Ministère de l'enseignement supérieur et de la recherche scientifique

Université Ahmed DRAIA -Adrar-Algérie

Faculté des Sciences et de la Technologie

Département des Sciences de la Nature et de la Vie

Master : Biochimie Appliquée

Cours

Aspects biochimiques de pathologies humaines

Responsable de la matière : Dr. TEHAMI Wafâa

Dr TEHAMI.W 1
 Qu’est ce qu’un (bio)marqueur?

Un biomarqueur est une caractéristique

biologique mesurable liée à un processus
normal ou non.

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Dr TEHAMI.W
 Qu’est ce qu’une analyse biologie ?

• Les analyses de biologie médicale sont des

examens biologiques qui concourt au

diagnostique, au traitement ou à la prévention

des maladies humaines ou qui font apparaitre

toute une autre modification de l’état

physiologique.
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Dr TEHAMI.W
 Quelle est la place de la biochimie dans le milieu clinique?
- Marqueurs de - Dosages
fonction & etat hormonaux
clinique d’organes - Marqueurs de
(rein,foie,sys CV) cancer
marqueurs de l’etat - Recherche d’Ac
inflamm, nfs, gaz specifiques…
sanguin, analyses
d’urines
•Examens de base

•Examens plus spécialisés

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Dr TEHAMI.W
 • La fonction principale d’un laboratoire de
biochimie clinique ou bien de biochimie
pathologique est de fournir les données
biochimiques nécessaires à la prise en charge
des patients.

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Dr TEHAMI.W
• Domaines d’utilisations de paramètres
biochimiques :

• Dépistage • Diagnostic

Confirmation ou
Détection des
affirmation
situations infra
d’une anomalie
cliniques
biologique

Suivi de la
Informations
maladie, effets
sur l’évolution
du traitement
d’une
ou des
pathologie
complications

• Suivi des • Pronostic

patients

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Dr TEHAMI.W
 Tableau : Principales différences entre test de dépistage et test diagnostique
selon Durand-Zaleski, 2000

Test de dépistage Examen diagnostique

• Il est une étape avant le diagnostic • Il doit donner une certitude

de certitude diagnostique (examens spécifiques)

• Il est appliqué aux personnes • Il est appliqué aux personnes

apparemment indemnes de la maladie présentant des troubles définis
recherchée

• Il est pratiqué sur des groupes • Il est essentiellement individuel

d’individus à haut risque • Il est éventuellement utilisé en
seconde ligne après un test de
• Il ne constitue pas une aide à la dépistage
décision thérapeutique
• Il débouche sur une décision
thérapeutique
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Dr TEHAMI.W
 Les milieux biologiques utilisés

Sang : plasma , sérum ou éléments figurés

Sans artériel : gaz du sang

Sang veineux : glycémie

Urines : échantillon ou recueil pendant une durée

déterminée

Liquide Céphalo Rachidien : LCR

Liquides divers : synovial, pleural, ascitique… 8

Dr TEHAMI.W
 LP

LCR

Dr TEHAMI.W
L. SYNO 9
 Types de marqueurs dosés en biochimie
• Familles :
• Electrolytes Na+, K+, Cl-…
• Métabolites : glucose, urée, créatinine…
• Protéines: - Enzymes : ASAT, ALAT, LDH
- Vitamines
- Transporteurs albumine
• Gaz : O2, CO2…
• Médicaments
• Toxiques : alcool

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Dr TEHAMI.W
 Les principaux tubes

Tube avec citrate de sodium

Tube sec avec gel séparateur
Ce tube est le seul utilisable pour
les bilans d’hémostase Il permet l’obtention d’un sérum
(coagulation). après coagulation et centrifugation
pour la réalisation de la plupart des
Pour être conforme, le tube doit paramètres biochimiques et
être rempli au moins jusqu’au trait sérologiques.
de remplissage.

Tube avec héparinate de lithium Tube avec EDTA

Empêche la transformation du Il permet une bonne conservation
fibrinogène en fibrine. des éléments figurés du sang
(IONO, analyses en chimie et en (leucocytes, hématies, plaquettes,
immunologie) etc.), HbA1C, GP...

Tube avec fluorure de sodium

Le fluorure de sodium est un anti-
glycolytique qui inhibe la
consommation du glucose par
blocage enzymatique
ils permet la stabilité du dosage de
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la glycémie pendant 24 heures.
Dr TEHAMI.W
 Pathologies hépatiques

• Le foie a un rôle vital dans la régulation de l’homéostasie et

dans le fonctionnement de l’organisme :

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Dr TEHAMI.W
 Fonctions principales du foie
Métabolisme glucidique • Néoglucogenèse
• Synthèse et catabolisme du glycogène

Métabolisme lipidique • Synthèse des AG, cholestérol, lipoprotéines,

Ac biliaires
• Cétogenèse
• 25-hydroxylation de la vit D

Métabolisme protidique • Synthèse des protéines plasmatiques

(incluant quelques facteurs de coagulation)

Métabolisme hormonal • Métabolisme et sécrétion des hormones

stéroïdiennes
• Métabolisme des hormones polypeptidiques

Médicaments et subs étrangères • Métabolismes et excrétion

Stockage • Glycogène, Vit A , Vit B12, Fer
Métabolisme et excrétion de la bilirubine
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Dr TEHAMI.W
• Production de la bile
Les hépatocytes produisent environ 500-1000ml de bile alcaline/jr
- Un liquide visqueux vert-jaunâtre.

o Les Ac biliaires principalement l’Ac cholique, sont formés à partir

du cholestérol.
Les sels biliaires sont secrétés dans les canaux biliaires
et pénètrent dans l’intestin où la plupart d’entre eux sont
réabsorbés.

o Les pigment biliaires ou bilirubine sont formés essentiellement du

catabolisme de l'hémoglobine et aussi des autres composés : la
myoglobine et les cytochromes.

La bilirubine non conjuguée (libre ou indirecte), liposoluble,

toxique pour les cellules.
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Dr TEHAMI.W
 La bilirubine conjuguée (directe) moins toxique,
hydrosoluble, passe dans la bile puis le duodénum.

15
Dr TEHAMI.W Figure : Production de bile
 UDP
Uridyl
Di P

Figure : excrétion de la bilirubine par le foie 16

Dr TEHAMI.W
• Métabolisme et excrétion de la bilirubine
• La bilirubine présente physiologiquement dans le plasma et
principalement sous forme non conjuguée (95%).

• Chez les individu sains, elle est liée aux protéines, elle n’est
pas filtrée par les glomérules rénaux et donc elle n’est pas
détectable dans les urines.

• Une bilirubinurie reflète une augmentation de la bilirubine

conjuguée toujours pathologiques.

• Les dosages de bilirubine servent surtout au diagnostic de

maladies hépatiques, à la détection d'anémie hémolytique et à
l'évaluation de la gravité d'un ictère.

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Dr TEHAMI.W
 La fonction de synthèse dans le foie

• Les hépatocytes synthétisent la plupart des protéines

plasmatiques (plus de 1000 protéines), en particulier l’albumine et
la plupart des globulines (alpha et beta), le fibrinogène sont
fabriqués à partir d’acides aminés.
Ainsi que la majorité des facteurs de coagulation (II, V, VII, VIII,
XI, X, XI, XII, XIII).

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Dr TEHAMI.W
 Le bilan enzymatique

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Dr TEHAMI.W
 20
Dr TEHAMI.W
 -1- Gamma-glutamyl-transférase ou
Gamma-GT

 Enzyme membranaire, qui est la première enzyme à réagir en cas

de souffrance hépatique ou biliaire.
 Bon indicateur de l’alcoolisme, d’une hypersensibilité
médicamenteuse ou toxique.
 C’est une appréciation d’intoxication du foie, normalement 5-40U/l
mais peut monter jusqu’à 1500.

-2- Transaminases

 SGOT (GOT = glutamate oxyloacétate transaminase) ou ALAT et

SGPT (GPT : glutamate pyruvate transaminase).
 Ce sont deux enzymes intracellulaires qui assurent le transfère du
groupement –NH3 des Ac.aminés.
 La GOT et GPT sont présentes dans le foie, le coeur et les muscles
normalement 0- 35 U/l.
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Dr TEHAMI.W
 Si ce taux est augmenté, il indique une nécrose tissulaire. Pas
de différence entre elles, mais moins sensibles que les
Gamma-GT.

 Des transaminases modérément élevées (entre 30 et 150 U/l.)

à deux dosages successifs espacés de quelques semaines,
doivent faire évoquer :

 La grossesse ou des efforts musculaires intenses (marathon)

 L’excès de poids (stéatose hépatique) ou le jeune

 Une prise médicamenteuse mal supportés

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Dr TEHAMI.W
 L’alcoolisme ou une toxicomanie

 Les hépatites virales chroniques et la vaccination contre

l’hépatite B

 Une hémochromatose génétique (fer) ou une maladie de

Wilson (cuivre)

 Une maladie cœliaque (dosage des IgA antiglutaminases)

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Dr TEHAMI.W
 -3- Phosphatases alcalines (PAL)

 Enzymes hydrolysant les esters de l’acide phosphorique.

 Les phosphatases sont normalement excrétées par les voies

biliaires.

 Augmentés, ils indiquent un obstacle de ces voies.

Normalement < 200 U/l.

 Augmentent aussi lors de maladies osseuses (rachitisme,

hyperparathyroïdie, métastase osseuse, maladie de Paget,
ostéomalacie = rachitisme des gens âgés).

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Dr TEHAMI.W
 Une phosphatase alcaline trop basse est le plus souvent
synonyme d’un grave dysfonctionnement du foie (insuffisance
hépatocellulaire) pouvant être engendré par plusieurs causes
(hépatite ou cirrhose).

 Une maladie héréditaire appelée hypophosphatasie est

caractérisée par une diminution importante du taux de
phosphatases alcalines.

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Dr TEHAMI.W
 -4- Lactate déshydrogénase (LDH)

 Enzyme explore le métabolisme du glucose hépatique.

 Normalement < à 320 U/l, mais peuvent monter jusqu’à 3000.
 Elle est perturbée lors de pathologies musculaires (infarctus,
crush syndrome), en plus des atteintes hépatiques,
hématologiques et rénales.
-5- Créatine phosphokinase (CPK)

 Enzyme catalysant la réaction entre l’ATP et l’ADP

 Importante dans les muscles striés, le cœur et le cerveau.
 Normalement < à 200 U/l.
 Signent une atteinte hépatique, avec manifestations
musculaire, cardiaque ou cérébrale. 26
Dr TEHAMI.W
 La bilirubine
Diminution de la
Non conjuguée est due le plus souvent à conjugaison par la
l’hémolyse ou maladie de Gilbert . bilirubine-glucuronide-
transférase
- Ictère néonatal
(physiologique) disparaît rapidement.
- Deux anomalies
génétiques fort différentes déterminent une
diminution constitutive de l’activité
enzymatique : le syndrome de Gilbert et le
syndrome de Crigler-Najjar.

Les hépatites virales, une maladie

de foie causée par l’alcool. Une

Libération de la bilirubine conjuguée dans pierre au foie (calcul dans la

la circulation à partir des hépatocytes, vésicule biliaire) ou une obstruction
lorsque la voie normale d’excrétion est
bloquée Х stercobiline (selles des canaux biliaires par une tumeur
décolorées) peuvent également être impliquées.
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Dr TEHAMI.W
 Sydromes hépatiques
 I. Le syndrome de cytolyse
 La membrane hépatocytaire une destruction de la
membrane la nécrose hépatocytaire les substances
normalement contenues dans l’hépatocyte les sinusoïdes

Elévation des transaminases sériques

Le foie contient plus d’ALAT que d’ASAT. Ainsi, la cytolyse qui

accompagne les maladies de foie prédomine habituellement en
ALAT. Il y a deux exceptions importantes à cette règle :
Lorsque la cytolyse est provoquée Lorsqu’une maladie hépatique est au
par un excès de consommation de stade de cirrhose, et ceci quelle que
boissons alcoolisées (hépatite soit l’étiologie de la maladie
alcoolique), hépatique, la cytolyse peut devenir
- La cytolyse prédomine en ASAT. prédominante en ASAT
- Le rapport ASAT/ALAT est > 1 28
Dr TEHAMI.W
 Les ASAT ne sont pas spécifiquement hépatocytaires
- Les cellules musculaires contiennent plus d’ASAT que d’ALAT.

- Il faut donc savoir évoquer la nature musculaire d’une cytolyse

lors des élévations modérées des transaminases qui prédominent

en ASAT. En cas de difficulté diagnostique, il faut doser des

enzymes spécifiques des cellules musculaires comme la créatine

kinase (élevée dans les maladies musculaires et normale dans

les atteintes hépatiques).

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Dr TEHAMI.W
  II. Le syndrome de cholestase (stase biliaire)
 Le syndrome de cholestase ne témoigne pas d’une atteinte de
La membrane hépatocytaire mais d’une atteinte des mécanismes
d’excrétion biliaire.
Une atteinte cellulaire touchant
les cellules épithéliales des voies
Un obstacle sur les voies biliaires interlobulaires ou le pôle
biliaires macroscopiques biliaire des hépatocytes
(cholestase obstructive) (cholestase non obstructive)

Phosphatases alcalines

- La phosphatase alcaline est localisée dans les microvillosités

des canalicules biliaires et au pôle sinusoïdal des hépatocytes.
- Des enzymes que l’on retrouve également dans le placenta et
dans l’os où elles jouent un rôle important dans le métabolisme.
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Dr TEHAMI.W
 5’ nucléotidase

- La 5’ nucléotidase est une phophatase alcaline particulière. Elle

est plus spécifique du foie (absence d’origine osseuse) mais elle

ne doit pas être utilisée en routine car elle son dosage coûte cher

et sa sensibilité est inférieure à celle des ƔGT.

ƔGT

- La gamma-glutamyl-transpeptidase est une glycoprotéine

membranaire des cellules ayant une activité importante de

sécrétion et d’absorption.

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Dr TEHAMI.W
- Le dosage conjoint des PAL et des ƔGT est utilisé pour
rechercher une cholestase L’ élévation conjointe de ces deux
enzymes.
- En cas d’élévation isolée:

PAL est habituellement isolée des ƔGT doit faire

en rapport avec une maladie rechercher une induction
osseuse (car l’élévation des enzymatique (consommation
ƔGT est plus sensible) excessive non reconnue de
boissons alcoolisées ou prise
médicamenteuse).

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Dr TEHAMI.W
 Allongement du temps de Quick

- Le temps de Quick est exprimé en secondes. Il peut aussi être

exprimé sous la forme d’un rapport entre temps de Quick d’un
témoin sain / temps de Quick du malade : c’est le taux de
prothrombine (TP).

- La cholestase provoque une carence en vitamine K car les sels

biliaires sont nécessaires à l’absorption des graisses.

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Dr TEHAMI.W
 III. Le syndrome d’insuffisance hépato-
cellulaire
 Il peut se définir par l’atteinte des fonctions actives du foie. Il
procède essentiellement de l’atteinte des fonctions de synthèse
hépatique.
Hypoalbuminémie

- L’albumine, dont la synthèse est spécifiquement hépatique, est

la protéine sérique la plus abondante (40 g/l). en raison de sa
longue demi-vie (21 jours), l’hypoalbuminémie n’est pas un
marqueur précoce et ne permet pas de suivre l’évolution à court
terme de l’insuffisance hépatocellulaire. Bien entendu, une
hypoalbuminémie ne signifie pas nécessairement la présence
d’une insuffisance hépatocellulaire et il y a plusieurs causes
d’hypoalbuminémie (carence alimentaire, fuite digestive,
syndrome néphrotique). 34
Dr TEHAMI.W
 Hyperbilirubinémie mixte

- Défaut de captation et de conjugaison de la bilirubine de la

bilirubine non conjuguée, défaut d’excrétion biliaire à une
élévation de la bilirubine conjuguée.
Autres signes :

hypocholestérolémie Diminution de l’urée Hypoglycémie

• Le foie assure la
• Un signe classique synthèse de l’urée à • Dans certaines
(c’est le foie qui partir de l’ammoniaque insuffisances
qui provient du
synthétise le catabolisme des hépatocellulaires
protéines. La baisse
cholestérol) de l’urée est souvent majeures, des
masquée par une hypoglycémies
atteinte rénale
fréquente dans les peuvent survenir par
maladies graves du
foie atteinte de la fonction
glycogénique du foie
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Dr TEHAMI.W