l'indice de réfraction.
D’après l’analyse GC-MS des huiles essentielles (HEs) a identifié plusieurs composés
majoritaires, notamment l'eucalyptol, le linalol, le terpinéol et le benzène, 1,2-diméthoxy-4-
(2-propyl).
Les résultats des caractéristiques physicochimiques (pH, densité, pouvoir moussant…) du
shampooing à base l’hydrolat et l’huile essentielle de Laurus Nobilis étant similaires à ceux
du shampooing de référence, nous pouvons conclure que notre produit présente une qualité
comparable aux standards du marchéEnfin, des perspectives d'avenir ont été proposées pour
approfondir cette recherche, notamment en explorant la période de floraison du Laurier Noble

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pour en déterminer le sexe, en modélisant sa morphologie et en étudiant des procédés

d'extraction innovants.

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Figure A 1:Spectre GC-MS des HEs du 1er lot

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Tableau A1:Composition chimique du 1er lot

Composée TR Formule Pourcentage

chimique
-pinene 10,559 C10H16 2,42
Camphene 11,034 C10H16 0,27
Bicyclo[3,1,0]hexane,4-methylene-1-(1- 11, 784 C10H16 2,07
methylethyl)

-pinene 11,9 C10H16 1,72

Eucalyptol 13,631 C10H18O 41,26
-Terpinene 14,419 C10H16 0,35
Linalol L 15,808 C10H18O 9,38
Bicyclo[2,2,1]heptan-2-ol,1,7,7-trimethyl- 17,955 C10H18O 0,32
exo
3-cyclohexan-1-ol,4-methyl-1-(1-methyle) 18,205 C10H18O 2,18
Linalyl propionate 18,678 C13H22O2 1,37
Trans-Geraniol 19,627 C10H18O 0,25
Linalyl acetate 20,083 C12H20O2 0,25
Endobornyl acetate 21,07 C12H20O2 0,48
Ocimentyl acetate 21,917 C12H18O2 0,62
-terpinenyl 22,936 C12H20O2 16,52
Phenol,2-methoxy-4-(1-propeny) 23,366 C10H12O2 1,71
-Elemene 23,998 C15H24 0,26
Benzene,1,2-dimethoxy-4-(2-propyl) 24,349 C11H14O2 12,73
Trans-caryophyllene 24,809 C15H24 0,49
Cyclohexane,1-ethenyl-1-methyl-2-(1- 26,74 C15H24 0,32
methylethenyl)-4-(1-methylethylidene)
Delta-Cadinene 27,303 C15H24 0,34
Benzene, 1, 2,3-trimethoxy-5-(2-propenyl) 28,05 C12H16O 0,87
2-(,,-trideuterioethyl)pyridine 28,954 C7H6D3N 1,36

Annexe
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Tableau A2:Composition chimique du 2eme lot

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Composée TR Formule chimique Pourcentage

-pinene 10,557 C10H16 1,48
Camphene 11,038 C10H16 0,3
Bicyclo- 11, 787 C10H16 1,92
[3,1,0]hexane,4-
methylene-(1-
methylethyl)
2--pinene 11,901 C10H16 1,58
Eucalyptol 13,608 C10H18O 23.92
-Phellandrene 14,4221 C10H16 0,29
Linalol L 15,838 C10H18O 22,76
Bicyclo[2,2,1]heptan- 17,964 C10H18O 0,26
2-ol,1,7,7-trimethyl-
exo
3-cyclohexan-1-ol,4- 18,213 C10H18O 1,3
methyl-1-(1-methyle)
Linalyl propionate 18,689 C13H22O2 1,38
1,6-Octadien-3- 20,092 C17H23NO2 0,45
ol,3,7-dimethyl-,2-
aminobenzoate
Endoborrnyl acetate 21,074 C12H20O2 0,58
Ocimentyl acetate 21,92 C12H18O2 0,51
-terpinenyl acetate 22,824 C12H18O2 11,11
Phenol,2-methoxy-4- 23,369 C10H12O2 2,33
(2-propenyl)
Benzene,dimethoxy4 24,37 C11H14O2 25,2
--(2-(1-propeny)
Delta-Cardinene 27,303 C15H24 0,27
Benzene,1,2,3- 28,066 C12H16O3 0,58
trimethoxy-5-(2-
propenyl)

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